Alkaen kromatiinin arkkitehtuurin proteiini histoni chaperone
Poly [ADP-riboosi] polymeraasi 1 (PARP-1) on erittäin runsaasti soluissa. Ydinvoimalaitoksen pitoisuus noin PARP-1molecule per 20 nukleosomit, sillä on potentiaalia vaikuttaa monet ydin- prosesseihin. Se katalysoi NAD +: sta riippuvainen polymeroinnissa pitkiä ketjuja poly-ADP riboosi (PAR) itsensä päälle vasteena DNA-vauriolle ja muita vihjeitä. Täällä me raportoimme että automaattinen muuttaminen PARP-1 voi olla rooli molemmissa kromatiinirakenteeseen proteiinia ja histoni chaperoniproteiiniin.
määrittää dissosiaatiovakioita eri PARP-1-chromatin komplekseja käyttäen suuren läpimenon vuorovaikutukset fluoresenssilla intensiteetti FRET. Modifioimaton PARP-1 tarttuu vähintään kaksi korkean affiniteetin sitoutuminen -tiloja kromatiinin, joista ei liity vapaa DNA loppuu, sopusoinnussa rooliaan chromatin arkkitehtoninen proteiinia.
Auto-PARylation PARP-1activated mukaan erilaisille ärsykkeille, jotka liittyvät transkription ja DNA: n korjaus säätelee sen kyky tiivistää kromatiinin. Tämä muutos pienentää PARP-1 affiniteetti ehjä chromatin mutta ei nukleosomeissa altistuvat DNA päät. AM-PARP-1 suoraan kilpailee DNA histonien, kuten ennustettiin meidän Affiniteettimittaukset ja havaittu muita histoni chaperones.
malli PARP-1 sitoutuu nukleosomeihin on suuri taipumus koko genomin, mikä tiivistyvä chromatin.
ALS ja spastinen paraplegia (SP) luokitellaan rappeutumista moottori neuronien, mikä johtaa lihasten surkastumista ja jopa ennenaikainen kuolema. Yksi tällainen MNDS liittyy heikentynyt mitokondrio hengitystä ja mitokondrioiden jakelu. Tässä osoitamme, että Miro1 on välttämätöntä kehittämiseksi kallon moottorin ytimeksi.
mitokondrio Rho (Miro) GTPaasina proteiinit ovat kriittisiä liikenteen, koska ne ovat ainoa tunnettu pinnan reseptoreita, jotka pitävät mitokondrioita sovittimien ja moottoreita. Liikkuminen hermosolujen mitokondrioita välillä solun elin ja synapsi säätelee sovittimia kutsutaan salakuljetuksen kinesiiniin proteiineja. Me rakentaa Cre-loxP-järjestelmä pudottaa Miro1 hiirillä.
unluckily, KO hiiret ovat kuolleisuutta. Alkio-linjan Miro1 KO hiiri täydentää alkionkehityksen mutta epäonnistuu hengittää ja kuolee syntyessään. Nämä tiedot osoittavat, että kuoleman Miro1 KO-hiirten on aiheuttanut tiettyjä puutteita moottori neuronien tarvitaan hengitys syntymän jälkeen.
Seuraavaksi tutkimme molekyylimekanismin. Huomasimme, että Miro1 poisto johtaa menetykseen erityisiä neuronien tarvitaan hengityksen. Mitokondriot merkitty Mito Tracker oli tunnusomaisia putkimainen morfologia ja jaettiin koko sytoplasmassa ja filopodia The Miro1 KO MEF ryhmittyivät tuman ympärillä ja poissa filopodia.
Yhteenvetona nämä tulokset osoittavat, että ensisijainen viat mitokondrioiden liikkuvuutta ja jakelu ja aiheuttaa neurologinen sairaus.