Krooninen sairaus

tiivistelmä

Haimasyöpä on lähes aina kuolemaan tauti aikaisesta invaasio viereisiin rakenteisiin ja etäpesäke ja puute tehokkaan hoitomuoto. Aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että Qingyihuaji kaava (QYHJ), seitsemän yrtti kiinalaisen lääketieteen kaava, oli merkittävä syöpälääkkeen vaikutuksia haimasyövän. Täällä, tutkimme vaikutuksia QYHJ haiman syöpäsoluinvaasiota ja etäpesäkkeiden ja mahdolliset liittyvä mekanismi (t). Huomasimme, että QYHJ esti sekä kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeiden nude-hiirissä ihmisen haimasyövän solu ksenograftien. Lisäksi tutkimus osoitti, että QYHJ esti epiteelin-to-mesenkymaalitransitioon (EMT), joka on ominaista lisääntynyt E-kadheriinin ilmentymisen ja laski vimentiinin, N-kadheriinin ja Slug ilmaisun. Interleukiini 6 (IL-6), tulehdusta sytokiinien tuotetaan pääasiassa makrofagit, voisi edistää syöpäsolujen EMT ja invaasiota. Sitä vastoin hoito QYHJ esti syöpään liittyvien tulehdusta kasvaimissa vähentämällä tunkeutumisen kasvaimeen liittyvien makrofagien ja IL-6: n tuotantoa, mikä estää solujen invaasiota ja etäpesäkkeiden. Nämä tulokset viittaavat siihen, että Kiinan kasviperäisten QYHJ voisi estää haimasyövän soluinvaasiota ja etäpesäkkeiden osittain kääntämällä kasvain tukeva tulehdus.

Citation: Zhang J, Wang P, Ouyang H, Yin J, Liu A, Ma C, et ai. (2013) Targeting syöpään liittyvien Tulehdus: Kiinan kasviperäisten lääkeaineiden Estää epiteelikasvaimet-to-mesenkymaalitransitioon in Haimasyöpä. PLoS ONE 8 (7): e70334. doi: 10,1371 /journal.pone.0070334

Editor: Fabrizio Mattei, Instituto Superiore di Sanità, Italia

vastaanotettu: 03 helmikuu 2013; Hyväksytty: 18 Kesäkuu 2013; Julkaistu: 29 heinäkuu 2013

Copyright: © 2013 Zhang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat National Science Foundation of China (81001061, 81072942, 81173461); Shanghai Nature Science Fund, Shanghai, Kiina (09ZR1406800); Jatko-ohjelmat Säätiö Opetusministeriön Kiina (20090071120076); Shanghai Science and Technology komitea Rising Star Program (11QA1401300); ja Medical Talents Training Program of Health Bureau of Shanghai (XYQ2011008). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Haimasyöpä on yksi vaikeimmista syövistä hoitaa [1]. Huono ennuste potilaiden haimasyöpä johtuu suurelta osin varhainen paikallinen invaasio viereisiin rakenteisiin ja etäpesäkkeiden [2]. Useimmat potilaat haimasyöpä diagnosoidaan etäpesäkkeitä, ja vain 10%: sta 20%: lla potilaista, joilla oli paikallinen sairaus ovat kokoisen aikaan diagnoosi [3]. Gemsitabiinin yksinään tai yhdistelmähoidossa Erlotinibi on tullut standardi solunsalpaajahoitoa kehittyneen haimasyövän; kuitenkin, mediaanielossaolosta 5-6 kuukauden [4]. Näin ollen on tärkeää löytää terapeuttinen lähestymistapa, joka auttaa ehkäisyssä ja /tai hoidossa haimasyövän etäpesäkkeiden.

epiteelikasvaimet-to-mesenkymaalitransitioon (EMT), prosessi solujen menettävät epiteelin fenotyyppi ja hankkimalla vaeltava mesenkymaaliset fenotyyppiä, on hyväksytty olevan tärkeä rooli syövän etäpesäkkeiden useissa ihmisen maligniteettien kuten haimasyövän [5], [6]. EMT on osoitettu vaikuttavat kielteisesti eloonjäämisaste potilaiden haimasyöpä [7]. Lisäksi EMT myötävaikuttaa lääkeresistenssin haimasyövän [8]. Siten esto EMT haiman syöpäsoluja voivat helpottaa kehittää tehokas strategia ehkäisyyn ja /tai metastasoituneen haimasyövän.

Lisääntyvä todistusaineisto viittaa siihen, että jotkut kasviperäisten lääkkeiden, kuten

coptis chinensis

(Huang lian),

Scutellaria baicalensis

(Huang Qin),

Teepensas

(Lu cha),

Wedelia chinensis

(Peng qi ju) ja Songyou Yin (kiinalainen kasviperäisten yhdiste), joka sisälsi joitakin bioaktiivisia yhdisteitä tai erilaisia ​​fytokemikaalit voi kääntää EMT ja vähentää etäpesäkkeiden [9] – [13]. Siten nämä yrtit voidaan käyttää täydentäviä ja vaihtoehtoisia hoitoja ja /tai adjuvanttihoito tavanomaisten sytotoksisten hoitoja. QYHJ, seitsemän yrtti Kiinan lääkkeiden kaava ja jota käytetään haimasyövän Kiinassa, on osoitettu estävän sekä kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeiden nude-hiirissä, joilla oli haiman syöpäsolun ksenograftien [14] – [16]. Lisäksi, QYHJ yhdistettynä tavanomaisiin Western lääke on osoitettu pidentävän elinaika potilailla, joilla on maksan etäpesäkkeiden haimasyöpä [17]. Kuitenkin taustalla molekyylitason mekanismi jää epäselväksi.

Tässä osoitamme, että QYHJ estää sekä kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeiden nude-hiirissä haimasyöpä solujen ksenograftien. Tulokset osoittivat, että QYHJ esti syöpään liittyvien tulehdusta kasvaimissa vähentämällä tunkeutumisen kasvaimeen liittyvien makrofagien ja IL-6: n tuotantoa, joka lopulta laski EMT ja solujen invaasiota. Siksi esillä havainnot viittaavat siihen, että QYHJ pystyy estämään haiman syöpäsoluinvaasiota ja etäpesäkkeiden ihmisen haimasyövän osittain kääntämällä kasvain tukeva tulehdus.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics Statement

Kaikki hiiren kokeet suoritettiin ohjeiden mukaisesti National Institutes of Health, että hoito ja käyttö Laboratory Animals. Tutkimuksen protokolla hyväksyi myös valiokunnan elävien eläinten käyttö opetuksessa ja tutkimuksessa, Fudanin yliopiston Shanghai. Aikana perustaminen maksan etäpesäke malli ja potilaalle tehdä mallin haimasyöpä, hiiret nukutettiin 3% pentobarbitaalinatriumilla (40 mg /kg) ja yritettiin minimoida kärsimyksen.

Solulinjat ja hiiret

ihmisen haimasyövän solulinja BxPC3 saatiin American Type Culture Collection. SW1990HM, erittäin metastaattinen ihmisen haimakarsinooma- linja, subkloonattiin SW1990 ryhmämme [18]. Kaikki viljeltyjen solujen kasvatettiin RPMI1640 /10% vasikan sikiön seerumia, ja pidettiin kosteutetussa, 5% CO

2-ilmakehässä 37 ° C: ssa. Kaikki solulinjat säännöllisesti oikeaksi tarkistamalla niiden morfologia ja testattiin puuttuminen mykoplasmakontaminaation (MycoAlert, Lonza, Rockland, ME, USA).

BALB /c-nu /nu nude-hiirissä vuotiaiden 4 -6viikko saatiin Shanghai Institute of Materia Medica, Kiinan tiedeakatemia (Shanghai, Kiina), ja sijoitettu laminaarisen virtauksen kaappien erityisissä taudinaiheuttajista vapaissa olosuhteissa ja annetaan ruoka ja vesi

halun

.

lääkkeet ja reagenssit

QYHJ, seitsemän yrtti Kiinan lääkkeiden kaava, joka koostuu

Scutellria barbata

(Ban zhi lian),

Heydyotis diffusan

(Bai Hua hän hän caO),

Amorphophallus kiusianus

(hän ​​liu gu),

Coix lacryma-jobi

(Yi ren),

Gynostemma pentaphyllum

(Jiao gu LAN),

Ganoderma luncidum

(Ling zhi) ja

Amomum cardamomum

(Bai Dou kou). QYHJ valmistettiin previouly decribed [14] – [16]. Lyhyesti, jauheet QYHJ kaavan tuotettiin Jiang Yan Tianjiang Pharmaceutical Co, Ltd. varmistamiseksi standardoinnin ja ylläpitää erien välistä luotettavuus QYHJ, korkean suorituskyvyn nestekromatografialla (HPLC) kromatografinen sormenjälki on kehitetty sen laadun valvontaa. Sormenjälki kromatogrammit QYHJ kaava oli kuvassa S1. Lopullinen keittäminen QYHJ valmistettiin liuottamalla kasviperäisten jauhe tislattua vettä vaadittuun pitoisuuteen. Päivittäinen annostus nude-hiirissä oli 18 g /kg, kun lasketaan seuraavan ihmisen-hiiren siirtokaavalle Db = Da × (Rb /Ra) x (Wb /Wa) 2/3, jossa D, R, ja W edustavat annostus, muoto kerroin, ja kehon painoa, vastaavasti, ja a ja b ovat ihmisen ja hiiren, vastaavasti. Ihmisen rekombinantti-interleukiini-6 (IL-6) saatiin R kanin anti-CD68 (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA); vuohen anti-IL-6 (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA); GAPDH (Epitomics, Burlingame, CA).

perustaminen maksametastaasin malli nude-hiirissä

malli haimasyövän maksan etäpesäke perustettiin kuten aiemmin on kuvattu [18]. Lyhyesti nude-hiiret nukutettiin kloraalihydraatilla; perna paljastui; ja haimasyövän soluja SW1990HM (5 x 10

6 /0,2 ml PBS) injektoitiin perna ruiskulla. Perna palautettiin vatsan, ja haava suljettiin yhteen kerrokseen haava leikkeitä. Kuusi viikkoa injektion jälkeen, hiiret tutkittiin karkeasti ruumiinavauksessa maksan etäpesäkkeitä. Seuraavaksi arvioitiin kasvaimen etäpesäke laskemalla metastaattisen pesäkkeiden yksi histologisen leikkeen keskiosan kunkin maksan näytteen kustakin hiirestä ja määrittämällä suhde metastaattisen alueen kokonaispinta-ala histologisia osastoja keskiosa kunkin maksan [19], [20] kantavassa metastaattinen ja kokonaisala laskettiin käyttäen Adobe Photoshop versio 7.0 (Adobe Systems) ja ImageJ versio 1,29 (National Institutes of Health) ohjelmistoja, ja tulokset ilmaistaan ​​prosentteina.

Orthotopic malli haimasyövän

potilaalle tehdä malli haimasyövän perustettiin aiemmin kuvattu [21]. Lyhyesti, 2 x 10

6 SW1990HM haimasyöpäsoluissa eläintä kohti 100 ul: ssa fosfaattipuskuroitua suolaliuosta injektoitiin ihon alle vasempaan kylkeen nude mouse. Kasvainten koot mitattiin 3 kertaa viikossa käyttäen paksuus. Kun kasvaimet kasvatettiin ihonalaisesti saavuttanut koko 0,5-1 cm

3, ne poistettiin aseptisesti hiiristä ja siirrettiin Petri-maljoille, jotka sisälsivät 10 ml fosfaattipuskuroitua suolaliuosta. Makroskooppisesti elintärkeisiin kasvain leikattiin 1 mm

3 kappaletta käyttäen leikkausveitsellä. Sitten hiiret nukutettiin 3% pentobarbitaalinatriumilla (40 mg /kg) ja yritettiin minimoida kärsimyksen. Pieni poikittainen viilto luotiin vasemmassa vatsan kylki, ja haima oli huolellisesti alttiina. Tasku on 2 3 mm valmistettiin pyrstö haiman käyttämällä suuria perna vein johtavana rakenne, ja kasvaimen palaset olivat paikallaan. Haima käyttöön uudelleen vatsaan, ja vatsan suljettiin käyttäen 6-0 imeytymättömät ompeleita.

Enzyme immunosorbenttimääritys (ELISA) B

pitoisuudet seerumin IL-6 ja TNF-α mitattiin käyttämällä ELISA. Verinäyte oli varastoitu huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, sentrifugoitiin (12000 x g) 15 minuutin ajan, ja sitten kryosäilöttiin -80 ° C: ssa. Pitoisuudet IL-6 ja TNF-α mitattiin käyttämällä sandwich-ELISA-kittiä (DuoSet; R 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen SPSS 15.0 ohjelmistopaketti.

Tulokset

QYHJ vaimentaa maksametastaasin Human Haimasyöpä in vivo

Ensinnäkin varmistimme tehoa QYHJ vuonna tukahduttaa maksa etäpesäke haimasyövän. Nude-hiiriin istutettiin intrasplenically ihmisen haimasyövän solulinja SW1990HM ja satunnaisesti jaettu QYHJ tai kontrolliryhmään. Viikon kuluttua satunnaistamista, hiiret QYHJ ryhmässä käsiteltiin oraalisesti QYHJ (0,2 ml, letkuruokinnalla päivittäin), kun taas hiiret Kontrolliryhmä sai normaalia suolaliuosta kontrollina 4 viikkoa (vrk 7-35). Kuusi viikkoa injektion jälkeen, hiiret lopetettiin ja niiden maksat talteen. Sekä QYHJ- ja valvonta-käsitellyt solut muodostivat kasvaimia, kun istutetaan perna, mutta hiiret käsiteltiin QYHJ kehittyi merkittävästi vähemmän metastaaseja kuin ei niillä, joita hoidettiin ohjaus normaalia suolaliuosta. Lisäksi hiiret, joita käsiteltiin QYHJ näkyy vähemmän metastaattisen pesäkkeitä ja laski metastaattinen ja kokonaispinta-alan suhde (kuviot 1A ja B). Yhdessä nämä tulokset osoittavat, että QYHJ voi tukahduttaa maksan etäpesäke ihmisen haimasyövän.

. Maksansiirtopotilaalle etäpesäke kautta luotiin kuvatulla Materiaalit ja menetelmät. Hiiret saivat 28 päivän hoidon QYHJ tai normaalia suolaliuosta kontrollina. Hiiret tapettiin 6 viikkoa injektion jälkeen, ja niiden maksat otettiin talteen. Edustavia maksat alkaen nude-hiirten näkyvät. H T, kasvain. Alkuperäinen suurennos, × 200. B. Western blot-analyysiä käytettiin mittaamaan ilmentymisen EMT liittyviä markkereita E-kadheriinin, N-kadheriinin, vimentiinistä ja Slug soluissa, jotka ovat peräisin kolmesta edustavien ksenografti näytettä kustakin ryhmästä. Bändi voimakkuudet mitattiin densitometrisesti ja suhteellinen osoitetun proteiinin ilmentymistä osoitettiin (alempi).

QYHJ vaimentaa syöpään liittyvien tulehdus Haimasyöpä

Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että syöpää liittyvä tulehdus edistää kasvainten kehittymisen [23], [24]. Lisäksi jotkut proinflammatoristen sytokiinien, kuten IL-8, IL-6 ja TNF-a, on osoitettu aktivoivan EMT ja lopulta helpottaa solujen invaasiota ja etäpesäkkeiden [25] – [29]. Siksi käytimme entsyymi-immunologinen määritys tutkia seerumin kahden proinflammatoristen sytokiinien IL-6 ja TNF-α nude-hiirissä. Seerumin IL-6-tasot olivat alhaisempia käsitellyillä hiirillä QYHJ (15,50 ng /l ± 4,49 ng /l) verrattuna ohjaustiedon vastaanottamisen hoitoa (29,06 ng /l ± 6,99 ng /L, P 0,01). Lisäksi, seerumin TNF-α väheni hoidon jälkeen QYHJ (19,94 ± 3,55 ng /l vs 29,50 ± 5,09 ng /L, P 0,01) (kuvio 4A). Nämä tiedot osoittivat, että QYHJ vähentynyt tuotanto pro-inflammatoristen sytokiinien. Leukosyyttien infiltraatiota havaitaan useimmissa kasvaimia ja osallistuu kasvaimen invaasion ja metastaasin [30]. Kasvaimeen liittyvä makrofagit (TAM) ovat tärkeä osa leukosyyttien infiltraatiota [31]. TAM infiltraatit on osoitettu korreloivan kasvaimen etenemistä ja huono ennuste syöpäpotilailla [32], [33]. Olemme havainneet, että tunkeutumisen TAM esti QYHJ (kuvio 4B). Lisäksi, QYHJ laski IL-6 TAM (kuvio 4C). Yhdessä nämä tulokset osoittavat selvästi, että QYHJ vähensi TAM soluttautuminen ja estivät IL-6 lauseke lopulta tukahduttaa syöpään liittyvien tulehdus.

. Ortotrooppinen nude-hiirimallissa on perustettu ja käsiteltiin QYHJ tai ajoneuvon edellä kuvatulla tavalla. Verta kerättiin kustakin hiirestä, ja seerumin pro-inflammatoristen sytokiinien IL-6 ja TNF-α havaittiin ELISA: lla. Studentin t-testiä käytettiin tilastollisen merkittävyyden määrittämiseksi. B. arvioimiseksi TAM tunkeutumisen, CD68 värjäys suoritettiin käyttäen IHC. Alkuperäinen suurennus, 200 ×. TAM tunkeutuminen arvioitiin kvantitatiivisesti laskemalla suhde CD68-positiivisia alueen kokonaispinta-ala kunkin kentän, ja keskiarvo kymmenestä kentiltä 200 × mikroskopialla määritettiin. * P 0,05. C. Konfokaalimikroskopia haimasyövän kudoksia käsiteltiin anti-CD68 (punainen) ja anti-IL-6 (vihreä). Solujen tumat vastavärjättiin DAPI.

IL-6 indusoi Haimasyöpä Cell EMT

edelleen varmistamiseksi korrelaatio EMT ja tulehduksellinen kasvain microenvironment, arvioimme vaikutukset IL 6 haimasyövän solujen EMT

vitro

. SW1990HM, jolla oli korkea vimentiinista ilmaisun, ja BxPC3, jolla oli korkea E-kadheriinin ilmentymisen, käsiteltiin ihmisen rekombinantti-IL-6. IL-6-hoito johti lisääntyneeseen vimentiinista ilmentymistä SW1990HM soluissa ja laski E-kadheriinin ilmentymisen BxPC3 soluissa havaittuna immunocytofluorescence (kuvio 5A). Nämä tulokset varmistettiin Western blot -analyysillä (kuvio 5B). Näin ollen meidän tulokset osoittivat, että yli-tuotannon proinflammatoristen sytokiinien IL-6 edistää haiman syöpäsolun EMT.

. Haiman syöpäsoluissa SW1990HM ja BxPC3 käsiteltiin IL-6 (100 ng /ml) 24 tuntia. Sitten solut värjättiin havaitsemiseksi E-kadheriinin ja vimentiinista (vihreä). Solujen tumat vastavärjättiin DAPI. Alkuperäinen suurennos, × 200. B. haimasyöpä soluja käsiteltiin IL-6 (100 ng /ml) 24 tuntia. Yhteensä proteiini uutettiin, ja ilmaisu E-kadheriinin ja vimentiinin havaittiin Western blot. GAPDH käytettiin latauskontrollina.

IL-6 Edistää Haimasyöpä Cell Migration and Invasion

The effects of IL-6 on solumigraatio tutkittiin tarkemmin käyttäen haavan paranemista määritys. Tulokset osoittivat, että enemmän soluja siirretään tyhjästä haava IL-6 käsitellyt solut verrattuna soluihin, jotka eivät saaneet IL-6 hoidon molemmissa solulinjoissa (kuvio 6A). Tutkia hyökkäyksen kapasiteetti IL-6-käsiteltyjen haimasyöpäsoluissa, teimme

in vitro

invaasiomääritys käyttäen siirtokuoppaan kammio päällystetty matrigeeliä. Kuten odotettua, IL-6-hoito johti lisääntynyt solujen invaasiota

in vitro

molemmissa solulinjoissa (kuvio 6B). Nämä tulokset yhdessä havainto, että IL-6 indusoi haiman syöpäsolujen EMT ilmoittivat, että syöpään liittyvien tulehdus liittyy lisääntynyt kapasiteetti EMT ja invaasiota (kuva 7).

. Solujen migraation hinnat haimasyövän soluja käsiteltiin IL-6 (100 ng /ml) tai pelkkää vehikkeliä verrattiin kautta haavan paranemista määrityksissä. Mikroskooppiset havainnot kirjattiin 48 tunnin kuluttua naarmuuntumista pinnan konfluentin kerros soluja. Tähti osoittaa haava oli täysin parantunut. B. invasiivinen kyky haimasyövän soluja käsiteltiin IL-6 (100 ng /ml) tai pelkkää vehikkeliä verrattiin käyttäen Matrigeliä hyökkäystä määrityksiä. Numerot solujen kulkenut kalvon laskettiin 10 kenttää alle × 20 objektiivilinssin. Alkuperäinen suurennos, × 200. Tulokset ovat keskiarvoja ± SD arvoista, jotka saatiin kolmessa riippumattomassa kokeessa. Tilastollinen merkitsevyys laskettiin käyttämällä Studentin t-testiä.

QYHJ suunnattu syöpään liittyvien tulehdusta haimasyövän kautta laski TAM tunkeutumisen ja IL-6: n tuotantoa. Koska IL-6 voi edistää syöpäsolujen muuttoliikettä ja invaasiota indusoimalla EMT, tukahduttaminen syöpään liittyvien tulehdusta QYHJ voi estää haimasyövän soluinvaasiota ja etäpesäkkeiden.

Keskustelu

esillä olevat tulokset osoittivat, että kasviperäisten lääkkeiden QYHJ voi estää haimasyövän invaasio ja metastaasi kautta tukahduttaminen syöpään liittyvien tulehdusta, erityisesti vähentää TAM-peräisen IL-6. Nämä havainnot ulottuvat aiemmat havainnot siitä, miten tärkeää kasvaimen microenvironment keskeisenä kohteena Kiinan kasviperäisten lääkeaineiden.

perinteinen kiinalainen lääketiede (TCM), joka perustuu ainutlaatuisen teorian ja yksinäinen aikavälin käytännön kokemusta, on hyvin suosittuja Kiinassa. On raportoitu, että 90% modernin kiinalaisen syöpäpotilaiden ovat saaneet jonkinlaisen TCM aikana hoito [34]. Määrien TCM käyttää terveydenhuollon tarjoajat ja potilaiden etujen mukaisesti Kiinan ulkopuolella jatkaa nousuaan vuosittain huolimatta erityisesti onkologian alalla [35]. Soveltaminen TCM adjuvanttina syövän hoitoon on raportoitu parantaa tehoa sekä kemo- ja sädehoidon ja auttaa vähentämään haitallisia vaikutuksia kunkin hoidon [36], [37]. Lisäksi kasviperäisten lääkkeiden käytetyt TCM on hiljattain tunnustettu tärkeä uusille lääkekehityksen, kuten syöpälääkkeet [38], [39]. Esillä olevassa tutkimuksessa olemme vahvistaneet, että QYHJ esti etäpesäke haimasyövän; kuitenkin, taustalla olevien mekanismien edelleen epäselviä.

Viimeaikaiset tutkimukset ovat vahvistaneet, että syöpään liittyvien tulehdus vaikuttaa moniin näkökohtiin maligniteetti, mukaan lukien leviämisen ja selviytymistä pahanlaatuisia soluja, angiogeneesi, etäpesäke, ja hoitovaste [24]. Kasvaimen edistävät tulehdussolujen ovat makrofagien alatyyppejä, syöttösolut, ja neutrofiilien, sekä T- ja B-lymfosyytit. Makrofagit ovat merkittävä osa immuunijärjestelmän soluinfiltraatin havaittiin lähes kaikissa maligniteettien [31]. On hyväksytty, että yleensä, syöpää ja isäntäsolun johdettu signaaleja ohjelma makrofageja hankkia M2 kaltainen polarisoitunut ja muuten kasvaimen tukevia fenotyyppi [40]. Monissa tapauksissa, kohonnut määrä TAM liittyy huonompi ennuste [32], [33]. TAM voi vapauttaa kasvutekijöitä (esim. TGF-β), pro-inflammatoristen tekijöiden (esim., IL-6) ja entsyymit (esim., MMP2, MMP9), jotka edistävät angiogeneesiä, kasvaimen kehittymisen, ja etäpesäkkeiden [24]. Kaikki nämä tekijät tai entsyymit voivat edistää EMT. Esimerkiksi pro-inflammatoristen sytokiinien TNF-α, IL-6 ja IL-8 voi indusoida EMT ja edistää syövän etäpesäkkeiden [25] – [29]. Lisäksi kliininen tutkimus vahvisti, että nämä sytokiinit kohosivat merkittävästi potilailla, joilla haimasyöpä ja liittyi huonoon ennusteeseen [41]. Näin ollen lääkkeet, jotka kohdistuvat syöpään liittyvien tulehdus on mahdollista uudelleen kouluttaa kasvaimeen edistää tulehduskeräytymää tai estämään tällaisten solujen kulkeutumasta kasvainkohtaan. Esillä olevassa tutkimuksessa osoitimme, että QYHJ vähentää TAM tunkeutumista ja tehokkaasti inhiboi useiden proinflammatoristen sytokiinien, kuten TNF-α: n ja IL-6, joka ehdotti, että QYHJ voi estää syöpään liittyvien tulehdusta haimasyövän.

prosessin aikana EMT, ulkoisten signaalien aktivoi luontainen transkriptiotekijöiden Snail, Slug, Twist ja ZEB1, jotka tukahduttavat ilmentymistä E-kadheriinin ja edistää ilmentymistä vimentiinista ja N-kadheriinin, niin että solut muuttuvat polarisoitunut epiteelisolujen fenotyyppi maahanmuuttoriskinä mesenkymaaliset fenotyyppi [42]. ”EMTed” karsinoomasoluja uskotaan olevan vastuussa kylvö kaukainen levittämiseen, joka lopulta johtaa syöpään liittyvää kuolleisuutta [5], [7]. Siksi me arveltu, että QYHJ estää etäpesäkkeiden haimasyövän soluja, mahdollisesti tukahduttamalla EMT. Kuten odotimme, tuloksemme vahvistivat, että QYHJ hoito johti lisääntynyt E-kadheriinin ilmentymisen ja laski vimentiinista, N-kadheriinin ja Slug ilmaisun, joka osoitti, että QYHJ esti EMT solujen ja tukahdutetaan solujen invaasiota.

IL-6 , joka on valmistettu pääasiassa mononukleaariset solut, makrofagit ja pienempi osuus fibroblastit, endoteelisolut, T- ja B-lymfosyytit, kondrosyyttien ja vesikalvoa soluihin [43], on pleiotrooppinen sytokiini, joka aiheuttaa karsinogeneesiä, edistää kasvaimen kasvua ja helpottaa kasvainsolujen etäpesäkkeiden [ ,,,0],25] – [27]. Kertyvät todisteet viittaavat siihen, että IL-6 on usein koholla, ja näin ollen on yhteydessä huonoon ennusteeseen monissa syöpätyypeissä, mukaan lukien haimasyövän [44], [45]. Lisäksi uusien hoitomuotojen kohdistaminen IL-6 ovat parhaillaan kliinisissä tutkimuksissa [46]. Koska olemme osoittaneet, että QYHJ alennettu TAM soluttautuminen ja tehokkaasti inhiboi IL-6: n tuotantoa, pyrimme vahvistamaan, alennetun IL-6-tuotannon liittyi tukahduttaminen EMT ja invasiivisen solujen kapasiteetin.