Nämä on saanut olla jotkut paremmin säilyneistä OG-L002 salaisuuksia World
Hur tiedetään paikallistaa ja polysomeilla ja stressi rakeet jälkeen tiettyjä erilaisia leluja ja solujen vaurioita. Huomasimme valtavan siirtyminen proteiinin raskaampia polysomal jakeet seuraavat doxo korjaamiseksi, mikä osoittaa, että proteiini osallistuu aktiivisesti solujen reaktio huumeiden ehkä säätelevät käännös käyttämisen sitoutuneen mRNA: iden. Hyödynsimme RIP siru määritys osoittaa, mikä mRNA: iden sitoutua Hur seuraavat doxo hoidon tutkimaan Hur vastaus doxo kannalta HUR tavoitteita.
Kun immunosaostus ja hybridisaatio Agilent paneelit kautta kertainen rikastus toleranssi, me suodatetaan ne mRNA lajike erityisen sidottu Hur. Huomasimme vastaavien mRNA: iden 822 HGNC selityksin geenejä, jotka voidaan sitoa Hur ja suhteellisesti rikastettu sisällä tuotteen. Me antanut 721 Hur sidottu geeni kirjaa arviointiin toiminnallisten motiivien ympärille 3UTR, arvioida vakauteen prosessi mRNA rikastamiseen. Koska Hur on tunnettu sitoutuvan ARE, odotimme etsimään vankka yliedustus ARE lausunto sitoutumisen 3UTRs näiden geenien.
rikastuminen ARE oli suuri ja tärkeydestä on säilynyt, vaikka poistaminen tasaisesti geenejä pienemmillä kertainen rikastus. Ensimmäiset 50 geenit maksimaalisesti rikastuneet ARE. Tästä luettelosta päätimme kolme geeniä tarkistaa seuraus genomin laaja analyysi tarkistamalla liittyvä määrä noin immunosaostusmenetelmiä ratkaisun kautta semikvantitatiivinen PCR c fos, c myc ja SOCS3. Kaikki mRNA: t perustettiin suhdettaan Hur jälkeen doxo hallitus, kuten kuvassa 5B.
Nämä tiedot viittaavat siihen osallistuminen HUR prosessissa apoptoosin aktivoitumisen aiheuttamien doxo meidän solu malli järjestelmä, jota ei voida selittää muodostamisen apoptogenic katkaistun tyyppi Hurin ja että vaihtoehtona Hur on sidottu tiettyihin mRNA: iden ja relocalizes polysomeilla jälkeen doxo hoidon. Koska Hur alassäätöä edistää laskua apoptoottisen vasteen aiheuttama doxo ja koska rottlerin antagonisoi doxo indusoimisessa elinkelpoisuuden menettämiseen, mietimme jos Hur voidaan osallisina puhkeamista doxo vastarintaa.
Pidämme MCF 7 soluja doxo kokoelma jatkuvasti lisäämällä lääkeaineen pitoisuus 0-100 nM kuukaudessa ajassa. Saimme solun kansalaiset, nimeltään MCF 7 /doxoR, joka osoitti noin 250 kertainen resistenssi syyli, verrattuna villityypin MCF 7-soluja, kuten havaittiin, että IC50 kasvu noin 10 uM. Lisävahvistusta Hankitun resistenssifenotyyppi alkunsa yli-ilmentyminen MCF 7 /doxoR on ABCG2 kuljettaja, keskimääräinen merkki ja tunnettu syy doxo pharmacoresistance, koska permissivity apoptoosille löysi kaspaasi 7 lause. Og-L002
Havaitsimme vahvan alas-säätely Hurin kun solut mukautettu läsnäolo doxo. Me toistuva menettely doxo collection 3 x usein hankkimalla sama ilmeinen Hur alassäätöä, koska olimme keskitytään väestön, luonnostaan läpi vaihtelua. Lisää yli, asetamme alle valikoima eri kaksi rintasyövän solulinjoissa erilaisilla tunnusomaisen luonteensa MCF 7 soluista: MDA MB 231, kolminkertainen huono soluja, ja SK BR 3, Her2 positiivisia soluja.
Olemme saaneet populaatio MDAMB 231- resistenttejä doxo muttei asukkaan SK BR 3 mukaisesti lasketut arvot. Mielenkiintoista, näimme Hur downregulation in MDAMB 231 /doxoR muttei SK BR 3 /NOdoxoR, mikä viittaa siihen, että rintasyövän soluja downregulate Hur ilmaus vain, jos syvä geneettinen uudelleen ohjelmointi kohti pharmacoresistance tapahtuu eikä seurauksena pelkkä läsnäolo doxo.