Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

VEGF-riippumaton angiogeenisten signaloinnin tärkeä rooli kehitettäessä peräsuolen syöpä (CRC). Kuitenkin sen mukanaoloa näissä kliininen tulos CRC ei ole raportoitu. Tämän tutkimuksen tavoitteena oli selvittää yhdistyksen välillä geneettisen vaihtelun useita merkittäviä VEGF-riippumaton signalointireitin geenejä ja eloonjäämisaste CRC potilaista.

Methods

Seven yhden emäksen monimuotoisuus (SNP) neljässä tärkeä VEGF-riippumaton angiogeenisten geenien (

ANGPT1

,

AMOT

,

DLL4

ja

ENG

) genotyypattiin kiinalaisessa väestöstä 408 CRC potilaille.

tulokset

Yksi SNP, rs1954727 vuonna

ANGPT1

, oli merkitsevästi yhteydessä CRC kokonaiselossaolo. Verrattuna potilaisiin, joilla homotsygoottinen villityypin genotyypin rs1954727, joilla on heterotsygoottinen ja homotsygoottinen variantti genotyyppien näytteillä suotuisa kokonaiselossaoloaikaa riskisuhde (HR) 0,89 (95% luottamusväli [CI] 0,55-1,43,

P

= 0,623), ja 0,32 (95% CI 0,15-,71,

P

= 0,005), vastaavasti (

P

trendi = 0,008). Vuonna kerrostunut analyysi, tämä yhdistys säilyi merkitsevänä kemoterapialla (

P

trendi = 0,012), mutta ei niitä ilman kemoterapiaa. Arvioimme lisäksi vaikutukset kemoterapian CRC selviytymisen että stratifioitiin rs1954727 genotyypit. Huomasimme, että kemoterapia johti huomattavasti parempaa yleistä selviytymistä CRC potilailla (HR = 0,44, 95% CI +0,26-+0,75,

P

= 0,002), mikä oli erityisen merkittävä niillä potilailla, joilla on heterotsygoottinen genotyyppi rs1954727 (HR = 0,45, 95% CI ,22-,92,

P

= 0,028).

Johtopäätös

Tuloksemme viittaavat siihen, että rs1954727 in

ANGPT1

geeni saattaisi olla ennustetyövälineenä biomarkkereiden varten eloonjäämisaste CRC potilaiden, erityisesti potilailla, jotka saavat kemoterapiaa, päätelmä optio validointi suuremmissa itsenäinen populaatioissa.

Citation: Dai J, Wan S, Zhou F, Myers RE, Guo X, Li B, et al. (2012) geneettistä polymorfismia on VEGF-Independent Angiogeneesi Gene ANGPT1 ja eloonjäämisaste peräsuolen syövän Potilaat jälkeen poistettu kirurgisella. PLoS ONE 7 (4): e34758. doi: 10,1371 /journal.pone.0034758

Editor: Masaru Katoh, National Cancer Center, Japani

vastaanotettu: 07 lokakuu 2011; Hyväksytty 5 maaliskuuta 2012 Julkaistu: 04 huhtikuu 2012

Copyright: © 2012 Dai et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Työ tässä raportoidut tukee starttirahan Thomas Jefferson University, myöntää 2009CB521704 The National Basic Research Program of China, ja myöntää 30872927 National Natural Science Foundation of China. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Worldwide, peräsuolen syöpä (CRC) on kolmanneksi yleisin maligniteetti ja neljänneksi suurin syy syövän kuoleman arviolta 1234000 uutta tapausta ja 608000 kuolemantapausta vuonna 2008 [1]. CRC on sairaus, joka vaikuttaa suuresti elintapojen ja ruokavalion tekijät [2], mutta viimeaikaiset tutkimukset ovat viitanneet siihen, että yksilöiden välisiä geneettisiä vaihtelut voivat vaikuttaa merkittävästi riskiä CRC [3], [4], [5]. Lisäksi saatu todisteita, myös omasta tutkimuksissa on myös osoittanut, että yhden emäksen monimuotoisuus (SNP: t) voidaan käyttää korvike biomarkkereita geneettisen taustan CRC potilaiden ennustaa hoitovaste ja ennusteen [6], [7], [8], [9].

tuumoriangiogeneesissa, sukupolven uusien verisuonten, on ratkaiseva soluprosessin joka vaikuttaa kasvainsolujen kasvua, invaasio, paikalliset alueiden uusiutumisen ja metastaattisen leviäminen CRC, joten se houkutteleva kohde syöpälääkkeen kehittämiseen [10] kantavassa kasvainsolujen kasvua, invaasio, ja etäpesäkkeitä vaikuttavat voimakkaasti tasapaino toimintojen endogeenisten angiogeenisten ja anti-angiogeenisten tekijöiden [10]. Verisuonten endoteelin kasvutekijät (VEGFs) ja sen reseptorit (VEGFRs) on keskeinen rooli angiogeneesissä koulutusjakson [11]. Toiminnallinen VEGF ja VEGFRs, kuten anti-VEGF-neutraloivien vasta-aineiden ja pieniä molekyylejä, jotka estävät tyrosiinikinaasin VEGFRs, on hyväksytty anti-angiogeneesiä hoitoja moniin syöpiin, mukaan lukien CRC [12]. Kuitenkin, laaja vastus anti-angiogeenisten terapioiden kohdistettu VEGF reitti stimuloitiin etsiä hoidot kohdistuvat VEGF-riippumattoman angiogeneesiä reitti [12], [13], kuten pro-angiogeenisten teille, joita välittävät angiopoietins /TIE-2 ja Delta /Notch [14], [15], sekä anti-angiogeeninen teille, joita välittävät angiomotin ja endogliini proteiinit [16], [17].

Genetic vaihtelut

VEGF

geeni on on raportoitu moduloivan VEGF-geenin ilmentymistä [18], [19], [20]. He ovat myös olleet yhteydessä etiologiaa ja kliinisiä tuloksia CRC [21], [22], [23]. Vaikka perus tutkimukset ovat paljastaneet keskeinen rooli VEGF-riippumattoman reitin geenien etiologiassa ja kliininen tulos CRC, ei tutkimus on raportoitu assosiaatiota geenimuunnelmat näiden geenien ja CRC ennustetta. Tavoitteena nykyisen pilottitutkimus oli arvioida yhdistyksen välillä SNP useita merkittäviä VEGF-riippumaton angiogeenisten reitin geenien kanssa eloonjäämisaste CRC potilaista.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics

Tämän tutkimuksen hyväksyi laitoksen tarkastuslautakunta neljännen Military Medical University. Kirjallinen suostumus, jossa on allekirjoitus saatiin kullekin potilaalle.

Potilasjoukko ja kliinisten tietojen keruu

Tämä tutkimus keskittyi VEGF-riippumattoman angiogeneesiä geenin SNP mahdollisina ennustajia CRC ennustetta. Siksi kaikki aiheet mukana tässä tutkimuksessa oli histopatologisesti vahvistanut CRC. Alunperin 496 CRC potilasta rekrytoitiin välillä helmikuussa 2006 ja huhtikuuta 2010 osastot General Surgery vuonna Xijing sairaala ja Tangdu Hospital, jotka ovat yhteydessä neljännen Military Medical University Xi’an, Kiina. Ei ollut rekrytointi rajoituksia iän, sukupuolen, ja syöpä vaiheessa. Kaikki CRC potilaista ei ollut aikaisemmin muiden syöpien, kemoterapiaa tai sädehoitoa. Kaikki CRC potilaat vasta diagnosoitu ja histopatologisesti vahvistettu olevan adenokarsinooma. Tarkoitetaan tässä tutkimuksessa 88 potilasta jätettiin pois, seuraavista syistä: ei leikkaukseen tai saivat vain lievittävä toimintaa (26 potilasta), oli epätäydellinen kliiniset tiedot tai puuttui seuranta (48 potilasta), kuoli kuukauden kuluessa leikkaus (6 potilasta) ja oli huono laatu ja /tai määrä DNA-näytteen (8 potilasta). Lopuksi 408 kirurgisesti resektoitiin potilaalla on täydellinen kliininen ja seurata tietoja sekä laadukas DNA-näytteet otettiin mukaan esillä olevassa tutkimuksessa. Kaikki potilaat olivat Han-kiinalaisia.

Demografiset ja kliiniset tiedot

Yksityiskohtainen demografiset ja kliiniset tiedot kerättiin henkilökohtaista haastattelussa, lääketieteen kaavio tarkastelu, tai kuulemisen hoitavat lääkärit. Väestörakenteen kerätyt tiedot ovat ikä, sukupuoli, kansallisuus, tupakointi, juominen tilan ja painoindeksi (BMI). Kliiniset kerätyt tiedot sisältävät diagnoosin aikana, leikkauksen aikana ja /tai chemotherapies, kuolinaika, kasvain vaiheessa erilaistuminen, sijainti sivuston, imusolmuke invasiivisuus, hoitokäytäntö, ja seerumin CEA (karsinoembryoninen antigeeni). Tavallinen seurantaa suoritettiin koulutettu kliininen asiantuntija läpi paikan päällä haastattelussa, suora soittaa tai lääketieteen kaavio tarkastelu. Uusin seurantatiedot Tässä analyysissä saatiin helmikuussa 2011. Potilaan kirjoittautunut elokuun 2008 jälkeen, 5-ml verta oli käytettävissä genomista DNA: n eristämiseksi käyttäen E.Z.N.A. Veri DNA Midi Kit (Omega Bio-Tek, Norcross, GA). Potilaille otettiin ennen elokuuta 2008 genomista DNA: ta uutettiin noin 100 mg vierekkäisten normaaleissa kudoksissa saadaan patologi leikkauksen jälkeen käyttäen E.Z.N.A. kudosten DNA Kit (Omega Bio-Tek).

SNP valinta ja genotyypityksen

Neljä suurta geenien VEGF-riippumaton angiogeenisten reitin tutkittiin, kuten

AGNPT1

joka koodaa TIE2 agonisti, joka stimuloi PI3K-Akt signalointireitin kuin selviytymisen signaalin ja vakauttaa verisuonia,

DLL4

(Delta-like 4 ligandi), joka koodaa proteiinia, joka erittyy endoteelisoluista ja edistää angiogeneesiä estämällä ei -functional itäminen verisuonten endoteelisolujen,

AMOT

(Angiomotin), joka koodaa angiostatiini estäjä, joka välittää putken muodostumiseen ja endoteelisolujen migraation kohti kasvutekijöitä aikana muodostuu uusia verisuonia, ja

FIN

(Endoglin), joka koodaa komponentti transformoivan kasvutekijä beeta-reseptorin kompleksin angiogeneesiin liittyvien, sydän- ja kehitystä, ja verisuonten homeostaasin. Mahdollisesti toiminnallinen SNP, vuonna toiminnallisia alueita kuten promoottoreita, eksonit, ja transloimattomat alueet (UTR) valittiin tietyn joukon web-pohjainen SNP valintatyökaluja (vapaasti saatavissa https://snpinfo.niehs.nih.gov/snpfunc.htm) , jolla voidaan valita SNP: itä perustuu kytkentäepätasapainossa (LD) ja ennustettu toiminnalliset ominaisuudet sekä koodaus- ja ei-koodittavista SNP-kohdista. 5 ’ja 3’ viereisten alueiden mielivaltaisesti asetettu 1000 bp kaikki geenit. Vain validoitu SNP valittiin ja SNP vähäisin alleelin taajuus (MMM) 5% Aasian väestöstä jätettiin pois. Kun kyseessä on useiden potentiaalisesti toiminnallisen SNP samassa haplotyyppi lohkon (määritelty nostolaite kertoimella r

2 0,8), vain yksi SNP oli mukana. Lopuksi, yhteensä seitsemän SNP: tä tunnistettiin neljän geenien, mukaan lukien kaksi SNP

ANGPT1

(rs1954727 ja rs9297395), kolme SNP

AMOT

(rs2286064, rs2286063, rs640009), yksi SNP

DLL4

(rs12439845) ja yksi SNP

FIN

(rs7865146). Genotyypitys suoritettiin käyttäen Sequenom iPLEX genotyypin järjestelmän (Sequenom Inc, CA). Laboratorion henkilökunta suorittaa genotyypitys sokaisi potilaiden tietoja. Keskimääräisten korko genotyypityksen oli 99,4%. Tiukka laadunvalvonta toimenpiteiden aikana tehtiin genotyypin kanssa yli 99% välistä yhdenmukaisuutta näytteiden genotyyppi on kahtena kappaleena.

Tilastollinen

päätepiste arvioidaan tässä tutkimuksessa oli kokonaiselinaika, määriteltiin ajaksi alkuperäisestä leikkauksesta kuolemaan tai Viimeisimmässä seurannassa. Riskisuhde (HR) ja 95%: n luottamusväli (95% CI) arvioitiin käyttämällä monimuuttuja Coxin suhteellisen vaarat malli korjattuna ikä, sukupuoli, tupakointi, juominen tila, BMI, kasvaimen sijainti, kasvaimen erilaistumiseen, kasvain vaiheessa ja kemoterapia , tarvittaessa. Haplotyypin /diplotype määritettiin käyttämällä HelixTree ohjelmistoa (Golden Helix, Inc.), ja HR arvioitiin monimuuttuja Coxin suhteellisen vaarat malli käyttäen haplotyyppi /diplotype sisältää kaikki villityypin alleelit referenssinä. Testit interaktioiden SNP ja DNA lähde tehtiin sisällyttämällä rajat tuote aikavälin osaksi Coxin suhteellisten riskien mallia. Log-rank-testi käytettiin arvioimaan eroja kokonaiselinaika eri potilasryhmille. SAS tilastollinen paketti (SAS ohjelmistoversio 9.2, Cary, NC) käytettiin analyyseihin. Kaikki

P

arvot tässä tutkimuksessa olivat kaksipuolisia.

P

≤0.05 pidettiin kynnyksellä tilastollista merkitystä.

Tulokset

Potilaiden ominaisuudet

yhteensä 408 kirurgisesti resektoitiin CRC potilasta osallistui tähän tutkimus, joiden keski-ikä 59,4 vuotta (vaihteluväli, 22-90 vuotta) ja keskimääräinen painoindeksi on 22,7 (vaihteluväli 15,8-32,9). Niistä potilaista, 56,4% (n = 230) oli miehiä ja 46,6% (n = 178) oli naisia. Suurin osa potilaista oli tupakoimattomia (70,8%) ja ei koskaan juovat (89,5%). Prosenttiosuus potilaille, joilla on paksusuolen syöpä (47,1%) oli hieman pienempi kuin peräsuolen syöpäpotilailla (52,9%). Noin 47,1%: lla potilaista oli vaiheen II kasvain, kun taas vaiheessa 0, I, III ja IV kasvaimia esiintyi 2,0%, 14,2%, 27,2% ja 9,6%: lla potilaista. Noin 66,4% potilaista oli kohtalaisen eriytetty kasvaimia ja 78,2% potilaista hoidettiin kemoterapiaa leikkauksen jälkeen. Vuonna mediaani seuranta-aika 22,9 kuukautta, noin 23,0% (n = 94) potilaista oli kuollut kuin edellisen seurannan (helmikuu 2011) (taulukko 1).

Association between yksittäisten SNP ja kokonaiselinaika CRC potilailla

yhdistysten seitsemän valitun SNP CRC eloonjääminen analysoitiin yhden ja usean analyysit säätämisen ikä, sukupuoli, tupakointi asema, juominen tila, BMI, kasvaimen sijainti, kasvaimen erilaistumiseen , kasvain vaiheessa ja kemoterapiaa. Tulokset esitetään yhteenvetona taulukossa 2. Niistä yksi SNP, rs1954727 sijaitsee 3 ’UTR alue

ANGPT1

geeni, oli merkitsevästi yhteydessä yleiseen eloonjäämiseen CRC potilaista molemmissa yhden ja usean analyysejä. Vuonna Monimuuttuja-analyysissä verrattuna homotsygoottinen villityypin genotyypin (WW), heterotsygoottinen (WV) ja homotsygoottinen variantti genotyyppi (VV) on rs1954727 liittyi HR = 0,89 (95% CI 0,55-1,43,

P

= 0,623) ja 0,32 (95% CI 0,15-0,71,

P

= 0,005), vastaavasti, joilla on merkittävä annos-vaste vaikutuksen havaittu (

P

trendi = 0,008, taulukko 2 ). Log rank -testi osoitti merkittävää eroa kokonaiselossaoloaikaa väliin villityypin ja homotsygoottinen variantti genotyypin rs1954727 (log rank

P

= 0,019, kuva 1). Nämä tulokset osoittivat, että rs1954727 oli itsenäinen ennustaja CRC selviytymisen tutkimuksessamme väestöstä. Lisäksi olemme satunnaisesti valittu 50 potilasta mukana tässä tutkimuksessa sekä veren ja normaaleista kudoksista saatavilla ja genotyyppi kaikki seitsemän SNP sekä veren ja kudosten DNA: t näille potilaille. Genotyyppaustulokset Tulokset olivat 100% yhtäpitävät välillä veren ja kudosten DNA-näytteitä. Lisäksi kunkin seitsemän SNP teimme testi vuorovaikutus (heterogeenisuus) väliin SNP ja DNA lähde eikä havainnut mitään merkittävää vuorovaikutusta (

P

vuorovaikutusta varten eloonjäämiseen vaihtelee 0,143 varten rs1954727 kohteeseen 0,651 ja rs2286063, tuloksia ei ole esitetty). Yhdessä nämä rivit näytön mukaan eri DNA lähteistä ei vaikuttanut tehdyt havainnot tässä tutkimuksessa.

Association of rs1954727 kanssa eloonjäämisaste CRC potilaiden ositettu isäntä ominaisuuksia

analysoitava tarkemmin vaikutusta rs1954727 eloonjäämiseen CRC potilailla ositettu demografiset ja kliiniset ominaisuudet. Kuten taulukosta S1, merkittävät parempi eloonjäämisaste myönnetty rs1954727 havaittiin vanhemmilla potilailla (HR = 0,12, 95% CI, 0,03-,60,

P

= 0.010), miehillä (HR = 0,20, 95% CI, 0,05-0,75,

P

= 0,017), tupakoimattomia (HR = 0,28, 95% CI, 0,11-,73,

P

= 0,009), ei koskaan juovat (HR = 0,35, 95% CI, 0,15-0,84,

P

= 0,018), ja potilaille, joilla on alhaisempi koulutustaso (HR = 0,28, 95% CI, ,08-,94,

P

= 0,040 ), kemoterapiaa (HR = 0,33, 95% CI, 0,14-,79,

P

= 0,012), paksusuolen syöpä (HR = 0,09, 95% CI, 0,02-0,40,

P

= 0,002), jossa on huono ja kohtalainen kasvaimen erilaistumiseen (HR = 0,32, 95% CI, ,13-,78,

P

= 0,012), jossa vaihe 3 tai 4 kasvaimet (HR = 0,16, 95% CI, 0,04-0,65,

P

= 0,011), ja molemmat pienempiä tai suurempia painoindeksi (HR = 0,20, 95% CI, 0,04-0,97,

P

= 0,045, tai HR = 0,32, 95% CI, 0,11-0,92,

P

= 0,035, tässä järjestyksessä). Merkittävä annoksesta riippuvainen vaikutus myönnetty rs1954727 näkyi potilailla, jotka olivat vanhempia (

P

trendi = 0,006), mies (

P

trendi = 0,012), ei koskaan tupakoitsija (

P

trendi = 0,021), ei koskaan juomari (

P

trendi = 0,025), ja potilailla, joilla on korkeampi painoindeksi (

P

trendi = 0,025), kemoterapiaa (

P

trendi = 0,012), jossa kasvain asema paksusuolensyöpä (

P

trendi = 0,012), huono ja kohtalainen kasvain eriyttäminen (

P

trendi = 0,016), ja kehittyneitä kasvain vaiheessa 3-4 (

P

trendi = 0,003). Niistä 319, joilla on kemoterapialla, 308 (96,6%) sai FOLFOX hoito, mukaan lukien foliinihapon (FOL), fluorourasiilia (F) ja Oksaliplatiini (OX). Rajoitetaan analyysi kuin potilailla, jotka saivat FOLFOX tuotti samanlaisia ​​tuloksia kuin nykyisten analyysi (tietoja ei esitetty).

Moduloiva vaikutuksia kemoterapian CRC eloonjäämiseen tekijänä rs1954727

Koska valtaosa CRC tutkimuspotilaat oli kemoterapiaa, me arvioitu, moduloivan vaikutuksia yhdistyksen välillä kemoterapiaa ja yleistä potilaan selviytymistä, stratifioituna rs1954727. Kuten taulukosta 3, joilla on kemoterapialla oli merkitsevästi parempi kokonaiseloonjääminen HR = 0,44 (95% CI, 0,26-0,75,

P

= 0,002) verrattuna potilaisiin ilman kemoterapiaa. Tämä merkittävä vaikutus elossaololuku myönnetty kemoterapiaa havaittiin vain potilaille, joilla on heterotsygoottinen genotyyppi rs1954727 vuonna kerrostunut analyysissä (HR = 0,45, 95% CI +0,22-0,92,

P

= 0,028), mutta ei ne kuljettavat homotsygoottinen villityypin tai variantin genotyypin.

Haplotyyppifrekvenssianalyysi ja diplotype on

ANGPT1

geeni ja CRC kokonaiselossaolo

haplotyypin ja diplotype analyysit tehtiin sen arvioida yhdistetty vaikutus kahden SNP

ANGPT1

geenin CRC eloonjäämiseen. Kuten taulukossa 4 on esitetty, oli neljä haplotyyppien järjestyksessä rs9297395 ja rs1954727 (W_W: 52,5%, W_V: 42,2%, V_W: 4,3%, ja V_V: 1,0%) ja kolme diplotypes (W_W-W_W: 28,8%, W_W-W_V: 44,3%, ja W_V-W_V: 19,7%), jonka taajuus 1% tutkimuksessa väestöstä. Kun verrataan haplotyyppi, joka sisältää villityypin alleeli kaksi SNP: (W_W), potilailla, joilla on haplotyyppi W_V osoitti merkittävästi parempi eloonjäämiseen (HR = 0,59, 95% CI 0,42-0,83,

P

= 0,002), mikä oli yhdenmukainen pääasiallinen vaikutus analyysin rs1954727 SNP. Sillä diplotype analyysi, verrattuna diplotype sisältävät homotsygoottinen villityypin genotyypin sekä SNP: (W_W-W_W), diplotype joka sisältää yhden kopion W_V haplotyyppi (W_W-W_V) ja kaksi kopiota W_V haplotyyppi (W_V-W_V) näytteillä asteittain parannettu kokonaiselossaoloaikaa HR = 0,74 (95% CI ,44-+1,24, P = 0,247) ja 0,30 (95% CI +0,13-0,67,

P

= 0,004), tässä järjestyksessä. Olemme myös suorittaa haplotyypin ja diplotype analysoi kolmen SNP

AMOT

geeni, mutta mitään merkittäviä löydöksiä (tuloksia ei ole esitetty).

Keskustelu

tässä tutkimuksessa raportoimme merkittävän yhdistys yleisen eloonjäämisen kohortin 408 kirurgisesti saaneista CRC potilailla, joilla on geneettinen variantti, rs1954727, vuonna

ANGPT1

, keskeinen geeni VEGF-riippumaton angiogeenisten signalointi polku. Lisäksi tunnistimme uskottava yhteisvaikutusta tämän SNP ja kemoterapian moduloimalla CRC elossaololuku.

Angiogeneesi-inhibiittorit kohdistaminen VEGF-signalointireitin, kuten bevasitsumabi sunitinibi ja sorafenibi, ovat osoittaneet merkittävää terapeuttista tehoa erilaisia ​​syöpiä ja hyväksynyt Yhdysvaltojen Food and Drug Administration syövän hoidossa [24]. Nämä VEGF-kohdistaminen antiangiogeneettiset hoitoja johtaa usein vain ohimenevä vasteita syöpäpotilailla, pääasiassa johtuen kahden tilan vastustuskyvyn angiogeneesin esto, mukautuva vastus ja luontainen ei-vaste [13]. Molemmat tilat resistenssin voidaan katsoa johtuvan luontaisen heterogeenisuus geneettisesti epästabiili kasvainsolujen läsnäolo tarpeeton angiogeenisten tekijöiden, ja rekrytointi hematopoieettisten solujen ja tulehdussolujen kasvaimen massa [13]. On mahdollista, että hoitomenetelmät samanaikaisesti moniosaisia ​​angiogeenisten tekijöiden, tulehduksellinen polkuja, ja etäpesäkkeiden prosessit voivat aiheuttaa kliinisesti merkityksellisiä vastauksia [25]. ANGPT-TIE-reitin esittelee houkutteleva mahdollisuus tällaiselle terapeuttisesta koska se ei ole tärkeä ainoastaan ​​angiogeneesiä ja verisuonten homeostaasin käytettäessä VEGF-riippumattomalla tavalla, mutta se tarjoaa myös tärkeän yhteyden angiogeneesin ja tulehduksen reitit [25].

Ihmisen ANGPT-TIE-proteiinin perhe koostuu kolmesta ligandien, ANGPT1, ANGPT2 ja ANGPT4, sekä kaksi reseptoreihin, TIE1 ja TIE2. ANGPT1 on tärkein välittäjä VEGF-riippumattoman angiogeneesiä signalointireitin, joka aktivoi alavirran PI3K /AKT-reitin kautta vuorovaikutus TIE2 proteiini [26], [27]. ANGPT2 estää ANGPT1 sitoutumisen TIE2 reseptoriin ja estää sen aktivoitumisen [28]. Dynaaminen tasapaino ja juokseva ilmentymistä ANGPTs ja VEGF ylläpitoon tarvittavat angiogeneesiä [29], [30]. Ylös-säätely ANGPT1 on tutkittu monissa syövissä, mikä viittaa siihen, että ANGPT1 korreloi voimakkaasti kasvaimen pahanlaatuisuuden [25]. Kuitenkin useissa tutkimuksissa on raportoitu inhiboivan vaikutuksen ANGPT1 on patologisen verisuonten laajentumista, mikä osoittaa, että ANGPT1 voi toimia myös tuumorisuppressori useita syöpiä, mukaan lukien CRC [31], [32], [33], [34]. Nämä löydökset olivat yhdenmukaisia ​​raportteja useiden riippumattomien tutkimusten osoittavat, että suurempi suhde ANGPT2 /ANGTP1 liittyi huonoon ennusteeseen useiden maligniteettien, mukaan lukien CRC [25]. Nämä paradoksaalinen havainnot viittaavat vaikutuksiin ANGPT1 kasvainten ominaisuuksiin ja ennuste saattaa olla syöpää erityinen ja riippuu myös muista angiogeneesiin liittyvien geenien.

Genetic vaihtelut ANGPT geenit voivat johtaa muunnetun geenin tuotantoa ja johtaa aktivointi /inaktivointi geenin. SNP

ANGPT1

geeni on yhdistetty riski sairauksien kuten autoimmuunisairauksien, nuoruusiän sairastavalle, ja portopulmonary verenpainetauti [35], [36]. Kuitenkin tähän mennessä ei ole ollut tutkimuksen perusteella yhdistys

ANGPT1

SNP riskiin ja kliininen tulos syöpiä. Tässä tutkimuksessa olemme tunnistaneet

ANGPT1

SNP, rs1954727, joka voi ennustaa eloonjäämisaste CRC potilaiden leikkauksen jälkeen. Tämä SNP sijaitsee 3 ’UTR:

ANGPT1

geeni. Toiminnallinen SNP tällä alueella voi vaikuttaa lähetti-RNA vakauteen tai microRNA sitova. Bioinformatiikan etsimään PolymiRTS tietokannan ei havaittu mahdollisia miRNA sitoutumiskohta välittömässä ympäröivällä alueella tämän SNP [37]. Kuitenkin vielä hakuun johti tunnistamiseen neljän SNP 3’UTR

ANGPT1

geenin, jotka sijaitsevat otaksutun miRNA sitovat alueet (tuloksia ei ole esitetty). Lähin SNP on noin 600 nukleotidin päässä rs1954727. Toiminnalliset characterizations kuten reaaliaikainen PCR seurasi lusiferaasianalyysissä tarvitaan, onko rs1954727 on suoraa fysiologista vaikutusta lähetti-RNA ilmaus

ANGPT1

.

kerrostunut analyysin löysimme suojaava vaikutus myönnetyn rs1954727 oli huomattavampi potilailla, jotka saavat kemoterapiaa (taulukko S1). Aiemmat tutkimukset ovat raportoineet huomattavasti antituumoriaktiivisuus kun yhteiskäyttöä ANGPT1 vasta-ainetta ja kemoterapiaa hoidettaessa kiinteitä kasvaimia, mukaan lukien CRC [38]. Nämä linjat todisteet sai meidät edelleen arvioida moduloiva vaikutus kemoterapia potilaiden eloonjäämiseen ositettu genotyyppejä rs1954727. Yhdenmukainen sen havainnon kanssa, että variantti genotyyppejä rs1954727 siirrettävä paremmin yleistä eloonjäämistä kemoterapiaa saaneilla potilailla, löysimme parantunut selviytymistä myönnetty kemoterapiaa pysyivät havaittavissa potilailla, joilla on heterotsygoottinen genotyyppi rs1954727 (taulukko 4). Totesimme myös, että potilailla, joilla on homotsygoottinen variantti genotyyppi rs1954727,

P

arvo ei ollut merkitsevä (p = 0,297), vaikka parantunut eloonjäämisaste myönnetty kemoterapia oli paljon näkyvämpi (HR = 0,19). Tämä voi johtua epävakaa arvion johtuva pieni potilas numero tässä ryhmässä (vain 1 potilaiden kuoleman ilman kemoterapiaa, taulukko 3) .Future tutkimukset suurempia otoskoko tarvitaan riittävän tilastollinen voima analysointiin välisten vuorovaikutusten rs1954727 ja kemoterapia potilaiden eloonjäämiseen.

on useita vahvuuksia tässä tutkimuksessa. Potilaat otettiin Xi’an ja viereinen alue, alueella, joka on erittäin houkutteleva johtamiseen väestöön perustuva tutkimus johtuen maantieteellisestä vakautta alhainen liikkuvuus nopeudella. Myös potilaat analysoitiin tässä tutkimuksessa olivat erittäin homogeenisia, että kaikilla potilailla oli adenokarsinooma ja kirurgisesti käsitelty poistamiseksi primäärikasvaimissa. Lisäksi kaikki kemoterapia aloitettiin 2 kuukauden kuluessa leikkauksesta ja lähes 80% potilaista sai kemoterapiaa. Erittäin homogeeninen potilasryhmät ja hoitoja sekä alhainen potilaan menetys seuranta, vähentää huomattavasti sekoittavia vaikutuksia heterogeeninen terapeuttisten yksityiskohtaiset monessa muussakin vastaavassa biomarkkereiden tutkimuksissa CRC ennustetta. Rajoitukset Tutkimuksemme sisältävät yleistettävyyttä kysymys, koska tutkimus rajoitettiin Han-kiinalaisia. Edelleen arviointi on tarpeen selvittää nämä löydökset voidaan yleistää muihin etnisiin ryhmiin. Lisäksi maltillinen otoskoko rajoitettu pätevyyden joidenkin kerrostunut analyysien pienestä näytteestä. Analysoimme tutkimuksessa tehon pääasiallinen vaikutus analyysin sekä kemoterapia-ositettu analyysi. Tiettyihin lisäaineen geneettistä mallia (käytetty analyysi tämän tutkimuksen) ja monotoninen vaikutus, joka on MMM 43,5% varten rs1954727, ainoa merkittävä SNP tunnistettu tässä tutkimuksessa, 23,0% ja kuolleisuus koko tutkimuksen väestö, ajan mediaani kuolemaan 15,2 kuukautta kuolleen potilaiden ja mediaaniaika seurannan 23,9 kuukautta censored potilailla, meillä on noin 82% teholla havaitsemaan HR 0,6 (heterotsygoottinen genotyyppi vs. homotsygoottinen villityypin genotyypin) ja 0,4 (homotsygoottinen variantti genotyyppi vastaan ​​villityypin genotyypin). Teho on hieman suurempi, jos käytetään trendi testi. Kun analyysi rajoittuu kemoterapiaa saavilla potilailla, voimamme on noin 70% havaita edellä mainitun vaikutuksen kokoja. Kuitenkin meidän teho on rajallinen, kun analyysi on rajoitettu 89 potilasta ilman kemoterapiaa tai muu ei-merkitsevä SNP tässä tutkimuksessa, joilla on alhainen MAF, ja niiden tulokset alle-käyttöinen analyysit ovat alustavia ja niitä on tulkittava varoen . Tästä huolimatta ilmoittautuminen tästä väestöstä on edelleen käynnissä, jolla on alhainen potilaan menetys, jonka avulla voimme saada korkeamman tilastollista voimaa perusteellisia analyyseja tulevaisuudessa.

Yhteenvetona Meidän havainto viittaa siihen, että geneettistä polymorfismia

ANGPT1

geeni liittyy merkittävästi parempi eloonjäämisaste CRC potilailla leikkauksen jälkeen. Jatkotutkimuksissa suurempia populaatioita tarvitaan vahvistaa tätä päätelmää.

tukeminen Information

Taulukko S1.

ry rs1954727 vuonna ANGPT1with kokonaiselossaoloaikaa CRC potilailla ositettu isäntä ominaisuudet.

doi: 10,1371 /journal.pone.0034758.s001

(DOC) B

Kiitokset

Kiitämme tohtori Marie Dennis ja Heidi Swan (Division of Population Science, Lääketieteellisen Syöpätautien, Thomas Jefferson University) tieteellistä muokkausta.