Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Eturauhassyöpä on hyvin heterogeeninen sairaus ja yksi johtavista kuolemansyistä kehittyneissä maissa. Erityiset ennustetekijöitä ja ennakoivan merkkiaineita eturauhassyöpäpotilaiden ei vielä ole. Syy-yhteyttä androgeenien ja kehittämiseen eturauhassyövän pidetään yleisesti biologisesti uskottava, mutta Androgeenit eivät ole ainoa efektori monimutkaisuuden eturauhasen syövän synnyn. Tutkimuksen tavoitteena oli arvioida ennustetekijöiden merkitystä progesteroni reseptorin tuumorikudoksessa T1-3N0 eturauhassyövän potilailla, joille tehdään eturauhasen.

Methods

kudossiruina alkaen 535 potilaalla on eturauhassyöpä rakennettiin . Monista ytimet kasvainsolujen ja kasvaimen strooman kudoksen kustakin resektoitiin näytteestä poimittiin. Immunohistokemian käytettiin arvioimaan in situ ilmentyminen progesteroni reseptorin.

Tulokset

univariate analyyseissä, korkea kasvainsolu tiheys (p = 0,006) ja korkea kasvainten stroomasolulinja tummuusasteen (p = 0,045) progesteroni reseptorin molemmat merkitsevästi yhteydessä taudin etenemiseen ja kliinisen epäonnistumisen. Vuonna Monimuuttuja-analyysissä, progesteroni reseptorin ilmentyminen kasvainsoluissa oli itsenäinen negatiivinen ennustetekijä kliiniseen epäonnistumiseen (HR: 2,5, 95% CI: 1,2-5,2, p = 0,012).

Johtopäätös

korkea progesteronireseptorin tiheys kasvainsoluissa eturauhassyövän kasvain on itsenäinen negatiivinen ennustetekijä kliiniseen epäonnistumiseen.

Citation: Grindstad T, Andersen S, Al-Saad S, Donnem T, Kiselev Y, Nordahl Melbø- jørgensen C, et ai. (2015) Korkea progesteronireseptoriin ilmentäminen Eturauhassyöpä liittyy Clinical jättäminen. PLoS ONE 10 (2): e0116691. doi: 10,1371 /journal.pone.0116691

Academic Editor: Zoran Culig, Innsbruck Medical University, Itävalta

vastaanotettu: 26 kesäkuu 2014; Hyväksytty: 08 joulukuu 2014; Julkaistu: 27 helmikuu 2015

Copyright: © 2015 Grindstad et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot kuuluvat paperin ja sen tukeminen Information tiedostoja.

Rahoitus: Tätä työtä tukivat The Norja Health Department (https://www.regjeringen.no/en/dep/hod.html?id=421 ), The Norja Cancer Association (https://kreftforeningen.no/en/main-priorities/), UIT – Arktinen yliopisto Norja (https://en.uit.no/startsida), Pohjois-Norjassa Regional Health Authority ( Helse Nord RHF) (https://www.helse-nord.no/?lang=en_US), rahoitus numero 30125/30012. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Eturauhassyöpä (PCA) on yksi johtavista kuolinsyistä miehillä länsimaissa [1]. Valtaosa PCa tapahtuu kuin veltto muoto, joka ei todennäköisesti hyökätä pidemmälle Kudosten paikallisen ympäristön. Alaryhmä kumppanuus- kuitenkin näyttää aggressiivisuutta ja metastaattisen ominaisuuksia. Tällaisia ​​syöpiä johtavat nopeasti taudin etenemistä ja vähentää tautikohtaisten eloonjäämistä [2]. Näin ollen taudinkulku Eturauhassyövän on hyvin yksilöllistä ja vaikeasti ennustettavissa alusta alkaen.

ei ole erityisiä molekyylimarkkereita niin ja ennustavia välineitä, havaitseminen Eturauhassyövän ja sen hoito strategia edelleen pääasiassa perustuu eturauhasen-antigeenin (PSA) arvo, Gleason pisteet kasvainbiopsioissa ja primaarikasvaimen (pT) -staging [3]. PSA ei voi erottaa eri PCa etenemistä kuvioita. Niinpä monet havaittujen PCa tapauksissa kliinisesti veltto kasvaimia, jotka hoitamaton pysyy vakaana vuosia [2]. Siksi PSA muodostaa uhan ylidiagnostiikka ja ylihoito johon liittyy kielteisiä vaikutuksia elämänlaatuun ja laajoja taloudellisia kustannuksia [4,5]. Tunnistaminen uusi, parannettu prognostisia ja diagnostisia biomarkkereita PCA siis todella tarvitaan.

sukupuolisteroidihormonit, kuten androgeenit, estrogeenit ja progesteroni, ovat voimakkaita efektoreita mukana proliferaatiota, erilaistumista sekä solujen kehitystä, ja tiedetään avustajat kehittämiseen eri syöpien [6]. Metabolinen toiminnot eturauhasen on viranomaisvalvonnan alaisuudessa tällaisten sukupuolisteroidihormonit [7]. Syy-yhteyttä androgeenien ja kehittämisen PCA yleensä pidetään biologisesti uskottava [8]. Tämä osoittaa keskeinen rooli androgeenireseptorin eturauhasen syövän synnyn ja hormonitoimintaa hoidon epäonnistumisen. On kuitenkin olemassa yhä enemmän todisteita siitä, että androgeenireseptorin ei ole ainoa tehokas hormonitoimintaa reseptori tässä monimutkaisessa prosessissa. Tutkimus viittaa siihen, osallistumista sekä glucocorticoid-, estrogeeni ja progesteroni-reseptoreihin tässä prosessissa on julkaistu [9-13].

Progesteroni on 21-hiilen hormoni syntetisoitiin steroidi esiasteista eri kehon osiin mukaan lukien kivekset, lisämunuaisen, istukassa ja gliasolut aivoissa, lisäksi munasarjoissa [14]. Progesteroni reseptorin (PGR) esiintyy kaksi isoformia, PGR-A ja PGR-B, ja molemmat ovat transkriboidaan samasta geenistä. Se kuuluu samaan reseptoriin perhettä androgeeni- ja estrogeenin reseptorit, jotka ilmentyvät sekä strooman ja kasvainsoluja PCA kudoksen [11,13,15-18]. Tällä hetkellä on olemassa yleinen sopimus PGR läsnäoloa stroomasoluissa Eturauhassyövän [10,17,19-23]. Tulokset koskien PGR: n läsnäolo kasvainsoluissa ovat kuitenkin ristiriitaisia ​​[9,10,17,19-25]. Siten merkitys PGR ihmisen eturauhasen ja eturauhasen syövän syntymistä ei ole koskaan selitetty riittävän hyvin. Tämän seurauksena olemme pyrkineet arvioimaan ilmentymistä PGR sekä kasvainsoluissa johdettu epithelia (TE) ja kasvaimen stroomasolut (TS) in pahanlaatuinen prostatektomia yksilöitä ja löysi PGR tiheys tasolla sekä TE ja TS liittyvän PCa etenemiseen.

Materiaalit ja menetelmät

potilaat, clinical- ja histopatologiset tulokset

671 potilasta, joille tehtiin radikaaleja prostatectomies kuin alustava hoito adenokarsinooma 1995-2005 oli takautuvasti tunnistettiin osastojen patologian yliopistollisessa sairaalassa Pohjois-Norjan (n = 267), Nordlandin Hospital (n = 63) ja St. Olavin sairaalan (n = 341). Näistä yhteensä 136 potilasta suljettiin pois, koska (i) sädehoitoa lantion alueella ennen leikkausta (n = 1), (ii) muiden pahanlaatuisten kasvainten 5 vuotta ennen PCA diagnoosin (n = 4), ( iii) riittämätön parafinoidut kudosblokeista (n = 130), ja (IIII) puute kliinistä seurantaa data (n = 1). Yksikään potilaista ei ollut saanut hormonihoidon ennen tai sen aikana ja eturauhasen. Täten 535 potilaalla on täydellinen seurantatiedot olivat mukana tässä tutkimuksessa. Mediaani seuranta-aika oli 89 (vaihteluväli 6-188) kuukauden viimeisen potilaan päivitys marraskuussa 2012. Täydellinen demografiset ja kliiniset tiedot saatiin potilastietoja. Kaikki kudosta analysoidaan ja lisätään tutkimus käsitelty vastaavalla tavalla, kasvaimet luokiteltiin mukaan muutettu Gleason luokitusjärjestelmä [26,27], ja lavastettu mukaan Maailman terveysjärjestön suuntaviivat [28]. Kaikki primaarisyöpien histologisesti tarkastelleet kaksi patologit (ER ja LTB), ja kaikki demografiset, kliiniset ja histopatologiset tulokset (taulukko 1) kirjattiin SPSS tiedoston, jossa potilaat de-tunnistaa. Alueneuvoston Lääketieteen ja Health Research Ethics (2009/1393), Data Protection virallisen tutkimuksen (NSD), ja National tietosuojaviranomaiselle hyväksyi tämän tutkimuksen. Kaikki potilaat saivat nimettömiksi kunkin kokeen numero. Nämä luvut alun perin sidoksissa identiteettiä vain yksi tarkoitus ennen; kerätä kliinistä tietoa. Norja Social Science Data Service ja yliopistollisen sairaalan tietosuojavaltuutetun toimisto on hyväksynyt tämän ratkaisun (2009/1393). Kirjallinen suostumus potilaan katsottiin, mutta koska tämä oli retrospektiivinen tutkimus, jossa suurin osa materiaalista oli yli 10 vuotta vanhoja ja suurin osa potilaista kuolleen, katsottiin ei tarvita. Kaikki tiedot analysoitiin anonyymisti.

Microarray rakentaminen

Tissue Microarray (TMA) rakentaminen valittiin suurikapasiteettisten molekyyli patologian analyysejä. Kunkin kudoksen lohko, patologi (ER) yksilöity ja merkitty kaksi edustavalla epiteelin kasvainkudoksen ja kaksi kasvainta strooman kudoksen vastaaviin hematoksyliinillä ja eosiinilla dioja. Yksi alue, jossa normaali epiteelisolujen, ja yksi normaali strooman kudosta myös tarkasti merkitty. Jokaisesta näistä alueista, ytimet otettiin näytteet kustakin luovutuslohkosta voidakseen rakentaa TMA lohkoja. Eturauhasen ytimet 20 potilaalta, ilman pahanlaatuisuushistoria käytettiin verrokkeina.

TMA koottiin käyttäen kudosta ryhmittelyn väline (Beecher Instruments, Silver Springs, MD, USA). Käytimme 0,6 mm neulaa satoa ydintä alkaen merkitty kudoksesta alueita kustakin parafinoidut kudosblokeista. Ydin näytteet työnnetään tyhjä vastaanottaja parafiiniblokkiin tarkasti array kuvio. Jos haluat sisällyttää kaikki kairausnäytteitä, kaksitoista kudoksen array lohkojen rakennettiin. Useita 4 pm: n leikkeet leikattiin Micron mikrotomin (HM355S), kiinnitetty lasilevyille, ja sinetöity parafiini. Yksityiskohtaiset menetelmät on raportoitu aiemmin [29].

immunohistokemia (IHC) B

immunohistokemiallisella värjäyksellä, Ventana Benchmark XT automatisoitu värjäys järjestelmä (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ) ja Ventana reagenssit käytettiin. TMA Objektilasit deparaffinised ksyleenillä ja niihin lisätään pitoisuuksien alentamista etanolia. Endogeeninen peroksidaasi estettiin käyttäen Ventana endogeeninen peroksidaasi estää kit jälkeen huuhdellaan tislatulla vedellä. Sillä antigeeni haku, diat olivat lämmitetään cell ilmastointi ratkaisu (CC1, Ventana), vakio, mukaan valmistajan ohjeiden. Seuraavat vasta-aine Ventana Medical (Tucson, Arizona, USA) käytettiin tässä tutkimuksessa: CONFIRM anti-progesteroni-reseptorin (klooni 1E2, luettelo # 790-4296) kanin monoklonaalista primaarinen vasta-aine, joka on kohdistettu sekä A- ja B-isoformien ihmisen progesteronin reseptoriin. Vasta-aine oli esilaimennettu valmistaja. Levitetty vasta-aine tuotetaan rutiinidiagnoosimenetelmää IHC ja on saanut FDA: n hyväksynnän (510K) IVD (

in vitro

diagnostinen) käyttää. PGR-vasta sovelletaan parhaillaan rutiinikäytännön arvioinnissa PGR aseman rintasyövän. Voidakseen vahvistaa spesifisyyden ensisijaisen vasta-ainetta PGR, lysaatit HEK 293-soluissa joko ohimenevästi yliekspressoidaan PGR tai tyhjän vektorin käytettiin. Lisää yksityiskohtia vasta-validointi löytyy tuki- ohjetiedostoista (S1 Text, S2 teksti, S1 Kuva.). UltraView Universal DAB käytettiin havaitseminen pakki. Lopuksi TMA dioja vasta- värjättiin hematoksyliinillä visualisoimiseksi ytimeksi.

pisteytys IHC

ARIOL kuvantamisjärjestelmä (Applied Imaging Corp., San Jose, CA, USA) käytettiin skannata ja digitalisointia IHC värjättyä TMA dioja. Levyt ladattu SL 50 automatisoitu dia kuormaimen ja skannattu alhaisella resoluutio (1,25 x) ja korkean resoluution (20x) käyttäen Olympus BX61 mikroskooppi automaattisen alustan (Prior Scientific, Cambridge, UK). Kuvia ytimet ladattiin osaksi Ariol Software. Kaikki näytteet de-tunnistaa ja teki käsin kahdella patologit (ER ja SAS) toisistaan ​​riippumatta ja molemmat olivat sokaissut patologisia tai kliinisen tiedon. Jos asiasta ei päästä, kalvot tutkittiin uudelleen ja tarkkailijat pääsivät. Edustavia elinkelpoinen kudosleikkeet teki puolittain määrällisesti ja aste ydinvoiman PRG ilmentymisen IHC oli porrastettu sekä hallitseva värjäytymisen intensiteetti ja tiheys sekä TE ja TS. Sekä voimakkuus ja tiheys sai pisteet 0-3. Intensiteetti pisteytettiin seuraavasti: 0 = negatiivinen, 1 = heikko, 2 = kohtalainen, 3 = voimakas. Tiheys pisteytettiin mukaan positiivisten solujen prosenttiosuuden tarkastellulla osastossa käyttäen seuraavaa järjestelmää: 0 = 0%, 1 = ≤ 5%, 2 = 5-50%, 3 = 50%. Kullekin tapauksessa keskimääräinen pistemäärä laskettiin. Keskimääräiset pisteytys arvot kytkettiin sitten potilaan kliiniseen ja histopatologisia tietoa. Pisteytys arvot sitten dichotomised korkean ja matalan intensiteetin tai tiheyteen värjättyjen solujen (Fig. 1) käyttäen optimaaliset cut off-arvot. Sekä TE ja TS, katkaista määriteltiin tummuusasteen × 4

th neljännekseen. Korkea pistemäärä määriteltiin tiheys taso ≥ 0,75 TE, ja ≥ 1,75 TS.

immunohistokemia mikroskooppiset kuvat kudoksen mikro array edustavat eri ilmentymistä PGR värjäytymisen PCA kohdissa A-B. (A) korkea tiheys PGR kasvainsoluissa (TE), kuten suurennus. (B) Alhainen tiheys PGR TE, kuten suurennus. Alkuperäinen suurennos x100 ja x400.

Tilastolliset menetelmät

Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen tilastollista pakettia IBM SPSS, versio 21 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). IHC pisteytys arvot kustakin patologi verrattiin väliseen tarkkailijan luotettavuutta käyttämällä kaksisuuntaisen random efektimalli ehdottoman sopimuksen määritelmän. Wilcoxonin testiä käytettiin arvioimaan, oliko tilastollisesti merkittäviä eroja PGR voimakkuus ja tiheys eri osastojen PCA yksilöitä. Käytimme Spearman korrelaatiokertoimen tutkia yhdistyksen välillä PGR ilmaisun ja clinopathological muuttujia. Kaplan-Meier menetelmää käytettiin yhden muuttujan selviytymisen analyysin, ja log-rank-testi arvioida välillä tilastollista merkitystä eloonjäämiskäyrien mallin. Univariate Kaplan Meier konstruoitiin seuraavien päätepisteissä: 1) Biokemiallinen vika (BF), 2) kliininen vajaatoiminta (CF) ja 3) PCa kuolema (PCD). BF määritettiin PSA toistumisen ≥ 0,4 ng /ml, vähintään kaksi eri verinäytettä leikkauksen jälkeen [30]. CF määriteltiin vahvistettu paikallinen oireiden etenemisen pidemmälle parannuskeinoa ja /tai havainnoista etäpesäkkeiden luun, sisäelimissä tai imusolmukkeiden CT, MR, luukuvaus tai ultraäänitutkimus. PCD määriteltiin aiheuttama kuolema progressiivinen ja levitetään kastraatio kestävä PCa hallitsemattomia terapialla. Kaikki merkittävät muuttujat yhden muuttujan analyysin merkittiin monimuuttujamenetelmin käyttäen taaksepäin vaiheittaista Coxin regressiomallin todennäköisyydellä vaiheittain merkinnän poistamista 0,05 ja 0,1, vastaavasti. Me pidetään p-arvo 0,05 tilastollisesti merkitsevä kaikissa analyyseissä.

Tulokset

Potilasominaisuudet

eturauhasen oli retropubic vuonna 435 tapausta ja välilihan 100 tapauksissa. Potilaiden ikä leikkauksen vaihteli 47-76 vuotta iän mediaani 62 vuotta. Täsmennyksiä koskien kohortin ovat aiemmin julkaistu [31]. Katsaus demografisen, kliiniset ja histopatologiset ominaisuudet on esitetty taulukossa 1. Yhdistetyn Gleason vaihteli 6 stä 10: een ja kasvaimen vaiheessa T2a ja T3b. Viimeisessä seurannassa 170 (32%) koki BF, 36 (7%) koki CF ja 15 (3%) oli kuollut johtuu PCa.

progesteroni ilmaisun ja korrelaatio kliinispatologiset muuttujien

oli hyvä pisteytys välille sopimuksen tutkivat patologien. Sisäiset luokan korrelaatiokerroin (luotettavuus kerroin, r) varten PGR markkeri oli 0,78 (p 0,001). PGR on ilmaistu tumassa sekä normaalien solujen ja TE: n ja TS (Fig. 1). Korkea PGR tiheys TE (≥ 0,75) havaittiin 109 (20%) ja 535 potilasta taas korkea PGR tiheys (x 1,75) TS todettiin 120 (23%) potilaista. Ei ollut merkitsevää eroa PGR tiheyden tason valvonta epiteeli verrattuna TE (p = 0,429), vaikka keskimääräinen tiheys pistemäärä oli 0,37 valvonta epiteelissä ja 0,52 TE. Lisäksi 61,9%: n valvonta ei ilmaista PGR, kun taas vain 28,3% ja TE oli ilman PGR ilmaisua. Oli kuitenkin merkittävästi korkeampi PGR tiheys tason TS vertailuryhmän stroman (p 0,001). Edelleen huomattavasti korkeampi ilmaisun intensiteetin ja tummuusasteen PGR todettiin TS verrattuna TE (molemmat p 0,001).

Tiheä tasot PGR TE korreloivat positiivisesti apikaalisella marginaali (p = 0,025) ja hermoa infiltraatiota (PNI) (p 0,01). Ei korrelaatiot muihin clinopathological muuttujiin tunnistettiin.

Univariate analyysi

assosiaatioiden tummuusasteen PGR ja CFFS (kliininen vika elinaika) on esitetty taulukossa 2 ja kuvassa. 2. Seuraavat clinopathological muuttujat olivat kaikki merkittävät ennustavat tekijät CF: pT-vaihe (p 0,001), PN vaiheen (p 0,001), Gleason grade (p 0,001), kasvaimen koko (p = 0,019) , hermoa tunkeutuminen (p = 0,001), positiivinen kirurginen marginaali (p = 0,038), ei-apikaalisella kirurgiset marginaali (p 0,001) ja lymphovascular tunkeutuminen (p 0,001) (taulukko 1).

Kaplan-Meier -käyrät näyttämällä osa eturauhasen Caner potilaista (n = 535), jossa CFFS mukaan korkean ja alhaisen tiheyden taso progesteroni reseptorin (PGR) eri solutyyppejä AD. (A) Kasvaimen stroomasolut (TS), (B) kasvainsolut (TE), (C) TE ja TS yhdistetään ja (D) TE potilailla, joilla on korkea Gleason (≥ 7). Korkea PGR tummuusasteen liittyy merkittävästi vähenemiseen CFFS. Sekä TE ja TS, katkaista määriteltiin tummuusasteen × 4

th neljännekseen. Korkea pistemäärä määriteltiin tiheys taso ≥ 0,75 TE, ja ≥ 1,75 TS. Log-rank testejä käytettiin arvioimaan välillä tilastollista merkitystä eloonjäämiskäyrien mallin. Mediaani seuranta-aika oli 89 (vaihteluväli 6-188) kuukautta. P-arvo 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Lisääntyvä PGR tummuuden sekä TE (p = 0,006) ja TS (p = 0,045) liittyivät merkittävästi CF (Fig. 2, paneeli A ja B). Kun sulautuvan PGR tummuuden TE ja TS, potilailla, joilla on korkea (korkea /matala) PGR tummuuden oli alentanut merkittävästi CFFS (p = 0,019) verrattuna niihin, joilla on alhainen tiheys tasolla (matala /korkea, korkea /matala ja matala /matala) (Fig. 2, paneeli C). Kymmenen vuoden CFFS oli 76,8% vs. 91,6%: lla potilailla, joilla on korkea (korkea /matala) tummuuden vs. alhainen (matala /korkea, korkea /matala ja matala /matala) (taulukko 2).

Korkea PGR tasot TE osoitti samanlaisen prosessin lisääntyi BF, mutta tämä ei ollut tilastollisesti merkitsevä (p = 0,144). TS tai TS ja TE yhdistetään, ei ollut assosiaatioita BF tai PCD.

korkea tummuusasteen PGR TE oli merkitsevästi yhteydessä CF potilaiden alaryhmässä Gleason pisteet ≥ 7 (p = 0,002 , Fig. 2, paneeli D) verrattuna potilaiden alaryhmässä Gleason pisteet 6 (p = 0,914). Kymmenen vuoden CFFS potilailla, joilla on korkea PGR tiheyden tasot olivat 72,2% vs. 97,2%: lla potilailla, joilla Gleason pisteet ≥ 7 vs. Gleason pisteet 6.

Monimuuttuja-analyysi

Monimuuttuja-analyysissä ( taulukko 3), korkea ilmentyminen PGR TE oli itsenäinen ennustaja CF (HR: 2,5, 95% CI: 1,2-5,2, p = 0,012) lisäksi Gleason grade (p = 0,001) ja ei-apikaalisella kirurgiset marginaali ( p = 0,006). PGR ilmentymistä TS yleensä, mutta ei saavuttanut tilastollista merkittävyyttä (HR: 2,1, CI: 1,0-4,3, p = 0,060). Ei riippumaton ennustetekijöiden havaittiin BF ja PCD.

Keskustelu

Tietääksemme tämä on ensimmäinen laajamittainen tutkimus tutkii ennustetekijöiden roolia PGR TE ja TS Eturauhassyövän. Vuonna univariate analyysi, korkean tiheyden tasoon PGR sekä TE ja TS liittyi CF. Tiheä taso PGR TE oli itsenäinen ennustetekijä varten CF

Ensimmäinen askel ymmärtää PGR toiminta PCA on määritellä reseptorin ilmentymistä eturauhasen kudosta. Edellinen julkaisuja PGR ilmaisun PCA, erityisesti ne, jotka käyttävät IHC, ovat esittäneet ristiriitaisia ​​tuloksia ja vain harvat raportit ovat käsitelleet PGR roolia eturauhasen syövän synnyn. Meidän suurikokoinen tutkimus osoittaa laaja jakautuminen PGR vuonna strooman ja epiteelisoluissa sekä hyvän- että pahanlaatuisia eturauhasessa. Tällä hetkellä näyttää olevan yleinen sopimus PGR läsnäoloa stroomasoluissa Eturauhassyövän [10,17,19-23]. Mukaisesti havaintomme, useat ovat myös raportoitu korkea PGR ilmaisun TE Eturauhassyövän [9,10,23,25]. Sen sijaan muut ovat osoittaneet täydellinen puuttuminen PGR ilmentymisen TE [17,19,20,22]. Jopa kokeelliset tutkimukset käyttämällä solulinjoja ovat raportoineet ristiriitaisia ​​tuloksia [17,24,25,32]. Tällainen ristiriita voidaan selittää useilla tekijöillä. Tähän sisältyy erilaisia ​​vasta, kudosten käsittely, antigeeni hakumenetelmät, useita kudosnäytteitä ja eri pisteytysjärjestelmiä ja voi heijastaa puute menetelmien standardointia. Monoklonaalinen vasta-aine 1E2 käytettiin tutkimuksessamme on optimoitu kliiniseen käyttöön ja sitä käytetään rutiininomaisesti arvioinnissa PGR aseman rintasyövän. Tämä pätee myös, että NCL-PGR1A6-vasta sovellettu artikkeleita Bonk- hoff et al. [10] ja Hiramatsu et al. [23], joka vahvistaa läsnäoloa PGR TE. Useat IHC tutkimusten ristiriidassa tämän tutkimuksen havainnon tehtiin ennen uusien menetelmien lisätä menetelmien tarkkuus [17,19,20]. Tällaisia ​​menetelmiä ovat uusien, erittäin spesifisiä monoklonaalisia vasta-aineita PGR, mikroaaltosäteilytystä menetelmää ja aika tehokas kudosten käsittelymenetelmä TMA [33], joka on ilmoitettu arvokas väline arvioida potilaan materiaali ja hyvä korvike koko jakso analyysi [34].

Yu et ai. äskettäin tutkinut sijainti ja rooli sekä PGR isomuotojen PCA ja raportoida havainnoista ristiriitaisia ​​meidän. Tämä voidaan selittää niiden tutkinta PGR jotka ne havaittiin ilmentyvän yksinomaan osajoukko stroomasolujen 27 eturauhasen yksilöt [22]. Tämä on päinvastoin kuin työmme olivat ilmaus PGR sekä TE ja TS havaittiin selvästi. Meidän kohortti 129 (28,3%) potilaalla ei ollut PGR ilmentymistä TE, mutta sitä vastoin vain 8 potilaalla (1,7%) ja negatiivinen PGR värjäytymistä TS. Kuitenkin ne, joilla on korkea tiheys taso PGR TE oli merkitsevästi yhteydessä CF. Ero kohortin koko saattaa selittää joitakin eroavaisuuksia havaintojen. Lisäksi sekä valitun vasta-aineen ja kudosten käsittely menetelmät eroavat.

Toisessa tutkimuksessa soluproleferaatiomäärityksessä, Yu et ai. todettu PGR negatiivisesti säännellä strooman solujen lisääntymistä

in vitro

[32]. Työmme yhden muuttujan analyysi osoitti korkeaa PGR ilmentymistä TS liittyvän kliinisen epäonnistumisen PCA potilailla. Toistaiseksi emme ole vielä osoittaneet mekanismia taustalla -alueella.

Steroidihormonien säätelevät solun etenemisensä solusyklin sitoutumalla niiden reseptoreihin. Nämä reseptorit ovat signaalitransduktion molekyylejä ja voi säädellä lisääntymistä kahdella eri tavalla, genomisen tai ei-genomisia toimia monimutkainen signalointi verkoissa [6]. Useita ei-genomisia proliferatiivinen toimia progesteronin on ehdotettu kasvainsolujen muiden elinten, mukaan lukien rinta- [35-37], astrosytooma [38] ja osteosarkooma [39] solulinjat. Tällaisia ​​tuloksia ovat ristiriidassa ehdotukset antiproliferatiivinen toimia progesteronin kohdun limakalvon syöpä [40]. Tämä voi osoittaa, että toimet progesteronin ovat kudosspesifisiä. Huomasimme, että korkean PGR tummuusasteen TE liittyi CF potilaalla on Gleason pisteet ≥ 7, mikä viittaa säätely ylöspäin PGR etenemisessä PCa. Tämä on täysin samansuuntainen aiemmat julkaisut. Bonk- hoff et ai. ovat ehdottaneet asteittainen syntyminen PGR aikana PCa etenemisen ja etäpesäkkeiden [10]. Tukeminen Näiden havaintojen Latil ja työtoverit löysivät vähentynyt PGR ilmaisun kliinisesti lokalisoitu kasvaimia ja kasvanut PGR ilmentymistä hormoni-tulenkestävien kasvaimia, verrattuna normaaliin eturauhasen kudosta [9].

Useissa kokeellisissa tutkimuksissa Check et al., hiiret PCA hoidettiin PGR antagonisti, mifepristonin, ja verrokkeihin nähden. He löysivät korkeampi kuolleisuus näitä ei hoideta. Lisäksi oli vähemmän PCa komplikaatioita hoidetussa ryhmässä [41,42]. Samanlaisia ​​havaintoja anti-progesteroni aktiivisuus mifepristonin sekä androgeenien herkkä ja ei-herkkien PCa solulinjoissa

in vitro

ja

in vivo

, on raportoitu [43,44]. Tutkimuksen tuloksiin sisältyy lisätukea näihin havaintoihin, mikä osoittaa, että PGR on rooli patogeneesissä PCa. Sen tutkimiseksi, poikkeava PGR toiminta on mekanismi kastraatiotason kestävä eturauhassyövän kehitystä, vaiheen I /II tutkimus on juuri aloitettu vaikutuksen testaamiseksi anti-progestiinia, onapristoni, potilailla, joilla on tämä tila (http: //clinicaltrials gov /Show /NCT02049190).

taustalla olevaa mekanismia PGR ylössäätöä PCA ei ole vielä selvitetty. Tässä tutkimuksessa Ki67 ja PGR TE korreloivat CF (S3 Text), mikä osoittaa yhdistyksen välillä PGR ja proliferatiivista aktiivisuutta. Arora et. al. [12] ovat raportoineet, että säätely ylöspäin glukokortikoidireseptorin uudelleen aktivoi ilmaus osajoukon androgeenireseptorin geenien ja siten indusoi castrate kestävä PCa. PGR on, kuten glukokortikoidireseptorin, samanlainen androgeenireseptorin kanssa 88% sekvenssihomologia ligandin sitova domeeni [45]. Tämän mukaisesti havainnon, progesteroni indusoima androgeenireseptorin geenien voisi olla mahdollinen mekanismi edistää kehitystä kastraatiotasolle resistenttien PCa. Kuitenkin lisätutkimuksia tutkii tätä edellyttää tällaista hypoteesia vahvistamatta.

Mahdollisuus eri rooleissa kahden PGR isoformit normaalissa eturauhasessa ja PCA kuten ehdotetaan estrogeenireseptoreihin [13], lisäksi on otettava huomioon. Tiedämme nyt, että ylikuuluminen välillä TE ja TS on kehityksen kannalta olennaisen tärkeää Eturauhassyövän. Eräässä tutkimuksessa Memarzadeh et al., Syöpään liittyvä fibroblastikasvutekijät aiheutti säätely ylöspäin epiteelin androgeenireseptorin [46]. Tämä voi osoittaa, että epiteelin-strooman ylikuulumisen on mekanismi takana induktion PGR ilmaisun TE ja se on siten edistetään PCa etenemistä. Kuitenkin säätely ylöspäin PGR ei voi olla suora mekanismi takana lisääntyvän leviämisen, vaan pikemminkin seurausta muista taustalla prosesseja. Siten kunkin rooli epiteelin vs. strooman PGR eturauhasessa syövän synnyn ja mahdollinen yksittäisten roolia PGR isoformeja jäävät vielä.

Johtopäätös

Tässä huomasimme, että suuri tiheys taso PGR TE on itsenäinen ennustetekijä etenemisen CF PCA. Lisäksi korkea PGR tiheyden tasot ovat merkittäviä etenemisen CF potilaalla on Gleason pisteet ≥ 7. progesteroni /PGR voi näistä syistä olla hyödyllinen ennustetyövälineenä, vaan myös kohteena uusille hoitostrategioiden PCA. Lisäksi toiminnalliset tutkimukset tutkivat PGR rooli sekä epiteelin ja strooman osastot Eturauhassyövän tarvitaan vielä päätellä, miten parhaiten soveltaa tätä tietämystä PCa diagnostiikassa ja hoidossa.

tukeminen Information

S1 Dataset. SPSS PCa ja PGR aineisto.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0116691.s001

(SAV)

S2 Dataset. SPSS PCa ja Ki67 aineisto.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0116691.s002

(SAV) B S1 Kuva. Lysaatit HEK 293-solut, joko tyhjällä vektorilla (A) tai PGR yliekspressio konstrukti (B) ajettiin SDS-PAGE-geelissä ja siirrettiin nitroselluloosakalvolle.

Kalvo ensin koetettiin Ventana anti-PGR vasta-aine (ylempi paneeli), ja sitten anti-aktiini-vasta ohjaamaan lastaus (alempi kuva).

doi: 10,1371 /journal.pone.0116691.s003

(TIFF) B S1 teksti. Vasta-aineen spesifisyyden validointi.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0116691.s004

(DOCX)

S2 teksti. Ventana tuoteluettelo, CONFIRM anti-progesteronireseptorille (PR) (1E2) Rabbit Monoclonal Ensisijainen Vasta.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0116691.s005

(PDF)

S3 teksti. Ki67 immunovärjäystä.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0116691.s006

(DOCX) B

Kiitokset

Haluamme kiittää Magnus Persson, (Kliininen patologia, University Hospital Pohjois-Norjan) ja Mona Pedersen (uIT Arktinen yliopisto Norja) niiden hyvin varovainen laboratoriotyössä.