PLoS One: vaikutus Transcatheter valtimoon Therapies jakelua doksorubisiinin maksasyöpää on Rabbit Model
tiivistelmä
Tausta ja Tavoitteet
Transcatheter valtimoon tekniikoita voidaan tehokkaasti toimittaa solunsalpaajalääkeaineet kasvain ja parantaa tehokkuutta kemoterapiaa. Tässä tutkimuksessa on tarkoitus arvioida vaikutusta transkatetri- valtimoon tekniikoita jakautumisesta doksorubisiinin nähden verisuoniin maksasyövän.
Methods
VX2 kasvaimia istutettiin maksa 32 kanit . Eläimet jaettiin 4 ryhmään 8 eläimen ryhmään. Ryhmä 1 (doxo iv) eläimet saivat doksorubisiinia laskimonsisäisesti; ryhmä 2 (doxo ia) sai doksorubisiinia maksan valtimoon infuusio; ryhmä 3 (doxo ia + E) saivat doksorubisiinia maksan valtimoon infuusiona, jota seuraa embolization; ryhmä 4 (doxo + L ia + E) sai maksan valtimoon infuusiona doksorubisiinin sekoittaa Lipiodol seurasi embolization. Kymmenen minuuttia tai 4 tuntia käsittelyn jälkeen eläimet tapettiin ja kasvaimet otettiin näytteet. Immunofluoresenssilla tekniikoita käytettiin arvioimaan jakeluun doksorubisiinin osalta verisuonissa.
Tulokset
Doksorubisiini fluoresenssi jaettiin noin kasvaimen verisuonten ja laski etäisyys verisuonissa. Kasvainsolujen suonettoman ja lähialueilla ei altistettu sen pitoisuus doksorubisiinin. Kasvaimet ryhmässä 2, 3 ja 4 oli merkittävä kasvu doksorubisiinin tunkeutuminen verrattuna ryhmän 1 kasvainten (
P
0,05). Niistä kolme ryhmää transkatetri- hoitoja, doksorubisiini levinneisyys etäisyys ryhmässä 3 oli merkitsevästi suurempi kuin ryhmässä 2 ja 4 (
P
0,05), ja mitään merkittävää eroa välillä havaittiin ryhmässä 2 ja 4 kasvaimet (
P
0,05) 10 minuuttia. Sen sijaan 4 tuntia ja yhteensä, sekä ryhmien 3 ja 4 kasvaimia oli merkitsevä lääkeaineläpäisevyyden verrattuna ryhmään 2 (
P
0,05), ja mitään merkittävää eroa välillä todettiin ryhmän 3 ja 4 kasvaimet (
P
0,05).
Johtopäätös
Transcatheter valtimoon hoitoja parantaa doksorubisiinin levinneisyys maksasyövän; kuitenkin niiden vaikutus huumeiden levittämiseen on melko rajallinen.
Citation: Liang B, Xiong F, Wu H, Wang Y, Dong X, Cheng S, et al. (2013) vaikutus Transcatheter valtimoon Therapies jakelua doksorubisiinin maksasyöpää on Rabbit Model. PLoS ONE 8 (10): e76388. doi: 10,1371 /journal.pone.0076388
Editor: Gayle E. Woloschak, Northwestern University Feinberg School of Medicine, Yhdysvallat
vastaanotettu: 21 maaliskuu 2013; Hyväksytty: 30 elokuu 2013; Julkaistu: 08 lokakuu 2013
Copyright: © 2013 Liang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.
Rahoitus: Työ tukivat avustusta National Natural Sciences Foundation of China (nro 81101134). Rahoittajat oli rooli tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.
Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.
Johdanto
Maksasyövän on edelleen merkittävä terveysuhka maailmanlaajuisesti. Vaikka resektio, maksansiirron ja ablaatio ovat hoitavia hoitoja, vain pieni vähemmistö potilaista ovat ehdolla nämä hoidot [1]. Transcatheter valtimoon hoitoja käytetään laajalti lievittävä hoitoja voida leikata primaarinen ja metastaattinen maksasyövän [2] ja on esiintynyt rohkaisevia tuloksia selviytymisen [3], [4]. Perusteet valtimoon hoitoja johtuu havainto, että verenkiertoa kehittyneiden maksasyöpien on enimmäkseen riippuvainen maksan valtimo [5]. Maksan Valtimo kemoterapia-infuusio, joka määritellään injektiona kemoterapian kanssa tai ilman lipiodol vuonna maksan valtimo kautta valikoiva katetrin asettamisen, on tärkeä osa transkatetri- hoitoja maksasyövän [6]. Vaikka maksasyövän kestää systeemistä kemoterapiaa, kasvain on osoittautunut vastaamaan jossain määrin maksan Valtimo kemoterapia-infuusio. Injektio kemoterapeuttisten aiheuttaa solumyrkkyvaikutuksessa [7], ja kun se yhdistetään seuraavien embolisaatiota kasvaimen ravintonsa alus, ts transkatetri- valtimon chemoembolization (TACE), mikä johtaa suuriin tuumorinekroositekijä [8]. Herkempiä maksasyövän kemoterapia on oletettavasti johtuu tehokkaan toimittamisen erittäin keskittyneet annosteltu kemoterapeuttisten lääkkeiden kasvain.
Kuitenkin tehoa kemoterapian maksasyövän edelleen kiistanalainen. Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että kemoterapia ei embolisaatiota näytti saavuttaa alhaisempi tuumorinekroositekijän verrattuna TACE [9], ja että lisäys kemoterapiaa embolisaatiota ei johtanut parempaan tehokkuuteen kuin embolisaatiota yksinään [10]. On hyvin tunnettua, että voidaan maksimoida sytotoksisia vaikutuksia kemoterapeuttiset aineet on tunkeutua syvälle tavoittaa kaikki syöpäsolut terapeuttisesti tehokkaan pitoisuuden. Aiemmat tiedot osoittivat, että kun sitä annetaan ihon alle tai laskimoon syöpälääkettä muodostettu kaltevuudet sisällä kasvain, suuria pitoisuuksia periferiassa ja pieninä pitoisuuksina keskellä kasvain [11], [12]. Vaikka lääkeaineen konsentraatio kasvainkudoksessa on osoitettu olevan paljon suurempi kuin normaalissa maksaparenkyymi [13], [14], syöpälääke avulla, joka valtimoon reitti sijaitsee pääasiassa noin embolized alusten maksan syövät, joille TACE [15 ], [16]. Rajallinen jakautuminen syöpälääkettä tuumorin saattaa selittää heikentynyt tehokkuuden kemoterapiaa. Tarkastelu lääkkeen jakelun maksasyövän jälkeen transkatetri- valtimoon hoitomuodot voisivat auttaa ymmärtämään terapeuttista vaikutusta kemoterapeuttisen infuusio ja kehittää strategioita muuttaa lääkkeen jakeluun.
Doksorubisiini on yleisimmin käytetty yksittäinen kemoterapeuttisen aineen transkatetri- terapiassa maksan syöpä. Lääkeinfuusion näytteillä suotuisa vaste ja eloonjäämisen valittujen ehdokkaiden [17]. Lisäksi lääke voi hakea suoraan havaitsemiseen fluoresenssimikroskopialla koska sen fluoresenssiominaisuus. Doksorubisiini on käytetty tutkimaan huumeiden levittämiseen nähden kasvaimen verisuonten tunnustama endoteelisolumarkkeri CD31, eläinten ja ihmisten kasvaimissa [11], [12]. Esillä olevassa tutkimuksessa käytimme fluoresenssi doksorubisiinin tutkia vaikutusta transkatetri- tekniikoiden huumeiden levittämiseen on VX2 kasvain malli maksasyövän.
Materiaalit ja menetelmät
Kokeellinen suunnittelu
yhteensä 32 aikuista New Zealand White kaneja, joiden paino 2,5-3,0 kg, käytettiin tässä tutkimuksessa. VX2 kasvaimia inokuloitiin maksa eläimistä. Seitsemäntoista päivää tuumorin istuttamisen jälkeen, kunkin eläimen tehtiin magneettikuvaus (MR) havaitsemiseksi kasvaimen muodostumisen. Yhden päivän kuluttua MR imaging, joilla oli kasvain, kanit jaettiin satunnaisesti neljään ryhmään, 8 eläintä kussakin, ja ne käsiteltiin. Ryhmässä 1 (doxo iv) eläimet saivat doksorubisiinia suonensisäisen injektion. Ryhmässä 2 (doxo ia), eläimet kävivät doksorubisiini maksan valtimoon infuusiona. Ryhmässä 3 (doxo ia + E), eläimille tehtiin maksan valtimoon infuusio doksorubisiinin seurasi embolisaatiota kanssa verisuonitukos agentti. Ryhmässä 4 (doxo + L ia + E), eläimet saivat maksan valtimoon infuusiona doksorubisiinin sekoittaa lipiodol seuraa embolization. Kymmenen minuuttia tai 4 tunnin kuluttua interventionaalisen hoitoon, neljä eläintä kussakin ryhmässä tapettiin, vastaavasti, ja kasvain näytteet kerättiin immunofluoresenssimenetelmällä.
kasvaimensiirrostuspäivänä
Eläinkokeet suoritettiin mukaan Guide Care ja käyttö Laboratory Animals Huazhong tiede ja teknologia, kuten hyväksymä Animal Care komitean Hubein maakunnassa Kiinassa. Eläimet nukutettiin suonensisäinen injektio natriumpentobarbitaalia (30 mg /kg kehon painoa), ja yritettiin minimoida kärsimystä. VX2 kasvain on erittäin pahanlaatuinen syöpä, joka on peräisin viruksen aiheuttama papilloomavirus kaneja. Kasvain voidaan kasvattaa maksassa kanin ja osoittaa tiettyjen biologisten yhtäläisyyksiä ihmisen hepatosellulaarinen karsinooma, joka on tullut optimaalisen eläinten maksakasvain mallin kehittämiseen katetrin-hoitojen, [18]. VX2-kanta säilyi peräkkäisillä siirrettäväksi takajalkojen operaattorin kaneja. Sillä tuumorin istuttamisen, kasvain oli ensin korjattu operaattorin kanin ja hakattu 1 mm
3 Hanksin liuokseen. Sitten maksa vastaanottajan kanin paljastettiin subxiphoid vatsan viilto, ja kasvain fragmentit upotettu 10 mm syvälle vasemmalle maksalohko. Pieni pala liivate sieni pantiin haavan saada hemostaasin ja vatsan suljettiin sen jälkeen.
MR kuvantamisen
MR kuvantaminen suoritettiin käyttäen 1,5-T yksikkö (Magnetom Avanto Siemens Medical Solutions, Erlangen, Saksa). Kanit oli kuvattu selälleen käyttämällä yhdistelmää kuuden kanavan body vaiheistettujen array kela ja kaksikanavainen selkärangan vaiheistettujen array kela. Kaikki eläimet kävivät T2-painotettu turbo spin-kaiku sekvenssi seuraavat kuvantamisen parametreja: TR /TE = 3700/87 ms, 4-mm leikepaksuudella, 15% risteyksessä aukon, 168-Hz /pikseli BW, 200 x 200 mm
2 näkökenttä, 320 x 320 matriisi, turbo kerroin = 11, keskiarvo = 2.
Transcatheter tekniikoita
Transcatheter menettely suoritettiin eläimillä johdolla digitaalisen vähennys- angiografia (Altis Zee Celling, Siemens Medical Solutions, Muenchen, Saksa). Lyhyesti, oikea reisivaltimo pääsee läpi avoimen puncturation jossa 18-neula ja katetroidusta on 4-F verisuonten tuppi (Terumo, Tokio, Japani). 4-F Cobra sisäelinten katetrin (Terumo) käytettiin ensimmäisen kerran valitsemaan keliakia akselilla, ja sitten 2,7-F koaksiaali katetrijärjestelmää (Terumo) oli edennyt koaksiaalisesti kautta 4-F katetri oikeaan maksan. Kun ympätty kasvain vahvistettiin vastaanottamaan sen verenkierto peräisin maksan valtimo digitaalisella vähennyslaskua angiografia asianmukaisen maksan valtimo, myöhemmät käsittelyt tehtiin. Doksorubisiinin annettiin valtimonsisäisesti tai laskimonsisäisesti annoksella 8 mg /kg helpottamiseksi havaitsemiseksi ja sen määrän lääkettä auto-fluoresenssi. Materiaalin valmistamiseksi, 8 mg /kg doksorubisiinia jauhe liuotettiin 1 ml: suolaliuosta tai sekoitettuna 0,4 ml: Lipiodol, ja PVA-hiukkaset 150-250 um (PVA, Cook, Bloomington, USA), joka on pakattu injektiopullo kuivia hiukkasia, liuotettiin uudelleen 10 ml varjoainetta. Eläimet ryhmässä 2 sai maksan valtimoon infuusiona doksorubisiiniliuosta. Ryhmä 3 eläimet saivat doksorubisiiniliuosta infuusiona, jota seuraa embolisaatiota kanssa 0,2-0,4 ml PVA seoksen. Ryhmä 4 eläimet saivat infuusiona doksorubisiinin /Lipiodol seosta, jonka jälkeen PVA embolization. Embolisaatio päätepiste ryhmille 3 ja 4 oli täydellinen pysähtymiseen ensin pois veren virtausta. Ryhmälle 1 eläimiä, doksorubisiiniliuosta injektoitiin korvalaskimosta ilman interventiomenetelmän.
Immunofluoresenssianalyysi ja kuva-analyysi
Eläimet inhimillisesti tapettiin 10 minuuttia tai 4 tunnin kuluttua doksorubisiinin annon laskimoon Yliannostuksen natriumia pentobarbitaalilla (100 mg /kg kehon painoa). Valinta kahden uhri ajankohtina perustuu edellisen havainnon, että doksorubisiini voidaan tehokkaasti kuljettaa kasvainsolujen kautta verisuonia 10 minuutin jakson ajan yksin käytettynä [19] ja että kun sekoitetaan Lipiodol, kaikki doksorubisiini voi eluoituvat Lipiodol emulsio alle 4 tuntia [20]. Näytteet, jotka sisälsivät suurimman halkaisijan kasvaimen kerättiin ja sitten upotettu välittömästi optimaalinen leikkaus lämpötilassa yhdisteen ja jäädytettiin nestetypessä. Kryostaattipreparaatit 10 pm paksu leikattiin on suurin halkaisija kasvaimen, asetettiin lasilevyille, ja sen annettiin kuivua.
Doxorubicin auto-fluoresenssi havaittiin käyttäen Nikon TE2000 ylösalaisin fluoresenssimikroskopiaan 465-495 nm: n virityksellä ja 510-555 nm emissiosuodattimia, ja kuvia kudosleike pyydystettiin Nikon DS-U3 kamera. Verisuonten tunnustettiin ilmentymistä CD31 membraaniproteiinina endoteelisoluissa. Doksorubisiinin kuvantaminen kudosleikkeet fiksattiin paraformaldehydillä 10 minuutin ajan, pestiin PBS: ssä, ja blokattiin naudan sikiön seerumia (laimennus 1:20; Roche) 20 minuuttia, jotta ei-spesifisen vasta-aineen sitoutuminen. Näytteet inkuboitiin yön yli 4 ° C: ssa hiiren anti-ihmis-CD31 monoklonaalisia vasta-aineita (laimennos, 01:20; Dako), ja pestiin sitten PBS: ssä ja värjättiin vuohen anti-hiiri-vasta-aine, FITC (laimennus 1:50; Jakson) ja 1 h huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen värjättiin DAPI ydin- väriaine 10 min. Lopuksi kohdat olivat kansi-liukastui asennettuina alustassa, joka sisältää anti-fluoreskeiini sammuttaja. Anti-CD31 fluoresenssi edustavat endoteelisolujen havaittiin 510-560 nm: n virityksellä ja 590 nm: n emissio suodattimet ja DAPI-värjätään tuman DNA lokalisointi havaittiin 330-380 nm: n virityksellä ja 420 nm: n emissiosuodattimia.
Composite kuvia doksorubisiinin ja CD31 fluoresenssi luotiin käyttäen Image Pro Plus ohjelmisto. CD31 kuvia, mikroverisuonitiheys (MCD) arvioitiin käyttämällä laskentamenetelmän käyttöön Weidner et ai [21]. Kasvain leikkeet ensin skannattu alhaisella suurennuksella kentän (× 40 suurennus, 6,82 mm
2) löytää alueita, jotka osoittivat voimakkaimman vascularization ja sitten yksittäisten pienten verisuonten laskettiin kolmessa eri korkean suurennuksen kenttää (× 200 suurennus, 0,27 mm
2). Lopullinen MVD oli keskiarvo laskee kolmesta kentästä. Arviointia varten doksorubisiinin, kolme erilaista korkean suurennuksen kenttää (x 100 suurennus, 1,09 mm
2), joilla on korkea doksorubisiinin fluoresenssia valittiin. Alueet kuolion ja värjäys artefakti jätettiin pois.
tunkeutuminen Doksorubisiinin mitattiin käyttäen Image Pro Plus sovellus ja räätälöityjä algoritmeja. Lyhyesti, doksorubisiini kuva ja erillinen verisuonen kuva samasta kentän olivat aluksi kiinni. Jotta verisuonen kuvan samankokoinen kuin doksorubisiini kuva, ylimääräinen kopio doksorubisiinin kuva tehtiin, ja sen päälle on verisuonen kuvan. Verisuonen kuva sitten naamioitu, niin että kaikki verisuonet voidaan tunnistaa ja muuntaa valkoisen värin, jonka intensiteetti on 255. Loput pikselit, että kuva oli intensiteetti 0. Tämä kutsuttiin binaarisoidun kuvan. Minkä tahansa pikselin, joka ei ole 0 pidettiin verisuonen. Kuva sitten muunnetaan ja uusi kuva muodostettiin käyttämällä etäisyyden funktiona suodattimen. Tässä kuvassa harmaa arvo jokaisen pisteen edustaa etäisyyttä pisteestä lähimpään alukselle. Doksorubisiinimolekyylin kuva oli myös siirtynyt binaarisoidulle kuvan, jossa jokainen doksorubisiinille positiivinen täplä oli edustettuna sen keskipisteen. Käyttämällä Minimifunktiolohko ohjelmistojen, kunkin kohdan etäisyyden doksorubisiinin paikalla lähimmästä verisuonen mitattiin. Aineisto taulukoitu tasaa doksorubisiinin tunkeutuminen etäisyys kentän. Keskimääräinen tunkeutuminen etäisyys kolmesta kentästä otettiin lopulliseen doksorubisiinin tunkeutuminen etäisyyden kunkin eläimen [22]. Lasken doksorubisiinin fluoresoiva paikalla kullakin alalla on samanaikaisesti laskettiin.
Tilastollinen
Data tiivistää keskiarvo ± keskihajonta (SD). Erot ryhmien välillä verrattiin käyttämällä yksisuuntaista varianssianalyysiä, jota seuraa LSD-
t
testi.
P
0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
VX2 kasvain ja transkatetri- menettely
VX2 kasvain onnistuneesti kasvanut vasemmalla maksan koru kunkin kanin (kuvio 1). Kasvaimet vaihtelivat 1,16-2,12 cm halkaisijaltaan. Keskimääräinen halkaisija on ryhmä 1, 2, 3, ja 4 olivat 1,53 cm ± 0,27, 1,58 cm ± 0,30, 1,63 cm ± 0,25, ja 1,49 cm ± 0,20, vastaavasti, ilman merkitsevää eroa ryhmien välillä (
P
= 0,679). Transcatheter toimenpiteitä tehtiin onnistuneesti kaikissa eläimissä (kuvio 2).
T2-painotettu MR kuvassa on hyper-intensiteetin VX2 kasvain vasemmassa maksalohko (nuoli).
valikoiva vasen maksan valtimo varjoainekuvauksessa esittää hypervascular kasvain (nuoli) vastaanottava sen verenkierto vasemmalta maksan valtimo (nuolenkärki).
mikroverisuonitiheys
kryostaattileikkeiden, pienten verisuonten osoitettiin kuin vihreä fluoresenssi erottaa yksittäisen endoteelisolujen tai kytketty soluklusterin (kuva 3). Mikrosuonten oli epätasaisesti sisällä VX2 kasvain, ja voimakkain vascularization havaittiin reunalla kasvain. Ei ollut mitään merkittävää eroa MVD neljän ryhmän (
P
= 0,543) (taulukko 1).
Photomicrograph edustavan VX2 kasvain esittää lukuisia verisuonia (vihreä, tunnustettu CD31) reunalla kasvain.
Doksorubisiini jakelu ja sen suhde mikrosuonten
Doksorubisiini fluoresoitu punaisina kasvainleikkeissä. Lääke-spesifinen fluoresenssi havaittiin pääasiassa tumissa soluissa, vaikka se oli peräisin kaikista kasvainkudoksessa (kuvio 4). Yleensä, doksorubisiini jaettu noin kasvaimen verisuonten ja laski etäisyys verisuonia (kuvio 5). Fluoresenssin intensiteetin Doksorubisiinin myös rappeutunut etäisyyden verisuonista. Todettiin, että edes transkatetri–käsiteltyjen ryhmien monilla alueilla kasvainsoluja ole alttiina havaittavina pitoisuuksina doksorubisiinin. Nämä kasvainsolut lähinnä sijaitseva suonettoman ja lähialueilla. Lisäksi oli muutamia CD31-positiivisia mikrosuonten ilman ympäröivän havaittavissa doksorubisiini.
Mikrovalokuva edustavan VX2 kasvaimen osoittaa doksorubisiinin auto-fluoresenssi (punainen) reunalla kasvain.
hematoksyliini-eosiinilla (A), immunofluoresenssilla (B, ytimen; C, doksorubisiini, D, verisuonet) ja komposiitti (E, alkuperäinen komposiitti, F, modifioitu komposiitti) kuvat osoittavat jakelu doksorubisiinin (punainen) suhteessa kasvaimen verisuonet (vihreä).
taulukko 1 ja kuva 6 yhteenveto doksorubisiinin tunkeutuminen matkan neljään ryhmään perustuen lopetuksen. Kasvaimet ryhmässä 2, 3 ja 4 oli merkittävä kasvu doksorubisiinin tunkeutuminen verrattuna ryhmän 1 kasvainten 10 minuuttia (
P
= 0,032, 0,001 ja 0,046, vastaavasti), 4 tuntia (
P
= 0,046,
P
0,001 ja
P
0,001, vastaavasti) ja yhteensä (
P
= 0,09,
P
0,001 ja
P
0,001, tässä järjestyksessä). Niistä kolme ryhmää transkatetri- hoitoja, ryhmä 3 kasvaimia osoitti suurimman doksorubisiini levinneisyys päässä, merkittävä ero verrattuna ryhmään 2 ja 4 (
P
= 0.010 ja 0.007, vastaavasti), ja mitään merkittävää eroa ei havaittu välillä ryhmä 2 ja 4 kasvaimet (
P
= 0,846) 10 minuuttia. Sen sijaan 4 tuntia ja yhteensä, sekä ryhmien 3 ja 4 kasvaimia oli merkittävä kasvu huumeiden levinneisyys verrattuna ryhmään 2 (
P
= 0,004 ja 0,001, 4 tuntia;
P
0,001 ja
P
= 0,023, yhteensä, vastaavasti), ja mitään merkittävää eroa välillä todettiin ryhmän 3 ja 4 kasvaimet (
P
= 0,454, 4 tuntia;
P
= 0,138, yhteensä, vastaavasti).
kuvat osoittaa erot doksorubisiini levinneisyys välillä ryhmä 1 (A, E), 2 (B, F), 3 (C, G) ja 4 (D, H) kasvaimen 10 minuutin (A-D) ja 4 tunnin (E-H) aikapisteessä.
count doksorubisiinin erityisiä fluoresenssi paikalla joukossa neljä ryhmää osoitti suuntaus muutoksen samanlainen suuntaus nähdään doksorubisiinin tunkeutuminen etäisyys (taulukko 1). Lukemat Doksorubisiinin fluoresenssin ryhmässä 2, 3 ja 4 olivat merkitsevästi suurempi kuin ryhmässä 1 (
P
0,05). Niistä kolme ryhmää transkatetri- hoitoja, lisääntyi huumeiden loisteputki määrä saadaan ryhmä 2 ja 3 välillä 2 ja 4, vaikka jälkimmäinen ei ollut tilastollisesti merkitsevä 10 minuuttia (
P
= 0,568). Ei havaittu merkittävää eroa välillä ryhmän 3 ja 4 huumeiden loisteputki count 4 tuntia (
P
= 0.170) ja yhteensä (
P
= 0,286), mutta ero oli merkitsevä 10 minuuttia (
P
= 0,001).
keskustelu
on tunnettua, että ollakseen tehokkaimpia kemoterapia-aineiden tulee tunkeutua syvälle tavoittaa kaikki syöpäsolut terapeuttisesti tehokas pitoisuus . Tavoitteet maksan Valtimo kemoterapia-infuusio, tai ilman myöhemmin embolisaatiota ovat maksimoida sytotoksisia vaikutuksia kemoterapeuttisten aineiden ja minimoida syöpymistä. Vaikka aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että transkatetri- valtimoon tekniikat lisäävät kasvaimensisäisenä lääkeaineen pitoisuus [11], [12] ja pidentää lääkeaineen kosketusaika kasvainsolujen [23], mikä voi osittain selittää parantuneen kemoterapeuttisten tehoa, rooli näiden tekniikoiden huumeiden jakelu edelleen suurelta osin määrittelemätön. Tiedot tässä viittaavat siihen, että transkatetri- valtimoon tekniikat parantavat jakelua doksorubisiinia maksasyövän.
Tämä tutkimus osoittaa, että transkatetri- valtimoon tekniikoita edistää tunkeutuminen doksorubisiinin. Yleisesti uskotaan, että toimituksen solunsalpaajalääkeaineet syöpäsoluja klassisesti sisältää kolme prosessia: kuljetus kautta verisuonia, kuljetus verisuonista kasvaimeen välitilaan, ja liikenteen välitilan [24]. Nämä prosessit on määritetty useita tekijöitä, mukaan lukien fysikaalis-kemialliset ominaisuudet lääkkeen ja biologinen ominaisuuksia kasvain. Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että transvaskulaarisen lääke liikenne vaikuttaa lähinnä mikrovaskulaariset paine ja verenkiertoa kasvain, ja että kuljetus kautta interstitium alhaisen molekyylipainon huumeiden kuten doksorubisiini vaikuttavat lähinnä diffuusio riippuu diffuusion ja konsentraatiogradientti huumeiden [24], [25]. Kuten esitetään tuloksemme, tunkeutuminen etäisyys doksorubisiinin fluoresenssia oli merkitsevästi suurempi kolmeen ryhmään transkatetri- hoitoja kuin että vein doksorubisiini injektion ryhmässä. Tämä havainto todennäköisesti johtuu parantuneesta huumeiden kuljetuksen prosesseissa syntyy transkatetri- valtimoon toimitusta. Ensinnäkin lääkeinfuusion kautta valtimoon asetettu katetri voi suoraan toimittaa lääkkeen kasvaimeen ravintonsa valtimot, helpottaa liikenteen kautta verisuonia. Toiseksi infuusio teoreettisesti lisää verenkiertoa kasvaimen kudoksissa, mikä voi parantaa transvaskulaarisen lääkeaineen kuljetuksen. Lopuksi valtimoon toimitus erittäin keskittynyt annoksia kemoterapiaa kasvattaa konsentraatiogradienttia, joka voi parantaa lääkeaineen kulkeutumista kasvain interstitium.
Lisäksi meidän tutkimuksessa todettiin, että transkatetri- valtimoon embolisaatiota jälkeen valtimoon doksorubisiini infuusio auttaa edelleen lääkeaineläpäisevyyden . Aiemmassa tarkastelun artikkeli, Geschwind [26] arveltu, että hiukkanen embolisaatiota Kasvainten ruokinta alusten saattaa sallia lääkkeen tunkeutua kasvaimen helpommin. Tuloksemme osoittivat, että molemmat ryhmän 3 ja ryhmän 4 kasvaimia oli suurempi keskimääräinen doksorubisiinin tunkeutuminen matkan verrattuna ryhmään 2, jotka tukevat hypoteesia. On osoitettu, että suurempi mikrovaskulaariset paineen ja /tai alemman Kudosneste paine voi nousta transvaskulaarisen nesteen suodatus, ja puolestaan johtaa parantamiseen transvaskulaarisen lääkeaineen kuljetuksen kasvaimen [24]. Uskomme, että merkittävä kasvu doksorubisiini levinneisyys matkan ryhmässä 3 ja 4 kasvaimia todennäköisesti seurausta kasvava paine-ero syntyy myöhemmin embolisaatiota kasvainten ruokinta aluksia.
Mielenkiintoinen havainto oli, että doksorubisiini levinneisyys etäisyyden ryhmä 4 kasvainten oli merkittävästi pienempi kuin ryhmässä 3 10 minuuttia, mutta oli hieman suurempi kuin ryhmä 3 4 tuntia. Tämä saattaa johtua siitä, että eri aikavälein välillä lääkeannostelun ja ruumiinavaus. Aiemmat kokeelliset tutkimukset ovat osoittaneet, että Lipiodol, kantajana syöpälääkkeiden, voi lisätä kasvaimeen lääkeaineen pitoisuus [27], mutta että materiaali pääosin säilytetty microarterioles ja venules jälkeen valtimoon infuusion seurauksena sen rasvaliukoisuus [28]. Lewis ja työtovereiden [20] äskettäin suoritettu doksorubisiini Vapautumiskoe in vitro käyttäen T-solu laitteen ja totesi, että lääke eluoitujen doksorubisiini /Lipiodol seos alle 4 tuntia, joiden puoliintumisaika on 1 tunti. Tässä tutkimuksessa talteen kasvainkudoksen 10 minuutin kuluttua hoidon väistämättä aliarvioida lääkeaineläpäisevyyden kasvaimissa vastaanottaa Lipiodol. Sen sijaan 4 tunnin aikaväli sallii doksorubisiinin eluoitua Lipiodol emulsio, joka johtaa kasvuun lääkeaineläpäisevyyden.
Käyttämällä fluoresenssimikroskopiaa, me osoitti myös merkittävästi lisääntynyt määrä doksorubisiinin fluoresoivan täplän kolmessa ryhmässä of transkatetri- hoitojen verrattuna vein injektion ryhmässä. Se on analoginen löydökset korkean suorituskyvyn nestekromatografialla aiemmissa tutkimuksissa [11], [12], [29], jotka vahvistavat transkatetri- valtimoon tekniikat parantavat lääkeaineen pitoisuus maksasyövän. Niistä kolme transkatetri- valtimoon terapiaryhmät, muutossuunnan doksorubisiinin fluoresenssia määrä oli samanlainen kuin doksorubisiini levinneisyys etäisyyden, joka todennäköisesti on myös selittyy embolismia liittyvät huumeiden kuljetus ja Lipiodol aiheuttamia lääkeretentioon.
Toisaalta, meidän tutkimus osoitti, että kasvaimen solut suonettoman ja viereisten alueiden kasvaimia jotka saavat transkatetri- hoitoa ei altistettu havaittavina pitoisuuksina doksorubisiinin. Se on samanlainen kuin löydökset viimeaikaisissa tutkimuksissa. Namurin työtovereiden suoritetaan maksansiirto seuraavat TACE potilailla, joilla maksasyövän ja totesi, että doksorubisiini pitoisuus kasvainkudoksessa väheni etäisyyden tukkeutuneen alusten ja lääkeaineläpäisevyyden liittyi tuumorinekroosi [15]. Nämä tulokset viittaavat siihen, että vaikutus transkatetri- valtimoon nykyisten tekniikoiden huumeiden jakelu voi olla jonkin verran rajoitettu. Transcatheter valtimoon tekniikoita, koska ne riippuvat nykyisten verisuonistoon, saattaa parantaa lääkkeen toimitus verisuoni alueille kasvaimen mutta eivät onnistu parantamaan toimitus verisuonettomassa alueille. Kun otetaan huomioon näiden havaintojen perusteella on selvää, että ylimääräinen niiden muuttamisesta huumeiden levittämiseen tulisi sisällyttää transkatetri- valtimoon hoitoja saavuttaa parempia kemoterapia-teho.
Tämä tutkimus oli useita rajoituksia. Ensinnäkin, käytimme yliannostus doksorubisiinin helpottamiseksi havaitsemiseen lääkeainekohtaisista kukinto, erityisesti kasvaimen vastaanottamisesta doksorubisiini suonensisäinen injektio, joka voi yliarvioida vaikutusta transkatetri- valtimoon tekniikoiden huumeiden levinneisyys. Jakauma doksorubisiinin annetaan rutiininomaisesti annoksen kautta transkatetri- valtimoon reitti on tutkittava tarkemmin. Toiseksi, valitsimme 10 minuuttia ja 4 tuntia doksorubisiinin annon uhrina ajankohtina varmistaa tehokas lääke tunkeutuminen [19], [20]. Koska lääkeaineen kasvainten on dynaaminen prosessi, on mahdollista, että enemmän aikaa olevia mittauksia voi antaa lisätietoja doksorubisiinille levinneisyys kasvain. Lopuksi, käytimme näyte kasvaimen arvioida doksorubisiini jakelua koko kasvain. Tunkeutuminen pituus kaksiulotteiset kuvat voi yliarvioida todellinen matka Doksorubisiinihoidon fluoresoivan täplän sen lähimpään aluksen koska lähin alus saattaa olla osan. Jatkotutkimuksissa käyttäen immunofluoresenssitekniikkaa olisi pyrittävä määrällisesti värjäystä koko kasvain.
Yhteenvetona, tämä tutkimus antaa näyttöä, että maksan Valtimo kemoterapia-infuusio, varsinkin yhdistettynä embolisaatiota parantaa huumeiden levinneisyys sekä lääkeaineen pitoisuus maksassa syöpä. Tämä voi ainakin osittain selittää mekanismia, jolla transkatetri- valtimoon tekniikat ovat tehokkaita hoitoja maksasyövän. Toisaalta, tulokset viittaavat siihen, että vaikutus näiden tekniikoiden huumeiden jakelu on melko rajallinen huolimatta yliannostuksen doksorubisiinin. Lisäksi tutkimukset ovat tarpeen kehittää uusia strategioita jakelun parantamiseksi doksorubisiinin.