Krooninen sairaus

tiivistelmä

Korvapunkit (

Otodectes cynotis

) ja korvakäytävän kasvaimet ovat erittäin vallinneista liittovaltion uhanalaisten Island kettujen (

Urocyon littoralis catalinae

) elävät Santa Catalina Island rannikon of Southern California. Koska tutkimukset alkoivat vuonna 1990, lähes kaikki ketut tutkitaan todettiin tartunta punkkeja, ja ceruminous rauhanen kasvaimia (karsinoomien ja adenoomia) havaittiin noin puolet kaikista kettujen ≥ 4-vuotiaille lapsille. Oletimme, että vähentäminen korvapunkkitartunnan infektio vähentäisi ulkokorvatulehduksen ja ceruminous rauhanen liikakasvu, riskitekijä kasvainten kehittymiseen. Tässä tutkimuksessa, teimme satunnaistetussa kenttäkokeessa arvioida punkkien hoidon korvapunkkitartunnan yleisyys ja intensiteetti infektio, ulkokorvatulehdus, ceruminous rauhanen liikakasvu ja punkki IgG ja IgE-vasta-ainetasot. Hoito oli erittäin tehokas poistamaan punkkeja ja vähentää ulkokorvatulehduksen ja ceruminous rauhanen liikakasvu ja punkki IgG-vasta-ainetasot olivat merkittävästi alemmat joukossa infektoimattomien kettuja. Ceruminous rauhanen liikakasvu lisääntynyt krooninen infektio, hoitamaton kettuja aikana kuuden kuukauden tutkimuksessa. Tuloksemme antaa vakuuttavia todisteita siitä, että punkkien hoito on tehokas keino vähentää punkkeja, ja että punkki poistaminen puolestaan ​​vähentää korvaan vaurioita ja punkki-IgG-vasta-tasot Santa Catalina Island kettuja. Tämä tutkimus on edennyt ymmärrystämme taustalla synnyssä joka johtaa ceruminous rauhanen kasvaimia, ja on auttanut johdon päätökset, jotka vaikuttavat lajien säilyminen.

Citation: Moriarty ME, Vickers TW, Clifford DL, Garcelon DK, Gaffney PM Lee KW, et ai. (2015) korvapunkkitartunnan poisto Santa Catalina Island Fox (

Urocyon littoralis catalinae

): ohjaus syövän riskitekijöitä Development. PLoS ONE 10 (12): e0144271. doi: 10,1371 /journal.pone.0144271

Editor: Douglas Thamm, Colorado State University, Yhdysvallat |

vastaanotettu: 01 elokuu 2015; Hyväksytty: 16 marraskuu 2015; Julkaistu: 7. joulukuuta 2015

Copyright: © 2015 Moriarty et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat saatavilla Dryadi (DOI: 10,5061 /dryad.12vb8).

Rahoitus: Tämä tutkimuksen rahoittivat Morris Animal Foundation (TWV; lupanumeroon D08ZO-043, https://www.morrisanimalfoundation.org), Institute for Wildlife Studies (TWV, MEM, https://www.iws.org), Catalina Island Conservancy (JLK, CLD, https://www.catalinaconservancy.org), Greer Laboratories, Inc. (KWL, MEM; http : //www.greerlabs.com), opiskelijat koulutus Advanced Research, UC Davis School of Veterinary Medicine (MEM; https://www.vetmed.ucdavis.edu/research/grad_education/star). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu. Greer Laboratories, Inc tuettiin muodossa palkkojen tekijöille [KWL], mutta ei ollut mitään ylimääräistä roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen. Erityinen roolit nämä kirjoittajat ovat muotoutuneet ”kirjoittaja maksujen osiossa.

Kilpailevat edut: Meillä on seuraavat edut: Tämä tutkimus sai rahoitusta Greer Laboratories, Inc. Kenneth W. Lee työskentelee Greer Laboratories , Inc. ei ole patentteja, tuotteiden kehittämiseen, tai kaupan tuotteita tuloksena tämän projektin. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen PLoS One politiikkaa jakaa tietoja ja materiaaleja.

Johdanto

Tauti on merkittävä uhka säilyttämiseen riippuvaisten luonnonvaraisia ​​lajeja, erityisesti geneettisesti ja maantieteellisesti eristyksissä väestön [1]. Santa Catalina Island (SCA) kettu (

Urocyon littoralis catalinae

) on yksi kuudesta erillisen alalaji [2,3] kotoisin Kanaalisaaret rannikolla Southern California (SCA: 33 ° 24 ’N, 118 ° 24 ’W). Vuonna 1999 epäillyn penikkatauti epidemian tuhosi 85-90% tästä väestöstä, ja loput ~ 100 ketut tämä alalaji listattiin liittovaltion uhanalaisten [4,5]. Intensiivinen hoito, joihin kuuluu translokaatio vankeudessa kasvattamiseen, ja rokotus onnistuneesti vältyttiin sukupuuttoon ja vaikutti nopea väestönkasvu on arvioitu väkiluku 1114 vuonna 2012 [6, 7]. Vaikka väestö kasvaa nyt, tautiepidemiat edelleen ensisijainen uhka jatkumista SCA kettuja [8, 9].

Ceruminous rauhanen kasvaimia (karsinoomien ja adenoomia) havaittiin ensimmäisen kerran vuonna SCA ketut vuonna 2001 [ ,,,0],10]. Meidän seuralainen tutkimuksessa johdetaan 2001-2008, Vickers et al. havaitsi, että noin puolet SCA kettujen ≥ 4-vuotiailla lapsilla oli ceruminous rauhanen kasvaimia, ja että punkkeja oli läsnä 98% SCA kettujen [10]. Punkkeja on havaittu kahdessa muussa alalaji Kanaalisaari ketut Southern saarilla, mutta ei koskaan kolmessa alalaji Pohjois saarilla; kuitenkin, SCA ketut ovat ainoat alalaji, joka on korvakäytävän kasvaimia (kuvio 1) [8,10]. On edelleen epäselvää, miksi jotkut alalaji saaren kettujen ovat punkkeja ja toiset eivät, mutta mahdollisia olettamuksia sisältävät historiallisia käyttöönotto Korvapunkkitartunnan Feral kissat eteläisen saarilla [8], sekä mahdolliset erot immuunivasteen tai geneettinen alttius. Kvantitatiivinen riskinarviointi osoitti, että kasvaimia liittyy ceruminous rauhanen liikakasvu (CGH), joka on puolestaan ​​korreloi voimakkaasti ulkokorvatulehdus aiheuttama punkkeja (

Otodectes cynotis

) [10]. Nämä havainnot ovat sopusoinnussa hypoteesin, että SCA kettuja ovat yksilöllisesti alttiita vakavia korvakäytävään vaurioita, ja että punkkeja yllyttävät tulehdusvastetta ja ceruminous rauhanen liikakasvu, jotka edeltävät ja saattaa edistää kasvainten muodostumista ja syövän syntymistä [10].

jakelu kettujen että tartuntaa tai tartunta punkkeja, ja kettuja, jotka ovat korvakäytävään kasvaimia. Island ketut eivät asu Santa Barbara tai Anacapa saaria.

Korvapunkit elää ja pinnallinen keratiini korvakäytävän ja aiheuttaa tulehdusreaktion dermis, joka lisää korvavahan tuotanto ja keratiinin roskia, joskus estää korvakäytävään, ja mikä ceruminous rauhanen liikakasvu [11-13]. Tämä paksuuntunut ceruminous eritettä voi aiheuttaa syöpää [14], ja tutkimus koirilla ja kissoilla osoitti vahvan yhteyden kroonisen ulkokorvatulehduksen ja kehittäminen ceruminuous rauhasen liikakasvun ja neoplasian [15]. Vuonna SCA kettuja, punkki infektio on nähty yhdessä selvästi ulkokorvantulehduksen, peri-kuultavassa haavat, selluliitti, paikallinen toissijainen bakteeri-infektiot ja verenmyrkytys, sekä ceruminous rauhanen karsinoomien paikallisten invaasiota ja etäpesäkkeiden [8,10]. Vaikka punkit on havaittu aloittavan kaskadin tapahtumia, jotka voivat altistaa ceruminous rauhanen kasvaimia, ei ole aikaisempaa tutkimuksissa on tarkasteltu, mikä vaikutus punkki poistaminen voisi olla sairauden etenemiseen.

Tavoitteena tätä satunnaistettiin kuusi kuukautta kenttäkokeessa oli arvioida vaikutusta punkkien hoidon korvapunkkeja, korvakäytävässä vaurioita, ja tasot punkki-spesifisten vasta-aineiden (IgG ja IgE) vapaassa-alainen SCA kettuja. Lisäksi vertasimme tasoja punkki-spesifisten vasta-aineiden SCA kettujen kanssa Santa Cruz Island (SCZ) kettujen (

Urocyon littoralis santacruzae

), joka on läheistä sukua alalaji ilman näyttöä punkkeja, korvatulehdus tai ceruminous kasvaimet . Oletimme, että (1) punkki yleisyys ja intensiteetti infektion vähenisi merkittävästi käsittelemällä kettujen kanssa punkkien torjunta (2) mite poistaminen liittyisi pienentää korvatulehduksen ja ceruminous rauhanen liikakasvu; ja (3) mite poistaminen olisi yhteydessä alentuneeseen tasojen punkki-IgG ja IgE.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics selvitys

Eläinten pyydystäminen ja biologisia näytteitä SCA ketut oli myönnetty Yhdysvaltain Fish and Wildlife Service (USFWS) liittovaltion 10 (a) 1 (A) lupa (nro TE744878-9) ja aiesopimuksen kanssa Kalifornian Department of Fish and Wildlife (CDFW). Kaikki toimenpiteet, joissa eläimet tarkistettiin ja hyväksyttiin University of California, Davis, Institutional Animal Care ja Käytä komitea (lisäpöytäkirjan 13366).

kenttäkokeiluun Suunnittelu

SCA ketut otettiin kiinni heinäkuussa 2009 (t

0), syyskuu 2009 (t

1), marraskuu 2009 (t

2), ja tammikuussa 2010 mennessä (t

3) (taulukko 1). Kettuja Kaapattu t

0 sisällytettiin tutkimukseen, jos heillä oli punkkeja alkuperäisen tentti, oli suurempi kuin 1 vuotta vanha, ei ollut hoidettu korvapunkkeja viimeisen 12 kuukauden aikana, ja ei ollut aiemmista sivuseinämän resektiota korvakäytävän kasvaimen poisto. Rekisteröidyt ketut satunnaistettiin käsiteltyä tai käsittelemätöntä vertailu ryhmien lohkoissa kaksi, mikä tapahtui ajankohtana talteenotto ja seurasi

a priori

ohjeet satunnaisesti määrittää ensimmäinen kettu johonkin ryhmistä, ja vaihtoehtoinen ryhmä jakaminen jälkeen.

Box ansat (Tomahawk live Trap Company, Tomahawk, Wisconsin, USA) asetettiin ja syötti yhdistelmä koiran nappulat, purkitettu kissanruoka, ja marja tahna. Ansat sijoitettiin pitkin linjalta lähellä teitä ja polkuja, 250-300 metrin välein. Yksi tai kaksi ansat asetettiin kussakin paikassa, jossa 15-44 paikkoja, joita käytetään päivittäin. Kaikki ansat tarkastettiin joka aamu, ja kettuja tutkittiin näytteitä, käsitelty ja vapautetaan paikalla kaapata. Ketut olivat silmät ja käsin hillitty samalla hankkeen eläinlääkäri (TWV) suoritetaan lääkärintarkastus ja otoscopic arviointi sekä korvakäytävät. Lähtötilanteen kerättiin, myös passiivisen integroitu transponderi tunniste, sukupuoli, ikä, paino, fyysinen kunto, ja korvakäytävän havaintoja. Ketut 1-3 vuotta vanha luokiteltiin nuoria ja ketut ≥ 4 vuotias luokiteltiin kypsä. Jos tarkkaa ikää ei voitu määrittää aikaisemmista kaapata historiasta, ketut jaettiin ikäryhmien käyttämällä hampaiden kuluminen kuvioita [16,17], ja kettuja luokiteltiin nuoret, jos heillä oli luokan 1 Dentin altistustavoiltaan tai kypsä, jos heillä oli Class 2- 4 dentiini altistutaan.

korvapunkkitartunnan infektion voimakkuus arvioitiin kahdella tavalla: punkki pisteet ja punkki laskea. Subjektiivinen mite vakavuus pisteet määritettiin otoscopically hankkeen eläinlääkäri (taulukko 2). Sen jälkeen pisteytys, pumpulipuikolla työnnettiin kuhunkin korvakäytävään kerätä punkit, sitten laitettiin lasiputkeen ja pidetään eristetyn astian jään pakkauksissa kunnes säilytyksen 4-8 ° C: ssa. Viikon kuluessa kokoelma näytteet toimitetaan kuivajäässä laboratorioon at University of California, Davis, ja määrä punkkien määritettiin käyttämällä preparointimikroskooppia (MEM). Sekä mite pisteet ja punkki count laskettiin keskiarvot välillä vasemman ja oikean korvan tarjota kokonaisarvion infektion intensiteetin.

korvakäytävään koepalat tehdä paikallispuudutuksessa lidokaiinin kanssa 4% geeliä, ja lidokaiini injektioliuos infusoidusta subkutaanisesti välittömästi vieressä biopsiakohtaan. Käytä steriiliä 5-6 mm ihon booli, koepalat otettiin alemmasta kaudaalisesta näkökohta vasemman ja oikean pystysuuntaisen korva kanava risteyksessä kanssa vaaka- kanavat, ja kiinnitettiin 10% neutraaliin puskuroituun formaliiniin. Proliferative vauriot olivat myös biopsiat ja poistaa kokonaan, jos ne täysin tukossa kanavalle. Sen jälkeen kun näytteen saamiseksi, digitaalinen paine ja tyrehdyttävä jauhe levitettiin biopsiakohdassa edistää hemostaasin. Tulehduskipulääkkeet (ketoprofeeni, 2 mg /kg, Zoetis Inc., Kalamazoo, MI, USA) ja systeeminen antibiootti (Enrofloksasiini, 10 mg /kg, Bayer, West Haven, CT, USA) annettiin ihon alle.

10 ml verinäyte kerättiin kaulavaltimoa laskimopunktuurilla seerumin keräys putkeen ja säilytetään eristetyssä säiliössä jään pakkauksissa. Sen jälkeen hyytymistä, verinäytteitä jäähdytetty ja sentrifugoitiin 1176 x g (Fischer Scientific Centrific Model 225) 24 tunnin kuluessa talteenoton; seerumit jaettiin aliqots ja säilytettiin -80 ° C: ssa, kunnes sitä käytettiin testauksessa mite-spesifisen IgG ja IgE. Ketut hoidetussa ryhmässä sai fiproniili (Frontline Top Spot, 30 mg /kg, Merial, Ltd., Duluth, GA, USA) paikallisesti lapaluiden väliin ja ivermektiini (Acarexx, 0,5 ml 0,01% liuos, Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc ., St. Joseph, MO, USA) kumpaankin korvaan. Fiproniili annettiin augmentation auttamaan käsittelyyn

Otodectes

. Tämä on off-label käytön, mutta oli perusteltua vähentää todennäköisyyttä välittömästi uudelleen tartuntoja kosketukselta muiden kettujen (pitempi puoliintumisaika kuin ivermektiini), ja estää uudelleen punkit yhdestä korvasta toiseen kautta ihon pintaa . Ketut käsittelemättömän vertailuryhmän eivät saaneet myöskään hoitoa.

Pyrkimykset vangita tutkimuksen kettuja tehtiin kerran kahdessa kuukaudessa yli kuuden kuukauden koeaika (t

1, t

2, t

3). Ensimmäisessä kaksi recapture tapahtumat (t

1, t

2), kaikki kettuja tutkittiin ja näytteet (punkkeja ja veri), kun taas vain käsitelty kettujen sai punkkien (taulukko 1). Lopussa kuuden kuukauden aikana (t

3), kaikki ketut tutkittiin näytteitä (punkkeja ja veri), biopsied, ja käsitelty maksimoimaan käsiteltyjen ketut SCA väestöstä vuoden tutkimuksen lopussa (taulukko 1).

histopatologia arviointi koepaloja

korvakäytävään koepalat rutiininomaisesti käsitelty, parafiiniin upotettu, leikattiin 5 um ja värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla. Immunohistokemiaallisesti yleiseurooppalaisen sytokeratiini käytettiin lopullisten kasvaimen diagnoosia. Kaikki histologia tulkittu board-sertifioitu patologi (PMG) at University of California, Davis, jotka pysyivät sokea hoitoon. Näytteet arvioitiin näyttöä tulehduksen sopusoinnussa otitis (taulukko 2), CGH (taulukko 2), ja läsnä ollessa tai ilman ceruminous rauhanen adenooma tai syöpä. Pisteiden vasemman ja oikean korvan laskettiin keskiarvot antamaan kokonaisarvion korvatulehduksia ja CGH.

Mite tiivisteet ja valmistelu päällystettyihin kuoppiin

Korvapunkit eristettiin SCA kettuja aikana kenttä arviointeja käytettiin valmistaa vesiliuoksia punkki-spesifisiä antigeenejä. Lyhyesti, punkit jauhettiin käyttäen Tenbroeck kudosjauhimessa suspendoitiin sitten fosfaattipuskuroitu suolaliuos (PBS). Yön yli inkuboinnin -20 ° C: ssa, punkki sentrifugoitiin 12857 x g: ssä ja supernatantti kerättiin ja sitä käytettiin punkki-antigeenin. Proteiinipitoisuus määritettiin kolorimetrisesti kanssa BCA Protein Assay (Thermo Fisher Scientific, Pierce, Rockford, IL, USA). Immulon 4HBH tasainen pohja nauhat kokoonpanot (Thermo Electron Corporation, Waltham, MA, USA) käytettiin koko ja toimi kiinteän faasin kaikkien suoraan sitoa entsyymi-immunologiset määritykset (ELISA). 12-kuoppaisilla suikaleet erikseen päällystetty mite uutteet (1 ug /ml) sen jälkeen, kun aiemmin määritellyn mukaisesti [18]. Lyhyesti, yksittäiset uutteet laimennettiin bikarbonaattipuskurissa (pH 9,6), ja 350 ui lisättiin kuhunkin osoitettu hyvin. Yön yli inkuboinnin jälkeen 4-8 ° C: ssa, kuopat pestiin PBS: llä, blokattiin 1% monoetanoliamiinia (pH 7,5), kuivattiin ilmassa ja varastoitiin -20 ° C: ssa Ziplock pussien käyttöön asti.

ELISA punkki-IgG ja IgE

läsnäolo punkki-IgE-vasta-aineen kettu seerumissa arvioitiin käyttämällä koiran IgE erityinen ELISA [18, 19]. Samanlainen puolikvantitatiivinen ELISA spesifinen kettu IgG kehitettiin tätä tutkimusta, jotta voidaan määrittää suhteellinen taso punkki IgG-vasta kussakin seerumeista näytteestä (KWL ja MEM). Sillä IgG määritystä, kolme kertaa sarjalaimennoksia kettu seerumeista välillä 1: 150-1: 36450 lisättiin kolmena kappaleena, ja levyt on päällystetty antigeenejä uutettiin homogenoidusta punkkeja. Biotinyloitu monoklonaalinen anti-IgG-vasta-aineita käytettiin ensisijaisena koetin reagenssi, streptavidiinin alkalinen fosfataasi, kuten entsyymiä, joka sisältää toissijaisen merkkiaineen, ja p-nitrophenylphosphatase kuten kromogeenista substraattia [18].

yhtenäistää määrityksen tulokset ja mahdollistavat johdonmukaisesti vertailut määrityksen tulokset, useiden määritys ajoja ja vaihteleva seerumilaimennoksen, kaikki tulokset normalisoitiin neljän pisteen kalibrointi [20]. Suhteellinen määrä punkki IgG oli interpoloitu neljän pisteen regressiokäyrän luotu piirtämällä tausta-korjattu optinen tiheys havaittu kunkin kalibraattorit vs. mielivaltaisesti Pitoisuusarvo perustuva laimennusjärjestelmä skeema valmistukseen käytetty kalibraattori ratkaisuja. Suhteellinen IgG-pitoisuuden läsnä alkuperäisessä seeruminäytteessä on tuote interpoloidun arvon ja seerumin laimennuskerroin, joka testattiin. Seerumit kerätään Santa Cruz Island (SCZ) kettujen (n = 43) toimi korvapunkkitartunnan infektoimattomien vertailuja. Ketut saarella ovat erillinen alalaji ja punkkeja ei ole havaittu tutkittaessa elävien tai kuolleiden SCZ kettuja.

Tilastollinen

onko vai ei käsitellyt ja käsittelemättömät ketut olivat vertailukelpoisia alussa tutkimuksen, vertasimme ikä, sukupuoli, brutto korvakäytävän arviointi (punkkeja, proliferatiivinen vaurioita, tulehdus, nodulaarinen paksuuntumista, mätä), histologiset korvakäytävän arviointi (ulkokorvantulehduksen, CGH, talirauhasten hyperplasia, epidermaalinen liikakasvu, acanthosis , liikasarveistuminen, adenooma, karsinooma, tai edellinen kasvain diagnoosi), ja punkki-IgG /IgE-tasot käyttäen Yates khiin neliö -testi, kahden otoksen t-testi, ja U-testi [21]. Vallata menestys, määritellään suhteessa alunperin näytteitä kettuja resampled kullakin kaapata aikana verrattiin Pearsonin chi-neliö testi [21].

onko vai ei korvapunkkitartunnan taakka väheni sen jälkeen käsittelemällä kettujen kanssa punkkien , arvioimme sekä punkki yleisyys ja intensiteetti infektio. Esiintyvyys määriteltiin osuutta kettujen kanssa punkki pisteet ja /tai laskea 0, ja infektoimattomat ketut määriteltiin ne, joilla on sekä punkki pisteet ja laske yhtä suuri kuin 0. Intensity tartunnan arvioitiin käyttämällä sekä punkki pisteet ja laskea, ja Spearmanin rank testi tehtiin arvioida korrelaatio kahden toimenpiteen [21]. Yleisyys ja intensiteetti infektio vertailtiin käsitellyn ja käsittelemättömän ryhmissä jokaisessa kaapata kauden käyttäen Pearsonin khiin neliö -testi ja U-testi, vastaavasti. Muutokset yleisyys ja intensiteetti tartunta t

0 ja t

3 arvioitiin käyttäen McNemar chi-neliö testi ja Friedman testi, vastaavasti [21].

onko vai ei korvatulehduksen ja CGH vähennettiin punkki poisto, histopatologia tulokset verrattiin välillä käsiteltyjen ja käsittelemättömien ryhmien t

3 käyttäen U-testi. Muutokset korva patologian välillä t

0 ja t

3 arvioitiin käyttäen Friedman testi. Voit selvittää, IgG- ja IgE-pitoisuus laski punkki poisto, verrattiin välillä käsiteltyjen ja käsittelemättömien ryhmien jokaisessa kaapata kauden käyttäen U-testi. Muutokset IgG- ja IgE-tasojen t

0 ja t

3 verrattiin käyttäen Friedman testi. IgG ja IgE verrattiin toisiinsa SCA kettuja jokaisella talteenotto kauden ja SCZ kettuja käyttäen U-testi.

Koska hoito on yksinkertaisesti keino vähentää punkit ja punkki läsnäolo ja voimakkuus ovat todellisia riskitekijöitä kiinnostavat, kaikki edellä mainitut analyysit suoritettiin myös vertaamalla tartunnan ja infektoitumattomien kettuja riippumatta hoitoryhmässä. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen SPSS ohjelmistoa (versio 20.0, IBM SPSS Statistics for Windows, Armonk, NY) ja alfa-tasoon 0,05.

Tulokset

Sata seitsemäntoista ketut oli otettu tutkimus: 59 oli osoitettu hoidetussa ryhmässä ja 58 käsittelemättömän ryhmän (S1 taulukko). Aikana tutkimuksen, kaksi kettuja, niin hoidetussa ryhmässä, kuoli auto trauma., Haittavaikutuksia ei näytteenoton tai hoidon aikana havaittiin takaisinvalloituksen tutkimukset. Alussa tutkimuksen, ei havaittu merkittäviä eroja välillä käsitellyn ja käsittelemättömän ryhmien osalta ikä, sukupuoli, brutto korvakäytävään arviointi, histologinen korvakäytävän arvioinnin tai punkki-IgG /IgE (p ≥ 0,1). Vallata takaisin menestys oli samanlainen käsitellyn ja käsittelemättömän kettuja t

1 (39/59 = 66% ja 43/58 = 74%, tässä järjestyksessä) ja t

3 (40/59 = 68% ja 37/58 = 64%, tässä järjestyksessä) (p ≥ 0,3); kuitenkin vähemmän käsitelty ketut olivat uudelleenpyydetyistä kuin käsittelemätön kettuja t

2 (25/59 = 42% ja 36/58 = 62%, vastaavasti) (p = 0,03) (S1 ja S2 kuvioissa).

Vaikutus akarisidina punkki yleisyys ja intensiteetti infektio

korvapunkkitartunnan pisteet ja count merkittävästi korreloivat (p 0,001), siis punkki count käytettiin kuvaamaan intensiteetti infektio. Käsitellyt ketut oli huomattavasti pienempi punkki yleisyys ja intensiteetti infektio verrattuna käsittelemättömän kettuja t

1, t

2, ja t

3 (p 0,001; Kuva 2). Mite levinneisyys pieneni merkittävästi sisällä hoidetussa ryhmässä (p 0,001), mutta ei sisällä käsittelemättömän ryhmän (p = 0,1) välillä t

0 ja t

3. Kuitenkin punkki infektio intensiteetti laski merkittävästi sisällä sekä käsitellyn (p 0,001) ja käsittelemättömän ryhmän (p = 0,02) välillä t

0 ja t

3. Arvioimme kesto punkkien tehon tutkimalla osajoukko kettujen että vasta käsiteltiin kerran (t

0), sitten arvioidaan uudelleen kaksi, neljä tai kuusi kuukautta myöhemmin. Hoidettujen kettuja, 10/39 tartutettiin kaksi kuukautta myöhemmin, 1/7 tartutettiin neljä kuukautta myöhemmin, ja 3/7 sai tartunnan kuusi kuukautta myöhemmin (S1 Kuva).

yleisyys: kettujen lukumäärän kanssa punkit /kokonaismäärä kettuja. Intensiteetti infektio: mediaani korvapunkkitartunnan count. Lukumäärä käsitellyn ja käsittelemättömän kettujen (t

0: 59, 58; t

1: 39, 42; t

2: 24, 36; t

3: 40, 36). Vaihteluvälin punkin intensiteetti suluissa kunkin pylvään yläpuolella. Kettuja ulkopuolelle analyysi: yksi hoitamaton kettu t

1 ja t

2 (puuttuva mite count), yksi hoitamaton kettu t

3 (vahingossa käsiteltiin t

2).

a, b, c Merkittävä ero (Pearson’in neliö -testi, p 0,001).

d Merkittävä ero (McNemarin chi-neliö testi, p 0,001).

e, f, g Merkittävä ero (U-testi, p 0,001).

h, i Merkittävä ero (Friedman testi, p 0,001, p = 0,02).

vaikutus punkin poistoon korvatulehduksen ja liikakasvu

Käsitellyt kettuja näytteillä huomattavasti alhaisempi korvatulehduksia ja CGH tulokset kuin käsittelemätön kettuja t

3 (p 0,001; Kuva 3). Välillä t

0 ja t

3, korvatulehdus tulokset laski merkittävästi sisällä hoidetussa ryhmässä (p 0,001), kun taas ei ollut merkittävää muutosta sisällä käsittelemättömän ryhmän (p = 0,5). CGH tulokset myös merkittävästi vähentynyt sisällä hoidetussa ryhmässä (p = 0,007) välillä t

0 ja t

3, mutta toisin kuin korvatulehdus tulokset, CGH tulokset merkittävästi lisääntynyt käsittelemättömän ryhmän (p = 0,001) välillä t

0 ja t

3. Samat löydöksiä kun infektoimattomia ketut verrattiin tartunnan kettuja.

Vertailu käsiteltyjen ja käsittelemättömien kettuja t

3, ja välillä t

0 ja t

3 kussakin ryhmässä. Lukumäärä käsitellyn ja käsittelemättömän kettuja t

0 ja t

3 (37, 33). Vaihteluvälin korvatulehduksen ja CGH suluissa kunkin pylvään yläpuolella. Kettuja ulkopuolelle analyyseistä: kolme käsitelty ja kaksi käsittelemätöntä kettuja t

0, joka on käsitelty ja käsittelemättömän kettu t

3 (ei-diagnostinen biopsia), 18 käsiteltiin ja 22 käsittelemättömien kettuja t

3 (ei uudelleenpyydetyistä).

a, b Merkittävä ero (Mann-Whitney U-testi, p 0,001).

c, d, e Merkittävä ero (Friedman testi, p ≤ 0,007).

vaikutus punkin poistoon IgG- ja IgE

Käsitellyt ja käsittelemättömät ryhmät eivät ole merkitsevästi erilainen IgG tasoilla t

1 (p = 0,08), t

2 (p = 0,3), tai t

3 (p = 0,06), mutta siellä oli merkittävä lasku IgG tasoilla sekä ryhmien välillä t

0 ja t

3 (p 0,001; Kuva 4). Molemmat ryhmät SCA kettuja t

0 oli merkittävästi korkeammat IgG- tasot kuin infektoimattomia SCZ kettujen (p 0,001). SCA käsitelty kettuja säilyy huomattavasti korkeampi IgG- tasot kuin SCZ ketut t

1 (p 0,001) ja t

2 (p = 0,01), mutta niiden IgG väheni samalle tasolle SCZ kettuja t

3 (p = 0,6). Sen sijaan, SCA hoitamaton ketut säilyy huomattavasti korkeampi IgG- tasot kuin SCZ kettuja ollenkaan vangita aikoja (t

1 ja t

2: p 0,001, t

3: p = 0,004).

IgG taso: suhteellinen määrä punkki-spesifistä vasta-ainetta (määritetään interpoloimalla neljän pisteen kalibrointikäyrää, katso teksti lisäselvityksiä). Lukumäärä käsitellyn ja käsittelemättömän kettujen (t

0: 59, 57; t

1: 38, 42; t

2: 24, 36 t

3: 40, 36); määrä infektoitumattomien ja tartunnan saaneiden kettujen (t

0: 116; t

1: 31, 49; t

2: 25, 35 t

3: 42, 35); määrä SCZ kettujen (43). Vaihteluvälin IgG suluissa kunkin pylvään yläpuolella. Kettuja ulkopuolelle analyyseistä: yksi hoitamaton /tartunnan fox t

0 ja joka on käsitelty /infektoimattomat fox t

1 (puuttuva IgG taso).

a, b Merkittävä ero (Friedman testi, p 0,001).

c Merkittävä ero SCZ ketut vs. SCA käsitellyn ja käsittelemättömän kettuja ollenkaan talteenotto tapahtumat (U-testi, p ≤ 0,01), paitsi SCA käsitelty kettujen t

3 (p = 0,6).

d, e, f Merkittävä ero (Mann-Whitney U-testi, p ≤ 0,01).

g, h Merkittävä ero (Friedman testi, p ≤ 0,004).

i Merkittävä ero SCZ ketut vs. SCA tartunnan ja infektoitumattomien kettuja ollenkaan talteenotto tapahtumat (U-testi, p ≤ 0,001), lukuun ottamatta SCA infektoimattomat kettujen t

2 (p = 0,1) ja t

3 (p = 0,9).

Kun IgG-tasot SCA kettuja verrattiin perustuvat infektiotilanteesta infektoitumattomilta ketut oli huomattavasti pienempi IgG-pitoisuudet kuin tartunnan kettuja t

1 (p 0,001), t

2 (p = 0,01), ja t

3 (p = 0,01; kuvio 4). Välillä t

0 ja t

3, oli merkittävä väheneminen IgG tasoilla sekä infektoitumattomien ja tartunnan kettujen (p 0,001, 0,004). SCA infektoimattomat ketut oli merkittävästi korkeammat IgG- tasot kuin SCZ infektoimattomat kettuja t

1 (p 0,001); kuitenkin, IgG-pitoisuus olivat samat t

2 (p = 0,1) ja t

3 (p = 0,9). Sen sijaan, SCA tartunnan ketut ylläpidetään IgG tasoilla, jotka olivat huomattavasti korkeampia kuin SCZ kettuja ollenkaan vangita tapahtumat (t

1 ja t

2: p 0,001, t

3: p = 0,001). IgE tasot SCA ja SCZ ketut olivat alle määritysrajan kokeen; Siksi tietoja ei analysoitu tarkemmin.

korvakäytävään kasvaimen esiintyminen

Ensimmäinen kasvain esiintyvyys koko tutkimuspopulaatiossa SCA kettujen oli 21% (23/111). Kuusi kettuja suljettiin pois tämän analyysin riittämättömän koepaloja kerättiin alussa tutkimuksen. Valtaosa kasvaimia t

0 havaittiin kypsä kettuja, jossa 51% (22/43) kettujen ≥ 4 vuotias näytteillä korvakäytävään kasvaimia. Vaikka 79% (88/111) ja kettujen alun perin ilman kasvaimia, huomattava määrä näistä kettujen kehittäneet uusia kasvaimia yli kuuden kuukauden koeajan. Viimeisellä capture aikana (t

3), 53 aluksi kasvaimen vapaata kettuja jäivät loukkuun ja tutkittiin, ja 12 näistä kettujen oli ≥ 4 vuotias. Uusi korvakäytävään kasvaimia havaittiin viidessä kettujen (5/53), joista kolme tartunnan (kaikki käsittelemättömät) ja joista kaksi saastumaton (yksi käsitelty, yksi hoitamaton). Jälleen suurin osa kasvaimista havaittiin kypsä kettuja, jossa 33% (4/12) kettujen ≥ 4 vuotias näytteillä uusi korvakäytävään kasvaimia.

Keskustelu

Tämän tutkimuksen tulokset antaa vakuuttavia todisteita siitä, että punkkien hoito on tehokas keino vähentää punkkeja, ja että punkki poistaminen vähentää tunnettuja riskitekijöitä ceruminous kasvain muodostumista SCA kettuja. Mite poisto näyttää laskevan kroonisen korvakäytävän ärsytystä ja liiallinen cerumen tuotannon, todennäköisesti pienenee patologisten muutosten korvaan, jotka saattavat johtaa kasvaimen muodostumiseen. Se, että CGH itse asiassa kasvoi näin lyhyessä ajassa kuluessa pysyvästi infektoituneista kettuja tarjoaa vahvaa näyttöä siitä, että pitkäaikainen läsnäolo punkkien todennäköisesti liittyy epiteelin liikakasvu. Rapid solunjakautumisen ajan lisää mahdollisuuksia hankkia onkogeenisessä mutaatio, joka johtaa hallitsemattomaan kasvuun ja kehittämiseen kasvaimia kuten ceruminous adenoomien ja karsinoomien [22]. Ilman väliintuloa, liikakasvu korvakäytävässä jatkaa edetä punkki-tartunnan kettuja, todennäköisesti lisää riskiä kasvaimen kehitystä.

väheneminen punkki yleisyys ja intensiteetti infektio tukee jatkuvaa käyttöä ivermektiinin tai muiden punkkimyrkyt lausuntatavaltaan vähentää korvapunkkitartunnan infektioiden SCA kettuja. Pieni määrä kettuja hoidetussa ryhmässä tartutettiin punkit t

3; tämä voi johtua epätäydellinen poistaminen alkuperäinen infektio, tai uuden tartunnan. Mite määrän lasku sekä käsiteltyjen ja käsittelemättömien ryhmät yli kuuden kuukauden tutkimuksessa, ja vaikka lasku oli huomattavasti merkittävämpiä hoidetussa ryhmässä, punkki vähentämisen käsittelemättömän ryhmän oli odottamaton. Epäilemme, että mekaaninen poisto punkit ja muuttaminen äänet sekä näytteenoton aikana ja koepala menettelyt voinut vaikuttaa tähän vähenemässä. Hallinto lidokaiini ja soveltaminen tyrehdyttävä jauhe koepala sivustoja sekä eritteen tai seerumi tuotettu paranemista, saattanut osaltaan väliaikaista vähentämistä punkki rasitusta molemmissa ryhmissä heti koepala. Mikä tahansa prosessi, joka lisää tulehdusta ja eritteen korvakäytävään voi luoda karu ympäristö punkkeja, aiheuttaen usein punkit luopua korvakäytävään tai kuolee, mikä vähentää yleistä punkki taakkaa [12]. Tämä ”huuhtoutumisen vaikutus” seerumin tai eritettä on myös ehdotettu SCA kettujen kanssa vaikeasti sairaita korvakäytävät jossa harvat punkit ovat läsnä [10]. On myös mahdollista, että vähentämällä punkki taakka on osa väestöstä, me vähensi uuden tartunnan, jota esiintyy lähes yksinomaan suoraan kosketukseen tartunnan saaneisiin kettujen [12]. Kausiluonteinen muutos mite taakka on epätodennäköistä, koska SCA saaren ilmasto on kuiva ja lämmin, vain lievä vaihtelut lämpötila ja sademäärä [23],

O

.

cynotis

on pakollinen ectoparasite joka täydentää kaikissa elämänvaiheissa sen isäntä [24], korkea punkki esiintyvyys on havaittu SCA kettuja ympäri vuoden, ja yleinen kettu kehon kunnossa ei näytä muuttuvat vuodenaikojen ( JKL, henkilökohtainen tiedonanto).

tällä hetkellä Island ketut ovat intensiivisesti hoidettuja laji, ja tulee olemaan lähitulevaisuudessa. Aikana vuotuinen saaren kattava väestölaskenta ansastuksen SCA saarella, huomattava määrä kettuja tutkitaan, tunnistetaan passiivinen integroitu transponderi tag, ja rokotettuja penikkatautia ja raivotaudin.