Krooninen sairaus

tiivistelmä

Yksittäisissä peräsuolen syöpä (CRC),

BRAF

V600E

mutaatio liittyy vajaisiin mismatch korjaus (MMR) asema ja käänteisesti yhteydessä on KRAS mutaatioita. Toisin kuin puutteellinen MMR (dMMR) CRC, tiedot läsnäolosta

KRAS

onkogeeninen mutaatioita taitavia MMR (pMMR) CRC ja niiden suhteesta kasvaimen etenemistä on niukasti. Siksi tutki MMR asema yhdistettynä

KRAS

mutaatioita 913 kiinalaisten potilaiden ja korreloivat Saatu tieto kliinisiä ja patologisia piirteitä. MMR tila määritettiin perustuen havaitsemiseen MLH1, MSH2, MSH6 ja PMS2 ilme.

KRAS

mutaatio ja dMMR tila havaittiin 36,9% ja 7,5%: ssa tapauksista, vastaavasti. Neljä alatyyppejä määritettiin MMR ja

KRAS

mutaatiostatus:

KRAS

(+) /pMMR (34,0%),

KRAS

(+) /dMMR (2,9%)

KRAS

(-) /pMMR (58,5%) ja

KRAS

(-) /dMMR (4,6%). Prosentuaalisesti enemmän pMMR kasvainten

KRAS

mutaatio oli todennäköisimmin naisten (49,0%), proksimaalinen sijaitsee (45,5%), joka on mucinous histologian (38,4%), ja lisänneen imusolmuke etäpesäke (60.3 %), verrattuna pMMR tuumoreihin

BRAF

V600E

ja

KRAS

mutaatioita (36,0%, 29,3%, 29,4% ja 50,7%, tässä järjestyksessä; kaikki

P

0,01). Päinvastoin, verrattuna kanssa

KRAS

(-) /dMMR kasvaimia, potilaita, joilla

KRAS

(+) /dMMR kasvaimia osoitti tilastollisesti merkitseviä eroja sukupuolten, kasvaimen sijainti, pT syvyys hyökkäyksen, imusolmuke etäpesäke, pTNM vaiheessa ja histologinen. Tutkimus paljasti, että erityiset epidemiologiset ja ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia liittyy MMR asema ositettu

KRAS

mutaatio. Tieto MMR ja

KRAS

mutaatiostatus voi tehostaa molekyylitason patologinen lavastus CRC potilaiden ja metastasointiin CRC voidaan arvioida perustuen näiden yhdistelmä biomarkkereiden.

Citation: Li W, Zhi W Zou S, Qiu T, Ling Y, Shan L, et al. (2015) Erilliset kliinis Patterns of Mismatch Korjauksen tila kolorektaalisyövässä stratifioituna

KRAS

mutaatiot. PLoS ONE 10 (6): e0128202. doi: 10,1371 /journal.pone.0128202

Academic Editor: Hiromu Suzuki, Sapporo Medical University, Japani

vastaanotettu: 03 helmikuu 2015; Hyväksytty: 24 huhtikuu 2015; Julkaistu 4. kesäkuuta 2015

Copyright: © 2015 Li et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi.

Rahoitus: Tätä työtä tukivat avustusta nuorten Backbone ohjelma (ja Jianming Ying) of Cancer Hospital, LÄHETYKSET, Peking, Kiina, Natural Basic Research Program of China (973 ohjelma 2014CB542002 ), ja National Natural Science Foundation of China (81401984). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

peräsuolen syöpä (CRC) on heterogeeninen sairaus kehittyy erilaisia ​​geneettisiä väyliä ja tarkan arvion syövän perustuu kasvaimen ominaisuuksista sallisi henkilökohtainen syövän hoidossa [1,2,3]. Nykyisin anatominen ja patologinen lavastus on edelleen tarkin ennustaja potilaiden hoitotuloksiin [4]. Löytö ja validointi geenimerkit määrittämiseksi tehokkuuden metastasointiin CRC on siis tärkeä tutkimusala, jossa mahdollinen arvo määritellään potilasryhmässä suurimmassa tai pienin riski taudin uusiutumisen. Yksi lupaava molekyylimarkkereiden tutkittu CRC on läsnä kasvaimen mikrosatelliittien epävakaus (MSI) [5,6,7,8].

CRC on yleensä jaettu kahden tunnetun molekyyli polkuja, mukaan lukien kromosomaalisen epävakaus (CIN) reitin ja mikrosatelliittimerkki epävakaus (MSI) kautta. MSI on seurausta puutteellisesta DNA mismatch korjaus (dMMR) [9]. Ituradan mutaatio yhdessä MMR geenien, kuten

MLH1

,

MSH2

,

MSH6

tai

PMS2

, on syy dMMR potilailla jossa Lynch oireyhtymä, joka on perinnöllinen sairaus, joka lisää riskiä sairastua CRC [10,11]. Puutteellinen MMR havaitaan myös 10%: sta 20%: lla potilaista, joilla satunnaista CRC, joista suurin osa dMMR kasvaimista johtuvat hypermetylaatiota

MLH1

geenin promoottori, jossa

MSH2

ja

MSH6

kirjanpitoa varten pienempi prosenttiosuus [5]. Sporadic dMMR kasvaimia, mutta ei Lynch oireyhtymä, usein kuljettaa aktivoivaa somaattisen V600E mutaatio eksonissa 15

BRAF

onkogeeni [12,13,14]. Sekä satunnaista ja Lynch oireyhtymä liittyvä kasvaimista dMMR asema on selvä viittaavia tekijöitä, kuten etuoikeus sijainti proksimaalisessa paksusuolessa, näkyvä lymfosyyttinen infiltraatti, mucinous tai sinettisormus erilaistumista, ja yhdessä suotuisa ennuste. Saadut tiedot PETACC-3 trail kertoi, että kasvain yksilöt dMMR asema ovat yleisempiä vaiheen II tauti kuin vaiheessa III tauti (22%

vs

12%,

P

0,001) ja jonka osuus 3,5% IV vaiheessa kasvaimia. Nämä tulokset osoittavat, että dMMR kasvaimet ovat vähentynyt todennäköisyys etäpesäkkeitä ja ehdottaa suotuisamman kehityksen [9,15].

Ras /Raf /MEK /ERK kinaasikaskadin osallistuu valvontaan solujen proliferaatiota ja selviytyminen ja miehityksen vuonna CRC syöpäsoluissa [16].

KRAS

on mutatoitunut 35% -40% CRC ja mutaatio

KRAS

proto on varhainen tapahtuma kehittämisessä näiden syöpien, vahvaan vaikuttamiseen kasvuun koolonpolyyppien ja varhainen syövistä [17,18]. Kestävä todisteet viittaavat ennustearvo

KRAS

mutaatio metastaattisessa CRC hoidettu anti-EGFR täsmähoitoihin [19,20]. Kuitenkin kliininen merkitys

KRAS

mutaatio ennustetyövälineenä merkki on kiistanalainen. Joissakin tutkimuksissa raportoitu ole yhteyttä selviytymisen, kun taas toiset ehdottivat, että potilailla, joilla on

KRAS

mutatoitunut kasvaimet ovat huonommat tulos jostain mutaation alatyypin [21,22,23,24].

yhdistys MMR tila,

KRAS

ja

BRAF

mutaatioita hoitotulokseen usein dokumentoitu. Kuitenkin kehitys tarkempi ennuste hoitotulokseen käyttäen biomarkkeri yhdistelmiä edelleen arvoinen alue tutkimuksen. Lisäksi toisin kuin dMMR CRC, tiedot läsnäolosta

KRAS

onkogeeninen mutaatioita taitavia MMR (pMMR) CRC ja niiden suhteesta kasvaimen etenemistä on niukasti. Tutkimuksen tavoitteena oli arvioida ennustetekijöiden roolia MMR asema yhdistettynä

KRAS

mutaatioita 913 kiinalaisten potilaiden ja luonnehtivat määritetyn alatyypeistä suhteen viittaavia tekijöitä.

Materiaalit ja menetelmät

Tutkimuskanta

Potilaat, joilla resektoidun, histologisesti todistettu CRC olivat oikeutettuja. Kliinis kirjaa 913 potilasta vastaavien parafinoidut materiaaleista Molekyylien analyysiin otettiin takautuvasti kerättiin Patologian osasto, Cancer Hospital, Kiina Academy of Medical Sciences, Peking, Kiina vuodesta 2011 vuoteen 2013. Keskeinen patologian tarkastelu suoritettiin. Stratifikaatiotekijät sisältyvät: useita metastaattisen paikallisiin imusolmukkeisiin (N1: 1-3

vs

N2: ≥4), histologinen (G1-2: no /kohtuullisesti erilaistunut

vs

G3: huonosti eriytetty /erilaistumaton), kasvain halkaisija, pT luokittelu, histologinen alatyyppi, kasvaimen sijainti, kasvaimen koko sekä pTNM vaiheessa. PTNM pysähdyspaikan järjestelmä 7. painos AJCC syövän pysähdyspaikan käytettiin. Arviointi M vaiheessa pääasiassa mukaan vahvistivat patologiset tuloksia ja /tai radiologisten tietoja. Proksimaalinen kasvainpaikkaa mukana umpisuoli, nouseva, maksan taipeet ja poikittainen paksusuoli; distaalinen mittauksessa mukana pernan taipeet, laskeva ja sigmasuolessa. Mucinous erilaistumista kasvain määritelty läsnäolo altaat ekstrasellulaarisen Limaa sisältävien klustereita karsinomatooseja soluja. Kun 50% analysoiduista kasvaimen osoitti mucinous erilaistumista, kasvain oli luokiteltu mucinous karsinooma. Tutkimuksen hyväksyi instituutin Review Board of Cancer sairaalan, Kiina Academy of Medical Sciences. Kukin osallistuja allekirjoitti Institutional Review Board hyväksyi tietoista suostumusta mukaisesti nykyiset ohjeet.

KRAS

ja

BRAF

V600E

mutaation analyysi

arvio

KRAS

ja

BRAF

V600E mutaatiostatuksesta riippumatta suoritettiin Molecular Pathology laboratorio patologian osaston, Cancer Hospital, LÄHETYKSET käyttäen asianmukainen laadunvalvonta. Mutaatio tila määritettiin käyttäen genomista DNA: ta macrodissected formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut kasvainkudoksessa. Molemmat

KRAS

(kodonit 12 ja 13) ja

BRAF

(p.V600E) mutaatio suoritettiin käyttäen multiplex alleelispesifinen PCR-pohjainen määritys (ACCB, Peking, Kiina), yhdessä kanssa Stratagene Mx3000P (Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA), joka arvioi seitsemän erilaista mahdollisia mutaatioita

KRAS

kodoneja 12 ja 13 (

Gly12Ala

,

Gly12Asp

,

Gly12Arg

,

Gly12Cys

,

Gly12Ser

,

Gly12Val

, ja

Gly13Asp

). Kumpikaan

KRAS

eikä

BRAF

V600E

mutatoitunut kasvaimia nimettiin villityypin

KRAS

alatyyppiä.

DNA mismatch korjaus proteiinit ilmaisu

MMR-proteiinin (MLH1, PMS2, MSH2 ja MSH6) ilmentyminen suoritettiin rutiini käytäntö meidän patologinen osastolla. Kaikki näytteet värjättiin käytettäessä Autostaineriin (Autostaineriin Link 48, Dako, Tanska). Neljä pm paksu kudosleikkeiden poistettiin parafiini ksyleenillä, niihin lisätään lajitellut alkoholin ja pestä tislatulla vedellä. Ready-to-perusesiintymiä hiiren monoklonaalisia vasta-aineita sisällytetään MLH1 vasta-(ES05, ​​Dako) ja MSH2 vasta-(FE11, Dako). Ready-to-perusesiintymiä kani monoklonaalisia vasta sisälly MSH6 vasta-(EP49, Dako) ja PMS2 vasta-(EP51, Dako). MMR-proteiinin menetys määriteltiin puuttuminen tumavärjäystä kasvainsoluissa mutta positiivisia tumavärjäystä normaaleissa paksusuolen epiteelisoluissa ja lymfosyytit. Kasvaimet nimetty dMMR asema, jos menetys ainakin yksi MMR-proteiinia ei havaittu, ja pMMR jos kaikki proteiinit olivat ehjiä.

MLH1

promoottorin metylointianalyysi

Kaikki DNA näytteet olivat altistetaan bisulfiittimodifikaatio käyttäen EZ DNA metylointi Kit (Zymo Research, CA, USA) valmistajan mukaan ohjeita. Yksi ug genomista DNA: ta kustakin näytteestä oli bisulfiitin muunnetaan ja eluoitiin 18μl eluutiopuskuria. Metylaatiospesifinen PCR (MSP) suoritettiin kuten aiemmin on kuvattu [25]. Käytetyt alukkeet Tämän analyysin olivat: 5′-AAT TAA TAG GAA GAG CGG ATA GC-3 ’ja 5′-CCT CCC TAA AAC GAC TAC TAC CCG-3’ varten metyloitu

MLH1

promoottori ja 5 ’ -TGA ATT AAT AGG AAG AGT GGA TAG T-3 ’ja 5′-TCC CTC CCT AAA ACA ACT ACT ACC CA-3’ varten metyloimaton

MLH1

promoottori. MSP PCR spesifisyys vahvistettiin ne eivät vahvistavat ei-bisulfiitti-käsitellyn genomista DNA malleja, ja MSP-tuotteita useiden primaarikasvainten on vahvistettu suoralla sekvensoinnilla kanssa BigDye v3.1 (Applied Biosystems), mikä osoittaa, että meidän MSP-järjestelmä on erityinen.

tilastollinen

ensisijaisena tavoitteena oli selvittää erillisten viittaavia tekijöitä liittyy MMR asema ja

KRAS

mutaatio. Logistinen regressio malleja käytetään havaitsemaan yhdistyksille näiden ominaisuuksien kanssa kunkin

KRAS

mutaatioita ja MMR tila. Kruskal-Wallis ja χ

2 (tai Fisherin tarkkaa) testejä käytettiin vertailla jatkuvia ja kategorisen muuttujia, vastaavasti. Univariate logistinen regressio malleja käytettiin edelleen luokitella ja määritellä lopulliset covariables käytetty monimuuttuja analyysiä. Tilastolliset testit olivat kaksipuolisia, ja

P

arvot 0,05 pidettiin merkittävinä. Monimuuttujille, Bonferronin-oikaistu

P

arvoja raportoitu eroja

KRAS

mutaatio ja MMR tila (α = 0,05 /6). Tilastollisesti merkitsevä ominaisuudet perustuvat yhden muuttujan malleja sisällytettiin monimuuttujasäädin mallien avulla vaiheittain ja taaksepäin malli valintamenettelyt. Kerroin tunnusluvut ja niiden 95%: n luottamusväli laskettiin. Tilastot suoritettiin SPSS ohjelmistoa (versio 16.0 SPSS, Chicago, IL, USA).

Tulokset

Yhteensä on 913 tapausta arvioitiin immunohistokemiallisesti (IHC) läsnäolon tai puuttuessa MLH1, MSH2, MSH6 ja PMS2 proteiinin ilmentymiseen. Niistä 69 tapausta (69/913, 7,5%) kanssa dMMR, 49 oli puuttuminen proteiinin ilmaisun MLH1 /PMS2, 9 MSH2 /MSH6, 5 MSH6 ja 6 PMS2 yksin. Jotta selvä Lynch oireyhtymä liittyviä CRC satunnaisessa MSI syövät, suoritimme

MLH1

promoottori metylaatio tutkimus. Niistä 49 tapausta, joiden puuttuminen proteiinin ilmaisun MLH1 /PMS2, 32,6% (16/49) tapaukset oli

MLH1

promoottori metylaatio. Niistä,

KRAS

mutaatioita

MLH1

metyloitu satunnaista MSI kasvaimet olivat 25% (4/16) ja mutaation taajuus oli paljon pienempi kuin yleisen mutaatioita, 36,9% (337/913 ) (kuvio 1).

Patient ja kasvainten ominaisuuksiin nähden MMR tila on esitetty taulukossa 1. keskimääräinen ikä esitys dMMR kasvainten oli 53,3 ± 12,7 vuotta, mikä oli nuorempi kuin of pMMR kasvaimet (

P

= 0,003). Kaiken kasvaimista dMMR oli useammin sijoitettu proksimaaliseen puolella paksusuolen (72,4%

vs

18,9%,

P

0,0001) ja olivat todennäköisemmin huonosti eriytetty (34,8 %

vs

18,0%,

P

0,001), verrattuna pMMR kasvaimia. Lisäksi kasvaimista dMMR olivat myös merkitsevästi yhteydessä mucinous histologinen alatyyppi (63,8%

vs

32,7%,

P

0,0001) ja vähensi imusolmuke etäpesäke (39,1%

vs

54,6%,

P

= 0,01). Ei ollut tilastollisesti merkitseviä eroja sukupuolten ja pT vaiheessa.

Mutaatiot

KRAS

ja

BRAF

V600E

olivat keskenään yksinomainen. Oli 6 tapauksissa dMMR kasvaimia, jotka tunsivat

BRAF

V600E

mutaatioita ja nämä tapaukset jätettiin pois analyysistä.

KRAS

mutaatiot kodoneissa 12 ja 13 havaittiin 36,9% (337/913) kaikista kasvaimista. Korkeampi taajuus

KRAS

mutaatioita havaittiin dMMR kasvaimissa (27/69, 39,1%) verrattuna pMMR kasvaimia (310/844, 36,7%), vaikka tämä ero ei ollut tilastollisesti merkitsevä. Niistä 27 dMMR ja

KRAS

-mutated kasvaimia, 16 tapausta määriteltiin menetys MLH1 /PMS2, 7 MSH2 /MSH6 ja 4 PMS2 yksin.

Patient ja kasvainten ominaisuuksiin nähden sekä MMR ja

KRAS

mutaatiostatus oli koottu taulukkoon 2. Niistä 913 tapauksissa, joissa sekä MMR ja

KRAS

mutaatiostatus määriteltiin, 27 (2,9%) tapauksista, joissa dMMR olivat

KRAS

(+) ja 42 (4,6%) oli

KRAS

(-), kun taas 310 (34,0%) tapauksista, joissa pMMR olivat

KRAS

(+) ja 534 (58,5%) oli

KRAS

(-). Näistä neljä ryhmää, havaittu merkittäviä eroja sukupuolten {

KRAS

(+) /dMMR tapaukset todennäköisemmin mies,

P

0,0001}, ikä {

KRAS

(+) /dMMR todennäköisemmin nuorempi ikä diagnoosin taudista,

P

= 0,0001}, arvosana {

KRAS

( -) /dMMR todennäköisemmin alemman luokan sairaus,

P

= 0,002}, kasvaimen sijainti {

KRAS

(+) ja

KRAS

(-) /dMMR tapausten todennäköisemmin sijaitsee proksimaalisessa paksusuolessa,

P

0,0001} ja imusolmuke etäpesäke {

KRAS

(+) /pMMR tapaukset todennäköisemmin korkeampi pN vaiheessa

P

= 0,004}. Kuitenkin ei havaittu eroja siinä pT vaiheessa näistä neljään ryhmään.

Kun verrattuna kanssa

KRAS

(-) /pMMR kasvaimia, potilaita, joilla

KRAS

(+) /pMMR kasvaimet olivat todennäköisimmin naisten (49,0%

vs

36,0%; OR = 1,85; 95% CI = 1,39-2,46;

P

0,0001) , jotka proksimaaliseen sijaitsee (45,5%

vs

29,3%; OR = 2,00; 95% CI = 1,30-3,08;

P

= 0,002), saada mucinous histologian (38,4%

vs

29,4%; OR = 1,50; 95% CI = 1,11-2,01;

P

= 0,007), ja nousseen imusolmuke etäpesäke (60,3%

vs

50,7 %; OR = 1,48; 95% CI = 1,11-1,96;

P

= 0,007) (taulukko 3). Päinvastoin, verrattuna kanssa

KRAS

(-) /dMMR kasvaimia, potilaita, joilla

KRAS

(+) /dMMR kasvaimia osoitti tilastollisesti merkitseviä eroja sukupuolten, kasvaimen sijainti, pT syvyys hyökkäyksen, imusolmuke etäpesäke, pTNM vaiheessa ja histologinen. Kuitenkin keskimääräinen ikä esitys

KRAS

(+) /dMMR kasvaimissa oli 51.051.051.0 esitys s, n, kuin

KRAS

(-) /dMMR kasvaimet (

P

= 0,001).

analyysi käyttämällä monimuuttuja logistista regressiota malleja, me tarkistetaan ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia taulukossa 4. Kuten on esitetty multivariably, kasvaimista

KRAS

(+ ) /pMMR tilastollisesti liittyy proksimaaliseen sijainti, mucinous histologian ja lisääntynyt imusolmuke etäpesäke.

keskustelu

määrittely kasvain alatyyppejä CRC perustuvat reittiin perustuva muutoksia on mahdollista parantaa ennustettavuutta sekä opas täsmähoitoihin. Distinct kliiniset ja patologiset ominaisuudet CRC eri MMR tila on jo pitkään tunnistettu [6,26,27,28]. Tässä tutkimuksessa osoitimme molekyyli- ja kliinis ominaisuudet pMMR ja dMMR kasvaimia ositettu

KRAS

mutaatiostatusta suuren ikäluokan peräkkäisten Kiinan CRC potilaille. Taitavan MMR kasvaimia, jotka oli mutatoitunut varten

KRAS

ja

BRAF

V600E

olivat yleisin alatyyppi ja edusti 58,5% (534/913) Tutkimuksemme kohortin . Tähän verrattuna alatyypin, potilailla, joilla on

KRAS

(+) /pMMR kasvaimet olivat yleisempiä proksimaalisessa paksusuolessa ja saada mucinous histologian. Mikä tärkeintä, potilaat, joilla

KRAS

(+) /pMMR kasvaimissa oli kohonnut imusolmuke etäpesäke joukossa neljä alatyyppiä ja saattaa olla huonompi eloonjäämisaste.

yhdenmukainen aiempien havaintojen meidän tiedot viittaavat siihen, että kasvaimia jossa dMMR asema usein on huono erilaistuminen, mucinous solutyyppi, proksimaalinen sijainti ja alennettu imusolmuke etäpesäke. Sen lisäksi tehtävä tunnistaa ainutlaatuisia patologisia piirteitä CRC, dMMR asema on myös käytetty ennustetyövälineenä merkki ja ohjausta Fluorourasiilia kemoterapiaa liitännäishoitona [8]. Viimeaikaiset todisteet osoittivat, että CRC voitaisiin luokitella viiteen ennalta määritellyissä alatyyppiä käyttäen biomarkkereiden yhdistelmää

KRAS

ja

BRAF

V600E

mutaatioita, MMR tila ja

MLH1

metylaatio tilastollisesti merkittäviä eroja viittaavia tekijöitä ja potilaan eloonjäämisprosentti [29]. Siten biomarkkereiden perustuva luokittelija antaa tärkeitä varoituksia syntymässä olevista CRC, joka vaikuttaa potilaan hoidossa. Todisteet muista raporteista tukevat ajatusta, että

KRAS

mutaatio ja MMR tila geneettisiä markkereita, jotka syntyvät varhain ja pysyy biologisesti relevantteja kaikissa vaiheissa syövän etenemisen [30,31]. Lisäksi

KRAS

mutaatioita löydettiin primaarikasvaimille säilyvät toistuminen ja etäpesäkkeitä. Näin ollen arvioimme ennalta määritellyn kasvaimen alatyypeistä suhteen viittaavia tekijöitä vuonna biomarkkereiden yhdistelmiä

KRAS

mutaatioita ja MMR tila.

puutteellinen MMR syöpiä yleensä peräisin proksimaalisessa paksusuolessa [15]. Kuten odotettua, suurin osa dMMR kasvaimia tässä tutkimuksessa (72,4%) oli proksimaalisesta paksusuolen ja tämä jakauma ei vaikuta

KRAS

mutaatioita. Vaikka suurin osa pMMR kasvaimet eivät todennäköisesti proksimaaliseen sijoitettu, on mielenkiintoista, että kun pMMR kasvaimia ositettu

KRAS

mutaatioita,

KRAS

mutantti kasvaimia (20,9% proksimaalinen) olivat todennäköisesti on proksimaalinen verrattuna

KRAS

(-) /pMMR kasvaimet (14,7% proksimaalinen). Perinteisesti paksusuolen syövät kehitetty proksimaalisessa suolen usein luonut ympäristön, jossa CIMP (CpG Island Methylator Fenotyyppikuvaus) on todennäköisempää, ja tämä synergoi

BRAF

mutaatio mahdollistaa etenemisen sahalaitaiset polyyppien [32]. On kuitenkin todisteita ehdotti, että

KRAS

mutaatioita voisi löytyä myös CIMP korkea ja CIMP matala kasvaimia, jotka sijaitsevat usein proksimaalisessa paksusuolessa [33]. Tämä osoitti, että oli kattavampi mekanismit sijainnin paksusuolensyöpä ja Mutaatioiden. Mucinous karsinooma on diagnosoitu, kun vähintään 50% tuumorin käsittää eritys- musiini ja liittyy usein dMMR asema ja hammastettu adenokarsinooma [34]. Tämä on johdonmukainen toteamisesta dMMR kasvaimia osoitti enemmän mucinous erilaistumista kuin pMMR kasvaimet (63,8%

vs

32,7%). Kuitenkin, kun stratifioituna

KRAS

mutaatiostatus, havaitsimme, että pMMR kasvaimista mutantti

KRAS

fenotyyppi esiintyi enemmän mucinous eriyttäminen kuin villityypin

KRAS

alatyyppi (38,4%

vs

29,4%). Tämä on suurelta osin, koska

KRAS

mutaatio ei liity ainoastaan ​​tavanomaisiin adenoomia vaan liittyy myös sahalaitainen adenoomia kehittämisessä paksusuolen syövän [35].

Merkittävä assosioitunut läsnäolo imusolmukemetastaaseja ja pMMR kasvaimia ositettu

KRAS

mutaatiostatus. Meidän havainnot paljastivat, että pMMR kasvaimista

KRAS

mutaatio osoitti positiivisempi imusolmukkeiden ja pTNM III-IV taudin vaiheesta kuin kasvainten

KRAS

(-) /pMMR tila. Tämä on sopusoinnussa havaintojen pienemmän raportin, joka osoitti, että tiheys

KRAS

mutaatioita oli suurempi pMMR imusolmuke kasvaimissa verrattuna pMMR imusolmuke syöpäkasvain [36,37]. Tuloksemme osoittavat, että suurin osa pMMR kasvainten tarvitaan

KRAS

mutaatio voi metastasoitua ja tämä aktivointi oli ratkaiseva neoplastisten solujen hankkia invasiivisia mahdollisia. Mutaatiot

KRAS

onkogeenin johtaa muutoksiin koodatussa aminohappoja vieressä GTP sitova tasku ja vähensi GTPaasi aktiivisuutta

KRAS

proteiinia jälkeen guaniininukleotidiä aktivoiva proteiini (GAP) sitova [38]. Molemmat

in vitro

ja

in vivo

kokeellisissa malleissa, transfektoimiseksi mutatoitunut, konstitutiivisesti aktiivisia muotoja

KRAS

onkogeeni osaksi aiemmin noncancerous solut voivat johtaa invasiivisia ja metastaattisen fenotyyppejä. Kohdunulkoinen ilmaus aktiivinen

KRAS

vuonna hiiren NIH 3T3 fibroblastisolulinja lisännyt hyökkäyksen ja hankinta metastaattisen ominaisuuksista [39]. Käyttämällä häntälaskimoinjektio transformoitujen solujen,

in vivo

mallien havaittiin maksan ja keuhkojen etäpesäke [40]. Sen lisäksi, että todisteita on saatu solusta ja eläinkokeissa, kliinisissä tutkimuksissa on myös näkyvissä merkittävää imusolmuke etäpesäke

KRAS

(+) /pMMR kasvaimissa [36,41]. Geeniekspressioprofilointi paljastaa, että geenit involoving epiteelin mesenkymaalitransitioon ja matriisi remodeling, joka voi helpottaa kasvaimen invaasio ja etäpesäkkeiden ovat säädellään ylöspäin mutantti

KRAS

-pMMR kasvaimissa [42]. Näin ollen,

KRAS

onkogeeninen aktivointi osoitettiin olevan tärkeä välittäjä kasvainsolujen invaasion ja metastaasin in pMMR kasvaimia.

taajuus

KRAS

mutaatioita Lynch oireyhtymä liittyviä CRC ja satunnaista CRC on lähes sama. Kuitenkin

KRAS

mutaatiot ovat huomattavasti yleisempiä Lynch oireyhtymä liittyvien CRC kuin että satunnaista MSI-H CRC [37,43]. Lynch oireyhtymä liittyvät CRC yleensä varhain alkanut ja proksimaalisen sijainti. Joten tämä saattaa selittää nuorempia ja proksimaalinen sijainti havaittavissa

KRAS

+ /MSI kasvaimia. Huolimatta näistä myönteisistä tuloksista, tutkimuksemme on joitakin rajoituksia. Ensinnäkin, koska tämä on jälkikäteen tutkia, se on vaikea kerätä verta tai sylkinäyte potilaista havaita ituradan mutaatioiden edelleen erottaa Lynch oireyhtymä liittyvän CRC satunnaista syöpään. Joten emme voineet laskea tarkkaa taajuus

KRAS

mutaatioita perinnöllinen CRC, mutta se on varma, että Lynch oireyhtymä liittyvien CRC tutkimuksessamme osoitti ensisijaisesti

KRAS

mutaatioita. Toiseksi, emme tutkia muita harvinaisempia mutaatioiden

KRAS

kodonien 61, 117 ja 146, joka myös osaltaan kasvaimia synnyttävän transformaatio syöpäsoluja.

Tämä tutkimus viittaa siihen, että erityisiä epidemiologisiin ja ennusteeseen viittaavia ominaisuudet liittyvät MMR asema ositettu

KRAS

mutaatio CRC. Tieto MMR ja

KRAS

mutaatiostatus voi tehostaa molekyylitason patologinen lavastus CRC potilaiden ja metastasointiin voidaan myös arvioida perustuu näiden yhdistelmä biomarkkereita. Validointi geneettisiä biomarkkereiden avulla voidaan tarkentaa hoitopäätökset yksittäisten potilaiden perustuvat tuumoribiologiassa. Tärkeää on, tämä voi myös auttaa kehittämään uusia terapeuttisia kohteita tukea hoitoon näiden aggressiivinen syöpien.

Kiitokset

Kiitämme kaikkia tutkimuksessa osallistujat patologian osaston heidän hankerahoitus. Tätä työtä tukivat avustusta nuorten Backbone ohjelma (ja Jianming Ying) of Cancer Hospital, LÄHETYKSET, Peking, Kiina, Natural Basic Research Program of China (973 ohjelma 2014CB542002) ja National Natural Science Foundation of China (81401984).