Krooninen sairaus

tiivistelmä

Eturauhassyöpä (PC) on johtava kuolinsyy miehillä kuitenkin tekijöitä, jotka säätelevät sen etenemistä ja lopulta etäpesäke luun jää epäselväksi. Tässä osoitamme, että WISP1 /CCN4 ilmentymisen eturauhassyöpäkudoksille oli säädelty alkuvaiheessa sairauden ja lisäksi, että se korreloi lisääntynyt pitoisuuksia verenkierrossa WISP1 seerumeista potilaista varhaisessa vaiheessa taudin. WISP1 myös kohonnut hiiren eturauhassyöpämallin TRAMP että hypoplastic sairaan kudoksen, joka kehittää ennen kehittynyt syöpä muodostumista. Kun testataan anti-WISP1 vasta leviämisen vähentämiseksi PC3-Luc solujen kaukaisiin kohtiin testattiin se osoitti, että kahdesti viikossa injektiot anti-WISP1 vasta vähensi ja kokoa kaukaisten kasvaimia kehittyi jälkeen intrakardiaa- (IC) injektion PC3-Luc soluja hiirissä. Kyky vasta-aineiden WISP1 kasvun inhiboimiseksi PC3-Luc syöpäsoluja hiirillä arvioitiin myös ja osoittaneet, että kahdesti viikossa injektiot anti-WISP1 vasta vähentää paikallisen tuumorin kasvua, kun tarkastellaan ksenografteissa. Jotta ymmärtää paremmin vaikutusmekanismi, migraation PC3-Luc solujen kalvojen läpi tai ilman Matrigel ™ este näytti solut puoleensa WISP1, ja että tämä vetovoima inhiboitui käsittelemällä anti-WISP1 vasta-aineita. Samalla osoitetaan ilmaus WISP1 at luun kasvaimen käyttöliittymä ja stroomaan varhaisen asteen syöpiä ehdotti WISP1 ilmentyminen on hyvät mahdollisuudet pelata rooleja sekä edistää syövän kasvu ja sen leviämistä luuhun. Yhteenvetona säätely ylöspäin WISP1 alkuvaiheessa syövän kehityksen yhdistettynä sen kyky estää leviämistä ja kasvua eturauhassyöpäsolujen tekee sekä mahdollinen kohde ja esteettömän diagnostinen markkeri eturauhassyövän.

lainaus: Ono M, Inkson CA, Sonn R, Kilts TM, de Castro LF, Maeda A, et al. (2013) WISP1 /CCN4: potentiaalisimmaksi Inhiboivaa eturauhassyövän kasvua ja leviämistä Bone. PLoS ONE 8 (8): e71709. doi: 10,1371 /journal.pone.0071709

Toimittaja: Surinder K. Batra, University of Nebraska Medical Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 06 maaliskuu 2013; Hyväksytty: 2. heinäkuuta 2013. Julkaistu: 14 elokuu 2013

Tämä on avoin-yhteys artikkeli, vapaa kaikki tekijänoikeudet, ja saa vapaasti jäljentää, levittää, välittää, modifioitu, rakennettu, tai muuten käyttää kuka tahansa laillista tarkoitusta. Teos on saatavilla Creative Commons CC0 public domain omistautumista.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukee Division of Intramural Research, NIDCR on Intramural tutkimusohjelma, NIH, DHHS (MO, CAI, TMK, LFCD, AM (Maeda), LML, PGR, ADB, LL NM-F, ACB, NPSC, AM (Molinolo) ja Mfy), jonka avustusta puolustusministeriön W81XWH-11-1-0239 (AJ ja NSF) ja jonka Howard Hughes Scholarship (RS). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Koska toiseksi suurin syy syövän kuolemaan miehiä kaikkien rotujen, eturauhasen syöpä on merkittävä terveysongelma miesten [1], [2]. On ehdotettu, että suurin iäkkäillä miehillä satama jälkiä eturauhassyövän, mutta molekyyli perustan, miten ja miksi syövän edetessä yhä vaikeasti [3]. Kuten monet muut vaaralliset syöpiä, eturauhassyöpä solut ovat erittäin korkea esiintyvyys siirtyessä primaarikasvaimen kaukaisiin paikkoihin, joissa ne ovat suorempi syy sairastuvuutta ja kuolleisuutta [4]. Usein sivusto etäpesäke eturauhasen syöpä on luun kuitenkin, kun syöpä etenee tässä vaiheessa, se on yleensä parantumaton [5], [6], [7]. Siksi on olemassa kriittinen tarve 1) ymmärtää, mitä tekijät vaikuttavat sairauden etenemisen eturauhasen, 2) ymmärtää, miten ja miksi eturauhasen syöpiä ”koti” luuhun ja edelleen 3) kehittävät uusia tapoja ehkäistä tätä monimutkaista ja tuhoisa käsitellä asiaa. Etäpesäkkeitä eturauhasen syöpä voi olla tehoton prosessi, ja vain murto-osa eturauhassyövän potilaista kehittyy syöpä, joka muodostaa etäpesäkkeitä kaukaisiin kohtiin [3]. Analysoimalla aikaisin tapahtumia, jotka tapahtuvat aikana eturauhassyövän etenemistä on mahdollista, että uusi diagnoosimenettelyistä voitaisiin kehittää että ennustaa etenemistä ja tulevaa vakavuudesta syöpä ja optimoida ajoitus ja luonne hoitointerventioiden. Uutta tietoa ehdokas proteiinien mukana tässä prosessissa voisi myös mahdollisesti käyttää uusien hoitomuotojen leviämisen vähentämiseksi ja perustamalla taudin kaukaisiin kohtiin, kuten luuta.

WISP1 (wnt aiheuttama erittyvää proteiinia-1 ) kuuluu CCN perheen, joka on nimetty sen perustajajäseniä Cyr61 /CCN1, CTGF /CCN2 ja marraskuu /CCN3. Tällä hetkellä kuusi perheenjäseniä, jotka myös WISP1 /CCN4, WISP2 /CCN5 ja WISP3 /CCN6 [8]. WISP1 oli ensimmäinen tunnistettu geeni ilmaistu metastaattinen melanooma linja, K-1735, jossa se oli nimeltään Elm1 (viitaten ilmaisunsa nöyrä metastaattisen soluissa) [9]. Samoihin aikoihin että Elm1 keksittiin, WISP1 todettiin erillisessä laboratoriossa, jossa todettiin olevan ajan säädellään wnt1 transformoitujen nisäepiteelisoluissa, ja eri paksusuolensyöpä linjat sekä ilmaistaan ​​ihmisen paksusuolen syövän kudosta [10 ]. Sen jälkeen, WISP1 osoitettiin antaa onkogeenisen ominaisuudet rotan munuaissolut (NRK-49F), mukaan lukien nopean kasvun, parantaa kyllästystiheyden ja lisääntynyt kyky muodostaa kasvaimia hiirissä [11]. Koska alkuperäisen tunnistamisen, WISP1 on havaittu eri syövissä, mukaan lukien ruokatorven okasolusyöpä [12], kondrosarkooma [13], rintasyöpä [14], [15], neuro- tyypin I [16], kolorektaalisyövän [17 ] Lewisin keuhkokarsinooma [18], invasiivisia kolangiokarsinooma, scirrhous mahasyöpä [19] ja kohdun limakalvon endometriod adenokarsinooma [20]. Mielenkiintoista, WISP1 ilmaistaan ​​useissa näistä syövistä on lokalisoitu strooman ympäröiviin kudoksiin syöpäsoluja [15], mikä viittaa siihen, että se voisi olla rooli mikroympäristön, joka tukee kasvua ja /tai mahdollinen leviäminen primaarikasvaimen.

ei-patologisten tilojen, WISP1 löytyy useista alkion ja aikuisen kudoksissa, jotka kuuluvat erityisesti uusia sivustoja luun muodostumisen [21], jossa se näyttää kontrolloivan osteogenesis [22]. Ottaen huomioon, että eturauhasen syövät on suuri tropismista luun ja lisäksi, että tämä prosessi voidaan parantaa lisäämällä luun vaihtuvuus [23] me arveltu, että WISP1 voi mahdollisesti olla mukana säätelyssä eturauhassyövän metatasis. Tämä koe tehtiin ensin onko ja missä WISP1 on ilmaistu ensisijaisesti eturauhaskasvaimissa ja sitten määrittää roolin WISP1 kasvuun ja itseohjautuva eturauhasen syöpäsolujen luuston kudosta. Meidän Tulosten mukaan WISP1 löytyy alkuvaiheessa eturauhassyövän joko kudoksissa koepaloja tai seerumista kärsivissä potilailla samoin kuin hypoplastic ennalta syöpä kudosta hiirimallissa eturauhassyöpää. Lisäksi osoitimme, että esto WISP1 funktion neutraloivat vasta-aineet vähensivät kasvua eturauhassyöpäsolulinja n ksenografti kasvain sekä sen homing luuhun. Yhdessä Tutkimuksemme osoittaa WISP1 uutena osallistuja eturauhassyövän kasvua ja luun etäpesäke prosesseja.

Methods

Ethics lausunto

ihmiseen kohdistuvan: Core koepaloja edustavat eri laadut eturauhassyövän (I-IV) sisältäen kontrollisilkkipaperia ostettiin USA Biomax ™ (Cat # PR801) ja niiden käyttö hyväksymiä National Institutes of Health Office of ihmiskoe, Bethesda, MD (Poikkeus # 11583). Hyväksynnän käyttää ihmisen seerumia saatiin Johns Hopkins University Medicine (JHM) Institutional Review Board (IRB), Baltimore, MD. Määrä Hyväksytyn IRB protokolla käytettäväksi määritystä seerumi on JHM IRB-X No: 04-07-27-03e. Patologinen näytteet /diagnostiset näytteet kaupallisesta toimittajat ovat peräisin lähteistä, jotka ovat julkisesti saatavilla, ja tiedot tallennetaan tutkijan siten, että henkilöt, ei voida tunnistaa, suoraan tai tunnisteita, jotka liittyvät aiheet ja suostumus saatiin kaikilta seerumin luovuttajia ennen sen käyttöä.

selvennetään: luonne käytettyjen näytteiden ihmispotilaille, kirjallinen suostumus saatiin luovuttajilta osana protokollien keräämiseen seeruminäytteitä (ProMedDx, Inc.) ja kudosbiopsia ytimet (US. Biomax- Inc.). Nämä protokollat ​​ja niiden suostumuslomakkeet oli hyväksynyt kaupallisia lähteitä oma Institutional Review Boards. Lisätietoja tarkat yksityiskohdat sisällöstä kirjallinen suostumus lomakkeet löytyvät www.promeddx.com varten seeruminäytteitä ja www.biomax.us varten kudosmatriisien. Nämä protokollat ​​ja niiden suostumuslomakkeet oli hyväksynyt kaupallisia lähteitä oma Institutional Review Boards. Koska kaupallisesti saatavilla näytteet tunnistamattomiksi ja de-linkitetty luovuttajien, niiden käyttö ei sovi NIH: n määritelmän ihmiskoe, joten protokollat ​​on vapautettu (Poikkeus # 1158 varten NIH ja No: 4.7.27 -03e varten JHU).

eläinkokeilla

Kaikki toimenpiteet, joissa käytetään eläimiä tehtiin National Institutes of terveyden ja laitokselle hyväksyneet sen eläimen kuvatut paperi on tiedossa kuten eläinten hoidon ja käytön komitea (ACUC). Hyväksyntä numero suoritetuissa kokeissa nykyisessä tutkimuksessa on NIH ACUC # 12-645.

polyklonaalisia vasta-aineen tuotanto

Ihmisen WISP1 jolla oli sekvenssi RDTGAFDAVGEVEAWHRN (aminohapot 198-216, liittyminen numero NP 003873, katso kuva S1A) syntetisoitiin ja konjugoitiin kautta kysteiini aktivoitu keyhole hemosyaniini ja ruiskutetaan kani (LF-185) tuottaa polyklonaalisia vasta-aineita käytettäessä AAALAC hyväksytty laitos (Covance Immunology Palvelut, Denver, PA, USA) . Titteri tuloksena antiseerumia testattiin käyttämällä suoraa ELISA: lla joko LF-185 peptidin tai puhdistetulla ihmisen WISP1 kontrollina (PeproTec, Rocky Hill, NJ, USA), joka on sitoutunut mikrotiitterilevylle. Spesifisyys LF-185 testattiin Western blot käyttämällä kolmea muuta käytettävissä jäsenten CCN perheen Cyr61 /CCN1, CTGF /CCN2 ja marraskuu /CCN3 (PeproTec, Rocky Hill, NJ, USA) ja osoitti immunoreaktiivisuus vain kohti WISP1 (Kuva S1B ). Toinen kani vasta-aine WISP1 syntyi sekvenssiä C-terminus, joka on erittäin konservoitunut ( 95%), hiiren ja ihmisen välillä WISP1 (aminohapot 346-367, NP 003873 katso kuvio S1A), käyttämällä ihmisen peptidisekvenssi CRNPNDIFADLESYPDFSEIN konjugoitu kautta kysteiini on aktivoitu KLH (LF-187). Tämä jälkimmäinen vasta-aine osoitti myös korkea reaktiivisuus WISP1 eikä muille CCN perheenjäsenet testataan (S1B).

polyklonaalisia vasta-aineen puhdistus

peptidit käytetään tuottamaan LF-185 ja LF-187 oli puhdistettiin käyttämällä niiden peptidin ja Sulfolink immobilisointi Kit (Thermo Scientific, Rockford, IL, USA), ja vasta-aineet affiniteetti- puhdistettiin seuraavasti. Ensimmäinen peptidi-kytketty pylväät tasapainotettiin mukaan valmistajan protokollan ja sen jälkeen 2,0 ml kutakin seerumia pylvään läpi, pestiin PBS: llä, ja eluoitiin 4 M guanidiinia liuosta PBS: ssä. Eluoitu vasta-aineet välittömästi dialysoitiin ylimäärin määrään PBS yön yli 4 ° C: ssa ja elpyminen immunoreaktiivisuutensa todentaa ELISA. Affiniteettipuhdistettua vasta-aineita säilytettiin -80 ° C: ssa ennen käyttöä. Kokeisiin valvontaa, IgG puhdistettiin kaniinin challanged ainoastaan ​​adjuvanttia käyttämällä proteiini A-IgG Purification Kit (Thermo Scientific, Rockford, IL, USA) ja proteiini A affiniteettipylvääseen käyttäen samaa sitova, pestä, eluutio ja dialyysi käytetyt olosuhteet puhdistava LF-185 ja LF-187.

immunohistokemia ja TRAP värjäys

Objektilasit värjättiin valmistajan suositusten tavalla samanlainen kuin käytettiin hiiren osissa kuvattu alla. Lyhyesti, kudosleikkeet poistettiin parafiini, endogeenisen peroksidaasin tuhoutui metanolisella H

2O

2, vedettömät ja inkuboitiin kanin polyklonaalisella anti-WISP1 IgG (sc-25441, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA) laimennettiin pitoisuuteen 4 ug /ml (01:50) PBS: ssä plus 10% vuohen seerumia yli yön 4 ° C: ssa. Normaali kaniinin IgG isotyyppiä on käytetty ei-immunoreaktiivisia ohjaus (AB-105-C, R 0,05 katsottiin tilastollisesti merkittäviksi. Jakauma mitattiin parametrien seerumin WISP1 arvot arvioitiin D’Agostino Pearson omnibus normaalius testin. Vertailut kahden ryhmän välillä suoritettiin käyttäen paritonta Studentin

t

-testi, kun taas vertailujen kolme tai useampia ryhmiä käytettiin yksisuuntaista ANOVA testi. Yhdistys WISP1 proteiinin tasot PSA arvioitiin käyttäen Spearmanin korrelaatiota.

P

arvojen 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

WISP1 Protein Expression in Eturauhassyöpä Tissue ja Serum Potilaiden

antiseerumia nosti vastaan ​​huonosti ja erittäin konservoitunut domeeni WISP1 (LF-185 ja LF-187 vastaavasti, katso S1) kaneilla ja todettu olevan erittäin reaktiivinen WISP1 (S1) ja pysty rajat reagoida kolme muuta jäsentä CCN perheen kuten Cyr61 /CCN1, CTGF /CCN2 tai marraskuu /CCN3 (S1). Vaikka ei suoraan testata Western blotilla, ihmisen WISP2 /CCN5 ja WISP3 /CCN6 eivät sisällä ensisijainen proteiinisekvenssien, joiden voidaan kohtuudella katsoa olevan homologinen erittäin konservoituneen ihmisen peptidi käytetään tuottamaan LF-185. Sijainti ja suhteellisen tason ilmentymisen WISP1 normaaleissa ihmisen eturauhasen ja eturauhasen syöpiä eriasteinen vakavuus arvioitiin kanssa LF-185 käyttämällä kudosta ydin koepaloja kaupallisesti saatu Biomax ™. Tässä kokeessa ydin biopsiat matalan ja korkean asteen syöpiä (I oli matalin, IV oli korkein) ja värjättiin immunohistokemialla käyttämällä WISP1 antiseerumit ja verrattiin värjäämällä, käyttämällä IgG negatiivisena kontrollina. Arvio Tämän värjäytymisen vähintään kaksi riippumatonta tarkkailijaa osoitti, että WISP1 ilmentyy suuremmassa määrin eturauhassyöpä verrattuna normaaleihin kontrolleihin (kuvio 1A), ja että se oli ensisijaisesti sijaitsee strooman ympäröivään kudokseen kasvain ja jossain määrin epiteelikudoksessa. Tämän lisäksi, WISP1 värjäytyminen oli suurempi näytteissä, jotka olivat peräisin potilaista, joilla on alhaisin arvosana syövän (I) verrattuna niihin, joilla korkeamman laadut (IV) syöpää.

. Immunohistokemiallinen havaitseminen WISP1 sisään koepalat potilailla, joilla on eri laatuja eturauhassyöpää. Erityisiä värjäytyminen WISP1 (LF-185) havaittiin strooman ja epiteelin kasvaimissa alemmista Gleason Grade (Grade I) tulokset ja hajanaisesti koko erittäin metastaattinen (IV asteen) neoplastisia syöpä. B. edustaja kuva kvantitatiivinen western blot määritystä käytetään mittaamaan seerumin WISP1 seerumissa normaaleista kohteista (kaistat 1-6) ja potilailla, joilla on eturauhasen syöpä (kaistat 7-12). C. määrälliset bändejä 20 terveille henkilöille ja 60 potilaalla on eturauhassyöpä verrattiin

t

-testi. D. Näytteitä ositettu taudin vaiheessa käyttämällä TNM pisteytysjärjestelmä ja vertailtiin ANOVA testi. NL, Normal, pT1, pT2, pT3 matalimmasta korkeimpaan vakavuus, LN

+ /SV

+, imusolmuke positiivinen, rakkularauhanen positiivinen. E. tasot WISP1 stratifioitiin Gleason tulokset ja verrattiin ANOVA testi, 5 on alin vakavuus, 9 on suurin vaikeusaste. F. Yhdistyksen seerumin WISP1 tasoilla PSA analysoitiin Spearmanin korrelaatiota (PSA, X-akseli, WISP1, Y-akseli). Jokainen pieni ympyrä edustaa arvoja yhdelle potilaalle.

immunohistokemia tietoja, jotka osoittavat, että WISP1 ilmentyminen oli voimakkainta alemman luokan koepaloja johti meidät spekuloida, että WISP1 tällaisissa syövät voisivat karata seerumi ja havaita käyttämällä immunoblottauksella tekniikat. Tämän hypoteesin testaamiseksi, seeruminäytteet tutkittiin western-blottauksella käyttämällä vasta-aineita WISP1 (kuvio 1 B). Meidän analyysi osoitti, että kun kaikki asteet koottiin WISP1 oli merkittävästi korkeampi seerumin potilailla, joilla on eturauhasen syöpä (PCA) verrattuna normaaleihin kontrolleihin (NL) (kuvio 1C). Nämä näytteet jaettiin edelleen käyttämällä kasvain, solmu, etäpesäkkeitä (TNM) pisteytysjärjestelmä ja osoitti, että suhteellinen taso WISP1 olivat merkittävästi suurempi potilailla, joilla laadut pT2, pT2 ja pT3 verrattuna joko NL tai potilaille, jotka olivat imusolmuke ja uraauurtava rakkula positiivinen (LN + /SV +) (kuvio 1 C). Ennustetusti, kun näytteet arvioitiin uudelleen käyttäen Gleason pisteytysjärjestelmää suhteelliset tasot WISP1 olivat merkitsevästi korkeammat asteet 5-7 verrattuna kehittyneempiä laadut 8-9 (kuvio 1 E). Mielenkiintoista, verrattuna PSA-arvot oli merkittävä käänteinen korrelaatio WISP1 ollessa suurimmillaan näytteiden oli alhaisin PSA-arvot (kuvio 1 F).

WISP1 Ekspressio TRAMP malli Eturauhassyöpä

jotta voitaisiin vahvistaa käsityksemme, että WISP1 oli säädellään ylöspäin eturauhassyöpä käytimme aiemmin luotuun hiirimallissa tunnetaan TRAMP (siirtogeeninen adenokarsinooma hiiri eturauhasen). Tämä kanta siirtogeenisiä hiiriä alkaa hankkia hypoplastic eturauhasessa 8 viikon iässä ja 16 viikkoa vaikuttaa kudosten edetä karsinoomat merkittäviä kasvaintaakkaa. Haavoittuvuus eturauhanen eristettiin TRAMP-NOD hiiret varhaisessa (8 viikon iässä) ja myöhäinen (16 viikon iässä) vaiheita syövän etenemisen ja analysoitiin WISP1 ilmaisun immunohistokemiallisesti. Alkuvaiheessa taudin WISP1 oli hyvin ilmaistu hypoplastic kudos, joka aluksi kehittyy mallissa tässä iässä (kuvio 2A alapaneeli). Kudoksissa eristetty 16 viikon ikäisiä hiiriä, WISP1 ekspressio lisääntyi vielä enemmän edelleen kehittämistä liikakasvun (kuvio 2B keskimmäinen paneeli), ja lisäksi ilmaistiin yleisesti alueilla, joilla on kehittynyt carinoma (kuvio 2B alapaneeli).

. WISP1 lokalisointi 8 viikon iässä normaalissa eturauhasessa kudoksessa (yläpaneeli) ja hyperplastic kudoksen (alempi paneeli, musta nuoli). B. WISP1 lokalisointi 16 viikon iässä normaalissa eturauhasessa kudoksessa (ylempi paneeli), hyperplastisessa kudos (keskimmäinen paneeli, musta nuoli) ja syövän (alempi paneeli). IgG ohjaimet näkyvät oikealla kunkin paneelin.

Anti-WISP1 hoito Vähentää leviäminen ja perustaminen PC3-Luc etäällä of Injection

PC3-Luc soluja ruiskutetaan vasempaan kammioon immuunivasteeltaan hiirillä ja saa levitä ja kasvaa 4 viikkoa kahdesti viikossa injektiot PBS, IgG tai anti-WISP1. Kasvainten määrä ja koko kasvaintaakkaa sitten määritettiin niiden kyvystä emittoimaan valoa (luminesenssi), ja osoittivat, että anti-WISP1 vähensi merkitsevästi sekä näiden parametrien verrattuna PBS: ää tai IgG: tä hoitoja (kuvio 3A ja 3B). Käsissämme PC3-Luc solulinjaa käytettiin tutkimuksessa oli korkea triopism luun tiensä jälkeen IC injektion lukuisia luustokohtien kuten leuan, kuono, selkärangan, reisiluu, sääriluu, kylkiluut, rintalasta, lapaluun ja kyynärluut. Kuitenkin muut sivustot PC3-Luc solun homing löydettiin myös ulkopuolelta luustoon ja mukana pehmeät kudokset kuten sydän-, keuhko- ja kives käsittävät kuin noin 10% kaikista etäpesäkkeitä. Edustava kuva kasvainten jälkeen muodostettu IC injektion näytetään (S2), joka kuvaa nämä havainnot. Kun kasvainten määrä laskettiin huomasimme, että luustokohtien olivat ensisijaisesti pienensi WISP1 vasta-hoitoa. Erityisesti kontrolleissa, 90% etäpesäkkeiden olivat kovassa kudosta ja 10% pehmytkudoksen. Jossa WISP1 vasta-hoitojen määrä luustokohtien vaikuttaa aleni 66% koko etäpesäkkeitä pehmytkudos sivustot muodostavat 33% koko etäpesäkkeitä. Sen lisäksi, että koko kasvaimen määrä koko kasvaimen taakkaa väheni jonka WISP1 vasta-aineen hoitoja verrattuna IgG-hoidot (kuvio 3B). Tämä osoitti, että ei ainoastaan ​​levittäminen vaan myös kasvaimen kasvua pienensivät WISP1 neutralointi. Testata mahdollisuus, että WISP1 voivat vaikuttaa kasvain kasvanut meidän seuraava arvioitu kasvu PC3-Luc käyttäen ksenografteissa.

. Kokonaismäärä kasvaimia kehittyi kohti käsitellyn hiiren IgG tai anti-WISP1 (LF-185). **

p

0,01 PBS vs. anti-WISP1 hoito, B. Yhteensä kasvaintaakkaa arvosteli suhteellinen reita mittausta per hiiri. ***

p

0,001 IgG vs. anti-WISP1 hoitoa.

WISP1 Vasta hoito vähentää koko PC3-Luc vierassiirrännäiset Immuunipuutteiset Hiiret

Vasta-aineet WISP1 käytettiin rinnalla IgG: n ja PBS valvoo testata niiden suhteellinen kyky vähentää kasvua eturauhassyövän solut, jotka kasvatettiin ihon alle immuunipuutteisilla hiirillä. Eläimet injektoitiin kahdesti viikossa anti-WISP1 ja kasvaimen kasvua seurattiin 4 viikkoa. Ottaen huomioon, että WISP1 tehdään luun tutkimme myös hiiriä käyttäen DEXA skannaus koneen ja osoittivat, että anti-WISP1 hoidetuissa hiirissä ei ollut merkittäviä muutoksia prosenttiosuuden luuntiheys ennen ja jälkeen hoidon verrattuna joko PBS: ää tai IgG valvonta (S3 ). Nopeus kasvaimen kasvua mitattiin aikana kokeen avulla jarrusatulat ja ilmoitti, että kasvaimia hiiret hoidettiin anti-WISP1 koko pieneni verrattuna joko PBS: ää tai IgG valvonta (S4). Kun tuumorit poistettiin lopussa hoitoja ja valokuvattu, oli selvää, että kasvaimet olivat pienempiä anti-WISP1 käsitellyissä hiirissä (kuvio 4A), ja että niillä oli tilastollisesti vähemmän kokonaispaino verrattuna kasvaimia hiirissä, joita käsiteltiin joko PBS: ää tai IgG: tä (kuvio 4B).

.