Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

parantamiseksi tuloksiin potilailla, joilla on ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC), biomerkkiaine, joka voi ennustaa tehokkuutta kemoterapiaa tarvitaan. Tutkimuksen tavoitteena oli arvioida rooli EGFR mutaatioita ja ERCC1 ennustettaessa tehoa platinapohjaisen kemoterapian ja tuloksiin potilailla, joilla on NSCLC.

Methods

Teimme retrospektiivinen tutkimus analysoida välisiä suhteita EGFR mutaatioita tai ERCC1 ilmaisun ja ilman taudin etenemistä (PFS) potilailla, joilla NSCLC jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian. EGFR-mutaatio tila määritettiin käyttäen peptidinukleiinihappo-lukittu nukleiinihapon polymeraasiketjureaktio puristin menetelmällä, ja immunohistokemia käytettiin ekspression tutkimiseksi ERCC1 Tuumorinäytteissä saatu potilaista.

Tulokset

Niistä NSCLC potilaat, jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian, mediaani PFS oli merkitsevästi parempi niille, jotka eivät olleet koskaan tupakoineet ja ne, joilla eksonin 19 deleetio, ja mediaani kokonaiselinaika (OS) oli merkitsevästi parempi niille, jotka eivät olleet koskaan tupakoineet, ne eksoni 19 poisto, ja naiset. Coxin regressioanalyysi osoitti, että eksonin 19 deleetio ja joilla ei ole koskaan tupakoinut liittyi merkittävästi sekä PFS ja OS. Subset analyysi paljasti merkittävän korrelaation ERCC1 ilmaisun ja EGFR-mutaatio, ja ERCC1-negatiivisella potilaalla, eksonin 19 deleetio oli pitempi PFS kuin muilla potilailla ERCC1-positiiviset potilaat ilman eksonin 19 deleetio oli lyhyempi PFS kuin muut potilaat.

Johtopäätökset

Tuloksemme osoittavat, että joukossa NSCLC saavilla potilailla platinapohjaisen kemoterapian, joilla eksonin 19 deleetio on pidempi PFS ja OS. Tulosten perusteella näyttää, että platina kemoterapian on tehokkaampi vasten ERCC1-negatiivisia ja eksoni 19-positiivisia NSCLC.

Citation: Yamashita F, Azuma K, Yoshida T, Yamada K, Kawahara A, Hattori S, et al . (2013) ennusteen arvioinnissa EGFR mutaatio ja ERCC1 potilailla, joilla ei-pienisoluinen keuhkosyöpä Undergoing platinapohjaisen kemoterapian. PLoS ONE 8 (8): e71356. doi: 10,1371 /journal.pone.0071356

Editor: Karl X. Chai, University of Central Florida, Yhdysvallat

vastaanotettu: 16 huhtikuu 2013; Hyväksytty: 28 Kesäkuu 2013; Julkaistu: 05 elokuu 2013

Copyright: © 2013 Yamashita et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat Fukuoka Foundation for Sound Health, Japani (https://www.sukoken.or.jp/). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen. Ei ylimääräistä ulkoista rahoitusta saanut tätä tutkimusta.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Keuhkosyöpä on johtava syy syövän kuolema maailmanlaajuisesti [1]. Epidermaalisen kasvutekijän reseptorin (EGFR) pidetään tärkeänä molekyylitasolla keuhkosyövän hoidossa. Somaattiset aktivoivat mutaatiot

EGFR

geeni on havaittu olevan merkittävä tekijä kliinistä vastetta EGFR tyrosiinikinaasin estäjät (TKI), kuten gefitinibi ja erlotinibi potilailla, joilla on NSCLC. Useimmat näistä mutaatioista esiintyy eksoneissa 19-21, jotka koodaavat tyrosiinikinaasidomeeniin reseptorin, joista yleisin on deleetioita eksonissa 19 (kuten delE746-A750) ja L858R pistemutaatio eksonissa 21. Nämä mutaatiot löytyvät lisää usein naispotilaiden, henkilöillä, jotka eivät ole koskaan tupakoinut, ja potilailla Itäaasialaisen etnisyyden [2] – [5]. Prospektiivisessa kliinisessä tutkimuksessa EGFR-TKI hoito pienisoluista keuhkosyöpää on aktivoivia EGFR mutaatioita, kuten delE746-A750 (eksoni 19) ja L858R (eksoni 21), ovat osoittaneet korkea kliininen hoitovasteen noin 80% [4] – [7]. Vuonna IPASS Tutkimuksessa verrattiin gefitinibin karboplatiinin ja paklitakselin kuin ensilinjan hoito Aasian potilailla, NSCLC potilaat EGFR-mutaatio oli korkeampi vastausprosentti kuin potilailla, joilla ei EGFR mutaatioita, kun he saivat karboplatiinin ja paklitakselin. Teho platinapohjaiseen kemoterapiaan oli parempi potilailla, jotka olivat positiivisia EGFR-mutaatio kuin ne, jotka olivat negatiivisia [8]. Nämä tulokset viittaavat siihen, että NSCLC potilaat EGFR mutaatiot voivat taipumus reagoida sytotoksinen hoito kuten platinaa kemoterapian. Jotkut tutkijat ovat raportoineet, että potilailla, joilla on EGFR mutaatioita vastata tavanomaisen kemoterapian [9] – [13]. Kuitenkin mekanismeista näitä vastauksia kemoterapia ovat jääneet epäselviksi.

Toisaalta, ERCC1 on osa nukleotidin poiston korjaukseen liittyvä reitti, joka on välttämätön korjaamiseen platina-DNA addukteja ja liittyy resistenssin platinapohjaiseen kemoterapiaan [13]. Jotkut kliiniset tutkimukset ovat osoittaneet, että yli-ilmentyminen ERCC1 taipumus liittyä vastustuskyvyn platinapohjaiseen kemoterapiaan [14] – [15]. Aiemmin myös raportoitu, että ERCC1 ilmaisua arvioitu immunohistokemiallisesti oli itsenäinen ennustetekijä kannalta sekä proression vapaa elinaika (PFS) ja kokonaiselossaoloaika (OS) potilailla, joilla on NSCLC uusiutumisen jotka olivat saaneet platinapohjaista kemoterapiaa [16]. Kaiken NSCLC potilaat, joilla on alhainen ERCC1 oli pidempi eloonjäämisen jälkeen platinapohjaisen kemoterapian kuin ne, joilla on korkea ERCC1. Gandara et al. ovat raportoineet merkittävän assosiaation EGFR-mutaatio ja alhainen ERCC1 mRNA NSCLC Tuumorinäytteissä [17]. Nämä tärkeät havainnot sai meidät tutkimaan korrelaatioita EGFR mutaatioita ja ERCC1 NSCLC saavilla potilailla platinapohjaisen kemoterapian. Suoritimme retrospektiivinen tutkimus arvioimaan hyödyllisyyttä EGFR mutaatio ennustajana tehokkuuden platinapohjaisen kemoterapian ja tuloksiin potilailla, joilla on NSCLC. Lisäksi käytimme immunohistokemiassa ekspression tutkimiseksi ERCC1 tuumorin näytteissä NSCLC potilailla, jotka saavat platinapohjaista kemoterapiaa, ja analysoitiin väliset suhteet ERCC1 ja EGFR mutaatioita kasvaimia ja elinaika onko vai ei näiden molekyylien ilmentyminen voitaisiin käyttää ennustaa PFS ja OS.

Materiaalit ja menetelmät

NSCLC Potilaat ja hoito

Tämä retrospektiivinen Tutkimukseen osallistui tapauksissa histologisesti tai sytologisesti diagnosoitu NSCLC, jotka edennyt (IIIB tai IV) tai uusiutuva alkudiagnoosin. Me seulotaan 206 NSCLC saaneilla potilailla gefitinibin tai erlotinibin syyskuun 2002 ja maaliskuun 2011 Kurume yliopistollisessa sairaalassa. Näistä potilaista, 103 sai platinapohjaisen kemoterapian ja EGFR-TKI. Hoitoa jatkettiin kunnes ulkonäkö haittavaikutuksiin, sairauden etenemisen tai kuoleman tai lopettaisi tutkimuksen. Kliiniset tiedot kulloinkin saatiin potilastiedot; parametrit mukana sukupuoli, ikä, Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) suorituskyky (PS), kasvainhistologiaa, vaihe, tupakointi asema, ja määrä ennen kemoterapiaa kursseja. Potilaiden ominaisuudet totesi mukana sukupuoli, ikä, PS, kasvainhistologiaa, sairauden vaiheessa, leikkauksen jälkeinen tauti uusiutuu, tupakointi historia, ennen kemoterapiaa, ja tyyppi EGFR mutaatio.

Tuumorivasteen tutkittiin tietokonetomografialla ja arvioitava asiaan liittyvien Response arviointiperusteet kiinteitä kasvaimia (RECIST). Response vahvistettiin vähintään 4 viikkoa (täydellinen tai osittainen vaste) tai 6 viikon ajan (vakaan sairaus), kun se oli ensin dokumentoitu. Tutkimus hyväksyi Institutional Review Board of Kurume yliopistosta.

DNA Extraction ja PNA-LNA PCR Clamp Pitoisuus

EGFR

mutaatio analyysi, peptinen nukleiini- happo- lukittu (PNA-LNA) polymeraasiketjureaktio (PCR) puristin menetelmä hyväksyttiin, protokollien avulla kuvattu aiemmin [18]. Erityisiä PNA-LNA koetinsarjojen kahden mutaation sivustoja, eksonin 19 (delE746-A750) ja eksonin 21 (L858R), kehitettiin ja nämä kattaa 90%

EGFR

mutaatiot aikaisemmin raportoitu Japanissa. Lyhyesti, genomista DNA: ta puhdistettiin parafinoidut kudoksissa käyttäen QIAamp DNA Micro Kit (QIAGEN). PCR-alukkeet palveluksessa syntetisoitiin Invitrogen Inc PNA puristin alukkeita ja LNA mutantti koettimet ostettiin FASMEC (Kanagawa, Japani) ja IDT (Coralville, IA), tässä järjestyksessä. PNA-LNA PCR puristin määritys suoritettiin käyttämällä SDS-7500-järjestelmä (Applied Biosystems). Eksonisekvenssejä, että EGFR kinaasin domeenin monistettiin nested PCR: llä käyttäen spesifistä aluketta.

immunohistokemiallinen arviointi Parafiini upotettu tuumorikudok- sissa

riittävät kasvaimen saatiin näyte 51 näistä potilaista ja alistettiin ERCC1 havaitseminen, kuten on raportoitu aiemmin [16]. Kudosnäytteet kiinnitettiin 10% neutraaliksi puskuroituun formaliiniin ja upotettiin parafiiniin. Parafiinileikkeet leikattiin sitten paksuuteen 4 um, joka on asennettu päällystetyn lasilevyille, ja leimattu vasta-aine ERCC1 (klooni 8F1, Neomarkers, Fremont, CA). Sen jälkeen kun osat oli parafiini ksyleenillä ja dehydratoitiin porrastettu etanolia sarja, endogeeninen peroksidaasiaktiivisuus estettiin H

2O

2 metanolissa. Sillä ERCC1 värjäys, antigeenejä haettiin kuumentamalla sitruunahappo (pH 6,0) 10 minuutin ajan. Leikkeitä inkuboitiin blokkausliuoksella (10% Block Ace; Yukijirushi, Tokio, Japani), ja sitten saatetaan reagoimaan anti-ERCC1 monoklonaalinen vasta-aine. Sen jälkeen kun ylimääräinen vasta-aine oli pesty pois PBS: llä, näytteet inkuboitiin piparjuuriperoksidaasi (HRP) leimattua vuohen anti-hiiri- tai anti-kani-vasta-aine (Nichirei, Tokio, Japani) 60 min. Reaktio visualisoitiin käyttämällä 3,3 ’diaminobentsidiiniä (DAB) substraattina (DAKO, Glostrup, Tanska), ja objektilasit vastavärjättiin hematoksyliinillä. Kukin dia lämpökäsiteltiin käyttäen Target Retrieval Solution, pH 9,0 (DAKO, Glostrup, Tanska) 30 minuutin ajan, ja niitä inkuboitiin vasta-aineen kanssa 4 ° C: ssa yön yli. ERCC1 ydinaseiden ilmentyminen luokiteltiin neljään ryhmään: pisteet 0, mitään värjäytymistä lainkaan 10% syöpäsoluja; pisteet 1+, heikko /tuskin havaittava osittainen ydinvoiman ilmentyminen 10% syöpäsoluja; pisteet 2+, heikko tai kohtalainen värjäytyminen koko tuman 10% syöpäsoluja; ja pisteet 3+, voimakas värjäytyminen koko tuman 10% syöpäsoluja. Laajuus immunohistologisilla värjäyksen ERCC1 määriteltiin seuraavasti: tulokset 1+, 2+, ja 3+ pidettiin positiivisina, ja pisteet 0 pidettiin negatiivisena. Kaikki IHC tutkimukset arvioitiin kahdella IHC-kokenutta tarkkailijaa, jotka olivat tietoisia olosuhteista potilaiden (AK ja MK).

Tilastollinen analyysi

Käytimme Fisherin testiä arvioida merkitystä välisiä EGFR-mutaatio asema ja muut potilasryhmät. EGFR-TKI: hoito, PFS laskettiin alkaen aloittamisesta EGFR-TKI asti sairauden etenemisen. Platinan kemoterapian hoitoja, PFS laskettiin alkaen aloittamisesta platinapohjaisen kemoterapian asti sairauden etenemisen. OS määriteltiin ajaksi, jona aloittamisesta platinapohjaisen kemoterapian saakka kuolinpäivä. Potilaat ilman taudin etenemistä ja jotka olivat yhä elossa käsiteltiin sensuroitiin heidän viimeisen kontakti analysoida PFS ja OS, vastaavasti. Eloonjäämiskäyriä PFS ja OS arvioitiin Kaplan-Meier menetelmällä, ja ero käyrien potilaiden kanssa ja ilman EGFR mutaatioita arvioitiin log-rank-testi. Coxin suhteellisten riskien mallia sovellettiin tutkia EGFR-mutaatio oli yhteydessä PFS tai OS jopa ottamisen jälkeen muista ennustetekijöitä. Kaikki testit olivat kaksipuolisia, ja erot

P

0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä. Tilastollinen analyysi suoritettiin JMP versio 10.0.0 ja SAS version 9.2 ohjelmisto (SAS Institute, Cary, NC).

Tulokset

väliset suhteet EGFR mutaatioita ja Potilastiedot

kliininen ominaisuudet 103 potilasta on esitetty taulukossa 1. Kaikki potilaat saivat platinapohjaisen kemoterapian ja oli hyvä PS (0-1). EGFR mutaatioita tunnistettiin 46 potilailla. Mitä tyypin

EGFR

mutaatio, 26 potilaalla oli deleetioita eksonissa 19, ja 20 potilasta oli L858R missensemutaatio eksonissa 21. Viisikymmentäkuusi potilasta oli naisia ​​ja 51 ei ollut koskaan tupakoinut; mediaani-ikä potilaiden yleistä oli 63 (vaihteluväli 33-78) vuotta. Kahdeksankymmentäyhdeksän potilaalla oli adenokarsinooma. Platinayhdisteet käytettiin ensilinjan kemoterapian useimmissa (99/103) potilaista. Toisaalta käsiä, 4 potilasta sai gefitinibin etulinjan kemoterapiaa seurasi platinayhdisteille toissijainen kemoterapiaa. Kemoterapia hoito koostui karboplatiinin-paklitakselin 55 potilasta, karboplatiinia-gemsitabiinin 12, karboplatiini-pemetreksedin 4, karboplatiini-vinorelbiini in 1, sisplatiini-vinorelbiini 18, sisplatiini-dosetakselia 4, sisplatiinin-gemsitabiinin 4, sisplatiinipohjaisen vinorelbiiniladatut gemsitabiini 3, sisplatiini-pemetreksedin 1, ja sisplatiini-etoposidi 1. mediaani määrä kemoterapian syklien oli kolme (vaihteluväli 1-4). Vuonna EGFR-mutaatio-positiivisten ryhmässä 17 potilasta (36,9%) ylläpidetään osittainen vaste (PR), 25 (54,3%) ylläpidetään stabiili tauti (SD), ja 4 (8,8%) ylläpidetään etenevä sairaus (PD), kun taas EGFR-mutaatio-negatiivinen ryhmä 10 potilasta (17,5%) ylläpiti PR, 28 (49,1%) yllä SD, ja 19 (32,2%) säilyy PD. Naissukupuoli (P = 0,072), kasvaimen vaste (P = 0,005), ja gefitinibin hoito (P 0,001) olivat merkitsevästi useammin ryhmässä potilaita, joilla EGFR mutaatioita, kun taas muut ominaisuudet eivät osoittaneet ryhmien välisten erojen (taulukko 1) .

Survival Analysis

mediaani seuranta-aika oli 565 (vaihteluväli 31-3367) päivää. Niistä 103 NSCLC potilaat, jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian, 101 kärsi taudin etenemistä ja 73 kuoli. EGFR-TKI hoidon mediaani PFS oli merkitsevästi pidempi EGFR-mutaatio-positiivisia kuin EGFR mutaatio-negatiivinen tapauksissa (P 0,001, P 0,001) (Kuva. 1A ja 1B), kun taas ei ollut merkitsevää eroa mediaani näiden kahden ryhmän välillä (

P

= 0,126, P = 0,122), tässä järjestyksessä.

erot ilman taudin etenemistä ja kokonaiselinaika välillä alaryhmiä analysoitiin log-rank-testi. A, B: For EGFR-TKI hoidon mediaani PFS oli merkitsevästi pidempi EGFR-mutaatio positiivisia kuin EGFR mutaatio-negatiivisella potilaalla (P 0,001, P 0,001) C: Potilailla NSCLC jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian, mediaani PFS oli merkitsevästi parempi niille, joilla on EGFR mutaatioita kuin ilman. D: Potilailla, joilla NSCLC jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian, mediaani PFS oli merkitsevästi parempi niille, joilla on eksonin 19 deleetio tai L858R.

Potilailla NSCLC jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian, mediaani PFS oli merkitsevästi parempi niille, jotka eivät olleet koskaan tupakoineet (P = 0,003) ja niille, joilla on eksonin 19 deleetio tai L858R (P = 0,040) (Kuva. 1 C ja kuvio. 1 D). Kuitenkin, PFS ei liittynyt muita tekijöitä, kuten ikä, sukupuoli, histologia, vaihe, ja EGFR-TKI: hoito (taulukko 2). Myös potilailla, joilla on NSCLC, jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian, mediaani OS oli merkitsevästi parempi naispotilaille (P = 0,020), potilailla, jotka eivät olleet koskaan tupakoineet (P = 0,03), potilailla, joilla on vaihe IV tai uusiutuva sairaus (P = 0,010) , ja potilailla, joilla on eksonin 19 deleetio (P = 0,028). Kuitenkin OS ei liittynyt muita tekijöitä, kuten ikä, histologian ja EGFR-TKI: hoito (Ptaulukko 2). Lopuksi Coxin regressioanalyysi, mukaan lukien tekijät, osoitettiin olevan merkitsevästi yhteydessä PFS tai OS on log-rank testi, paljasti, että EGFR-mutaatio ja tupakointi (Ei koskaan savustettu) liittyivät merkittävästi PFS (P = 0,036 heterogeenisyyden suhteen eksonissa 19 poisto, L858R ja villityypin; P = 0,024 tupakoinnin aseman riskisuhde (HR) 0,427 ja 95%: n luottamusväli (CI) 0,213-0,892). Pareittain vertailu suhteessa villityyppiin, potilailla, joilla on eksonin 19 deleetio oli merkittävästi pidempi PFS kuin villin tyypin (HR, 0,566; 95% CI, +0,340-0,911;

P

= 0019), kun taas potilaat jossa L858R ei ollut huomattavasti pidempi PFS (HR, 1,073; 95% CI, +0,621-+1,780) (taulukko 3). OS, saatiin samanlaisia ​​tuloksia: EGFR-mutaatio oli merkitsevästi yhteydessä OS (P = 0,010 heterogeenisyyden) ja tupakointi oli lähellä tilastollista merkitystä (P = 0,082; HR, 0,523; 95% CI, 0,256-1,086). Potilaat, joilla on eksonin 19 deleetio oli merkitsevästi pidempi OS että ne, joilla on villin tyypin (HR, 0,452; 95% CI, +0,242-0,811;

P

= 0007), kun taas ne, joilla L858R eivät (HR, 1.176; 95% CI, ,628-+2,100, P = 0,600) (taulukko 4).

immunohistokemiallinen arviointi ERCC1 ja korrelaatio ERCC1 ja Survival

riittävä kasvain saatiin näyte 51 näistä potilaista, ja alistettiin ERCC1 havaitsemiseen. Expression of ERCC1 arvioitiin immunohistokemiallisesti (kuvio. 2A). Ilmentymisen ERCC1 proteiini havaittiin ytimet syöpäsoluja. Taulukossa 5 on esitetty suhteita ERCC1 ilmaisun ja muiden ennusteeseen viittaavia tekijöitä. Nuclear ilmentyminen ERCC1 luokiteltiin neljään ryhmään. Kaksikymmentä kolme potilaalla oli pisteet 0, 12 oli pisteet 1+, 8 oli pisteet 2+, ja 8 oli pisteet 3+ (mediaani 1). Koska mediaani ERCC1 lauseke pisteet on pisteet 1+, tulokset 1+, 2+ ja 3+ pidettiin positiivisina ja pistemäärä 0 negatiivisena. ERCC1 ilmentyminen oli positiivinen 28 potilasta ja negatiivinen 23. ERCC1 ilmentyminen korreloi merkitsevästi EGFR-mutaatio (P = 0,030) (Kuva. 2B), mutta ei muiden tekijöiden, kuten ikä (

P

= 1,000) , sukupuoli (

P

= 1.000), histologia (

P

= 1.000), tupakoinnista (

P

= 0,773), tai vaste kemoterapiaan (

P

= 0,374).

V: n ilmentyminen ERCC1 arvioitiin immunohistokemiallisesti. Expression of ERCC1 proteiini havaittiin ytimet syöpäsolujen (X400). B: Kaplan-Meier eloonjäämiskäyrien mukaan ERCC1 ilmaisun pisteet. C: ERCC1-negatiivisella potilaalla, eksonin 19 deleetio oli pidempi PFS kuin toiset, ja ERCC1 positiivisten potilaiden ilman eksonin 19 deleetio oli lyhyempi PFS kuin toiset.

mediaani PFS oli merkitsevästi paremmin potilailla, jotka eivät olleet koskaan tupakoineet (P = 0,027) ja potilailla, jotka olivat ERCC1-negatiivisia (P = 0,039), kun se oli liity muita tekijöitä, kuten ikä, sukupuoli, histologian, ja EGFR-mutaatio (taulukko 6). Mediaani OS oli merkitsevästi parempi potilailla, joilla adenokarsinooma (P = 0,014) ja potilailla, jotka eivät olleet koskaan tupakoineet (P = 0,040), kun se oli liity muita tekijöitä, kuten ikä, EGFR-mutaatio, ja ERCC1 (taulukko 6). Kuvio 2C esittää Kaplan-Meier-koealojen rakennettiin käyttäen yhdistelmä ERCC1 ilmaisun ja EGFR tila. Potilaat, joilla on eksonin 19 deleetio ja alhainen ERCC1 ilme osoitti enää PFS, kun taas ilman eksonin 19 deleetio ja osoittaa korkea ilmentyminen ERCC1 oli lyhyempi PFS. Tutkimme vaikutukset mutaatiostatus ja ERCC1 samanaikaisesti käyttäen Coxin regressiota säätämisen tekijöitä, jotka oli osoitettu olevan merkitsevästi yhteydessä PFS tai OS on log-rank-testi. Coxin regressioanalyysi osoitti, että EGFR-mutaatio ja tupakointi (jolla ei koskaan savustettu) liittyivät merkittävästi PFS (P = 0,045 varten heterogeenisuus eksonin 19 poisto, L858R ja villityypin; P = 0,013 tupakoinnin). Parittainen vertailu suhteessa villityyppiin osoitti, että potilailla, joilla on eksonin 19 deleetio oli merkittävästi pidempi PFS kuin villin tyypin (HR, 0,484; 95% CI, 0,227-0,984;

P

= 0,045), kun taas potilaat jossa L858R ei ollut huomattavasti pidempi PFS (HR, 1.050; 95% CI, ,486-+2,163; P = 0,897) (taulukko 7). Ehdottivat Kuviossa 2C, Coxin regressio paljasti, että ERCC1-negatiivisella potilaalla, eksonin 19 deleetio oli pidempi PFS, kun taas ERCC1 positiivisten potilaiden ilman eksonin 19 deleetio oli lyhyempi PFS kuin toiset. Toisaalta, ei ERCC1 ilmaisu eikä mutaatiostatus oli merkitsevästi yhteydessä OS. Coxin regressioanalyysi, mukaan lukien tekijät, osoitettiin olevan merkitsevästi yhteydessä OS on log-rank testi, paljasti, että vaikkei ole savustettu ja joilla adenokarsinooma liittyivät merkittävästi OS (P = 0.021 tupakoinnin tila, P = 0,047 histologiaa varten). Ei kuitenkaan ole merkittäviä yhteydet olivat ilmeistä ERCC1 ja EGFR-mutaatio tila (taulukko 8).

Keskustelu

prospektiivisessa kliinisessä tutkimuksessa EGFR-TKI hoito NSCLC potilailla, joilla on aktivoivia EGFR mutaatioita, kuten delE746-A750 (eksoni 19) ja L858R (eksoni 21), ovat osoittaneet korkea kliininen hoitovasteen noin 80%. Satunnaistetussa kliinisessä tutkimuksessa verrata tehoa EGFR-TKI tai platina-yhdisteitä ensilinjan kemoterapiaa potilaille NSCLC kätkeminen EGFR mutaatioita [4] – [7] ovat osoittaneet, että NSCLC potilaat EGFR mutaatioita osoittavat dramaattinen vaste EGFR- TKI ja pidempi PFS kuin ilman

EGFR

mutaatioita. Yhtenevä nämä tulokset, meidän nykyinen tutkimus osoitti, että mediaani PFS oli merkitsevästi pidempi EGFR-mutaatio-positiivisia kuin EGFR mutaatio-negatiivisten potilaiden. Vuonna IPASS tutkimuksessa pienisoluista keuhkosyöpää EGFR-mutaatio osoitti suuremman hoitovaste kuin potilailla, joilla ei EGFR-mutaatio, kun he saivat karboplatiinin ja paklitakselin. Kuitenkin, PFS ollut eroa pienisoluista keuhkosyöpää ja ilman EGFR mutaatioita, jotka saivat sytostaattien [8]. Nämä tulokset viittaavat siihen, että NSCLC-potilailla, joilla on EGFR mutaatiot voivat olla taipumus vastata sytotoksisten aineiden, kuten platina-yhdisteet. Mukaisesti nämä tulokset, Huomasimme myös, että NSCLC potilaat kätkeminen EGFR mutaatioita oli korkeampi vastausprosentti kuin potilailla, joilla ei EGFR mutaatioita (36,9% vs. 17,5%). Lin ja Kalikaki et ai. ovat raportoineet, että NSCLC potilaat kätkeminen EGFR mutaatioita osoittavat vastata paremmin kemoterapiaa, kun taas muut tutkijat ovat raportoineet, että läsnäolo EGFR mutaatioita ei korreloi kemoterapiaa reagointikykyä [9] – [13]. Sitten tutki yhdistyksen välillä EGFR-mutaatio ja selviytymistä, ja totesi, että mediaani PFS ja OS oli merkitsevästi pidempi potilailla, joilla on eksonin 19 deleetio, jotka saivat platinapohjaisen kemoterapian. Lisäksi Coxin regressioanalyysi osoitti, että EGFR-mutaatio oli merkitsevästi yhteydessä PFS ja OS. On ollut jonkin verran erimielisyyttä tutkijoiden osalta yhdistyksen välillä EGFR-mutaatio aseman ja selviytymisen jälkeen tavanomaisen kemoterapian. Hotta et ai. osoitettu, että EGFR-mutaatio vaikutti PFS, kun taas muut tutkijat eivät havainneet tällaista korrelaatiota [9] – [13]. Kaksi aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että NSCLC potilaat kätkeminen eksoni 19 poistot näyttävät olevan kaikkein reagoivat EGFR-TKI: [19] – [20]. Meidän havainnot suosivat tulkinnan että kemoterapia on tehokkaampaa potilailla, jotka satama EGFR-mutaatio kuin niille, jotka ovat negatiivisia. Lisätutkimukset ovat tarpeen vahvistaa, onko EGFR mutaatio voi ennustaa vastaus sytostaattien.

parantamiseksi ennusteen potilaiden NSCLC, biomarkkereiden joka voi ennustaa tehoa kemoterapiaan tarvitaan. ERCC1 on osa nukleotidin poiston korjaukseen liittyvä reitti, joka on välttämätön korjaamiseen platina-DNA adduktit. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että yli-ilmentyminen ERCC1 taipumus korreloida vastustuskykyä platinapohjaiseen kemoterapiaan [14] – [15]. NSCLC potilaat, joilla on alhainen ilmentyminen ERCC1 osoittavat pidempi eloonjäämisen jälkeen platinapohjaisen kemoterapian kuin osoittaa korkeaa ERCC1 ilme. Gandara et al. tutki yhdistyksen välillä ERFR mutaatio ja ERCC1 mRNA tasot 1207 NSCLC kasvain näytteet, ja ilmoitti, että kasvaimia kätkeminen aktivoivia EGFR mutaatioita olivat todennäköisesti ilmaista alhainen ERCC1 mRNA [17]. Re et al. kertoi myös, että yksilöt kätkeminen EGFR mutaatioita oli todennäköisesti vähäinen ilmaus ERCC1 [21], ja Lee et al., käyttäen immunohistokemia, löytyi huomattava korrelaatio EGFR-mutaatio ja alhainen ERCC1 kasvainsoluissa [22]. Suostumuksella Näiden tulosten löysimme merkittävä korrelaatio ERCC1 ilmaisun ja EGFR-mutaatio (P = 0,030). Vaikka korrelaatio EGFR-mutaatio ja ERCC1 on ollut epäselvää, voidaan väittää, että heikentynyt kyky DNA: n korjaukseen synteesi voidaan korreloida lisääntynyt genomin epävakautta ja kasvaimen mutaatiot [23] – [24]. Oksidatiivisen DNA-vaurio ja korjaus edistää ihmisen eri patologioiden, mukaan lukien pahanlaatuisuuksien [25]. Aiemmissa tutkimuksissa olemme osoittaneet, että aktivoivat mutaatiot EGFR NSCLC läheisesti liittyy alentunut kyky korjata DNA aiheuttaman vaurion 8-hydroksi-2′-deoksiguanosiinia (8-OHdG-pitoisuuksiin). Yksi mahdollinen mekanismi, jolla 8-OHdG-pitoisuuksiin vaikuttaa EGFR mutaatioita NSCLC voisi olla vika pohjan Leikkauskorjauksessa prosessi poistaminen hapettuneen DNA, mikä johtaa kasvattamiselle EGFR mutaatioita ja edistäminen keuhkojen syövän synnyn [25]. Jää vielä tutkittu, miten ERCC1 voivat vaikuttaa mutaatioita EGFR geenin keuhkosyöpään.

tutkineet yhdistyksen välillä PFS tai OS ja EGFR-mutaatio ja ERCC1, ja totesi, että mediaani PFS oli merkitsevästi pidempi potilailla jotka olivat ERCC1-negatiivisia (P = 0,039). Kuten aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, NSCLC potilaat, jotka ovat negatiivisia ERCC1 osoittavat pidempään PFS [16]. Vaikka Coxin regressioanalyysiä paljastanut mitään merkittävää vaikutusta ERCC1 tilan PFS tai OS, tämä oli retrospektiivinen tutkimus ja potilaiden määrä oli liian pieni todistamaan mitään merkitseviä. Subset analyysi osoitti, että ERCC1-negatiivisella potilaalla, eksonin 19 deleetio oli pidempi PFS kuin muut, kun taas ERCC1 positiivisten potilaiden ilman eksonin 19 deleetio oli lyhyempi PFS kuin toiset. Mielenkiintoista on, että Gandara et al. havaitsivat, että syöpiä eksonin 19 deleetioita oli taipumus ilmaista alhaisempi ERCC1 kuin syöpiä villityypin tai L858R [17]. Nämä havainnot viittaavat siihen, että mediaani PFS ja OS ovat merkittävästi paremmat potilailla kätkeminen eksonissa 19 poisto, jotka saavat platinapohjaista kemoterapiaa. Kaksi aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että NSCLC potilaat kätkeminen eksoni 19 poistot näyttävät olevan kaikkein reagoivat EGFR-TKI: [19] – [20]. Lisäksi mahdollinen Kliinisissä tutkimuksissa pienisoluista keuhkosyöpää, kuten OPTIMAL ja EURTAC, ovat osoittaneet, että exon19 potilailla on suotuisampi riskisuhde kuin ne, joilla exon21 mutaatioita. Toisaalta, prospektiivisessa kliinisessä tutkimuksessa EGFR-TKI hoito pienisoluista keuhkosyöpää, joilla

EGFR

mutaatioita, kuten NEJ002 ja WJTOG3405, eivät ole osoittaneet eroja vastauksena potilaiden välillä kätkeminen exon19 ja exon21 mutaatioita. Ottaen huomioon tämän tilanteen, se on yhä ratkaisematta, onko EGFR exon19 poistot ovat edustavat yleensä myönteisesti ennustetekijä riippumatta kemoterapia palveluksessa. Suosimme tulkinnan että platina kemoterapian on tehokkaampi vasten ERCC1-negatiivisia ja eksoni 19-positiivisia NSCLC.

Kun useimmat NSCLC potilaalla on

EGFR

mutaatiot hyötyvät hoidosta EGFR-TKI, niiden kliinisen tehon EGFR-TKI: vaihtelee eri näille potilaille, ja lähes kaikki yksilöt lopulta kehittää resistenssin näille lääkkeille. Kehittynyt resistenssi EGFR-kohdennettuja lääkkeitä on yksi suurimmista esteistä parantamisen kliinisten tulosten tällä alalla. Immuunivärjäytyminen ERCC1 voi olla apua osituksesta pienisoluista keuhkosyöpää henkilökohtaista chemotherapies. Koska immunohistokemiallinen havaitseminen ERCC1 proteiini on yksinkertainen ja toteutettavissa hoitopaikassa, meidän havainnot voitaisiin laajasti sovellettavissa tässä yhteydessä. Tutkimuksemme osoittaa mahdollisesti lupaava hoitovaihtoehtoja pienisoluista keuhkosyöpää relapsi EGFR-TKI hoitoa.

Oli rajoituksia esillä olevassa tutkimuksessa. Ensinnäkin määrä potilaista oli suhteellisen pieni. Toiseksi, taannehtivuus tutkimuksessa ei salli standardoitua mitta PFS. Kolmanneksi otimme peptidi (PNA) -locked nukleiinihappo (LNA) PCR puristin menetelmää tunnistaa EGFR mutaatioita. Tämä menetelmä pystyy havaitsemaan 11 erilaisen mutaation läsnä ollessa, 100- ja 1000-kertaisesti villityypin EGFR tausta [16]. Nämä 11 mutaatiot muodostavat 95% kaikista EGFR mutaatioita löytyi japanilaisten potilaiden, mikä viittaa siihen, että loput 5% ei voida havaita PNA-LNA PCR puristin menetelmä [21]. Siksi on mahdollista, joillakin potilailla, joille mutaatioita ei havaittu saattoi itse asiassa kanna mutaatiota.

Yhteenvetona olemme havainneet, että eksoni 19 poisto liittyy pitempi PFS NSCLC saavilla potilailla platinapohjaisen kemoterapian. Tulosten perusteella näyttää, että platina kemoterapian on tehokkaampi vasten ERCC1-negatiivisia ja eksoni 19-positiivisia NSCLC. Edelleen tutkimus on perusteltua selventää kliininen hyöty immunohistokemiallisella analyysi ERCC1 määrittämiseen optimaalisen syövänvastainen hoito-käyttäen EGFR-kohdistaminen huumeita.