Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Keuhkosyöpä on yleisin maligniteetti ihmisillä ja sen korkea kuolemantapaukset tarkoittaa sitä, että ei ole tehokasta hoitoa on saatavilla. Kehitetään uusia terapeuttisia strategioita keuhkosyövän tarvitaan kiireesti. Malaria on raportoitu stimuloivan isännän immuunivasteita, joiden uskotaan olevan tehokkaita torjumiseksi jonkin verran kliinistä syöpiä. Tämä tutkimus on tarkoitus todistaa, että malaria loinen infektio on terapeuttinen keuhkosyöpä.

Menetelmät /Principal Havainnot

antituumorivaikutus malarian tartunnan tutkittiin sekä ihon alle ja suonensisäisesti istutettiin hiiren Lewis keuhkosyöpää (LLC) malli. Tulokset osoittivat, että malaria-infektion esti LLC kasvua ja etäpesäkkeiden ja lisäsi elinaikaa kasvainta kantavien hiirten. Histologinen analyysi kasvainten hiiristä tartunnan malaria kävi ilmi, että angiogeneesi estyi, joka korreloi lisääntynyt terminaali deoksinukleotidyylitransferaasi välittämän (TUNEL) värjäystä ja laski Ki-67 ilmentyminen kasvaimissa. Luonnolliset tappaja (NK) sytotoksisuuden lisääntyminen aktiivisuus, sytokiinimäärityksiä, entsyymi-immunospot määrityksessä, lymfosyyttien proliferaation, ja virtaussytometria, osoitimme, että malaria-infektion edellyttäen antituumorivaikutuksia indusoimalla sekä voimakas anti-kasvain synnynnäisen immuunivasteen, mukaan lukien IFN-γ: n ja TNF-α ja NK-solujen aktivaation sekä mukautuva kasvaimen vastaisen immuniteetin kasvaimen lisääntyvän-spesifisten T-solujen lisääntymistä ja sytolyyttisen aktiivisuuden CD8

+ T-soluja. Varsinkin on kasvain tartunnan loisen kehittyi pitkään ja tehokas kasvainta-immuniteetin. Näin ollen olemme havainneet, että malaria loinen infektio voi tehostaa immuunivastetta keuhkosyövän DNA-rokotteen pcDNA3.1-hMUC1 ja seos synergistisen antituumorivaikutus.

Johtopäätökset /merkitys

Malaria infektion merkittävästi tukahduttaa LLC kasvun kautta induktion synnynnäisen ja adaptiivisen antitumor vasteita hiirimallissa. Nämä tiedot viittaavat siihen, että malaria loinen voi tarjota käyttöön uusi strategia tai terapeuttista rokotetta vektorin anti-keuhkosyöpä immuuni-pohjaisen hoidon jälkeen.

Citation: Chen L, hän Z, Qin L, Li Q, Shi X, Zhao S, et ai. (2011) Antituumorivaikutus Malaria Parasite Infektio Hiiren Lewisin keuhkosyöpä Malli kautta induktio Innate ja Adaptive Immunity. PLoS ONE 6 (9): e24407. doi: 10,1371 /journal.pone.0024407

Editor: Hong Wei Chu, National Jewish Health, Yhdysvallat

vastaanotettu: toukokuu 18, 2011; Hyväksytty: 08 elokuu 2011; Julkaistu: 09 syyskuu 2011

Copyright: © 2011 Chen et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Grant tuki National luonnontieteiden Foundation of China (nro 81001022 ja ZH), apurahan valtion Key Laboratory of Respiratory Disease XC, ja avustusta CAS-FS Biotech ja Pharmaceutical Center XC. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Keuhkosyöpä on johtava syy syöpään liittyvien kuolemien maailmanlaajuisesti [1]. Vaikka hoitomenetelmiä leikkaus, säteilytys ja kemoterapia ovat parantuneet, ennuste on edelleen epätyydyttävä, ja kehittää uusia hoitostrategioita edelleen kipeästi kysyntää. Immunoterapia voi edustaa yksi uusien terapeuttisten strategioiden keuhkosyöpä on viime aikoina kehitetty [2] – [5]. Tavoitteena keuhkosyöpään immunoterapia on laajentaa heikentynyttä isännän immuunivastetta kasvaimia käyttämällä erityisiä ja /tai epäspesifistä immunostimulanttien [4] – [6]. Epäspesifinen immunostimulatorisia aineet ja yksittäisten toimenpiteiden sytokiinien kliinistä hyötyä. Kohde-suunnattu immunoterapia määritelty kasvaimen antigeenejä, kuten melanoomaan liittyvä antigeeni 3 ja musiinin 1 (MUC1), eivät ole optimaalisia ja voimakas adjuvantti aineita tarvitaan [6], [7]. Lisäksi nyt on selvää, että keuhkosyöpä usein esittää tolerogeenistä mikroympäristön joka estää tehokkaasti antitumor immuniteetin. Siksi uusi voimakas ja tehokas immunoterapia, molemmat augmenting antitumor koskemattomuutta ja torjua kasvain välittämä immuunosuppressio keuhkosyöpä tarvitaan.

Malaria, joka johtuu solunsisäisestä loinen päässä

Plasmodium

sukuun, on yleisin loisinfektio ihmisillä. Ihmisen malaria loinen infektio voi tuottaa ajoittain korkea kuume akuutissa vaiheessa. Hypertermia on kliinisesti käytetty tiettyjen syöpien hoidossa [8] – [11]. Lisäksi malaria on raportoitu stimuloivan isännän immuunivasteita, kuten edistämällä IFN-γ tuotantoa, aktivoimalla luonnon tappaja (NK-solut), γδ T-solujen ja NKT-soluja, indusoimaan dendriittisolujen kypsyminen (DC), ja stimuloivat T-solujen leviämisen [12], [13], joiden uskotaan olevan tehokkaita torjunnassa joissakin kliinisissä syöpien [14] – [16].

tässä tutkimuksessa, ehdotamme, että malaria loinen infektio on terapeuttinen keuhkosyöpään. Antituumorivaikutuksen vaikutus ja immunologisten mekanismien malaria-infektion tutkittiin hiiren keuhkosyöpään malli. Huomasimme, että

Plasmodium yoelii

17XNL (

P. Yoelii

17XNL) infektio estivät merkittävästi kasvua ja etäpesäkkeiden Lewisin keuhkosyöpä (LLC). Lisäksi osoitimme, että malaria-infektion säädetty antituumorivaikutus indusoimalla voimakas luontainen ja mukautuva antitumor immuniteetin.

Tulokset

vastustamisesta LLC kasvua ja etäpesäkkeiden kehitystä hiirissä malariaparasiitti infektio

vaikutuksen määrittämiseksi malarian infektion kasvuun LLC-solujen, me tartunnan kasvainta kantavien hiirten ympättiin ihon alle (sc) injektion LLC-solujen

P. yoelii

17XNL loisena punasolujen (LLC + Py) tai vastaava määrä infektoitumattomien punasolujen (LLC). Aikana tarttuvan ajan malaria (Fig. S1), kasvu kasvainsolujen tukahtui selvästi LLC + Py ryhmässä verrattuna LLC ryhmään (Fig. 1A B). Kasvaimen tilavuudet (

P

= 0,0006, Fig. 1A) ja kasvainten painot (

P

0,0001, Fig. 1 B) oli merkitsevästi vähentynyt LLC + Py ryhmä hiiriä verrattuna LLC ryhmä hiiriä. Sitten määritetään vaikutus malaria loisen tartunnan keuhkosyöpä etäpesäkkeitä analysoimalla esiintyminen etäispesäkkeitä keuhkojen ja maksan päivänä 35 post-tuumorisoluinokulaation. Huomasimme, että taas LLC kontrolliryhmä näytteillä tiheä etäpesäkkeiden (10 10 hiirestä, 100%), etäpesäke LLC + Py ryhmää havaittiin vain 1 10 eläimen (

P

0,0001 , Fig. 1 C ja kuvio. S2). Tämä koe suoritettiin sitten käyttäen aggressiivisempi metastaattinen malli tuotetaan suonensisäisesti (i.v.) kasvainsolujen injektion hiiriin [17]. Samanlainen kuin edellinen s.c. kasvain malli, malaria loinen infektio merkittävästi vähentänyt etäpesäkkeiden joka kehittyi keuhkojen (

P

= 0,0057, Fig. 1D B), ja lyyttisen aktiivisuuden NK-solujen määrä oli lisääntynyt alkuvaiheessa infektion ( kuva 4C). Vaikka osuus NK-solujen kasvaimia tyhjennys imusolmukkeiden (TdLNs) ei ollut merkitsevästi erilainen ryhmien välillä (Fig. 4D), loisinfektio lisäsi grantsyymi B-erittävien NK-solujen TdLNs (Fig. 4E). Kasvoi sekä määrän NK-solujen ja grantsyymi B-erittävien NK-solujen havaittiin kasvaimen kudoksessa LLC + Py ryhmä (Fig. 4F G), mikä viittaa siihen, että sen jälkeen, parasiitti-infektio, kasvaimeen infiltroivista NK-soluilla suurempi

in situ

sytotoksista aktiivisuutta. Nämä tulokset vahvistivat, että malaria-infektion oli toiminnon aktivointi synnynnäisen immuunivasteen, joka toimii kasvun kontrolloimiseksi rokotettujen LLC-soluja.

A ja B, IFN-γ (A) ja TNF-α (B) pernasolujen viljelysupernatanteista mitattuna ELISA: lla (n = 4). C, sytotoksisuus NK-solujen rikastettu pernasoluista eri ajankohtina arvioitiin vastaan ​​YAC-1-soluja osoitetussa efektori-to-tavoite (E:T) suhteet (n = 4). D ja E, viisi päivää tuumorin istuttamisen jälkeen, prosenttiosuus (D) ja grantsyymi B-eritystä (E) NK-solujen määritettiin TdLN ja TnLN hiirten virtaussytometrialla (n = 6). F ja G, absoluuttinen määrä kasvaimeen infiltroivien NK-solut (F) ja spontaani grantsyymi B-tuottavien NK-solut (G) kvantitoitiin virtaussytometrillä ja normalisoitiin koepalan painon (n = 6), 17 päivää tuumorin istuttamisen jälkeen. Nämä kokeet itsenäisesti suoritettiin kolme kertaa identtiset tulokset, ja edustaja sirontakuvaajiin esitetään. Kaikki kaaviot osoittavat keskimäärin SD. *,

P

0,05.

induktio anti-kasvain-spesifisen immuunivasteen

Heikon immunogeenisyyden LLC-solujen, tutkiminen antigeeni ( Ag) erityinen immuunivastetta LLC soluihin on haastavaa [21]. Siksi olemme tuottaneet rekombinantti LLC solulinja (LLC-MUC1), joka ilmaistaan ​​MUC1 (Fig. S4) tutkia kasvaimen Ag-spesifisten immuunivasteiden aiheuttama malaria loinen infektio. Jotta edelleen vahvistaa immuunivastetta olla kasvain antigeenispesifisten, ei hiiren itse antigeenispesifisten, käytimme eksogeeninen MUC1 (ihmisen MUC1) tuottaa LLC-MUC1 solulinjassa. Ihmisen MUC1 on erittäin immunogeeninen hiirillä ja sen epitooppi on hyvin selvää, niin että se on kätevä meille tutkia kasvaimen Ag-spesifisiä immuunivasteita. LLC-MUC1-soluihin ja vanhempien LLC solut eivät osoittaneet merkittäviä eroja kasvun ja morfologisia ominaisuuksia in vitro, ja näytetään myös samanlainen kasvu in vivo (tietoja ei esitetty).

Koska keskeinen rooli DC: iden aloittajana ja ylläpitäjänä Ag-immuunivasteet [20], [22] – [24], olemme analysoineet prosenttiosuus ja kypsymisen CD 11 c

+ DC imusolmukkeissa (LN) tuumoria kantavien hiirten tartunnan

P. yoelii

17XNL loisena punasolujen (LLC + Py) tai infektoimattomat punasolujen (LLC). Huomasimme, että malaria-infektion varhaisessa vaiheessa lisäsi prosenttia CD 11 c

+ DC (Fig. 5A ja kuvio. S5) ja säädelty CD80 ja CD86-ilmentymisen CD11 c

+ DC kasvain imusolmukkeiden (TdLN ), verrattuna LLC ryhmän hiiret (kuvio. 5B 0,05; **

P

0,01; ***

P

0,001.

sitten arvioitava, malaria tartunnan liittyvä DC lisälaite käännetty parannettu rajat esikäsittely ja sisäinen kasvain rekrytointi spesifisten T-solujen tai ei [25], [26]. Käyttämällä kasvaimen hiirimallissa LLC-MUC1-solut, arvioimme kasvainspesifisen (MUC1 vs. merkityksetön OVA) IFN-γ ja grantsyymi B TdLN solujen entsyymiin immunospot (ELISPOT) -määritys. Havaitsimme merkittävän kasvun määrän IFN-γ /grantsyymi B-erittävien efektorisolujen vasteena MUC1 (Ag-spesifinen), mutta ei OVA, LLC + Py ryhmä (Fig. 6A B). Tämä viittaa siihen, että TdLN DC LLC + Py ryhmä hiiret ovat toimivaltaisia ​​rajat prime perifeerinen kasvain spesifisten T-solujen, aiheuttivat MUC1 immuunivasteita korkeamman teho. Voit varmistaa, että DC aktivoitu TdLN solut todella muuttivat kasvainkudoksen, tiheys kasvainta infiltroituneen valkosolut tutkittiin. Huomasimme, että LLC + Py hiirillä, oli dramaattinen kasvu tiheys kasvainta infiltroituneen CD45

+ soluja, ja kun kasvain infiltroituneen lymfosyyttien alaryhmiä tutkittiin, sekä CD4

+ ja CD8

+ T-solut populaatiot lisättiin CD8

+ T-solut edustavat hallitseva solutyyppi (Fig. 6C). Niistä CD8

+ T-solut, tiheys grantsyymi B-ilmentävien solujen lisääntyi merkittävästi kasvainten LLC + Py ryhmä (Fig. 6C). Nämä tiedot osoittivat, että malaria-infektion edisti kertymistä sekä CD4

+ T-solujen ja CD8

+ T-solujen ja CD8

+ T-solut olivat lisänneet efektorivaikutus sisällä kasvain.

A ja B, IFN-γ- (A) ja grantsyymi B (B) tuottavat solut, jotka ovat peräisin TdLNs 17 päivää tuumorin istuttamisen jälkeen arvioitiin ELISPOT-määrityksellä (n = 6). C, absoluuttinen määrä kasvainta infiltroituneen CD45

+ soluja, CD4

+ ja CD8

+ T-soluja, ja spontaani grantsyymi B tuottavien CD8

+ T-solut kvantifioitiin virtaussytometrialla ja normalisoitu ja koepala paino (n = 6), 17 päivää tuumorin istuttamisen jälkeen. D-F, Pernasoluja kerättiin 30 päivää tuumorin istuttamisen jälkeen. D, IFN-γ-tuotanto mitattiin käyttäen ELISPOT-määrityksellä (n = 6). E, CD8

+ T-solut rikastettiin pernasolujen ja altistettiin ELISPOT-määrityksessä mittaamaan grantsyymi B-(n = 6). F, pernasolujen proliferaatio mitattiin BrdU (n = 6). Data esitetään stimulaatioindeksi (SI), joka laskettiin määrittämällä suhde tietyn MUC1 peptidien epäspesifisen OVA peptidejä. Kaikki kaaviot osoittavat keskimäärin SD. Nämä kokeet itsenäisesti suoritettiin kolme kertaa identtiset tulokset, ja edustaja sirontakuvaajiin esitetään. *,

P

0,05; **,

P

0,01; ***,

P

0,001.

vieressä tutki systeemisen anti-kasvain immuunivasteen ja havaittiin, että määrä MUC1-specific IFN-γ-tuottavia soluja perna oli paljon suurempi LLC + Py-hiirissä verrattuna LLC-hiirissä (Fig. 6D). Niistä grantsyymi B-tuottavia soluja pernassa, määrä MUC1-spesifisten CD8

+ T-solut oli merkitsevästi suurempi LLC + Py-ryhmän suhteen LLC ryhmään (Fig. 6E). Olemme edelleen mitattu kasvaimen spesifisten T-solujen lisääntymistä, ja totesi, että Ag-spesifinen proliferatiivinen kyky pernasolujen LLC + Py-ryhmän hiirillä oli merkittävästi suurempi kuin LLC-ryhmän hiiret (kuvio. 6F). Nämä tiedot osoittivat, että malaria-infektion aiheuttama systeeminen kasvaimen vastaisen immuunivasteen.

stimulointi tehokkaan, pitkäkestoisen anti-kasvain immuniteetin

Malaria loista infektio johti pitkäaikaiseen eloonjäämiseen ja täydellinen kasvaimen regressio 5-10% (1-2 per 20 hiiret) tartunnan saaneen tuumoreita kantavaa hiirtä. Elossa hylättyjä eläimiä myöhemmin ihonalainen ruiske emotuumorisoluille päivänä 50 alkuvaiheen jälkeen tuumorin istuttamisen, mikä viittaa siihen, että he olivat saaneet systeemistä immuniteettia LLC soluja. Sen arvioimiseksi, onko malariaparasiitti infektio johti sukupolven pitkän aikavälin immuniteetin, 50 päivää tuumorin istuttamisen jälkeen, pernasoluja hiiristä, joilla kasvaimen regression analysoitiin Ag-spesifisen proliferaation ja IFN-γ eritystä. Pernasoluja hiiristä, joilla kasvaimen taantumiseen lisääntynyt merkittävästi vastauksena MUC1 peptidit (Fig. 7A) ja tuotettu suuria määriä Ag-spesifisen IFN-γ (Fig. 7B), mikä osoittaa, että malaria loinen infektion lisätyn paitsi

in situ

vapautusta mutta myös pitkäikäinen, systeeminen kasvain-spesifisen immuniteetin, edistää eston kasvaimen kehittymisen ja hylkäämistä kasvaimen tunkeutumisesta kaukaisiin kohtiin.

A ja B,

P. yoelii

17XNL infektio johti täydelliseen kasvainten pienenemistä 5-10% (1-2 per 20 hiiret) tartunnan saaneen tuumoreita kantavaa hiirtä. Viisikymmentä päivää infektion jälkeen, pernasoluja hiiristä, joilla kasvaimen regression analysoitiin MUC1-spesifisen proliferaation (A) ja IFN-γ eritystä (B) (n = 4). Viiva A ilmaisee keskiarvo. Baareja B edustaa SD. ***

P

0,001.

antituumorivaikutus yhdistelmän malaria loinen tartunnan ja DNA-rokote hoitoon

Onnistunut apuaineita auttaa suojaavia antigeenejä stimuloida voimakas ja pitkäkestoinen immuunivaste. Kun kyseessä on malaria, on olemassa useita kandidaattimolekyylejä malariaparasiiteissä, joka voisi toimia adjuvanttina komponentit [27], [28]. Sen arvioimiseksi, onko loinen infektio voi tehostaa immuunivastetta keuhkosyövän DNA-rokotteen pcDNA3.1-hMUC1 [29], kasvain-hiiret immunisoitiin monoterapiana (LLC + DNA) tai yhdistelmähoito (LLC + Py + DNA), ja tartunnan saaneiden eläinten kanssa loisena punasolujen (LLC + Py) tai infektoimattomat punasolujen (LLC) toimi kontrolliryhmiin. Tulokset osoittivat, että yhdistelmä malaria loisen infektion ja DNA-rokotteen hoito kohdistuu synergistisiä vaikutuksia kasvaimen kasvun inhibitiota (Fig. 8A) ja jatkaminen hiiren eloonjäämisen (Fig. 8B). Nämä tiedot viittaavat siihen, että malaria loinen on uusi adjuvantti, joka voi helpottaa tiettyjä antitumor immuniteetin.

A ja B, 5 x 10

5 LLC-MUC1 solua injektoitiin s.c. kylkeen alueelle hiirillä. Neljään ryhmään (LLC, LLC + DNA, LLC + Py, ja LLC + Py + DNA) hiiriä immunisoitiin DNA-rokotteella tai infektoitu loisten kuvatulla Materiaalit ja menetelmät sekä myöhemmin seurata kasvainten kehittymiseen 40 päivää (A) ja määräytyy selviytymisen päätepiste 80 päivän (B). Kuvaaja (A) esittää keskimääräistä SD. Tilastolliset erot ryhmien välillä on merkitty

P

arvoja.

Keskustelu

Kasvaimet häiritsevät usein kehitystä ja toimintaa immuunivasteen [30]. Kyky erilaisten infektioiden tukahduttaa syövän kasvua on hyvin dokumentoitu [31] – [34]. Esillä olevassa tutkimuksessa tutkimme antitumor ja etäpesäkkeiden toimintaa malaria-infektion sekä ihon alle ja suonensisäisesti istutettiin hiiren LLC malli. Malaria loinen infektio esti LLC kasvua ja etäpesäkkeiden ja lisäsi elinaikaa kasvainta kantavien hiirten. Lisäksi histologinen analyysi kasvainten infektoidut hiiret malaria paljasti, että angiogeneesi on estetty ja osuus lisääntyvät solut on vähentynyt, kun taas apoptoottisia soluja lisättiin. Malaria-infektion LLC-hiirissä, myös merkitsevästi lisääntynyt IFN-γ: n ja TNF-α, aktivointi NK-solujen, kasvaimen spesifisten T-solujen lisääntymistä, ja sytolyyttinen aktiivisuus CD8

+ T-soluja. Nämä tulokset osoittavat, että malaria loinen infektio indusoi synnynnäisen ja adaptiivisen antitumor vasteet LLC-kantavissa hiirissä, mikä induktion antitumor ja etäpesäkkeiden toimintaa.

Keuhkosyöpä on suurin syy syöpään liittyvien kuolemien. Sen suuri fatality tarkoittaa, että ei ole tehokasta hoitoa on saatavilla [1]. Immunoterapia voi edustaa yksi uusien terapeuttisten strategioiden keuhkosyöpä on viime aikoina kehitetty. Tavoitteena keuhkosyöpään immunoterapia on laajentaa heikentynyttä isännän immuunivastetta kasvaimia käyttämällä erityisiä ja /tai epäspesifistä immunostimulanttien. Perinteiset biologiset immunoadjuvantit, kuten Bacillus Calmette-Guerin (BCG) ja difteriatoksiini, ja epäspesifinen immunostimulatorinen toimia sytokiinien, kuten IL-2, IFN-α, ja TNF-α, aiheuttaa valtavan tulehdussolujen ja tuotanto Th1-sytokiini profiili, joka johtaa positiivisiin tehoa joidenkin syöpien hoidossa [5]. Kuitenkin induktio halutun immuunivasteiden on heikko, vasteita lyhytikäisiä, ja muistin muodostuminen on viallinen. Siten epäspesifinen immuuni simulointi ei ole osoittanut selkeästi hyötyä keuhkosyövän joko prekliinisissä tai kliinisten ponnisteluja. Kuten useimmat taudinaiheuttajat [31] – [34], malaria loinen indusoi valtavan tulehdussolujen ja tuotannon Th1-sytokiinin profiili, joka johtaa immuunivasteen kasvainsoluja vastaan. Erityisesti malaria loinen infektio indusoi paitsi epäspesifistä antituumorivaikutuksen vapautusta mutta myös kasvain-immuniteetin. Lisäksi malaria infektio tuottaa tehokas ja pitkäkestoinen paikallinen ja systeeminen antitumor immuniteetin.

Nykyinen antituumorivaikutuksen siedätyshoidon kuten terapeuttinen rokotteita on edelleen optimaalinen. Immunoadjuvantin komponenttia tarvitaan luomaan proinflammatoristen miljöö, mikä parantaa kostimuloinnin ja T-lymfosyyttien aktivaation [35]. Lisäksi kasvaimen mikroympäris- on voimakkaasti immunosuppressiivinen seurauksena nopean funktionaalisen inaktivoitumisen spesifisen immunoterapian aiheuttaman efektori lymfosyytit, jotka onnistuvat kotiin kasvaimen mikroympäristössä [6]. Kuitenkin malariaparasiitti infektio lisää prosenttiosuus DC, ajan säätelee CD80 ja CD86 ilmentymisen-DC TdLN, edistää kypsymisen DC, ja toimittaa kostimulaation signaaleja, jotka johtavat sukupolven T-solujen aktivoitu fenotyyppi. Aktivoitu CD4

+ T-solut tuottavat sarjaa sytokiineja johtaa sukupolven ja kloonilaajenemisen kasvaimen CD8

+ T-solujen sytolyyttinen aktiivisuus, joka tunnistaa ja tappaa kasvainsoluja [20]. Lisäksi malaria loinen infektio täydentää CD8

+ T-solujen kasvaimen vastaisen immuniteetin lisäämällä numeron ja efektorivaikutus niin TdLNs sekä itse kasvain. Malaria loinen infektio edistää myös kasvainta infiltroituneen NK-solut, joilla on korkea sytotoksinen aktiivisuus kasvaimen mikroympäristössä.

malariaparasiitti infektioita syvästi provosoida isännän immuunijärjestelmän aiheuttaen polyklonaalista aktivaatiota, massiivinen lisääntymistä ja erilaistumista lymfosyyttien loisen-etuyhteydettömien erityispiirteet sekä immuunivasteita isännöidä antigeenejä aikana vapautuvan malariaparasiitti infektion [36] – [41], jotka voivat toimia tehostaa immuunijärjestelmän valvonnan mekanismeja keuhkosyöpä. Mahdollisesti jo olemassa vasta-aineita ja valmiiksi aktivoitu ei-kasvain-vasteita yhdessä kasvaimeen Ag-spesifisten humoraalisten ja soluvasteita jälkeen vireille loisen tartunnan voi estää alkuvaiheessa kasvaimien syntyyn. Sitten, kun malaria loinen infektio on hankittu keuhkosyöpään kasvua ja kehitystä, luontaiset ja adaptiivisen immuunivasteen voidaan edelleen aiheuttama ja /tai parannettu ja vahvasti tukahduttaa kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeiden. Lisäksi on olemassa useita kandidaattimolekyylejä malariaparasiiteissä, joka voisi toimia adjuvanttina komponentit [27], [28]. Glykosyylifosfatidyyli (GPI) on

P. falciparum

uskotaan olevan tärkeä tekijä induktion proinflammatoristen vastausten pääasiassa Toll-kaltainen reseptori (TLR) 2 /MyD88-välitteistä signalointia, [42]. Hemozoin, bio-kiteistä ainetta, on hemiiniä vieroitus sivutuotteena malaria loisten on osoitettu välittävän luonnollinen immuniteetti aktivointi kautta TLR9 [27], [28]. Hemozoin osoittaa myös voimakas adjuvantti vaikutus useita mallin antigeenejä. ”Sisäänrakennettu” adjuvantti voivat helpottaa tietyn antituumorivaikutus tutkimuksessamme. Yhdessä malaria loinen saattaa olla ihanteellinen rokotetta ajoneuvo ei vain esittämistä keuhkosyövän antigeenien (kuten MUC1) kasvaimen spesifisten T-solujen, vaan myös toimia adjuvanttina toimittaa tarvittavan miljöön tehostavat näiden efektorisolujen [43] – [45].

kuitenkin, tutkimuksemme on kaksi selkeitä rajoituksia. Ensinnäkin, ei ole kuumetta jyrsijän malaria [46], [47], joka on havaittu myös tutkimuksessamme (tuloksia ei ole esitetty). Siksi ei pitäisi olla hypertermia vaikutusta meidän jyrsijän malaria-syöpä malleja. Toiseksi syöpälääkkeen vaikutuksia on vahvistettu olevan vahvempi hiirissä suhteellisen pitkän luonnollisen taudinkulku (noin neljä viikkoa)

P. yoelii

infektio verrattuna lyhyemmällä taudinkulku (noin kaksi viikkoa)

P. chabaudi

infektio tai joilla on keskeytynyt lyhytkestoinen

P. yoelii

infektio (kaksi viikkoa sen jälkeen, malarialääkkeitä lääkehoitoa, tuloksia ei ole esitetty). Tämä tarkoittaa, että enää tarttuva aikana se on, sitä voimakkaampi vaikutus inhibitio keuhkosyöpä kasvun se on. Valitettavasti pisimmän jyrsijän malariainfektion ylläpidetään vain neljä viikkoa (

P. Yoelii

). Joten emme voineet havaita vaikutusta pitkän aikavälin malarian tartuntapäivää syövän kasvua. Kuitenkin yksi hyvänlaatuinen muotoja ihmisen malarian loisen

P. vivax

tuottaa ajoittain korkea kuume akuutissa vaiheessa, ja tämä loinen myöhemmin selviää vuosia aikana kroonisessa vaiheessa infektion jos potilas luopuu hoidossa [48], [49]. Siksi oletamme, että pitkä aikana terapeuttista malarian ihmisen keuhkosyöpä on oltava tehokasta.

Huolimatta Greentree ehdotti makrofagiaktivaatio perustuva hypoteesi terapeuttisen malariaan (malariotherapy tai malariatherapy) syövän vuonna 1981 [50], positiivinen suhde malarian ja joidenkin virusten liittyviä syöpiä (kuten Burkittin lymfooma ja kohdunkaulan syöpä) on hyvin dokumentoitu [51], [52]. Kuitenkin me raportoimme tässä, että malaria-infektion suppressoi merkittävästi LLC kasvun kautta induktion synnynnäisen ja adaptiivisen antitumor vasteita, joka tarjoaa uuden ymmärtämisen suhde malarian ja keuhkosyöpä. Ehdotamme, että kiireellinen tarve on tutkia mahdollisuutta käyttää geenin modifioitua heikennetty Plasmodium kuin keuhkosyöpä rokote vektori ja tunnistamaan tehoaine solukomponenttien malarialoisen immunoterapiaan keuhkosyöpä.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

eläinkoetta tilat hyväksyttiin Guangdongin maakunnan Department of Science and Technology, hyväksyntä tunnus on SYXK (Guangdong) 2005-0063, ja noudattanut ohjeita eläinten Care komitea, Guangzhou Institutes of biolääketieteen ja terveyden, Kiinan tiedeakatemia (Animal Welfare Assurance # A5748-01). Kaikki Leikkaus suoritettiin nukutuksessa, ja yritettiin minimoida eläinten kärsimyksiä.

Hiiret, soluja, ja loiset

Nainen 8- 10 viikkoa vanhoja C57BL /6-hiiriä ostettiin Vital River Experiment Animal Limited Company (Peking, Kiina) ja kasvanut Animal Center of Guangzhou Institutes of biolääketieteen ja terveyden mukaisesti opas hoito ja käyttö Laboratory Animals perustetun instituutin. Hiiren LLC solulinja ja YAC-1 lymfoomasoluilla saatiin Kiinan tiedeakatemia Cell Bank (Shanghai, Kiina). PcDNA3.1-plasmidi ilmentävät ihmisen mukiinia 1 (MUC1) [29], saatiin tri kesä-Key Chung (Seoul National University College of Medicine, Seoul, Korea), transfektoitiin stabiilisti LLC soluihin Lipofectamine (Invitrogen, Carlsbad, CA) [53] ja valitaan neomysiiniä (G418, Sigma, Saint Louis, MO, USA) tuottamaan LLC-MUC1 solulinjassa. MUC1 ekspressiotasoja vahvistettiin western blotting [53], [54]. Tappava

P. yoelii

17XNL kanta saatiin Malaria Research and Reference Reagent Resource Center (MR4).

Tumor Growth and Metastasis Inhibitiomääritvs

Voit muodostaa kasvaimia, C57BL /6-hiiret olivat s.c. pistetään 5 x 10

5 hiiren LLC soluja. Etäpesäke kehitys arvioitiin laskemalla yksittäisten etäpesäkenystyröiden. ***

P

0.001.

doi:10.1371/journal.pone.0024407.s005

(TIF)

Acknowledgments

We