Krooninen sairaus

Enzyme immunosorbenttimääritys, ELISA, on erittäin herkkä immunoeassay, jota käytetään sijasta radioimmunomäärityksen koska se ei liity erityisiä käsittelyä ja hävittämistä menettelyt vaativat työtä radioaktiivisia aineita. ELISA perustuu vasta-aineiden läsnäolon havaitsemiseksi antigeenien nestemäisten näytteiden, mikä muuttaa kirkkaasta nesteestä värillinen yksi. Koska ne ovat vasta-aineeseen perustuvat, ELISA: t, kutsutaan immunomäärityksiä. ELISA voi havaita pieniä määriä esiintyvien taudinaiheuttajien näytteet kuten kehon nesteiden, ennen kuin ruumis oli ollut mahdollisuus immuunivaste. Kun kokeillaan käyttäen ELISA-vasta-aineet näytteissä sitoutuvat antigeeniin levyn ja poistamisen jälkeen ylimääräinen vasta-aine, sitoutunut vasta-aine voidaan havaita lisäämällä entsyymi-konjugoitua toista vasta-ainetta.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on tarkastella kahta asiaa: ensinnäkin, on olemassa antigeeni-vasta sitovat lautaselle, joka sisältää kaksi erilaista vasta-spesifisiä kahdelle eri antigeenille: kananmunan lysotsyymiä (HEL) ja naudan seerumin albumiinia ( BSA), ja toiseksi, kuinka paljon sitoutuminen on läsnä levyn? Näiden kysymysten tarkastelua, käyttämällä entsyymi-immunosorbenttimääritys auttaa näytön vasta-ainetta erittävien hybridoomien, joka on sekä erittäin herkkä ja järkevää tehdä. Menettely käyttäen ELISA on lisääntynyt käsityksiä siteet antigeenin vasta-aine, kuten testaus kuten HIV, huumeiden (marihuana), raskauksia jne

tarkoitus ELISA on selvittää, onko tietty antigeeni-vasta-siteet ovat läsnä näytteessä; jos on sitoutuvien vasta-aineiden antigeenejä, ELISA auttaa määrittämään, kuinka paljon. On olemassa kaksi pääasiallista muunnelmia tällä menetelmällä; yksi on niin, että me määrittelemme määrä antigeeni-vasta-sitova ja muut, aiemmin todettiin, on niin voimme nähdä, kuinka paljon vasta-aine on läsnä meidän näytteessä. Tässä laboratoriokoe, olemme päällystetty mikro-levy kuopat antigeenejä. Antigeeni on voimakkaasti absorboi muovi- ja pysyy kiinni hyvin pintaan koko menettelyn ajan. Pinnoituksen jälkeen ja lisäksi vasta-aineiden, pystyimme määrittämään antigeeni-vasta-sitoutumisen.

Useimmissa kokeissa tutkijat käyttävät BSA: ta ja HEL, kuten eivät liity antigeenejä ohjaamaan ei-antigeenin reaktiivisuus. Esimerkiksi kuopat on päällystetty HEL antigeeni ei positiivisia merkkejä, kun anti-BSA-vasta-aineita on läsnä, ja päinvastoin. Tämä tarkoittaa, että entsyymimäärä-konjugoitu vasta-aine on sidottu kuhunkin kuoppaan pystyy hydrolysoimaan väritön substraatti, jolloin saatiin värillisen tuotteen.

Yhteenvetona, tulokset käyttäen ELISA tulisi päätellä, että antigeenit sitoutuvat vasta-aineet, joissa edellyttäen antigeenejä läsnä. Sekundaarinen vasta-aine on kiinnitetty entsyymiä, joka kemiallisesti muuttaa entsyymin substraatti, kääntämällä se väritön liuos keltainen liuos. Sivuhuomautuksena kuitenkin nollakoekuoppien ilman antigeenejä ovat vähennettävä säätölevyn mutta ei muodosta kumpaakaan antigeeni-päällystetyillä levyillä. Tämä johtaa siihen, että sekundaarinen vasta-aine on kovalenttisesti sidottu, konjugoitu, entsyymiin, joka katalysoi kemiallista reaktiota, kun entsyymi lisätään substraatti. Tämä värimuutoksen tuottamiseksi, jos seerumin näyte sisälsi vasta-ainetta bakteerit, koska entsyymi sitoo sekundaarinen vasta-aine sitoutuisi primaariseen vasta-aineeseen jo sitoutuneen antigeenin kuoppiin.