Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Meidän äskettäisessä tutkimuksessa, kudos proteomiikka analyysi suun premaligneja leesioita (OPLs) ja normaali suun limakalvojen johti tunnistamiseen paneelin biomarkkereiden, kuten protymosiini alfa (PTMA), erottamaan OPLs histologisesti normaalista suun kudoksiin. Tämän tutkimuksen tavoitteena oli määrittää kliinistä merkitystä PTMA yli-ilmentymisen suun levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja pään ja kaulan levyepiteelisyöpä (HNSCC).

Menetelmät

immunohistokemia of PTMA proteiinia suoritettiin HNSCCs (n = 100), levyepiteelisyöpä liikakasvun (n = 116), dysplasia (n = 50) ja histologisesti normaali suun kudosten (n = 100). Tilastollinen analyysi suoritettiin määrittämään yhdistys PTMA yli-ilmentymisen kanssa kliinis parametrien ja taudin ennusteen yli 7 vuotta HNSCC potilaille.

Tulokset

immunohistokemiallinen analyysi osoitti merkittäviä yliekspressio ydin- PTMA vuonna levyepiteeliperäinen liikakasvun (63,8%), dysplasia (50%) ja HNSCC (61%) verrattuna suun kautta normaali limakalvo (p

suuntaus 0,001). Chi-square analyysi osoitti merkittävää yhteyttä ydinvoiman PTMA kehittyneitä kasvain vaiheiden (III + IV). Kaplan Meier selviytyminen analyysi osoitti alentunut taudista elinaika (DFS) in HNSCC potilailla (p 0,001; mediaanielinajassa 11 kuukautta). Varsinkin Cox-monimuuttuja-analyysi paljasti ydinvoiman PTMA itsenäisenä ennustaja huonon ennusteen HNSCC potilaista (p 0,001, Hazard: n suhde, HR = 5,2, 95% CI = 2,3-11,8) verrattuna histologinen arvosana, T-vaihe, imusolmukestatuksesta ja kasvaimen vaiheessa.

Johtopäätökset

Nuclear PTMA voidaan käyttää ennustetekijöiden merkkiaineena HNSCC määrittää potilasryhmässä jotka ovat todennäköisesti osoittaa taudin uusiutumista.

lainaus: Tripathi SC, Matta A, Kaur J, Grigull J, Chauhan SS, Thakar A, et al. (2011) yli-ilmentyminen protymosiini Alpha ennustaa Huono Disease tulokset pään ja kaulan syöpä. PLoS ONE 6 (5): e19213. doi: 10,1371 /journal.pone.0019213

Editor: Irina V. Lebedeva, Enzo Life Sciences, Inc., Yhdysvallat

vastaanotettu: 11 lokakuu 2010; Hyväksytty: 29 maaliskuu 2011; Julkaistu: 05 toukokuu 2011

Copyright: © 2011 Tripathi et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: SCT on tukee Senior Research Fellowship Intian neuvoston Medical Research (ICMR), New Delhi, Intia. AM on vastaanottaja MITACS Accelerate Fellow. RR kiitollisena tunnustavat tukea Joseph ja Mildred Sonshine keskus pään ja kaulan alueen sairaudet ja Temmy Latner /Dynacare Family Foundation, Kanada. RR ja KWMS tunnustaa rahoitusta Kanadan Institutes of Health Research (CIHR), International Science and Technology Kumppanuudet Kanada (ISTP Kanada) ja Department of Biotechnology (DBT), Intia. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Human protymosiini alfa (PTMA) on 12,5 kDa, happo-rikas, ei-histoni tumaproteiini, joka käsittää 110 aminohappoa [1]. PTMA tiedetään olevan tärkeä rooli solukierron säätelyssä, lisääntymistä, transkriptio, kromatiinin remodeling, oksidatiivisen stressin vasteen ja apoptoosin [2] – [8]. Yliekspressio PTMA on raportoitu useissa maligniteettien, kuten rintasyövän [5], maksasyöpä [9], keuhkosyöpä [10], neuroblastooma [11], virtsarakon syöpä [12], mahan [13] ja ylempien virtsateiden välimuotoisen epiteelin syöpä [14]. Lisäksi PTMA toimi myös ennustetekijöitä merkkiaineena rinta-, maha-, eturauhas- ja virtsarakon [5], [13], [15], [16]. Viime aikoina olemme tunnistettu PTMA joukossa paneeli biomarkkereiden jotka voivat löytää hyödyllisyys erottamaan OPLs ja HNSCCs ei-pahanlaatuinen kudosten käyttäen isobaaristen tunnisteita suhteellisen ja absoluuttisen määritysrajan (iTRAQ) merkinnät ja moniulotteinen nestekromatografia /tandem-massaspektrometrialla (LC-MS /MS) [17].

HNSCC on kymmenen yleisintä syövät maailmassa, osuus on suurempi tapahtuu kehitysmaissa. Tupakka, betel mälli ja alkoholin kulutusta sekä ihmisen papilloomavirus (HPV) ovat merkittävimmät riskitekijät liittyvät kehittäminen pään ja kaulan alueen syöpä [18] – [24]. Suun okasolusyöpä (OSCC), yksi tärkeimmistä alatyyppejä HNSCC, edeltää usein kliinisesti hyvin määritelty vaurioita, kuten leukoplakia, joka aiheutuu kroonista altistumista suun limakalvon syöpää aiheuttaville aineille /kasvunedistäjiä tupakan ja /tai betel mälli. On keskimäärin noin 1-2% näistä suun haavaumia muuntua syöpä vuosittain [25] – [27]. Lisäksi yli 50% kaikista HNSCC potilaista on edennyt sairaus aikaan diagnoosi [28]. Vaikka on ollut kehitysten hoitomuotoja, jotka parantavat elämänlaatua ja ovat lievittävä arvo, eloonjäämisasteesta HNSCC ikäryhmässä ei parantunut huomattavasti (noin 50%), usein johtuu paikallista alueellista uusiutuminen tai toisen primaarikasvaimille havaittiin yleisesti perhe [27] – [30]. Tällä hetkellä tärkein ennustavat tekijät HNSCC ovat histologista kasvaimen, vaihe, syvyys kasvaimen invaasion ja alue- imusolmukkeiden aikaan diagnoosin. Kuitenkaan mikään näistä tekijöistä voi ennustaa ennusteeseen HNSCC tehokkaasti, mikä korostetaan identifioida uusia biomarkkereita varhaiseen havaitsemiseen, riskien arviointi ja tarkan ennusteen toistumisen tätä maligniteetti.

Tässä tutkimuksessa pyrittiin määrittämään kliinistä merkitystä PTMA yli-ilmentymisen pään ja kaulan kasvaimen kehittymisen. Analysoimme ilmaus PTMA suuressa kohortissa kliinistä näytettä, myös normaalia suun limakalvo, levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja HNSCC immunohistokemiallisesti. Lisäksi tutkimme korrelaatiot ydinvoiman PTMA lausekkeen kliinis parametrien squamous solujen liikakasvua, dysplasia ja HNSCC määrittää hyödylliseksi biomarkkereiden.

Tulokset

korrelaatio ydinvoiman PTMA vuonna levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja HNSCC kanssa kliinispatologiset ominaisuudet

määrittämiseksi kliinistä merkitystä PTMA proteiinin pään ja kaulan kasvainten synnyssä, sen ilmentyminen analysoitiin normaalissa suun limakalvojen, levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja HNSCC käyttäen immunohistokemia. Kuvio 1A esittää pisteet jakautuminen ydin- PTMA normaalissa suun limakalvojen, levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja HNSCC. 100 histologisesti normaalit kudokset analysoitiin 88 kudosten (88%), ei näkynyt havaittavissa PTMA immunovärjääminen ytimet epiteelisolujen normaaleissa kudoksissa (taulukko 1, kuvio 1 B (i)). PTMA ilmentymistä havaittiin 5 43 (11,6%) pariksi normaaleissa kudoksissa ja 7 57 (12,3%) parittomia normaaleissa kudoksissa vain. Chi square trendianalyysi osoitti myös merkittävä kasvu ydin- ilmentyminen PTMA kudoksissa saadaan eri vaiheista pään ja kaulan kasvaimen kehittymisen (levyepiteelisyöpä hyperplasia, dysplasia ja HNSCC, p

suuntaus 0,001). Niistä levyepiteelisyöpä liikakasvun (n = 116), 74 tapauksessa (63,8%) osoitti merkittävää kasvua ydin- PTMA immunoreaktiivisuus (p 0,001, OR = 12,9, 95% CI = 6,3-26,3) verrattuna normaaliin suun kudosten (taulukko 2 ja Kuvio 1 B (iii)). Lisääntynyt ydin- ilmentyminen PTMA havaittiin myös 50%: dysplasia (25 50 tapausta, p 0,001, OR = 7,3, 95% CI = 3,2-16,6) verrattuna normaaliin suun kudoksiin (taulukko 3 ja kuvio 1B (v)) . Taulukot 1, 2 ja 3 yhteenveto korrelaatiot ydinvoiman PTMA kanssa kliinis parametrien normaali suun limakalvojen, levyepiteelisyöpä liikakasvu ja dysplasia vastaavasti. Mielenkiintoista, ydin- PTMA osoitti merkittävää yhteyttä tupakan kulutustottumukset potilaalla on okasolusyöpä liikakasvun (p 0,001).

(a) Box-Plot analyysi: Rasiakuvaajat osoittaa jakautuminen koko tulokset perustuvat immunohistokemialla PTMA proteiinin parafiiniin upotettujen leikkeiden suun normaaleissa kudoksissa, levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja HNSCC. Pystyakselilla on yhteensä immunovärjäystä pisteet, saatu kuten on kuvattu menetelmät-osassa. Kuvassa näkyy pisteet jakautuminen ydin- PTMA ilmaisun levyepiteelisyöpä liikakasvun (pisteet alue 0-7), dysplasia (pisteet alue 0-7) ja HNSCC (pisteet alue 0-7). (B) immunohistokemiallinen analyysi PTMA pään ja kaulan kudosten: Parafiini upotettujen leikkeiden histologisesti suun normaalin limakalvon, levyepiteelisyöpä hyperplasia, dysplasia ja HNSCC värjättiin käyttäen anti-PTMA polyklonaalinen vasta-aine, kuten on kuvattu menetelmät-osassa. (I) normaali suun limakalvon näkyvissä mitään PTMA immunovärjäyksen; (Ii) levyepiteelisyöpä liikakasvun näkyvissä mitään immuunivärjäykseen PTMA; (Iii) levyepiteelisyöpä liikakasvun osoittaa ydinvoiman PTMA immunovärjääminen epiteelisolujen; (Iv) dysplasia ei näy yhtään ydinaseiden PTMA immunovärjäyksen; (V) dysplasia kuvaa ydin- PTMA immunovärjääminen epiteelisolujen; (Vi) HNSCC leikkaus, joka esittää ei ydinaseiden PTMA värjäytymistä; (Vii) HNSCC leikattuna, joka kuvaa ydin- PTMA värjäytymistä kasvainsoluissa; (Viii) virtsarakon syöpä kudoksen leikkaus, joka esittää ydinaseiden PTMA immunovärjäyksen; (Ix) HNSCC osassa käytettiin negatiivisena kontrollina, joilla ei ole PTMA immunovärjäys kasvainsoluissa; (I-ix alkuperäinen suurennos x 200).

joukossa HNSCC, 61% tapauksista osoitti ydinvoiman lokalisoinnin PTMA kasvainsoluissa verrattuna normaaliin suun kudoksiin (p Taulukko 4 ja kuvio 1B (vii)). Kliinis parametrit HNSCC ja niiden korrelaatioita ydin- PTMA ilme on esitetty taulukossa 4. Mielenkiintoista, ydin- PTMA osoitti merkittävää yhteyttä kehittynyt kasvain vaiheessa (p = 0,03). Erityisesti, mikään HNSCC kudosten osoitti soluliman PTMA immunovärjäyksellä. Positiivisen kontrollin (virtsarakon syöpä) osoitti voimakasta ydin- PTMA ilmentyminen (kuvio 1 B (viii)), kun taas ei immunovärjäyksellä havaittu kudosleikkeiden käytettiin negatiivisina kontrolleina, jossa primaarinen vasta-aine oli korvattu isotyypin IgG-(kuvio 1 B (ix)).

kyky ydin- PTMA erottaa levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja HNSCC normaalista suun limakalvon määritettiin arvioimalla herkkyys, spesifisyys, positiivinen ja negatiivinen ennustearvo arvojen ja ala-alle-käyrän (AUC) käyttäen Receiver Operating Characteristic (ROC) käyrä analyysi. Arvot herkkyys, spesifisyys ja AUC levyepiteelisyöpä liikakasvu, dysplasia ja HNSCC esitetään taulukossa 5. Positiivinen ennustava arvo (PPV) oli 86,0, 67,6 ja 83,6 ydin- ilmentymisen PTMA vastaavasti näissä kolmessa ryhmässä (taulukko 5).

PTMA yliekspressio itsenäisenä prognostinen merkkiaine HNSCC

arvioitu ennusteita on PTMA ilmaisun huonon ennusteen arvioitiin Kaplan-Meier selviytymisen analyysi. HNSCC potilaat kätkeminen ydin- PTMA osoitti vähentää merkittävästi tautivapaan elinajan (p 0,001; mediaanielinajassa 11 kuukautta) verrattuna potilaat, joilla ei ydin- PTMA immuunivärjäysmenetelmällä (kuvio 2d). Cox-monimuuttuja regressioanalyysi suoritettiin määrittämään ennustetekijöiden potentiaali ydinvoiman PTMA vuonna HNSCC verrattuna muihin clincopathological muuttujat, kuten ikä, sukupuoli, histologinen luokka, T-vaihe, imusolmukestatuksesta ja kasvaimen vaiheessa. Mielenkiintoista, ydinvoiman PTMA noussut itsenäisenä ja merkittävin ennustaja huonon ennusteen HNSCC potilailla monimuuttujamenetelmin (p 0,001, HR = 5,2, 95% CI = 2,3-11,8).

(a) Kaplan- Meier arvio kumulatiivinen osuus tautivapaan elinajan mediaani ajan taudista vapaan eloonjäämisen (DFS: toistuminen /etäpesäke) in HNSCC potilaat, joilla on ydin- immunovärjäyksen PTMA oli 11 kuukautta verrattuna potilaat, joilla ei ydin- PTMA immuunivärjäystä (p 0,001); (B) positiivinen ennustearvo Arvot: Positiivinen Ennakoiva arvot [PPV (t)] varten aika syövän uusiutumisen 51 HNSCC potilaalla on PTMA (+) (yhtenäinen viiva) ja kaikkien 77 HNSCC potilaalla on Eloonjääntitulokset (katkoviiva); (C) Negatiivinen Ennakoiva Arvot: Negative Ennakoiva arvot [NPV (t)] varten aika syövän uusiutumisen 26 potilaalla on PTMA (-) (yhtenäinen viiva), ja kaikkien 77 potilasta (katkoviiva).

Perustuu tietojen lisäksi ennusteen arvioinnissa että ydin- PTMA ilmaisu säädetyn ennustamiseen (PPV) tai ilman (NPV) syövän uusiutumiseen in HNSCC potilailla mitattiin suhde: PPV

uusiutumisen /HNSCC (83 kuukautta