PLoS ONE: Rhodococcus Bakteremia syöpäpotilailla on enimmäkseen katetriin liittyvä ja Associated kanssa Biofilm muodostaminen
tiivistelmä
Rhodococcus
on syntymässä syy opportunistinen infektio immuunivajepotilailla, yleisimmin aiheuttaa cavitary keuhkokuumetta. Se on harvoin raportoitu aiheuttavan eristyksissä verenmyrkytyksen. Kuitenkin suhde bakteremia ja Keskuslaskimokatetria ei tunneta. Vuosina 2002 ja 2010, ominaisuudet ja tulokset seitsemäntoista syöpäpotilaat
Rhodococcus
verenmyrkytyksen ja kestokanyyliä keskeinen laskimokatetri arvioitiin.
Rhodococcus
bakteeriverisyyttä olivat suurimmaksi osaksi (94%) keskilinjalle liittyvä verenkiertoinfektio (CLABSI). Useimmat bakteremian isolaatit olivat
Rhodococcus equi
(82%).
Rhodococcus
isolaattien muodostettu runsasta mikrobien biofilmin pinnalla polyuretaani katetrien, jota pienennettiin kokonaan tai osittain antimikrobinen lukko ratkaisu. Kaikki CLABSI potilailla oli onnistuneesti asiaan katetrin poiston ja Mikrobilääkehoidossa.
Rhodococcus
lajien olisi lisättävä luetteloon biofilmin muodostavien eliöiden immunosuppressoiduilla isännät ja useimmat
Rhodococcus
bakteeriverisyyttä syöpäpotilailla ovat keskeinen linja liittyy.
Citation: Al Akhrass F, Al Wohoush I, Chaftari AM, Reitzel R, Jiang Y, Ghannoum M, et al. (2012)
Rhodococcus
Bakteremia syöpäpotilailla on enimmäkseen katetriin liittyvä ja Associated kanssa Biofilm Formation. PLoS ONE 7 (3): e32945. doi: 10,1371 /journal.pone.0032945
Editor: Christiane Forestier, Université d’Auvergne Clermont 1, Ranska
vastaanotettu: 03 marraskuu 2011; Hyväksytty: 07 helmikuu 2012; Julkaistu: 13 maaliskuu 2012
Copyright: © 2012 Al Akhrass et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.
Rahoitus: Kirjoittajat ei ole tukea tai rahoitusta raportoida.
kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.
Johdanto
Rhodococcus
on noussut opportunistisia taudinaiheuttaja immuunivajepotilailla [1], [2]. Nimi
Rhodococcus
juontuu ominainen lohi- vaaleanpunainen punaisia ja pisaran muotoinen limaisia pesäkkeitä, jotka ovat kooltaan 2 mm 4 mm 4 päivän kuluttua kasvun kiinteällä alustalla.
Rhodococci
ovat yleensä liikkumattomia, solunsisäinen aerobinen, gram-positiivisia, heikosti hapan nopea kokkobasilleja [3], [4]. Vaikka hengittämistä tartunnan aerosolit ja pölyhiukkaset näyttää olevan vallitseva muoto lähetyksen
Rhodococcus
infektio ( 80% tapauksista
Rhodococcus
on keuhkoaffisio),
Rhodococcus
voidaan hankkia myös suoralla rokotus ihoon ja limakalvoihin [5], [6]. Muita reittejä hankinta kuuluu sairaalainfektioiden leviämistä, ihmisen asuttaminen ja henkilöstä siirto [7]. Lisäksi epidemiologiset altistuminen kotieläinten tai kasvatus ympäristöön liittyy vahvasti
Rhodococcus
infektio immuunivajepotilailla [8].
Rhodococcu
s verenmyrkytyksen on melko harvinainen ja koettiin olevan näkymättömästi liittyvän samanaikaiseen cavitary keuhkotulehdus [6]. Eristetty bakteremia ja CLABSI vuoksi
Rhodococcus
on harvoin raportoitu kirjallisuudessa ja ainoa kuvattu immuunivajepotilailla [6], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]. Ensimmäinen Tämän tutkimuksen tavoitteena oli kuvata kliinisiä piirteitä ja lähde ja tuloksia
Rhodococcus
bakteremian syöpäpotilailla. Toinen tavoite pyritään vaikutuksen tutkimiseksi
Rhodococcus
biofilmin muodostuminen keskeinen laskimokatetri (CVC) laboratoriossa mallin ja onko
Rhodococcus
organismien upotettu biofilmin voitaisiin hävittää tehokkaalla antimikrobinen lukko ratkaisu.
tulokset
Tarkempi tilastoja potilaan demografiset käytiin seitsemäntoista syöpäpotilaita tunnistettu tutkimusjakson aikana (taulukko S1). Kaikilla potilailla oli CVC paikallaan vähintään 48 tuntia ennen kliinisen esityksen ja veriviljely näytekokoelmaa.
Rhodococcus
bakteremian meidän syövän potilasryhmässä esitellään pääasiassa CLABSI; 16 potilasta (94%) oli CLABSI (kuusi 16 CLABSI potilaat täyttivät kaikki kriteerit selvä CRBShn) (taulukko S2) ja vain yksi potilas (6%) oli levitetty
Rhodococcus
bakteremia, keuhkokuume koska todennäköisesti lähde. (
Rhodococcus equi
otettiin talteen bronkoalveolaarinen huuhtelu nestettä.) Vain potilaan levitetään
Rhodococcus
verenmyrkytyksen keuhko osallistuminen vietti 11 päivää vuonna tehohoidossa varten septinen shokki, kun taas muut 16 potilasta jossa
Rhodococcus
CLABSI esittelyyn muutamia kliinisiä oireita vain, kuumeeseen on yleisin kliininen valituksen.
suurin osa potilaista (65%) aloitettiin yhdistelmähoitoa, kun taas kuusi potilasta (35 %) käsiteltiin monoterapiana. 17 potilasta, 88% koki CVC poiston jälkeen keston mediaani 43 päivää siitä päivästä, verenmyrkytyksen (alue 1-287). Vain 5 potilasta (29%) oli niiden CVC poistetaan 10 päivän kuluessa. Potilaita hoidettiin antibiooteilla mediaanin ollessa 11 päivää (vaihteluväli 1-90), jossa perusvähennystä kuume alle 72 tuntia. Potilailla oli riitansa verenmyrkytyksen jälkeen mediaani 5 päivän ajan (vaihteluväli 1-47 päivää). Keston mediaani oleskelu sairaalassa oli 10 vuorokautta (vaihteluväli 2-157).
Kaikki
Rhodococcus
isolaatit olivat johdonmukaisesti herkkiä gentamisiinille ja tigesykliinille; he olivat kuitenkin vaihtelevia alttius hinnat muille antibiooteille, kuten vankomysiinille (94%), moksifloksasiinia (91%), trimetopriimi-sulfametoksatsoli (88%), rifampisiinin (88%), Linetsolidin (87%), tetrasykliiniä (82%), ja atsitromysiinin (33%) ja osoittaa, vastus kaikille beetalaktaamiantibiootit testattu (penisilliini, ampisilliini sulbaktaamia ja oksasilliini).
arviointi biofilmin muodostumista ja tehoa mikrobilääkkeiden lukkoliuoksen
kaikki
Rhodococcus
isolaatteja (
equi
ja ei-
equi
) kiinni pintaan polyuretaani CVC luoda laajoja biofilmiä matriisi. Määrällinen kulttuuri häirinnyt biofilmin muodostumisen osoitti merkittäviä biofilmin muodostumiseen noin 10
6 pesäkkeitä muodostavaa yksikköä (CFU) per 1 cm segmentteihin (vaihteluväli 1,09 x 10
6-1,76 x 10
7 CFU /segmentti) ja
R. equi
,
Rhodococcus
spp, ja
R. corynebacterioides
. (Kuvio 1), ei ollut mitään merkitsevää eroa (p = 0,13), jonka määrä biofilmin tuotetaan
R. equi
(mediaani CFU /1 cm segmentti: 3,85 × 10
6) verrattuna ei-
equi Rhodococcus
isolaatteja (mediaani CFU /1 cm segmentti: 9,63 × 10
5 ).
ei ollut merkitsevää eroa biofilmin muodostumista pinnalle katetrin verrattaessa
Rhodococcus
ei-
equi
ja
R. equi
isolaatteja (p = 0,13).
Kolmesta ratkaisut testataan trimetopriimi EDTA + EtOH oli merkitsevästi tehokkaampi estämään biofilmin muodostumiseen verrattuna muihin ratkaisuihin ja hallita (kaikki p-arvot 0,01), jossa on täydellistä kuolemista.
Analyysi pyyhkäisyelektronimikroskoopilla 5000 × suurennuksella osoittivat laajaa biofilmin muodostumisen, jossa on näkyvä
Rhodococcus
bakteerin läsnä yhdessä biofilmiä matriisi. (Kuva 3).
Kuva suurennetaan 5000 ×. Laaja
Rhodococcus
gram positiivisia sauvoja voidaan nähdä upotettu ja sulatettu yhteen biofilmin matriisi, nuolilla. Yksittäiset
Rhodococcus
organismeja voidaan nähdä oikeassa alakulmassa, merkitään kehystetty alue.
Keskustelu
Rhodococcus
CLABSI syövässä potilaille, joilla on ylempi immunosuppressiota ei ole hyvin tutkittu ja onko CVC tulee epäillä lähteeksi
Rhodococcus
bakteremian puuttuessa näennäinen-elimet ei ole vielä tutkittu.
tässä tutkimuksessa olemme osoittaneet, että
Rhodococcus
muotoja raskas biofilmin pinnalla CVC polymeerejä. Useimmat
Rhodococcus
bakteeriverisyyttä meidän syöpäpotilailla oli katetrin liittyvää. Vain yksi potilas oli levitetty
Rhodococcus
infektio cavitary keuhkosairaus ja toissijainen
Rhodococcus
verenmyrkytyksen. Tästä syystä, vaikka niiden harvinaisuus,
Rhodococcus
lajeja tulisi sisällyttää erotusdiagnoosiin organismien aiheuttaa CLABSI immuunivajepotilailla kehittyneitä tasot immunosuppression.
Syöpäpotilaat riippuu valtavasti siitä suonensisäisen pääsyä laitteisiin ja CVC-koodi voi tulla lähde ja painopiste
Rhodococcus
verenmyrkytyksen, kun otetaan arjen näiden organismien läsnäolo ympäristössä ja niiden kyky kiinnittyä CVC-koodi ja edistää biologisen kalvon muodostumista pinnalle katetrin. Käsi saastuminen
Rhodococcus
aikaan CVC manipulointi voi vaikuttaa
Rhodococcus
verenmyrkytyksen. Epidemiologiset altistuminen maatalouden ympäristöt voivat selvästi aiheuttaa suoraan rokotus on CVC-koodi. Kuitenkin Tutkimuksessamme tietoa vastuita karja tai kotieläimet kuten hevoset ja siat puuttui. Todisteita tästä
Rhodococcus
biofilmin muodostusta Lisäksi osoitettiin in vitro ribiofilmimallia määrällistä biofilmin kulttuurin ja pyyhkäisyelektronimikroskoopilla (kuviot 1 ja 3). Intraluminaaliset kolonisaatio CVC muodostamalla antibiooteille vastustuskykyisten biofilmin matriisi on tärkein tekijä patogeneesissä CLABSI. Biofilmin mahdollistaa
Rhodococcus
lajien suojautumaan isännän puolustusta ja luoda jalansija josta nämä organismit voivat tunkeutua verenkiertoon kautta luminaali tai ulkopinnat CVC: n suonensisäisen segmentti.
Useimmat
Rhodococcu
s ihmisen infektiot ovat aiheuttaneet
Rhodococcus equi
ja vain muutamia muita lajeja on raportoitu aiheuttavan infektioita [13], [16], [17], [18]. Tämä havainto vahvistettiin tämä nykyinen tutkimus jossa
Rhodococcus
bakteremian syöpäpotilailla johtui enimmäkseen
R. equi
(82%), mutta kaikki lajit (
Rhodococcus equi
ja ei-
equi
) olivat biofilmin muodostava (kuvio 1), joka johtaa CLABSI.
Aikaisemmat tutkimukset kertoi, että
Rhodococcus equi
infektio immunokompetenteilla potilailla on parempi ennuste kuin tauti immuunivajepotilailla joiden kuolleisuus on 11% vs. 20-55% vastaavasti. [19], [20]. Äskettäin Yamshchikov ja kollegat osoittivat, että
R. equi
-aiheiset kuolleisuus elinsiirtopotilaille oli 10% [4]. Toisin kuin nämä aiemmat tutkimukset, eloonjäämisprosentti 100% havaittiin
Rhodococcus
bakteeriverisyyttä tutkimuksessamme kuormittaen siten parempi ennuste liittyy CLABSI syöpäpotilailla vaikka ylempi immunosuppressiota.
Rhodococcus
CLABSI voidaan hallita varhainen aloittaminen asianmukaista lyhyt kurssi (mahdollisesti 2-3 viikkoa) antibioottien aktiivisia
Rhodococcus
. Lisäksi katetrin poistamista voi parantaa lopputulosta mahdollisesti välttämällä etäinen toistuminen ja esiintyminen syvällä infektiot ikään kuin CVC säilytetään, organismi voi säilyä ja asuttaa katetrin.
suostumuksella aiempien tulosten, meidän havainto vahvisti myös in vitro aminoglykosidien, glykopeptidien, makrolidit, fluorokinolonit, rifampisiini, tetrasykliinit ja linetsolidi [21]. Näiden tulosten mukaan, antimikrobiset herkkyys
Rhodococcus
bakteerien aiheuttamien CLABSI syöpäpotilailla ei erota aiemmin raportoitu. Aktiivisimmat
in vitro
mikrobilääkkeitä tigesykliiniä ja gentamisiini, jonka jälkeen vankomysiinin, fluorokinolonit, TMP-SMX, rifampisiinin, linetsolidia ja doksisykliini. Gentamysiini ja glykopeptidien, kuten vankomysiinin ovat asianmukaisia valintoja.
estohoidoksi ei ole yleensä suositeltavaa, koska käytettävissä ei ole tietoja, jotka tukisivat sen tehoa ja koska infektio on harvinainen [6].
Rhodococcus
verenmyrkytyksen esitetään läpimurto infektio aktiivisista mikrobilääkkeille jossa organismi oli altis, kuten fluorokinolonien, TMP-SMX ja vankomysiini 45%: lla potilaista. Koska
Rhodococcus
lajit voivat muodostaa antibiooteille vastustuskykyisten monikerroksinen biofilmin matriisi, jossa ne upottaa itse, ei ole yllättävää, että kaikki läpimurto
Rhodococcus
bakteeriverisyyttä joka tapahtui ollessaan aktiivinen mikrobilääkkeitä oli CLABSI tapauksissa. Monet antibiootit ovat tehottomia hajottaa matriisin ja poistaa bakteerit upotettu biofilmin [22]. Tämä on todellinen terapeuttinen ja profylaktinen haaste hallinnassa CVC syöpäpotilailla. Siksi tehokas laajan kirjon antimikrobinen katetrilukkoliuokseen laajakirjoisten aktiivisuus biofilmin muodostavien bakteerien (mukaan lukien
Rhodococcus
) ja sienet voisi olla paras vaihtoehto strategia ehkäisyyn CLABSI syöpäpotilailla pitkän aikavälin kestokatetri CVC [23], [24] ja optio lisäarviointia kliinisissä kokeissa.
tässä nykyisessä tutkimuksessa testattiin ja verrattiin aktiivisuuteen eri katetrilukkoliuoksia. Vankomysiini /hepariinin ja uuden metyleenisiniliuosta on osoitettu vähentävän CLABSI aiheuttamia gram-positiivisia bakteereita [25], [26]. Kuitenkin, trimetopriimi EDTA /25% EtOH: lla on osoitettu poistamaan vastustuskykyisten bakteerien ja sienien upotettu biofilmin tavalla parempi kuin metyleenisiniliuosta kunhan niiden aktiivisuus metisilliiniresistenttiä
Staphylococcus aureus
(MRSA),
Pseudomonas aeruginosa
ja
Candida albicans
alussa ja kypsä biofilmin [27], [28]. Tuloksemme tukevat näitä havaintoja jolloin trimetopriimi-EDTA /25% EtOH oli tehokkainta, verrattuna muihin ratkaisuihin, hävittämisessä
Rhodococcus
biofilmin (kuva 2).
Yhteenvetona
Rhodococcus
bakteremian syöpäpotilailla oli pääosin katetriin liittyvä ja vastannut hyvin lyhytkestoinen Mikrobilääkehoidossa. Koska
Rhodococcus
organismien edistää laajaa biofilmin muodostumista CVC,
Rhodococcus
lajit on sisällytettävä ruokamyrkytysepidemian CLABSI ja sisimmässä CVC tulee epäillä lähteeksi
Rhodococcus
bakteremia syöpäpotilailla, joilla ei ole muuta ilmeistä lähde verenkiertoinfektio.
Materiaalit ja menetelmät
hyväksyntä toteuttamaan tämän tutkimuksen saatiin MD Anderson Cancer Center Institutional Review Board. Kun sairaalaan, kirjallinen suostumus antoivat potilaiden tietonsa tallennetaan sairaalan tietokantaan ja käyttää tutkimustarkoituksiin. Luopuminen tietoisen suostumuksen tässä tutkimuksessa saatiin.
Kliininen ominaisuudet
jälkikäteen tunnistettu syöpäpotilaat
Rhodococcus
bakteremian etsimällä mikrobiologian laboratorion tietokantaan Teksasin yliopiston MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, (UTMDACC) tammikuusta 2002 kautta maaliskuussa 2010. asiaankuuluvat tiedot potilasasiakirjamerkinnöistä olivat otetun lukien demografisia ominaisuuksia, syöpää sairastavilla, läsnäolo Luuytimensiirto, siirre-versus host disease, kliininen esitys , laboratoriokokeiden tulokset ja kuvantamistutkimukset, samanaikainen infektiot, antibioottihoidon tyyppi ja kesto sekä potilaiden hoitotuloksiin kolmen kuukauden seurannassa.
Määritelmät
Neutropenia määriteltiin neutrofiilien absoluuttinen määrä ( ANC) 500 solua /mm
3, ja lymfopenia absoluuttisena lymfosyyttiarvo (ALC) 1000 solua /mm
3. Potilaat, joilla on vähintään yksi sarja positiivisia veriviljelyeristyksissä varten
Rhodococcus
määriteltiin olevan
Rhodococcus
verenmyrkytyksen. Kun
Rhodococcus
eristettiin verestä, sitä pidettiin todellisena patogeenisen organismin. Keski viiva liittyvä verenkiertoinfektio diagnosoitiin mukaan Centers of Disease Control and Prevention (CDC) suuntaviivat [29]. Diagnoosi keskiviiva liittyy verenkiertoinfektio (CLABSI) pidettiin, jos potilas oli tunnustettu patogeeni viljelty yhden tai useamman veren viljelmät (ei sisälly organismeja pitää yhteistä ihon epäpuhtauksia) ja mitään ilmeistä lähde verenkiertoon infektion paitsi CVC. Lisäksi CLABSI pidettiin katetriin liittyvät verenkiertoinfektio (CRBShn) jos lisäksi CDC arviointiperusteet, Infectious Disease Society of America (IDSA) määritelmä kriteerit täyttyy myös, mikä viittaa siihen, että CVC on syyllinen lähde verenkiertoinfektio [30]. Nämä kriteerit koostui diagnoosi CLABSI kohti CDC kriteerit ja ainakin yksi seuraavista: kvantitatiivinen ( 10
3 CFU /katetri segmentti) katetrin kulttuurin, jolloin sama organismi eristettiin katetrin segmentti ja reuna- verta, tai ero määrällinen veriviljely samanaikaisella määrällisiä veriviljelyeristyksissä CVC ja ääreisverenkierron paljastaen suhde ≥3:1. Diagnoosi levittää
Rhodococcus
bakteremian vaaditaan elpyminen
Rhodococcus myynnissä maassa eri elin noncatheter liittyvien site (expectorated yskös, endotrakeaalinen toive, bronkoalveolaarinen huuhtelu, pleuraeffuusio, keuhkokudoksen tai ihon ) asettamisessa kliinisen ja röntgenkuvissa nähtävien-elimet (eli keuhkokuume, ihomuutokset, jne.). Kaikki potilaat oli CVC paikallaan aikaan bakteremian.
Mikrobiologiset tunnistaminen
Rhodococcus
näytteitä eristettiin kliinisistä verinäytteistä ja saatu UTMDACC kliinisen mikrobiologian laboratorio . Isolaattia tunnistettiin perusteella lohen värillinen limaisia morfologiaa pesäkkeitä. Lajiutuminen varten
Rhodococcus
spp ja
R. corynebacteroides
suoritti UTMDACC kliinisen mikrobiologian laboratoriossa 16S rRNA-geeniin.
Rhodococcus
spp. varmistettiin olevan ei-
equ
i ja sovitettu useita nimetty ja nimeämätön lajeja kuten EU741107,
R. gordoniae
W4937,
R. pyridivorans
, ja
R. rhodochrous
DSM 43241. vahvistaminen spesiaatio
R. equi
isolaatit tehtiin PCR-monistus on 956 bp: n fragmentti, kolesterolioksidaasi geeni, joka määritettiin olevan lajispesifinen ja
R. equi
[31]. Liemi mikro-laimennus minimaalinen estävä pitoisuus menetelmää käytettiin herkkyysmääritykseen
Rhodococcus
lajeja, mukaan julkaissut suuntaviivat Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI 2003). Antimikrobiset vaste määriteltiin resoluutio tai parantaminen kliinisten oireiden lisäksi negatiivinen mikrobiologista havaintoja.
arviointi biofilmin muodostumista ja tehoa mikrobilääkkeiden lukkoliuoksesta
Käytimme kvantitatiivisen mikrobiologinen arviointi ja pyyhkäisyelektronimikroskoopilla mikroskooppinen tutkimus arvioida biofilmin muodostumista. Käyttäen muunneltua Kuhn malli biofilmin kolonisaation [32], [33],
Rhodococcus
isolaatteja,
equi
(n = 3) ja ei
equi
(n = 2 ), testattiin biofilmin muodostumista.
Jokainen eristää testattiin sekstetti. Steriili polyuretaani CVC segmenttien pantiin 24-kuoppaisille kudosviljelylevyille, jotka sisältävät ihmisen plasmaa ja inkuboitiin ravistellen 24 tuntia 37 ° C: ssa. Plasman korvattiin sitten 1 ml: lla 5,5 x 10
5 solua /ml,
Rhodococcus
ymppiä ja niitä inkuboitiin ravistellen 48 tuntia 37 ° C: ssa. Ennen altistamista katetrin segmenttien ymppi kasvatettiin aivo-sydän-infuusio-lientä 4 tunnin ajan 37 ° C: ssa ja laimennettiin 5,5 x 10
5 CFU /ml. Liemi poistettiin sitten ja CVC segmentit pestiin 1 ml: lla 0,9% steriiliä suolaliuosta ravistellen 100 rpm: llä 30 minuutin ajan 37 ° C: ssa. Segmentit siirrettiin 5 ml: aan 0,9% steriiliä suolaliuosta ja sonikoitiin 15 minuuttia häiritä biofilmiä. Saatu liuos kvantitatiivisesti viljeltiin tekemällä sarjalaimennoksia 0,9% steriiliä suolaliuosta ja pinnoitus tryptikaasi-soija-agaria, jossa 5%: lla lampaan verta. Kaikki Levyjä inkuboitiin ylösalaisin 48 tuntia 37 ° C: ssa kasvun.
tehon arvioimiseksi antimikrobisen lukkoliuoksista vastaan
Rhodococcus
biofilmin, kaikki viisi
Rhodococcus
isolaatteja ( kolme
R. equi
ja kaksi ei-
equi
) altistettiin itsenäisesti ja testattiin sekstetti kolmeen antimikrobisia lukkoliuoksista lukien, 10 mg /ml trimetopriimia + 30 mg /ml CaEDTA + 25% EtOH: ssa (TEDTA + EtOH), 1 mg /ml vankomysiiniä + 100 ui /ml hepariinia (VancHeparin), ja 0,05% Metyleenisini + 7% natriumsitraatti + 0,15% metyyliparabeeni + 0,015% propyyliparabeenia (MethBlue). Biofilmin muodostettiin 1 cm segmentteihin steriiliä polyuretaani katetrien, kuten edellä on kuvattu. Pesuvaiheen jälkeen, segmentit altistettiin kolme antimikrobinen lukkoliuoksista 2 tuntia ravistellen 37 °. Segmentit poistettiin sitten lukko ratkaisu, laitettiin 5 ml: aan 0,9% steriiliä suolaliuosta, sonikoitiin 15 minuuttia, ja määrällisesti viljeltiin, kuten edellä on kuvattu.
visualisoimiseksi
Rhodococcus
biofilmin, näytteet arvioitiin kahtena käyttäen pyyhkäisyelektronimikroskoopilla. Sentin polyuretaani katetri segmentit olivat altistuneet
Rhodococcus
isolaattien kuten edellä muodostamaan biofilmiä. Segmentit kiinnitettiin sitten 2% glutaraldehydi, jonka jälkeen kiinnitys osmiumtetraoksidilla, parkkihappo, ja uranyyliasetaatilla kuvatulla aiemmissa tutkimuksissa [33]. Edelleen sarja etanolin kuivuminen vaiheet tehtiin segmenttien ja sitten sputteroitiin Au-Pd (60/40 suhde) ja katsella mallia XL3C Philips mikroskoopilla.
tilastolliset menetelmät
kuvailevia tilastoja käytettiin kuvaamaan peruspiirteet kliinisten tietojen tutkimuksessa. Mitä biofilmin tiedot kunkin
Rhodococcus
eristää, biofilmin muodostuminen mitattiin CFU /1 cm: n palanen verrattiin joukossa päällystämättömän ohjaus katetrien ja katetreja käsiteltiin erilaisilla mikrobilääkkeiden lukkoliuoksista. Ensimmäinen, Kruskal-Wallisin testiä käytettiin vertailussa. Jos merkittävä tulos (
p
0,05) havaittiin, käytimme Wilcoxonin summa testit pareittain vertailuissa. Α tasot post-hoc pareittain vertailuissa oikaistiin käyttäen peräkkäisiä Bonferroni oikaisu kontrolloimaan tyypin I virhe. Wilcoxonin summa testiä käytettiin myös vertaamaan biofilmin muodostumisen välillä
Rhodococcus equi
ja
Rhodococcus
ei-
equi
isolaatteja. Kaikki analyysit suoritettiin käyttäen SAS versiossa 9,1 (SAS Institute, Cary, NC) B
tukeminen Information
Taulukko S1.
aCLABSI, keskilinjalle liittyy verenkiertoon infektiota;
bGVHD, käänteishyljintä;
cHSCT, hematopoieettisten kantasolujen siirto;
dICU, tehohoidossa;
eTMP /SMX, trimetopriimi-sulfametoksatsoli
* 6 potilaalla oli selvä katetriin liittyvät verenkiertoinfektio (CRBShn)
** Virusinfektio koostuu adenovirus alahengitystieinfektio in 1 (6%) ja sytomegalovirus infektion 1 (6%); sieni-infektio käsitti
Candida albicans
CLABSI in 1 (6%) ja
Candida parapsilosista
CLABSI in 1 (6%); bakteeritartunta edusti
Acinetobacter baumanii
Bakteremian 2 (11%) ja keuhkokuume 1 (6%),
Corynebacterium
CLABSI in 2 (11%),
Micrococcus
CLABSI in 1 (6%),
Pseudomonas aeruginosa
keuhkokuumeen 1 (6%), metisilliinille herkkä
Staphylococcus aureus
CLABSI in 1 (6%), Alpha-hemolyyttinen
Streptococcus
bakteremian 1 (6%). Potilaat voivat olla rinnakkain olemassa virus-, bakteeri- ja sieni-infektiot sekä useita bakteeri- tai sieni-infektioita.
Doi: 10,1371 /journal.pone.0032945.s001
(DOC) B Taulukko S2.
* CLABSI, keskilinjalle liittyvä verenkiertoinfektio mukaan määriteltyä Centers for Disease Control and Prevention; CRBShn, katetriin liittyvät verenkiertoinfektio mukaan määriteltyä Infectious Disease Society of America (10); CVC, Keskuslaskimokatetria; peri, perifeerinen; NA, ei ole saatavilla. CVC arvot osoittavat veren kulttuurin kerätty CVC; peri arvot osoittavat veren kulttuurin kerätty perifeerisestä aluksesta. Kaikki 16 potilasta ei ollut toinen painopiste infektio, kuten keuhkokuume tai ihovaurioita (Kaikilla potilailla oli normaali keuhkoröntgen tai /ja CT rinnassa aikaan ilmoittautuminen).
Doi: 10,1371 /journal.pone .0032945.s002
(DOC) B
Kiitokset
Tämä tutkimus esiteltiin osittain klo 50
th vuosikokouksessa Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Boston, Massachusetts, 11-15 09, 2010.