PLoS ONE: Comparative Phytochemical analyysi eteeriset öljyt eri Biological osat Artemisia herba alba ja niiden sytotoksinen vaikutus syövän Cells

tiivistelmä

Tarkoitus

Suorittaminen kemiallinen koostumus ja antiproliferatiivisia vaikutuksia vastaan syöpäsoluja eri biologisista osista

Artemisia herba alba

.

Methods

öljyt tutkittiin kaasukromatografialla kytketty massaspektrometriaa (GC-MS) ja niiden kasvaimen kasvua estävä aktiivisuus testattiin P815 mastosytooma ja BSR munuaisten sinoomasolulinjoja; myös, jotta voidaan arvioida vaikutusta normaalin ihmisen soluissa, öljyjä testattiin perifeerisen veren mononukleaaristen solujen PBMC.

Tulokset

eteeriset öljyt lehdistä ja maanpäällisissä osissa (sekoitus capitulum ja lehdet) pääosin säveltänyt happipitoista seskviterpeenien 39.89% ja 46.15% vastaavasti; capitulum öljy sisälsi olennaisesti monoterpeenin (22,86%) ja monosyklinen monoterpeenin (21,48%); esterit muodosti suurempaa osaa (62,8%) varren öljy. Eteeriset öljyt eri biologisten osien tutkittu osoittanut ero antiproliferatiivista aktiivisuutta P815 ja BSR syöpäsolujen; P815-solut ovat herkin sytotoksista vaikutusta. Lehdet ja capitulum eteeriset öljyt ovat aktiivisempia kuin maanpäällisissä osissa. Kiinnostavaa kyllä, ei sytotoksista vaikutusta tällaisten rasvahappojen havaittiin perifeerisen veren mononukleaarisissa soluissa.

Johtopäätös

Tuloksemme osoittivat, että kemiallinen koostumus vaihtelevuus öljyjen riippuu luonteesta kasvitieteellisen osien

Artemisia herba alba

. Lisäksi olemme osoittaneet, että ero sytotoksinen vaikutus ei riipu vain eteeriset öljyt pitoisuus, vaan myös kohdesoluihin ja kasvit osat eteerisiä öljyjä käytetään.

Citation: Tilaoui M, Ait Mouse H, Jaafari A, Zyad A (2015) Comparative Phytochemical analyysi eteeriset öljyt eri Biological osat

Artemisia herba alba

ja niiden sytotoksinen vaikutus syöpäsoluihin. PLoS ONE 10 (7): e0131799. doi: 10,1371 /journal.pone.0131799

Editor: Rajesh Agarwal, University of Colorado Denver, Yhdysvallat |

vastaanotettu: 04 elokuu 2014; Hyväksytty: 7 kesäkuu 2015; Julkaistu: 21 heinäkuu 2015

Copyright: © 2015 Tilaoui et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi.

Rahoitus: rahoittivat avustusta CNRST (PROTARSIII, D61 /07), Rabat, Marokko.

Kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, että mitään kilpailevia etuja olemassa.

Johdanto

Artemisia Herba-alba

(Asteraceae) on vihertävän hopea monivuotinen kääpiö pensas kasvaa kuivilla ja puolikuivilla ilmastossa. Se tapahtuu läpi Välimeren alueella Pohjois-Afrikassa, Espanjassa, aavikot Siinain niemimaan, Lähi-idässä, Northwestern Himalajalla, ja Intiassa.

Artemisia herba alba

Asso (aavikko koiruoho, armoise blanche (Fr.), Chich (Arab.) On kääpiö pensas nopeaa kasvua kuivassa ja lämpimässä ilmastossa ja mutainen alueilla [1] kantavassa eri lajien ovat morfologisesti eroavat toisistaan ​​riippuen maantieteellisestä, ympäristö- ja ilmasto-olosuhteissa. kasvi on vihreä vaaleanvihreä, jossa on vahva, kestävä juuret. Kukinta aika ja sadonkorjuu on noin touko /kesäkuussa ja jatkuu lokakuuhun saakka joillakin alueilla [2] . Tämä kasvi käytetään aromia ja lääkkeenä yrtti hoitoon vilustuminen, yskä, suoliston häiriöt ja kuin diabeteslääke [3, 4]. Tutkimukset lääkinnällisiä ominaisuuksia

Artemisia herba alba

otteita raportoitu diabeteksen, leishmanicidal, antibakteerinen, ja sienilääkkeiden ominaisuuksia [5, 6]. viime vuosikymmenien aikana, tutkimukset

Artemisia herba alba

keskittyivät sen eteeriset öljyt. niiden kokoonpano läpi maailman paljasti korkeatasoisen polymorfismi ja johti määritelmän useita chemotypes. Koska niiden merkitys tuoksu teollisuudessa, lukuisia tutkimuksia

Artemisia herba alba

eteeriset öljyt on julkaistu [7, 8]. Kaksi arviot ovat myös saatavilla [9, 10].

Espanjassa eteerinen öljy

Artemisia herba alba

[8, 11] osoittaa, että monoterpeenien hiilivedyt ja happipitoista monoterpeenin ovat runsain luurangot, mutta suuria määriä seskviterpeenien myös havaittiin joissakin populaatioissa. Kamferi, 1,8-sineoli,

p

-cymene ja davanone olivat suuria kemiallisia yhdisteitä esiintyy. Kaksi öljytyyppejä havaittiin kasveja viljellään Israelissa ja Sinai kuin kineoli-thujane bornaani tyypin ja pinaanista tyyppinen monoterpeeni luurangot [8].

Jordaniassa, säännöllinen monoterpeenien olivat hallitseva ja pääkomponenttien olivat α- ja β-thujones luokittelemalla

Artemisia herba alba

kuin on tujonia kemotyyppi [12]. Marokossa, kuusitoista chemotypes löydettiin, ja kaksitoista heistä ovat monoterpeeneitä pääkomponentit eteerisiä öljyjä. Loput neljä chemotypes, on sesquiterpene luurankoja kuin suurempaa osaa. Tutkimukset raportoitu mitään korrelaatiota chemotypes ja maantieteellinen jakauma [13].

Algerian eteerinen öljy, monoterpeenien olivat tärkeimmät komponentit, lähinnä kamferi, α- ja β-thujones, 1,8-kineolin ja chrysanthenyl johdannaiset [2 , 14]. Tunisian öljy, happipitoista monoterpeenien todettiin pääkomponenttien

Artemisia herba alba

öljy uutetaan maanpäällisiä osia [15, 16].

Seuraavassa käsitellään kemiallinen koostumus ja biologinen aktiivisuus vastaan ​​syöpäsolun riviä eteeriset öljyt, saadut eri biologisista osista

Artemisia herba alba

kerätään Er-Rachidiya (Keski- idässä Marokon).

Materiaalit ja menetelmät

Ethics selvitys

Artemisia herba alba

Asso tehtaan korjattu Imilchil, Errachidia alueella keskisessä Itä Marokon (W 5 ° 39’25.43 ”- N 32 ° 12’15.059”) kesäkuussa 2007 (ei erityistä luvat tarvitaan kuvatun kentän tutkimuksia tai keräämiseen kasviaineisto) kantavassa kenttätutkimuksia ei liity uhanalaisten tai suojeltujen.

Ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisia soluja (PBMC): Tällä verinäytteet kerättiin laatijat käsikirjoitus (Mounir Tilaoui, Hassan Ait hiiri, Abdeslam Jaafari ja Abdelmajid Zyad) lääkärin valvonnassa. Hyväksymä Sultan Moulay Slimane University komitea, akkreditointia nro 2008 /01-2014. Kirjoittajat saa kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen päässä verenluovuttajien.

Kasviaines

Artemisia herba alba

Asso tehtaan korjattu Imilchil, Errachidia piiri, keskeinen itäisen alueen Marokko ( W 5 ° 39 ’25.43 ”- N 32 ° 12’ 15,059”) kesäkuussa 2007 (Ei erityistä luvat tarvitaan kuvatun kentän tutkimuksia tai keräämiseen kasviaineisto). Koko antenni osat (sekoitus capitulum ja lehdet) eristetty lehdet, capitulum (kukka pää) tai varret olivat varjoa kuivattiin huoneenlämpötilassa ilmanvaihto. Saatu kuiva eristettiin erikseen kasvi, jauhettu ja välittömästi hydrodistilled saada eteerisiä öljyjä.

Kaasukromatografia ja massa-analyysiä varten (GC-MS) B

Analyyttinen kaasukromatografialla suoritettiin käyttäen a Trace GC ULTRA kaasukromatografia järjestelmä varustettu VB-5 (metyylipolysiloksaania 5% of fenyyli) sarakkeen (30 mx 0,25 mm, 0,25 pm kalvon paksuus). Kantokaasun oli helium, jonka virtausnopeus on 1,4 ml /min. Kolonnin lämpötila oli alun perin pidettiin 40 ° C: ssa 2 min, ja sitten nostetaan asteittain 300 ° C: seen nopeudella 20 ° C /min. Näytteet (1 ui, sopivasti laimennettua etyyliasetaattiin) injektoitiin 220 ° C: ssa.

Massaspektrometria-analyysi suoritettiin sijoitukset

Polaris Q MS

kytketty GC ULTRA ionisen trap massan ilmaisin käyttö- että EI-tilassa (70 eV). Komponentit tunnistus tehtiin GC ja GC-MS (mukaan pirstoutuminen kuvioita) ja käyttämällä NIST (National Institute of Standards and Technology) MS haku tietokannasta.

Soluviljely

Hiiren mastosytoomasolulinja linja (P815, ATCC: TIB64) ja munuaisten sinoomasolulinjoja hamstereita (BSR, ATCC: CCL10) oli ystävällisesti lahjoittanut laboratoriossa tohtori Michel Lepoivre, 841 Institute of Biochemistry, University of Paris XI, Ranska. Solulinjoja viljeltiin DMEM: ssä (Dulbeccon modifioitu Eaglen väliaine), jota oli täydennetty 10% lämmön avulla inaktivoitua sikiövasikan seerumia (Gibco BRL, Cergy Pontoise, Ranska), penisilliiniä G-streptomysiiniä (1%), ja 0,2%: isella natriumbikarbonaatilla (Sigma) 37 ° C: ssa kostutetussa ilmakehässä, joka sisälsi 5% CO

2.

Sytotoksisuusmääritvs

alkaa tettäessä 2 x 10

5 P815 solua /ml ja 4,8 x 10

4 BSR solua /ml käytettiin räjähdysmäinen kasvuvaiheen. Cellular elinkelpoisuus määritettiin MTT väheneminen määrityksessä, jossa käytettiin (3- [4,5-dimetyylitiatsol-2-yyli] -2,5-difenyylitetratsoliumbromidi, MTT) [17]. BSR ja P815 solulinjoja kerättiin käynnistymästä kulttuurien eksponentiaalisen kasvuvaiheen. Jälkeen fosfaattipuskurisuolaliuosta (PBS) pesun jälkeen korjatut solut kaadettiin tasapohjaisille 96-kuoppaisille mikrotiitterilevyille, jotka sisälsivät 100 ui täydellistä alustaa kuoppaa kohti. Sitten soluja käsiteltiin eteeriset öljyt liuotettiin dimetyylisulfoksidiin (DMSO) ja sopivat pitoisuudet (kaikki eteeriset öljyt tutkittu tässä jotka liuotetaan DMSO: hon, ovat liukoisia viljelemällä media). Kontrollisoluja käsiteltiin DMSO: ssa, että sen lopulliseksi pitoisuudeksi 0, 5% (v /v). Sen jälkeen, kun 48-tunnin inkuboinnin kostutetussa atmosfäärissä 37 ° C: ssa, 5% CO

2, 20 ui MTT-liuosta (5 mg /ml PBS: ssä) lisättiin. Kun 4-tunnin inkuboinnin samoissa olosuhteissa, lohkaisu MTT formatsaaniksi metabolisesti aktiiviset solut kvantitoitiin skannaamalla levyt 540 ja 630 nm käyttäen Multiskan EX laitteen. Solujen elinkelpoisuus laskettiin kaavalla: Jos OD: optinen tiheys, Controlled solut: DMSO + soluja, OD eteeriset öljyt: käsitellyissä soluissa.

Vaikutus ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisissa soluissa (PBMC: t) B-

Tämä koe toteutettiin, jotta voidaan arvioida vaikutus eteeristen öljyjen ihmisen normaaleissa soluissa käyttämällä MTT kolorimetristä määritystä edellä kuvatulla tavalla. Elinkyky PBMC-solujen arvioitiin trypaani bleu eksluusio käyttäen Malassez hemosytometriä. Cell pitoisuudet määritettiin solut sekoitettiin 0,2% trypaanisinisellä ja laskettiin mikroskooppisesti kanssa Malasez hemosytometriä käyttäen seuraavaa menetelmää: 10 pl solususpensiota sekoitettiin 40 ui 0,2% trypaanisinisellä ja 10 ui samaa seos siirrettiin Malassez hemosytometriä. Prosenttiosuus solujen elinkykyisyys laskettiin seuraavan kaavan mukaan:% solujen elinkelpoisuuden = elävien solujen (värjäämätön) /Solujen kokonaismäärä x 100. Solujen elinkelpoisuus ennen sytotoksisuuden kokeessa oli yli 98%.

eristämiseksi PBMC: t, verinäytteet kerättiin terveiltä luovuttajilta heparinisoituihin putkiin. Verinäyte laimennettiin samalla tilavuudella PBS: ää. Sen jälkeen laimennettu verinäyte oli huolellisesti kerroksittain Ficoll-hypaque (Amersham Pharmacia Biotech AB). Seos sentrifugoitiin alla klo 2000tr /mn 30 min. Häiriötön lymfosyytti kerros siirrettiin varovasti ulos. Lymfosyytit pestiin kahdesti fosfaattipuskuroidulla liuoksella (PBS) ja suspendoitiin uudelleen DMEM. Eteeriset öljyt lisättiin samoina pitoisuuksina kykenee indusoimaan sytotoksista aktiivisuutta kasvainsoluja vastaan ​​(P815 ja BSR). PBMC: t ympättiin tiheydellä (1 x 10

5 solua /ml) 96-kuoppaisilla levyillä.

Tilastollinen analyysi

Kaikki kokeet suoritettiin kolmeen rinnakkaiseen. Tiedot ilmoitetaan keskiarvona ± S.D. n = 3. merkitys erot arvioitiin käyttäen Student: n pariksi t-testiä. Ero oli tilastollisesti merkitsevä, kun p-arvo oli alle 0,05. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen STATISTICA ohjelmistoa.

Tulokset ja keskustelu

kemiallinen koostumus eteerinen öljy

kemiallinen koostumus eteerinen öljy tutkittiin käyttäen sekä GC ja GC -MS tekniikoita (kuvio 1). Taulukossa 1 luetellaan osiin, jotka eteerinen öljy eri osien

Artemisia herba alba

(capitulum, lehdet, antenni osat ja varret). Taulukko 2 osoittaa, että eteerinen öljy lähtee koostuu pääasiassa happipitoista seskviterpeenien (39,89%), seskviterpeenien (29,04%) ja estereitä (23.97%). Monoterpeenit kanssa tujonia luuranko (1,24%) ja monoterpeenin kanssa pinaanista luuranko (4,48%) edustaa alhainen sisällön. Näitä yhdisteitä esittävät eri pitoisuuksina muualla kasvin tutkittu: β- tujonia (1,24%) vuonna lehdet ja (6,14%) vuonna antenni osa, bisabolon oksidi (17,55) antenni osat ja 10,27% vuonna lehtiä. Kuitenkin (+) 2,3,6,7-tetrametyyli, 4,4aα, 5,8,8aβ, 9β, 9aa, 10,10aα-decahydroanthracen-9-oli ja β-Guaiene puuttuvat muualla kasvi. Vuonna varret eteerinen öljy, esterit muodostavat suurempaa osaa 62,8%. Toisaalta, eteerinen öljy capitulum on suhteellisen runsaasti terpenoids verrattuna muihin biologisiin kasvin osia; happipitoista monoterpeenin ja monosyklisistä monoterpeenin ovat runsain kanssa 22.86% ja 21.48% vastaavasti. Muita tärkeitä yhdisteitä edustaa seskviterpeenien (12,92%), Yhdistyneessä monoterpeenien kanssa thujane luuranko (10,91%), ja monoterpeenien luuranko pinaanista (9,24%), kun taas monoterpeenien kanssa bornaani luuranko löydettiin pieni prosenttiosuus (3,31%).

V: lehtiä, B: capitulum, C: Varret, D: Aerial osat (seos lehdet ja capitulum).

eteerinen öljy uutetaan antenni osat (sekoitus capitulum ja lehdet) on hyvin runsaasti happipitoista seskviterpeenien (46.15%) ja pinaanista luuranko (26.02%), muita aineosia ovat edustajalle monoterpeeni luuranko thujane (10,78%), monoterpeenien kanssa bornaani luuranko (8,98%) ja monosyklinen monoterpeenin (6,59%). Tunisian

Artemisia herba alba

eteerinen öljy, happipitoista monoterpeenien ja happipitoista seskviterpeeneistä edustavat suurinta osa öljystä [18].

Tujonit ilmoitettiin pääkomponentti eteerinen öljy Tunisiasta ( 64%), kun taas se oli poissa Espanjassa kaikkien öljyjen tutkittu [8, 11]. Tässä tutkimuksessa tujonia pitoisuus oli 1,04%. Aiemmissa tutkimuksissa Benjilali ja Richard tunnistettu seitsemän chemotypes korkea pitoisuus vaihtelee välillä 34% ja 94% α ja β tujonia in

Artemisia herba alba

eteeriset öljyt kerätty eri Marokon alueilla [19, 21]. Myös Algeriassa, α tujonia ja β tujonia luonnehdittiin tärkeimpien komponenttien tutkituilla öljy [22,23]. Meidän tutkimuksessa, β tujonia pitoisuus oli 6,14%, mutta α tujonia ei havaittu maanpäällisten osien öljy. Pohjalta saatujen tulosten Ouyahya et al [10] kolmen Marokon Artemisia öljyt (

Artemisia Negri

,

Artemisia mesatlantica

ja

Artemisia herba alba

) siltä että prosentuaalinen koostumus α ja β tujonia vaihtelevat maantieteellisen kasvupaikalle, kausi, ympäristö- ja ilmasto-olosuhteissa.

on raportoitu lähes kaikissa näytteissä kuvattu kirjallisuudessa että kineolista on yksi yleisimmistä ainesosien

Artemisia herba alba

eteerinen öljy. On havaittu pääkomponenttina eteerinen öljy Espanjasta (Itä- ja Keski-Espanjassa) [8, 11], Israel [8], Egypti [24] ja muiden Marokon paikoissa [13]. Sen pitoisuus nousee korkeita arvoja (ylivoimainen 40%) Espanjassa ja Israelissa [11, 8]. Tunisiassa lainkaan tai hyvin matalia arvoja havaittiin 1,8-kineolin pitoisuus [15,16], kuten eteeriset öljyt Algeriasta ja Jordaniasta [12, 14]. Tässä tutkimuksessa 1,8-kineolin pitoisuus vaihteli välillä 1,49% antenni osat ja 20,37% vuonna lehtiä.

Kamferi löydettiin suurina pitoisuuksina eteerinen öljy näytteissä Southern Tunisia [18] ja Algeria (19,14%) [14]. Marokossa, aiemman tutkimuksen mukaan kamferi on yksi kaikkein kohdanneet komponenttien

Artemisia herba alba

eteerinen öljy. Viisi chemotypes määriteltiin kamferi tyyppi öljyt [20]. Työmme, löysimme 5,12% of kamferi.

Chrysanthenone on yleinen yhdiste öljyissä Israelista, Espanja (28,2% -36,4%), Tunisia (17%) ja Algerian (22,5% näytteen Sidi Aissa ) [2], ja jopa muista Marokon näytteistä (77%). Täällä se ei havaittu antenni osia

Artemisia herba alba

; se oli melko läsnä pieni pitoisuus capitulum (1,2%). Yhdisteiden joukossa havaittu muissa

Artemisia herba alba

öljyjä, ja ei havaittu tässä tutkimuksessa, puuttuminen davanon on syytä huomata; on havaittu olevan merkittävä osatekijä joissakin populaatioissa

Artemisia herba alba

muilta alueilta Marokon [21, 25] ja vähäisenä ainesosana näytteissä Israelin [8, 26] ja Siinain erämaassa ja ympäristö [8, 27]. Espanjassa sen pitoisuus nousee korkeita arvoja (ylivoimainen 39,1%), mutta se puuttuu muista eteeriset öljyt näytteitä [11].

Tuloksemme osoittavat, että eteeriset öljyt eri kasvitieteellisen osista

Artemisia Herba alba

tutkittu eivät sisällä kamferi, tujonia, ja 1,8 kineoli pääkomponentteina kuten muutkin Marokon [22], Algerian [2] ja Israelin tyyppisiä eteeriset öljyt. Lisäksi tutkimuksemme tunnistaa uusia molekyylejä, joita ei ole mainittu muissa tutkimuksissa ja mahdollinen luonnehdinta uuden chemothypes (verbenol, trans α bisabolone, farneseenin epoksidin) on

Artemisia herba alba

eteeriset öljyt (kuvio 2). Trans α bisabolone ja farneseenin epoksidin, on raportoitu olevan potentiaalisia antituumoriaktiivisuuksia [28, 29].

kautta tutkimuksen eteeriset öljyt GC-MS, olemme pystyneet tunnistamaan ja määrällisesti koostumus eteeriset öljyt

Artemisia herba alba

, joka vaihtelee eri kasvien osat. Nämä laadulliset ja määrälliset erot kemiallisen koostumuksen eteeristen öljyjen saattaa johtua useista tekijöistä, kuten maantieteelliset tekijät (sijainti), ilmastolliset vaikutukset kasvien, satokauden, maaperän laatu, laitoksen ikä osien (nuori tai aikuinen) , valtion kasvien käytetyn materiaalin (kuivattu tai tuore), osa käytetyn kasvin, kerättäessä, purkuprosessi, geneettinen vaihtelu (kemotyyppi), [30] jne.

tulokset ovat yhdenmukaiset muiden raporttien mukaan osoittanut, kuinka kasvien kasvuun vaikuttavat geneettiset ja ympäristötekijät, ja kuinka nämä tekijät vaikuttavat erot kemiallinen vaihtelu eteeriset öljyt kasvien eri chemotypes [31, 32]. Kemiallinen vaihtelu eteeristen eri chemotypes on

Thymus

lajeja eri paikoissa tai kasvaa samassa elinympäristö on katsottu johtuvan eron ympäristö- ja geneettiset tekijät [31, 33, 34, 35]. Lisäksi ekologiset tekijät, ilmasto-olosuhteet, varsinkin, valo ja lämpötila, on myös raportoitu vaikutuksille tuotantoon eteeriset öljyt sekä muita aktiivisia aineita kasveissa [32, 36, 37, 38, 39].

Syövän aktiivisuus

Artemisia herba alba

eteeriset öljyt

Kemoterapia ei ole antaa merkittäviä etuja ja se on usein liittyy systeemisen toksisuuden ja lääkeresistenssin. Näin ollen, etsivät uusia terapeuttisia aineita, jotka kykenevät kiertämään kemoterapian sivuvaikutukset, on edelleen tehokkaampi toksisuuden vähentämiseksi ja lisätä niiden tehokkuutta syöpää vastaan. Siksi toteutimme

in vitro

syövän vastaista aktiivisuutta eteeristen öljyjen saatuja eri biologisista osista

Artemisia herba alba

kasvua Marokossa.

Artemisia herba alba

on usein osa yrttisekoitukset käytetty perinteisen lääketieteen [40, 3, 4].

In vitro

kasvaimen vastainen sytotoksisuusmäärityksiä of

Artemisia herba alba

öljyjä tehtiin vastaan ​​P815 ja BSR solulinjoissa. Nämä öljyt ovat: eteeriset öljyt lehdet, capitulum ja maanpäällisissä osissa. Saadut tulokset on esitetty kuvioissa 3 ja 4; on osoitettu, että kaikki eteeriset öljyt on merkittävä annoksesta riippuva sytotoksinen vaikutus P815 ja BSR solulinjoissa. Kuitenkin P815 solulinjassa (kuvio 3) sytotoksisuus laski seuraavassa järjestyksessä: eteerinen öljy lehdet eteerinen öljy capitulum eteerinen öljy maanpäällisissä osissa. Keskittymä johtaa 50% sytotoksisuuden (IC

50) oli noin 15 ug /ml (P 0,05) lähtee öljyä ja 36μg /ml capitulum eteerinen öljy kuitenkin; eteerinen öljy maanpäällisissä osissa ei havaittu tärkeä sytotoksisuuden ja ei päässyt IC

50 (P 0,05). BSR-solulinjassa (kuvio 4), sytotoksisuus indusoitiin eteeriset öljyt tutkittu osoittaa, että capitulum öljy (IC

50 = 20 ug /ml, P 0,05)) on hieman herkkä lähtee öljyä (IC

50 = 26μg /ml, P 0,05) ja herkempiä kuin maanpäällisissä osissa öljyt (IC

50 = 50 ug /ml) (P 0,05). Tulokset viittaavat siihen, että sytotoksisuus vaikutus voidaan katsoa luonteeseen kemiallisen yhdisteen pitoisuus eteeriset öljyt uutetaan eri kasvitieteellisen osista

Artemisia herba alba

ja syöpäsolulinjoja kohdistaa.

P815- käsiteltiin eri pitoisuuksilla eteeriset öljyt peräisin maanpäällisten osien (EOAP), lehdistä (EOL), ja capitulum (EOC). Bars osoittavat keskimääräinen prosenttiosuus ± SD. * P 0,05.

BSR-solut käsiteltiin erilaisilla pitoisuuksilla tärkeät rasvat maanpäällisten osien (EOAP), lehdet (EOL) ja capitulum (EOC) on

Artemisia herba alba

varten 48h. Pylväsgrafiikka esitetään keskimääräiset prosentuaalinen ± SD. * P 0.05.

perusteella saaduilla tiedoilla on mahdollista oletuksen, että sytotoksiset vaikutukset näytteillä eteeriset öljyt, näissä koeolosuhteissa, voisi liittyä yleiseen toiminnan yhdisteiden läsnä öljyjä, erityisesti ja seskviterpeeniyhdisteitä [41, 42]. Eteerinen öljy lehdet, jotka esitetään suurempaa seskviterpeenien (68,93%) ja erityisesti hapetettuja seskviterpeeneistä (39,89%), on osoitettu olevan aktiivisempi kuin muut eteeriset öljyt uutetaan

Artemisia herba alba

. Itse asiassa, syövän vastaisen toiminnan seskviterpeenien on raportoitu kirjallisuudessa. On havaittu, että α-humulene tehoaa A-549, DLD-1 ja LNCaP-solulinjat [43, 44, 45]. Myös karyofylleeni antiproliferatiivisia aktiivisuutta K562 solujen [46]. Näin ollen meidän tuloksia kasvainsolulinjoja viittaavat siihen, että syövän vastaista aktiivisuutta eteeristen öljyjen eri biologisista osista

Artemisia herba alba

voi liittyä aktiiviseen seskviterpeenien liittyy synergiaa muiden luonnollisten tuotteiden läsnä eteerinen öljy koostumus.

ero sytotoksinen aktiivisuus eteeriset öljyt uutetaan eri biologisista osista, osoittavat, että syöpä solulinjoja tutkittu eroavat suhteessa niiden herkkyys sisältämien aineiden eteeriset öljyt

Artemisia herba alba

ja molekyylitason ominaisuudet solujen samoin. Tutkimus sytotoksisuuden aiheuttama eri öljyjen

Saccharomyces cerevisiae

osoittaa, että nämä solut ovat herkempiä

Artemisia herba Alba

, tämä sytotoksisuus mukana induktio sytoplasmisen mutaatio, joka osoittaa mitokondriovaurioita ja heikentynyt oksidatiivisen aineenvaihdunnan [47]. Tutkimuksessamme vaikka eteeriset öljyt joidenkin kasvien osia ei ole esitetty sytotoksisen vaikutuksen vastaan ​​PBMC (EOC, ja EOL), jotkin niistä osoittavat sytotoksinen vaikutus PBMC (EOAP). Toisaalta, mikroskooppinen vertailu elinkelpoisten syöpäsolujen ja PBMC: t käsiteltiin 50 ug /ml: ksi eteeriset öljyt lehtiä ja capitulum (EOC ja EOL), joka on esitetty sen jälkeen, kun 24 lyysin kasvainsolulinjoissa (70%) käyttäen bleu tryptan sulkemismenetelmällä. Katsovat, PBMC: t eivät osoittaa bleu väri heijastaa niiden elinkelpoisuutta, tämä havainto ei ole esitetty sen jälkeen, kun hoidon EOAP jotka osoittavat hajotukseen vaikutus kohti PBMC (kuvio 5). Lisäksi Tilaoui et ai, (2011) raportoitu sytotoksista aktiivisuutta antenni osa eteerinen öljy

Artemisia herba alba

CEM syöpäsolulinjoissa IC

50 = 6 ug /ml [40]. Sytotoksisuus

Artemisia herba alba

eteeriset öljyt voivat liittyä tuotantoon reaktiivisia happiradikaaleja (ROS). On todettu, että altistuminen eteeriset öljyt vaikuttaa voimakkaasti soluseinämän ja kalvot ja vahingot mitokondrioita. Tämä voi johtaa mitokondrioiden toimintahäiriöitä ja radikaaliin puhkeamisen reaktiivisia hapen lajeja, jotka laukaisee geenin induktion ja apoptoottisen solukuoleman [48, 49]. Itse asiassa, mitokondrioiden tiedetään lisäävän solunsisäistä pitoisuuksia DNA: ta vaurioittavien lajeja, kuten superoksidi- ja peroksidi-ionien liittyy apoptoottisen kuoleman [50, 51].

PBMC: t valmistettiin ihmisen normaaleista luovuttajista Ficoll-hypaque tiheys sentrifugoimalla. Soluja inkuboitiin 96-kuoppaisilla mikrotiitterilevyillä, kun läsnä on eri eteeriset öljyt (eteerinen öljy lehdet: EOL, eteeriset öljyt capitulum: EOC ja eteeriset öljyt maanpäällisissä osissa: EOAP) eri pitoisuuksilla (0, 4 ug /ml- 50 ug /ml). 48 tunnin kuluttua inkuboinnin elinkelpoisuus määritettiin käyttäen MTT-määritystä, kuten on kuvattu materiaalit ja menetelmät. Pylväsgrafiikka esitetään keskimääräiset prosentuaalinen ± SD. * P 0,05.

Aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että kasvit ovat tunnettuja näyttää pitoisuuden vaihtelu bioaktiivisen phytochemicals riippuen sisäinen tekijät, kuten ikä kasvi, ja ulkoisten tekijöiden, kuten maantieteellisen ilmasto, vuorokausirytmin rytmi, maaperän laatu, ja kausi. Sytotoksinen aktiivisuus eteeriset öljyt saattavat johtua synergioihin kaikkien terpeenien eteerinen öljy, tai ehkä joitakin muita aktiivisia yhdisteitä vastuussa antiproliferatiivinen eteerinen öljy, joka ansaitsee huomiota tulevissa tutkimuksen [52, 53]. On kuitenkin pidettävä mielessä, että eteeriset öljyt ovat monimutkaisia ​​seoksia lukuisia molekyylejä, ja voidaan kysyä, jos niiden biologiset vaikutukset ovat seurausta synergiasta kaikkien molekyylien tai heijastavat vain toimintaa tärkeimpien molekyylien läsnä korkeimmat pitoisuudet mukaan kaasukromatografinen analyysi. Yleensä tärkeimmät osat on todettu heijastavan melko hyvin biofysikaalisten ja biologiset ominaisuudet eteerisiä öljyjä, josta ne eristettiin, jossa amplitudit niiden vaikutukset on riippuvainen niiden pitoisuus, kun ne testataan sellaisenaan tai eteerisiä öljyjä [54 ]. Myös ero havaitut vaikutukset välillä syöpäsolulinjoja voisi liittyä kohteessa on näiden solujen, koska P815 on jousitus solulinja ja BSR on kiinnittynyt solulinjoissa. Tuloksemme on sopusoinnussa Kumura et al, (2004), jotka osoittavat, että esto soluproliferaation Metotreksaatti on erilainen jousitus (FM3A, 2B4 ja THP-1) ja kiinni (NIH3T3 ja V79-solut) [55].

vaikutus

Artemisia herba alba

eteerisiä öljyjä vastaan ​​PBMC

suurin osa kliinisesti hyväksytty syöpälääkkeiden on ominaista kapea terapeuttinen ikkuna, joka johtuu pääasiassa suuri systeeminen myrkyllisyys huumausaineiden yhdistettynä ilmeinen puute kasvaimen valikoivuus [56]. Tässä yhteydessä olemme testanneet eteeriset öljyt vastaan ​​ihmisen perifeerisen veren mononukleaaristen solujen (PBMC), jotta voidaan määrittää niiden vaikutuksia vastaan ​​normaaleja soluja. Saadut tulokset on esitetty kuviossa 5. on esitetty tässä kuviossa, että eteerinen öljy maanpäällisissä osissa aiheuttaa noin 50% sytotoksisuuden osaksi PBMC. Kuitenkin, eteeriset öljyt lehdet ja capitulum osoitettiin konsentraatiossa kykenevän indusoimaan sytotoksista aktiivisuutta kasvainsoluja vastaan ​​(P815 ja BSR); sytotoksisuutta vaikutusta ei havaittu (kuvio 6), mutta sen sijaan, että lehdet ja capitulum öljyt hieman proliferatiivinen vaikutus normaaleihin PBMC 105% ja 102% elinkelpoisuuden (P 0,05) 48 tunnin jälkeen hoidon lehtien ja capitulum vastaavasti . (Kuva 5). Ero sytotoksinen vaikutus kohti PBMC: ja syöpäsolujen (kuvio 6) voidaan selittää eron aineenvaihdunnan kunkin solun tyyppi. Lisäksi, se saattaa johtua siitä, että ero geenien ekspression ja näin ollen aktiivisuuden modulaatioon eteerisiä öljyjä. Samanlaisia ​​havaintoja

in vivo

tiedetään myös, jos se on nähty, että kasvin uutetta näyttelyitä antiperoxidative ja pro-hapettava vaikutus sydämen ja maksan kudoksissa vastaavasti [57].

EOC: eteeriset öljyt of capitulum; EOL: eteeriset öljyt lehtiä; EOAP: eteerisiä öljyjä maanpäällisissä osissa (sekoitus lehdet ja capitulum). Pylväsgrafiikka esitetään keskimääräiset prosentuaalinen ± SD. * P 0.05.

Johtopäätös

Yhteenvetona, esillä oleva työ vahvistaa erittäin tärkeä kemiallinen vaihtelu

Artemisia herba alba

eteerisiä öljyjä. Sikäli kuin voimme tutkia, tällainen tutkimus voidaan pitää syvä yksityiskohtaisen raportin kemiallinen koostumus ja

in vitro

syövänvastainen aktiivisuus eteerisiä öljyjä uutetaan varret, lehdet, capitulum ja sekoitus capitulum ja lehdet on

Artemisia herba alba

. Lisäksi tämä tutkimus tunnistaa uusia molekyylejä, joita ei ole mainittu muissa tutkimuksissa ja mahdollinen luonnehdinta uusien chemotypes on

Artemisia herba alba

eteerisiä öljyjä. Antituumorivaikutuksen eteeristen öljyjen eri biologisista osista

Artemisia herba alba

on määritetty kattavasti vastaan ​​kaksi syöpäsoluja riviä P815 ja BSR. Kaiken P815 solulinjat ovat herkempiä kuin BSR solulinjat eteeriset öljyt vaikutus; Meidän tulokset viittaavat siihen, että lehdet ja capitulum eteeriset öljyt ovat sytotoksisia kuin maanpäällisissä osissa tutkittu. Ei kuitenkaan sytotoksista vaikutusta tällaisten rasvahappojen havaittiin ihmisen normaaleissa soluissa, lukuun ottamatta pientä proliferatiivisen vaikutuksen. Näyttää todennäköiseltä, että

Artemisia herba alba

voisi olla tärkeä rooli syövän torjuntaa. On selvää, määritetään bioaktiivisten yhdisteiden (t)

Artemisia herba alba

eteerisiä öljyjä, jotka estävät syöpäsolujen linjojen proliferaatiota tarvitaan lisätutkimuksia, selventää toimintamekanismi ja niiden mahdollinen käyttö.

Kiitokset

kirjoittajat kiittää professori Khalid Chaouch (Department of Englanti, Faculty of Literature and Human Sciences) käsikirjoituksen tarkastami-.

Vastaa