Krooninen sairaus

tiivistelmä

Analysoimme ekspressiotasot fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä (tymidylaattisyntaasia [TS ], dihydropyrimidiinidehydrogenaasin [DPD], tymidiinifosforylaasi [TP] ja orotaattia nifosforibosyylitransferaasi- [OPRT]) tunnistaa mahdolliset biomarkkerit liittyvät hoitotuloksia mahasyövän (GC) potilailla, jotka saivat adjuvanttia S-1 kemoterapiaa. Tässä tutkimuksessa 184 potilasta, jotka saivat parantava gastrectomy (D2 imusolmukedissektiossa) ja adjuvantti S-1 otettiin mukaan. Immunohistokemia ja kvantitatiivinen RT-PCR suoritettiin proteiinin mittaamiseksi ja mRNA-tasoja TS, DPD, TP, ja OPRT kasvainkudoksessa. Vuonna univariate analyysi, alhainen kasvaimeen DPD-proteiinin ilmentyminen liittyi huonompi 5 vuoden tautivapaan elinajan (DFS; 78% vs. 88%; P = 0,068). Alhainen kasvaimensisäistä DPD mRNA ilmaisun (ensimmäinen [alin] kvartiili) liittyi myös köyhemmille DFS (69% vs. 90%; P 0,001) verrattuna korkea kasvaimensisäisenä DPD lauseke (2.-4 kvartiileja). Monimuuttuja analyysit, alhainen kasvaimeen DPD tai mRNA.ta. ilmentyminen liittyi huonompi DFS (P 0,05), riippumatta muiden kliinisten muuttujien. TS, TP, ja OPRT ekspressiotasoja eivät liittyneet hoitotuloksia. Vaikea ei- hematologista toksisuutta (arvosana ≥ 3) oli suuntaus kohti useammin kehitystä potilailla, joilla on alhainen kasvaimensisäisenä DPD mRNA: n ilmentymisen (29% vs. 16%; P = 0,068). Lopuksi GC potilailla, joilla on korkea kasvaimensisäisenä DPD ilme ei ollut huonompi tulos seuraavat adjuvantti S-1 terapian verrattuna alhainen DPD ilme. Sen sijaan alhainen kasvaimeen DPD ilmentyminen liittyi huono DFS.

Citation: Kim J-Y, Shin E, Kim JW, Lee HS, Lee D-W, Kim S-H, et al. (2015) vaikutus kasvaimensisäisenä Expression tasot fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä on Treatment Outcomes of Adjuvantti S-1 Therapy mahasyövän. PLoS ONE 10 (3): e0120324. doi: 10,1371 /journal.pone.0120324

Academic Editor: Qing-Yi Wei, Duke Cancer Institute, Yhdysvallat |

vastaanotettu 13 marraskuuta 2014; Hyväksytty: 20 tammikuu 2015; Julkaistu: 20 maaliskuu 2015

Copyright: © 2015 Kim et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi.

Rahoitus: Tämä tutkimus oli osittain tuettu tutkimusmäärärahat päässä Seoul National University Bundang Hospital Research Fund (02-2014-019) ja Jeil Pharmaceutical Company (Seoul, Korea). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Tutkimus rahoitettiin osittain Jeil Pharmaceutical Company muodossa tutkimusrahoituksen Keun -Wook Lee. Toinen tekijät raportoivat ole eturistiriitoja. Ei ole olemassa patentteja, tuotteiden kehittämiseen, tai markkinoille tuotteita julistaa. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamiseen ja materiaaleja, yksityiskohtaisena online-oppaassa tekijöille.

Johdanto

Mahasyöpää (GC) on viides yleisin syöpä ja kolmas johtava syöpäkuolemien syy maailmanlaajuisesti. Noin puolessa tapauksista esiintyy Itä-Aasia [1]. Leikkaus on hoito valinnan lokalisoitu GC, ja D2 leikkely pidetään vakiomenetelmässä. Huolimatta D2 leikkely, toistuminen on todettu yli 40% potilaista, joilla pitkälle GC leikkauksen jälkeen yksin [2, 3]. Äskettäin kaksi mahdollisille tutkimukset osoittivat, että lääkehoitona resektoidun GC on vähentää tehokkaasti toistumisen määrä [2, 3].

S-1 on oraalinen aine, joka sisältää tegafuuria (esiastetta fluorourasiili), gimerasiili (an estäjä Dihydropyrimidiinidehydrogenaasi [DPD]), ja kalium oxonate (inhibiittori 5-fluorourasiilin [5-FU] ruoansulatuskanavassa) [4]. Adjuvantti Kemoterapia Trial of TS-1 mahasyövän (ACTS-GC) paljasti, että adjuvantti S-1 kemoterapiaa 1 vuosi vähentää kasvaimen uusiutumisen potilailla, joilla curatively resektoitiin GC [3]; uusiutumisen elinaika korko 5 vuoden oli 65,4% adjuvanttia S-1 ryhmässä ja 53,1%: in leikkauksen ryhmässä (riskisuhde [HR], 0,653; 95%: n luottamusväli [CI], 0,537-0,793). Niiden perusteella, adjuvantti S-1 kemoterapia on nykyään laajalti käytetään estämään GC uusiutumisen Itä-Aasian maissa [5-7].

Tymidylaattisyntaasi (TS), Tymidiinifosforylaasi (TP), orotaatti fosforibosyylitransferaasin (OPRT ), ja DPD liittyvät fluoropyrimidiiniä aineenvaihduntaan. Useat tutkimukset ehdotti, että ekspressiotasot näiden fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä ovat assosiaatioita selviytymisen kannalta: metastasoitunutta GC saavilla potilailla palliatiivista S-1-kemoterapian [8-10]. Kuitenkin nämä tutkimukset osoittivat ristiriitaisia ​​tuloksia ennustearvo näiden entsyymien S-1-pohjainen lievittävä kemoterapiaa, mikä saattaa johtua pienestä potilaiden määrä ja erot S-1-sisältävien hoitojen käytetty keskuudessa tutkimuksissa. Tähän mennessä, tutkimukset suhdetta ekspressiotasot fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä ja tuloksia adjuvanttia S-1 käsittely GC ovat olleet niukkoja. Siksi olemme analysoineet proteiinin ja mRNA: n ilmentymisen profiilit fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä (TS, DPD, TP ja OPRT) tunnistamaan merkkiaineita liittyvät hoitotuloksia apuainetta S-1 kemoterapiaa GC potilailla.

Materiaalit ja menetelmät

Potilasjoukko

Käyttämällä GC syöpäpotilaan kohortin jota prospektiivisesti pidettiin Seoul National University Bundang Hospital [5, 6], tässä tutkimuksessa takautuvasti suunniteltu. Vuonna mahdollinen kohortin kaikki potilaalle tehtiin parantava gastrectomy D2 leikkelyn ja käsiteltiin adjuvanttia S-1 kemoterapiaa. Potilaat täyttivät seuraavat voivat kriteerit: histologisesti varmennettu gastroesofageaalinen risteykseen tai mahalaukun adenokarsinooman; patologista vaiheen II-III pohjautuu Yhdysvaltojen sekakomitean Cancer (AJCC, 7

painos); Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) suorituskyky (PS) 0-2; ja riittävä luuytimen, munuais-, ja maksan toiminta. Kaksi potilasta, joilla on vaiheen IB ja muita riskitekijöitä (eli N2 imusolmuke etäpesäke mukaan Japani pysähdyspaikan luokitus [11]) on myös mukana.

Potilaat, joille tehtiin gastrectomy marraskuusta 2006 syyskuu 2010 otettiin (N = 184 ). Tätä tutkimusta varten kirjallinen tietoon perustuva suostumus saatiin potilailta käyttää arkistoituja tuumorikudoksista ja kliiniset tiedot. Institutionaalinen Review Board of Seoul National University Bundang Hospital hyväksynyt tämän tutkimuksen (IRB numero: B-1205 /154-006).

Hoito ja myrkyllisyyden arviointi

S-1 annettiin suun kautta 4 viikkoa, jonka jälkeen 2 viikkoa lepoa. Kesto S-1 hoito piti olla yksi vuosi, jos ei ollut mitään näyttöä kasvaimen uusiutumisen, haittavaikutuksiin, tai potilas kieltäytyy. Aloitusannos ja muuttaminen S-1 annos hoidon aikana määritettiin aiemmissa raporteissa [5, 6]. Toksisuus luokiteltiin mukaan National Cancer Institute Common Toxicity Criteria (versio 3.0).

annosintensiteetti (DI) määritettiin suhde koko S-1 annos per neliömetri potilaan jaettuna koko S-1 hoidon kesto. Suhteellinen annosintensiteetti (TKI) laskettiin jakamalla vastaanotetun DI suunniteltujen DI.

immunohistokemia (IHC) B

Aiemmin värjätään hematoksyliinillä ja eosiinilla dioja tarkistettiin, ja yksi edustaja Formaliinifiksoidusta parafinoidut (FFPE) arkistointi lohko valittiin. Tissue array lohkot valmistettiin kuten kuvattu edellisessä tutkimuksessa (SuperBiochips Laboratories, Seoul, Korea) [8]. Seuraavat ensisijaiset vasta-aineita käytettiin: anti-ihmisen TS: n (klooni TS106, hiiri monoklonaalinen, Thermo tieteellisen, 1:70 laimennus), anti-ihmis-OPRT (klooni 2F5, hiiri monoklonaalinen, Abnova, laimennus 1: 1000), anti-humaani-TP (klooni P-GF. 44C, hiiri monoklonaalinen, Thermo tieteellisen, 1: 500 laimennus) ja anti-humaani-DPD: n (klooni ERP8811, kani monoklonaalinen, Abcam, 1: 500 laimennos). Vasta-aineen sitoutuminen havaittiin käyttämällä avidiini-biotiini-peroksidaasi-kompleksin (Universal Elite ABC Kit PK-6200; Vectastain, Burlingame, CA, USA) 10 minuutin ajan ja diaminobentsidiinitetrahydrokloridilla liuosta (Kit HK 153-5K, Biogenex, San Ramon, CA, USA). Leikkeet vastavärjättiin 0,1% hematoksyliinillä, kuivattu ja kiinnitetty. Värjäytyminen tutkittiin kaksi riippumatonta tutkijat sokko kliiniseen tulokseen. Värjäytymisvoimakkuuksia olivat puolittain määrällisesti mitattuna 200 x suurennus ja luokiteltu negatiivinen (pistemäärä = 0), heikko (pisteet = 1), kohtalainen (pistemäärä = 2), tai vahva (pistemäärä = 3). Prosenttiosuus immunoreaktiivisten solujen arvioitiin myös. IHC pisteet laskettiin seuraavasti: pisteet värjäytymisen intensiteetti kerrottuna prosenttiosuus värjätään kasvaimen alueelle näytteen.

kvantitatiivinen RT-PCR (qRT-PCR) B

mRNA: n ilmentymisen tasot geenit kvantifioitiin qRT-PCR: llä. RNA (500 ng) alkaen FFPE kudoksista suoritettiin cDNA-synteesin avulla amfiRivert Platinum cDNA Synthesis Master Mix (GenDEPOT). Seitsemän geenit (neljä fluoropyrimidiini reitin geenit ja kolme viite-geenit) esi-monistettiin at loppulaimennos 0,05 × alkuperäisen Taqman määrityksen pitoisuus (Applied Biosystems Life Technologies). Thermo-pyöräily-olosuhteet olivat seuraavat: 1 sykli 95 ° C (10 min), jota seurasi 14 sykliä 95 ° C (15 s) ja 60 ° C: ssa (4 min). Seuraavat kohteen monistus, näytteet laimennettiin 1: 5 DNA suspension puskurilla, ja sitten qPCR suoritettiin Fluidigm 48,48 Dynamic Arrays käyttäen Biomark HD mukainen järjestelmä valmistajan protokollaa. Näytteet ajettiin kolmena kappaleena. Kolme viite-geenit (ACTB, GAPDH, ja FTL) käytettiin normalisointia geeniekspression tietoja. Viite-geenit valittiin perustuen niiden alhaisen ilmentymisen vaihtelua edellisessä microarray tietoja (dataa ei esitetty). Normalisoimiseksi qRT-PCR data, tarkoittaa syklin kynnys (Ct) arvot muutettiin suhteellinen ekspressio arvot (-ΔCt) vähentämällä keskimääräinen viitteen geenien, jossa kukin yksikkö vastaa 2-kertainen ekspression. Käytetty koettimet olivat seuraavat: TS (Hs00426586_m1), OPRT (Hs00923517_m1), TP (Hs01034319_g1), DPD (Hs00559279_m1), ACTB (Hs01060665_g1), GAPDH (Hs02758991_g1) ja FTL (Hs00830226_gH); Tarkempia tietoja on saatavilla osoitteessa https://www.appliedbiosystems.com (Applied Biosystems Life Technologies).

Tilastollinen

erot kliinisiä piirteitä verrattiin käyttäen χ2-testien,

t

-testaukset tai Mann-Whitney

U

testi. χ2-testejä käytettiin verrattaessa frekvenssijakaumat S-1 liittyvät toksisuudet eri ryhmien välillä. Tautivapaa elinaika (DFS) laskettiin alkaen leikkaus kun ensimmäinen uusiutumisen tai kuolema mistä tahansa syystä. Kokonaiselinaika (OS) määriteltiin Kokoluokka leikkauksen kuolema mistä tahansa syystä. Kaplan-Meier menetelmää käytettiin analysoimaan DFS tai OS. Yhden ja usean analyysit DFS tai OS suoritettiin käyttäen log-rank testejä ja Coxin suhteellisen vaarat regressiotestien vastaavasti. Kaksipuolinen P arvot 0,05 pidettiin merkittävinä. Kaikki tiedot analyysit suoritettiin käyttäen IBM SPSS Statistics 21 for Windows (IBM Corp., Armonk, NY, USA).

Tulokset

Potilaan ominaisuudet ja toimitus S-1 kemoterapiaa

perustason ominaisuudet 184 potilasta on esitetty taulukossa 1. mediaani-ikä oli 57 vuotta (vaihteluväli 30-79 vuotta). Laparoskooppinen gastrektomia suoritettiin 50%: lla potilaista, ja niiden potilaiden osuus, joilla on vaiheen III tauti oli 55%. Mediaani seuranta kesto oli 47,0 kuukautta (alue, 3,5-81,8kuukautta). Seuranta-aikana, kasvaimen uusiutumisen ja kuoleman vahvistettiin vuonna 29 (16%) ja 22 (12%) tapauksista, vastaavasti. Viiden vuoden DFS ja OS hinnat kaikilla potilailla oli 83% (Fig. 1 (A)) ja 87%: lla. Koska seuranta kesto ei ollut riittävä edelleen OS analyysi, suoritimme selviytyminen analyysi vain DFS. DFS tulokset kliinisen muuttujat on esitetty taulukossa 1, Fig. 1 (B), ja S1 Kuva.

Suunnitellut 1 vuoden hoidon S-1 valmistui 139 potilasta (76%), ja keskimääräinen lukumäärä toimitettujen S-1 kemoterapiaa jaksoa oli 7,4 (95% CI, 7,0-7,8). Mean ja mediaani RDIs aikana kaikki S-1 terapian syklit olivat 77% (95% CI, 73-81) ja 88% (alue, 4-100), tässä järjestyksessä. S-1 hoito oli kokonaisuudessaan siedettävä, ja myrkyllisyys profiilit on esitetty S1 taulukossa.

vaikutus ekspressiotasot fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivien entsyymien hoitotuloksia: Univariate analyysit

Näistä 184 potilasta, IHC menestyi 183 potilaalla. Asetamme mediaaniarvon IHC tulokset kunkin proteiinin (TS, OPRT, TP, ja DPD) kuin raja-arvo jakaa potilaille kahteen ryhmään. Vaikka ekspressiotasot neljä proteiineja eivät olleet merkitsevästi yhteydessä DFS (taulukko 2), matala DPD ekspressiotaso (IHC pisteet 10 [cut-off-arvo, mediaani)] osoitti suuntauksena huonompi 5 vuoden DFS (78% vs . 88%, P = 0,068; Fig. 2 (A)). Lisäksi potilailla, joilla on korkeampi TP ilme (IHC pisteet 0 [cut-off-arvo, mediaani]) oli taipumus olla lyhyempi DFS kestoltaan kuin ne, joilla ei ole TP ilme (78% vs. 87%; P = 0,094). Ilmaisu tasot TS ja OPRT ollut yhdessä DFS tuloksia (P = 0,914 ja 0,109, tässä järjestyksessä).

(A) Tautivapaa elinaika mukaan IHC haavaumia DPD (cut-off arvo, mediaani). Tautivapaan elinajan käyrät mukaan kasvaimensisäisenä mRNA ekspressiotasoja DPD ((B), kun raja-arvo on mediaani, (C), kun potilaat luokitellaan kvartiileja, (D), kun potilaat luokitellaan 2 ryhmään [1

st kvartiili, huonoin kvartaali] vs. muut kvartiileja [2

nd, 3

rd ja 4

th kvartiileja]). Lyhenteet: IHC, immunohistokemia; DPD, dihydropyrimidiinidehydrogenaasin.

qRT-PCR kokeet menestyksekkäästi suoritettiin 179 potilaalla. Kuten IHC testeissä, mediaaniarvon mRNA ekspressiotasoja yksittäisten geenien vahvistettiin seuraavien cut-off-arvo ryhmille. Niistä neljä geenejä, ainoastaan ​​DPD mRNA: n ilmentymisen taso oli suuntaus, jonka suhteen DFS tuloksia; potilaille, joilla on pienempi mRNA ilmaus DPD oli huonompi DFS kuin ne, joilla on suurempi DPD ilme (P = 0,067; Fig. 2 (B)). mRNA: n ilmentymisen tasot TS, OPRT, ja TP-geenit eivät liittyneet DFS (taulukko 2). Seuraavaksi luokitellaan mRNA ekspressiotasot DPD osaksi kvartiileja tutkia, annos-vaste-suhde välillä oli DPD geeniekspressiotasot ja eloonjäämisen tuloksiin. Mielenkiintoista, vain potilasryhmässä alimmassa DPD geenien ilmentymisen neljännekseen osoitti huonompi DFS muihin kvartiilien, mutta eroa DFS hinnat havaittiin välillä 2

nd, 3

rd ja 4

th kvartiileja ( Fig. 2 (C)). Siksi me luokitellaan potilaat kahteen ryhmään käyttämällä tätä raja-arvo (1

st neljänneksessä [alin DPD mRNA ilmaisun] vs. muut kvartiileja [suurempi DPD mRNA ilmaisun mukaan lukien 2

nd, 3

rd, ja 4

th kvartiileja]) seuraavissa analyyseissä (Fig. 2 (D), taulukko 2).

vaikutus ekspressiotasot fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivien entsyymien hoitotuloksia: Multivariate analyysit

joukossa kliininen muuttujia, tekijät osoittivat P 0,10 univariate analyysit DFS (ikä [ 60 vuotta vs. 60-69 vuotta vs. ≥ 70-vuotiaita; P = 0,003], kirurginen menetelmä [laparoskooppisten vs. avoin; P = 0,082], imusuonten invaasio [no vs. kyllä ; P = 0,068], laskimoiden invaasio [no vs. kyllä; P = 0,045], ja vaihe [IB /II vs. III; P = 0,012], taulukko 1) sisällytettiin monimuuttuja analyysit. Niistä proteiineja tai geenejä, jotka liittyvät fluoropyrimidiiniä aineenvaihduntaa, joilla P 0,10 univariate analyysejä varten DFS sisällytettiin myös monimuuttuja analyysit (taulukko 2). Kuten taulukosta 3, pieni DPD ekspressiotaso (IHC pisteet 10; HR, 2,32; 95% CI, 1,08-4,96; p = 0,030) ja pieni DPD geenin ilmentymistä (1

st neljänneksessä [huonoin kvartaali] ; HR, 3,67; 95% CI, 1,67-8,03; p = 0,001) liittyi huonompi DFS riippumatta muiden kliinisten muuttujien. Vanhemmat ikä (≥ 70 vuotta) ja korkeampi vaiheessa myös itsenäisesti yhteydessä huonoon DFS.

väliset DPD ekspressiotaso ja sietokykyä S-1 terapia

positiivinen korrelaatio DPD IHC tulokset ja mRNA ekspressiotasot havaittiin (P = 0,022), vaikka valikoimia IHC tulokset molemmissa ryhmissä (1

st neljännekseen DPD mRNA ilmaisun [DPD IHC pisteet: mediaani, 0, alue, 0-200] vs. muut kvartiileja [DPD IHC pisteet: mediaani, 10, alue, 0-300]) olivat päällekkäisiä huomattava osa tapauksista (S2 Kuva).

Ei eroja S-1 TKI tai myrkyllisyys taajuus (hematologic tai ei-hematologisia) S-1 hoito ei havaittu potilailla, joilla on alhainen (alle 10) ja korkea (≥ 10) DPD IHC tulokset [taulukon A S2 taulukossa]. Kuitenkin, verrattuna potilaisiin, joilla on korkeampi kasvaimensisäisenä DPD mRNA (2

nd 4

th kvartiileja), potilailla, joilla on alhaisin DPD mRNA tasolla (1

st kvartiili) osoitti taipumusta saada vaikeita ei-hematologinen haittavaikutuksia (≥ 3. asteen) useammin, vaikka tilastollisesti merkityksetön (29% vs. 16%; P = 0,068); kuitenkin, esiintyvyys ≥ 3. asteen hematologista toksisuutta ei ollut erilainen näiden kahden ryhmän välillä. Lisäksi, vaikka tilastollisesti merkityksetön, niiden potilaiden osuus, jotka säilyttivät S-1 TKI ≥ mediaani (87,8%) aikana adjuvanttihoitoa oli pienempi potilailla sisällä alin neljännekseen DPD mRNA ilmaisun kuin potilailla muissa kvartiileja (40% vs. 54%; p = 0,111; B taulukon S2 taulukko).

keskustelu

tässä tutkimuksessa selvitimme suhdetta kasvaimensisäisenä ekspressiotasot fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä ja selviytymisen tuloksia adjuvanttia S -1 kemoterapiaa. Korkea kasvaimensisäistä DPD ilmaisua ei liittynyt huonompi selviytymisen tuloksia; sen sijaan, alhainen DPD ilmentyminen liittyi epäedullinen DFS GC hoidetuilla potilailla adjuvanttia S-1therapy. Ilmentymistasojen muiden entsyymien ei korreloi DFS. Tutkimuksessamme ilmentymistasojen fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä arvioitiin kahdella tavalla, nimittäin IHC ja qRT-PCR: llä.

DPD on ensimmäinen ja nopeutta rajoittava entsyymi kataboliaa 5-FU. Useissa prekliinisissä tutkimuksissa on osoitettu, että alemman kasvaimensisäisenä taso DPD mRNA ilmentymistä tai aktiivisuutta liittyy parempi vaste 5-FU ja että suuremmat DPD tason kasvainsoluissa liittyy 5-FU vastus [12-14]. Samanlaisia ​​tuloksia on havaittu myös potilailla, joilla oli erilaisia ​​kiinteitä kasvaimia, mukaan lukien GC [14-22]. Tehokkuutta fluoripyrimidiiniä kemoterapiaa GC potilailla on todettu olevan riippuvainen kasvaimeen DPD ekspressiotasot, joko lievittävää [22], adjuvantti [19-21], tai neoadjuvant [16-18] asetuksia.

Niistä kolme komponenttia, joka käsittää S-1, gimerasiilia käytetään estäjänä DPD säilyttää pitkään 5-FU pitoisuudet kasvainkudoksissa [23]. Vaikka joissakin tutkimuksissa on raportoitu, että teho S-1 vaikuttaa myös kasvaimeen DPD ekspressiotasot kuin muut fluoropyrimidiinit [24, 25], suurin osa tutkimukset ovat johdonmukaisesti osoittaneet, että vaikutus S-1-hoidon ei vaikuta kasvaimeen DPD ekspressiotasot, erityisesti GC [8-10, 19, 26-29]. Aiemmat tutkimukset ehdotti, että S-1 on tehokkaampi kuin 5-FU tai muita fluoropyrimidiinit kasvaimissa, joilla on suuri DPD ilmaisu [19, 25, 28, 29]. Suhde tehoa S-1-, joka sisältää kemoterapian ja ekspressiotasot fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä on tutkittu GC [8-10]; mutta useimmat näistä tutkimuksista pienehköistä potilasmäärän ja käytiin metastaattinen GC potilailla, jotka saivat erilaisia ​​S-1-sisältävä hoito kuten lievittävää hoitoa. Siksi edellinen tuloksia ei voida yleistää GC potilailla, joille tehdään parantavaan leikkaukseen ja adjuvantti S-1 kemoterapiaa.

Tutkimuksessamme Kokonaishoitoajan tulos D2 gastrectomy seurasi adjuvantti S-1 kemoterapia oli erinomainen; 5 vuoden DFS hinnat potilaita, joilla on vaiheen IB /II ja III oli 91% ja 77%, vastaavasti (taulukko 1). Niistä neljä analysoitiin entsyymit (TS, DPD, OPRT, ja TP), ainoastaan ​​ekspressiotaso DPD liittyi hoidon tulokset S-1. DPD tai mRNA.ta. yliekspressio ei korreloinut huonompi DFS GC saavilla potilailla adjuvantti S-1 terapia; Tämä havainto on sopusoinnussa ennen raportteja, että S-1 on tehokas kasvainten korkea kasvaimensisäisenä DPD [19, 25, 29, 30].

Mielenkiintoista, meidän potilaan kohortin alhainen kasvaimeen DPD ilmentyminen liittyi huonompi DFS, verrattuna korkea DPD ilme. Tämä havainto oli odottamaton ja sekavaa, koska, kunnes viimeistelty tietoanalyysit Tämän tutkimuksen, ei ollut tutkimuksen yhdistyksen välillä fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä ja tuloksia adjuvanttia S-1 kemoterapiaa GC potilailla. Kuitenkin lähes samaan aikaan, kun kerroimme tämän tutkimuksen tulokset akateemisella kokouksessa [31], tutkimuksen, jonka lähes sama muotoilu meidän raportoivat ACTS-GC tutkijat [32]. Tässä tutkimuksessa ACTS–GC tutkijat analysoi kasvaimensisäisenä ilmentymisen 4 geenien (TS, DPD, OPRT, ja TP) potilailla kirjoilla ACTS–GC ja tutkitaan niiden mahdolliset roolit kuten biomarkkereita hoitotuloksia. Kuten meille, ACTS–GC tutkijat ehdotti myös, että alhainen DPD mRNA ilmentyminen kasvaimissa liittyy epäedullinen DFS; keskuudessa GC potilailla, jotka olivat saaneet liitännäishoitona S-1 kemoterapiaa (N = 401), potilailla, joilla on alhainen kasvaimensisäisenä DPD mRNA ilmaisu oli huonompi 5 vuoden DFS (60,8% vs. 70,8%; p = 0,039) ja OS (66,8% vs. 78,0 %; P = 0,015) kuin ne, joilla on korkea DPD ekspressiotaso [32]. Siksi tutkimukset sekä ACTS-GC ryhmä ja meidän tutkijat saavuttaneet yllättäen sama tulos riippumattomien potilasaineistoihin.

Koska vain potilaat, jotka olivat saaneet S-1 hoito oli mukana tässä tutkimuksessa, on edelleen epävarmaa, kasvaimensisäistä DPD ilmentymistaso on ennakoivaa tai prognostinen markkeri GC saavilla potilailla adjuvantti S-1 terapian. Koska ACTS–GC oli kontrolliryhmään, jotka olivat saaneet leikkaus yksin ilman adjuvanttihoitoa, ACTS–GC tutkijat osoittivat, että hyöty adjuvanttia S-1 hoito on useimmiten rajoittuu GC potilaille, joilla on korkea kasvaimensisäisenä DPD mRNA ilmaisu [ ,,,0],leikkaus seurasi adjuvantti S-1 hoito vs. kirurgia yksin; HR OS, 0,52 (95% CI; 0,38-0,72)]; Sitä vastoin potilailla, joilla on alhainen kasvaimensisäisiä DPD ilme, adjuvantti S-1 terapian näytti olevan vähemmän hyötyä [leikkausta seuraa adjuvantti S-1 hoito vs. kirurgia yksin; HR OS, 0,85 (95% CI; 0,56-1,28)] [32]. Siksi, kun otetaan huomioon tutkimuksen tuloksia sekä ACTS-GC tutkijat ja meille, me varovasti viittaavat siihen, että kasvaimensisäisenä DPD mRNA ilmaisu voisi olla ennustavan biomarkkeri tehoa adjuvanttia S-1 kemoterapiaa GC potilailla jälkeen D2 gastrectomy. Kuitenkin meidän ehdotus on edelleen tutkittu mahdollisten tulevien tutkimuksissa.

Jos kasvaimensisäisenä DPD ilmentymistaso on ennustava biomarkkereiden adjuvanttia S-1 kemoterapiaa GC potilailla, taustalla olevia syitä, miksi alhainen kasvaimensisäisenä DPD ilmaisu annetaan huonompi DFS tulos GC saavilla potilailla adjuvantti S-1 terapia vaatii lisätutkimuksia. Ensinnäkin, vaikka kirjailijoiden ACTS-GC ryhmä ei tutkia yhdistyksen välillä toksisuusprofiilit tai TKI S-1 ja taso kasvaimensisäisenä DPD ilmaisun [32], analysoimme erot myrkyllisyys taajuuksilla ja TKI S-1 mukaan Kasvaimensisäinen DPD ekspressiotasot. Emme löytäneet mitään eroja toksisuutta ja TKI välillä DPD-korkea ja DPD-alhainen potilaiden IHC pisteet. Vaikka tilastollisesti merkityksetön, potilailla, joilla on alhaisin kasvaimensisäisenä DPD mRNA tasolla (1

st kvartiili) osoitti suuntauksena ei-hematologista toksisuutta of ≥ 3. asteen (29% vs. 16%; P = 0,068) ja näyttivät on alhaisempi toleranssi S-1 kuin potilaat, joilla on korkeampi DPD mRNA (S2 taulukko). Aikaisemmassa tutkimuksessa [5], me raportoitu, että TKI S-1 liittyy DFS GC saavilla potilailla adjuvanttia S-1-hoidon, ja että yleisin syy S-1-annoksen pienentämistä oli enterokoliitti, yksi yleisimmistä ei- hematologista toksisuutta aikana kehittynyt adjuvantti S-1 terapian. Vaikka onko DPD ekspressiotasot korreloivat välillä kasvainsolujen ja normaalien isäntäsoluista on edelleen tuntematon, Bertino et al. [15] kertoi, että alhainen kasvaimensisäisenä DPD ilmentyminen voi olla suurempi myrkyllisyyden kapesitabiinilla keuhkosyöpäpotilaita. Cui et ai. [33] raportoitiin, että seerumin DPD ilmentymistaso liittyy kehittämiseen myrkyllisyyden S-1-pohjainen kemoterapiaa metastasoituneen GC potilailla. Yhdessä oletamme että kasvaimensisäisenä DPD ekspressiotasot voivat heijastaa yleistä DPD tasot normaaleissa isäntä kudoksissa, mikä osoittaa, että alhainen kasvaimensisäisenä DPD ilmaisu saattaa liittyä useammin kehittäminen S-1 toksisuutta ja saattaa vähentää potilaan sietokyvyn S-1. Tämä hypoteesi voi selittää huonompi DFS potilailla, joilla on alhainen kasvaimensisäisiä DPD ilmaisua, verrattuna potilaisiin, joilla on korkea DPD ilme, vastaanottaessaan adjuvantti S-1 kemoterapiaa. Toiseksi korkea kasvaimeen DPD

sinänsä

voi antaa lisää herkkyyttä S-1 kuin alhainen kasvaimensisäisenä DPD GC potilailla. Shimizu et ai. raportoitu, että vastausprosentti oli huomattavasti korkeampi metastasoituneen mahalaukun scirrhous kohdunkaulan potilaille, joilla on DPD-positiivisia kasvaimia kuin niillä, joilla on DPD-syöpäkasvain hoidetuilla S-1-kemoterapian [29]. Kaikki edellä mainitut ehdotukset ovat hypoteesi tuottavia, ja lisää tutkimuksia tarvitaan.

Lisäksi, enemmän näkökohtia on vielä selvittämättä. Standardointia qRT-PCR-menetelmillä ja optimointia cut-off-piste DPD mRNA tasot FFPE Tuumorinäytteissä on suoritettava. Tutkijat alkaen ACTS-GC ryhmä käytti alin tertile on kasvaimensisäisenä DPD mRNA tasoilla kuin cut-off piste [32]. Tutkimuksessamme huonoin kvartaali käytettiin cut-off. Kun teimme toisen analyysit käyttämällä pienintä tertile on kasvaimensisäisenä DPD tasoilla kuin cut-off, vaikutus DPD ekspressiotasoja ennustamaan DFS oli edelleen voimassa yhden muuttujan (S3 kuvassa) ja monimuuttuja analyysit (S3 taulukko). Sopivin rajakohta on kasvaimensisäisenä DPD mRNA ekspressiotasot ennustamiseksi hoitotuloksia adjuvanttia S-1 hoito on validoitu tulevissa tutkimuksissa. Lisäksi kasvaimeen DPD proteiinin ekspressiotasot mitattiin IHC tulokset (värjäytymisen intensiteetti kerrottuna prosenttiosuus värjätään alue) liittyivät myös erilainen hoitotuloksia tutkimuksessamme. Kuitenkin tutkimuksessa ACTS-GC ryhmä, jossa proteiinin ilmentyminen mitattiin värjäämällä intensiteetti vain, kirjoittajat löytäneet yhdistyksen välillä IHC tulosten ja hoitotuloksia [32]. Lisäksi, ACTS–GC tutkijat raportoitu, että kasvaimeen TS mRNA: n ekspression taso oli myös ennustavan tehoa adjuvanttia S-1 kemoterapiaa. Kuitenkin meidän tutkimuksessa ekspressiotasot TS-onko se mitattiin IHC tai qRT-PCR-eivät liittyneet selviytymisen tuloksia adjuvanttia S-1 terapian. Siksi nämä erilaiset havainnot välillä ACTS–GC tutkijat ja meitä (hyödyllisyyttä kasvaimensisäisenä DPD-proteiinin ekspressiotasot mitattiin IHC ja TS mRNA ekspressiotasot ennustettaessa hoitotuloksia) on tutkittava tarkemmin tulevaisuudessa.

Lopuksi vastaanottaessaan adjuvantti S-1 terapian, GC potilailla, joilla on korkea kasvaimensisäisenä DPD ilmaisua ei tarvitse huonompi lopputulos heikosti DPD ilme. Sen sijaan vähäinen mRNA tai proteiinin ilmentyminen DPD liittyi huonoon DFS. Anto pienemmillä annoksilla S-1 johtuen toksisuutta on saattanut johtaa tämä odottamaton huonompi hoitotuloksen potilailla, joilla on alhainen DPD tasolla. Ilmaisu tasot Muiden fluoropyrimidiinipohjaiseen metaboloivia entsyymejä (TS, OPRT, ja TP) eivät liittyneet selviytymisen tuloksia adjuvanttia S-1 hoito. Tulevaisuuden suuri tulevaisuudentutkimusta biomarkkereita ennustavan tehoa adjuvanttia S-1 hoito ovat perusteltuja.

tukeminen Information

S1 Kuva. Survival tulosten mukaan vaiheet: (A) tautivapaan elinajan ja (B) yleiseen eloonjäämiseen.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0120324.s001

(DOCX)

S2 Kuva. Jakelu (A) IHC tulokset DPD ja (B) mRNA: n ekspression tasojen DPD.

(C) välinen korrelaatio IHC tulokset ja mRNA: n ilmentymisen tasoa DPD.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0120324. S002

(DOCX)

S3 Fig. Tautivapaan elinajan käyrät mukaan kasvaimensisäisenä mRNA ekspressiotasoja DPD (kun potilaat luokitellaan kolmannekseen).

Doi: 10,1371 /journal.pone.0120324.s003

(DOCX) B S1 Taulukko. Toksisuudet aikana kehitettiin S-1 kemoterapiaa (per potilas).

Doi: 10,1371 /journal.pone.0120324.s004

(DOCX)

S2 Taulukko. Vertailu toimituksen S-1 ja kehitetty toksisuuksia välillä kasvaimensisäisenä DPD-matala ja DPD-korkea ilmentymisen ryhmät [(A) IHC tulokset ja (B) mRNA ekspressiotasoja].

Doi: 10,1371 /journal.pone .0120324.s005

(DOCX)

S3 Taulukko. Vaikutus kasvaimensisäisenä DPD mRNA ekspressiotasot on tautivapaan elinajan.

DPD mRNA ekspressiotasoja jaettiin 3 ryhmään (kolmannekseen).

Doi: 10,1371 /journal.pone.0120324.s006

(DOCX ) B

Kiitokset

Tämä artikkeli on esitelty, osittain, julisteen esitys vuoden 2014 ESMO (European Society for Medical Oncology) Congress, Madrid, Espanja (26-30 09, 2014).