Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Perustuu potentiaalia Schiffin emäksen yhdisteiden toimia lähteinä syövän kehittymiseen kemoterapeuttisten aineiden, tämä

in vivo

tutkimus suoritettiin tutkimaan inhiboivia ominaisuuksia synteettisen Schiffin emäksen yhdistettä Cu (BrHAP)

2 paksusuolen poikkeavaan crypt foci (ACF).

Menetelmät

Tässä tutkimuksessa mukana viisi ryhmää urosrottien. Negatiivista kontrolliryhmää injektoitiin normaalilla suolaliuoksella kerran viikossa 2 viikkoa ja syötetään 10% Tween 20 10 viikkoa, syöpä kontrolliryhmään injektoitiin ihonalaisesti 15 mg /kg azoxymethane kerran viikossa kahden peräkkäisen viikon ajan, positiivinen kontrolliryhmä injektoitiin 15 mg /kg azoxymethane kerran viikossa kahden peräkkäisen viikon ajan ja 35 mg /kg 5-fluorourasiilin (injektoitu intraperitoneaalisesti) ja 4 viikkoa, ja kokeelliset ryhmät injektoitiin ensin 15 mg /kg azoxymethane kerran viikossa kahden peräkkäisen viikon ajan ja sitten syötettiin 2,5 tai 5 mg /kg Schiffin emäksen yhdistettä kerran päivässä 10 viikkoa. Soveltaminen Schiffin emäs yhdisteen tukahdutetaan koko paksusuolen ACF muodostumista jopa 72%: sta 74% (

P

0,05) verrattuna syövän kontrolliryhmään. Kolorektaalisen yksilöitä paljasti, että hoitojen kanssa Schiffin emäksen yhdiste laski keskimääräistä krypta arvosanat azoxymethane saaneilla rotilla. Merkittävä julkisivut superoksididismutaasi, glutationiperoksidaasista ja katalaasin toimintaa ja vähentää taso malondialdehydipitoisuus havaittiin myös. Histologisesti, kaikki hoitoryhmissä näytteillä pienensi merkitsevästi dysplasia verrattuna syövän kontrolliryhmään (

P

0,05). Immunohistokemiallinen värjäys osoitti alas-säätely PCNA proteiinia. Vertaileva western blot-analyysi osoitti, että COX-2 ja Bcl2 oli säädelty ja Bax oli alassäädetty verrattuna AOM kontrolliryhmään.

Johtopäätös

Nykyinen tutkimus osoitti, että Cu (BrHAP )

2 yhdisteellä on lupaava chemoprotective toimintaa, joka ilmenee merkittävää alenemista määrää ACFs in azoxymethane aiheuttama paksusuolensyöpä.

Citation: Hajrezaie M, Hassandarvish P, Moghadamtousi SZ, Gwaram NS, Golbabapour S , NajiHussien A, et al. (2014) chemopreventive arviointi Schiffin Base Derived Copper (II) Complex vastaan ​​azoxymethane-indusoitu peräsuolen syövän rotilla. PLoS ONE 9 (3): e91246. doi: 10,1371 /journal.pone.0091246

Editor: Ashraf B. Abdel-Naim, Farmasian tiedekunta, Ain Shams University, Egypti

vastaanotettu: 10 lokakuu 2013; Hyväksytty: 10 helmikuu 2014; Julkaistu: 11 maaliskuu 2014

Copyright: © 2014 Hajrezaie et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Kirjoittajat kiittää yliopiston malaya tukemiseksi tämän hankkeen PV069-2012A, ja HIR-Mohe (F000009-21001) päässä opetusministeriön korkeakoulu Malesia. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

peräsuolen syöpä, joka tunnetaan myös paksusuolen syöpä, voi liittyä poikkeavaa kasvaimet lisäyksessä, paksusuolen ja peräsuolen ja on yksi kolmesta yleisimmistä syöpien [1]. Vaikka paljon tutkimusta ja edistyksen ehkäisyyn ja hoitoon paksusuolen syöpä, merkittävä tukahduttaminen kasvainten edelleen harvoin saavutetaan, ja hoito tunnetuilla aineilla voi johtaa syövän etenemisen joissakin tapauksissa [2]. Havaitseminen ja hoito alkuvaiheen paksusuolensyöpä kunnon aineilla on keskeisessä asemassa määrän vähentämisessä paksusuolen syövän uhrien [3]. Azoxymethane (AOM) malli kokeellisen paksusuolensyöpä jäljittelee laaja molekyyli, kliinisiä ja histologisia piirteitä ihmisen paksusuolen syövän [4]. Azoxymethane (metyyli-metyyli-oxidoazanium) yhdiste on oksidi azomethane (molekyylikaavan C

2H

6N

2O) ja sitä käytetään yleisesti indusoimaan paksusuolensyöpä kokeellisissa malleissa [5], [6] .

metallikompleksit on laajasti käytetty farmakologian vuosisatojen [7], [8]. Kehittäminen metalliin perustuvia lääkkeitä on edistetty merkittävästi saavutuksia, jotka on saavutettu platinapohjaisen antituumoriaineista, kuten oksaliplatiini, sisplatiini ja karboplatiini. Kuitenkin hoito platinapohjaisen lääkkeiden liittyy tavallisesti kehittymistä lääkeresistenssin ja vakavia sivuvaikutuksia hoidon aikana prosesseja [9]. Kupari on tunnetusti tärkeä kationi solun selviytymisen, joka on keskeinen rooli kofaktorina joidenkin metalloentsyymien. Kupari on erinomainen ehdokas syövän hoitoon 1960-luvulta lähtien [10]. Oksidatiivisen luonto ja biologinen aktiivisuus kuparia ihmisillä on herättänyt epäorgaaninen kemistit käsitellä farmakologisen sovellukset kupari (II) [11], [12]. Tämäntyyppiset metallien ainutlaatuisuus reaktivaationopeuden kanssa dihappi käytetään elimistön läpi kuljettuaan suoliston seinät [13]. Koska niiden mahdollisuuksia DNA pilkkominen kautta oksidatiivisen tai hydrolyyttisen mekanismeja ja vahva vuorovaikutus DNA kautta intercalation tai pinta yhdistysten, kupari (II) komplekseja heterosyklisten emästen on laajalti tutkittu [14]. Schiffin emäkset ovat merkittävä luokka yhdisteitä, joilla on merkittävää potentiaalia haavaumalääkityksiä [15], bakteereita, sieniä [16], [17], anti-diabeetikoilla [18], antituumorivaikutuksen [19] – [23], anti-proliferatiivinen [24 ], [25] ja anti-inflammatorinen toiminta [26], [27].

Schiffin emäs-johdettu kupari (II) komplekseja on voimakas anti-proliferatiiviset, gastroprotektiivista ja antibakteerisia mahdollisten ominaisuuksien takia niiden metallia keskusten tai niiden koordinoida ligandeja, jotka liittyvät sähköisten ja rakenteellisten luonnehdintoja, jotka johtuvat niiden yhteensovittaminen [15]. Esillä olevan tutkimuksen tarkoituksena oli tutkia estävä vaikutus kupari (II) kompleksi, jotka ovat peräisin N, N’-dimetyyli-etyleenidiamiini ja 2-hydroksiasetofenonia Schiffin emäs-ligandin Cu (BrHAP)

2 vastaan ​​AOM aiheuttamaa paksusuolen syövän syntymistä rotat kannalta ilmaantuvuuden ACF.

Materiaalit ja menetelmät

Kemikaalit

tässä kokeessa karsinogeeninen kemiallinen azoxymethane (AOM) ostettiin Sigma Aldrich (St. . Louis, MO, USA), ja 5-fluorourasiilin, paksusuolen syöpä positiivinen viittaus, hankittiin Calbiochem (San Diego, CA, USA).

synteesi monimutkainen

kupari kompleksi syntetisoitiin kuten aiemmin yksityiskohtaisesti julkaistun artikkelin [15]. Tämä Cu (BrHAP)

2 Schiffin emäs yhdiste saavutettu alkaen kemian laitoksen tiedekunnan yliopiston malaya.

Eettiset kysymykset

protokolla Tutkimuksen hyväksyttiin jonka eettinen komitea eläinkokeiden tiedekunnan yliopiston lääketieteellisen Malaya, Malaysia (Ethic No. PM /27/07/2010 /MAA (R)). Eläimiä hoidettiin kriteerien mukaan National Academy of Sciencen opas Care ja koe-eläinten käyttöä [28], [29].

Välitön myrkyllisyys arviointi

Osoittaakseen turvallisuus käyttö Cu (BrHAP)

2 monimutkainen, 36 terveille ja urosrottia (painoivat 150-180 g) otettu Animal House of lääketieteellisen tiedekunnan yliopiston Malaya, Kuala Lumpur, koki akuutti myrkyllisyys analyysi. Rotat jaettiin kolmeen ryhmään: ajoneuvon ohjaus, ryhmä, joka sai 100 mg /kg kupari (II) kompleksi, ja ryhmässä, joka sai 2000 mg /kg kupari (II) kompleksin [15]. Yön yli paastoamisen jälkeen, rotille syötettiin kupari (II) -kompleksia ja myöhemmin havaittiin kahden tunnin välein 24 tunnin aikana, ja mikä tahansa toksisuus oireet kirjattiin. Kuolleisuus kirjattiin yli 14 päivän kokeen. Jälkeen rotat tapettiin, veri ja elimet kerättiin biokemiallisten, hematologisten ja histologiset analyysit.

arviointi chemopreventive vaikutus kupari (II) kompleksin

Sprague-Dawley-rottia saatiin Animal House of lääketieteellisen tiedekunnan, Malayan yliopisto. Kansainväliset periaatteet ja paikalliset säännöt on huomioitava hoitoa ja käyttöä koe-eläimiä. Rotat painotettu noin 180-200 grammaa ja saatiin likimäärin iässä 6-8 viikkoa. Eläimiä pidettiin valvotuissa olosuhteissa huoneenlämmössä (22-24 ° C) ja 50-60% kosteus on 12 tunnin valo-pimeä sykli ad libitum pääsy standardin ruokaan ja juomaan. Eläimiä sopeutettiin standardin laboratorio-olosuhteisiin ajaksi kaksi viikkoa ennen aloittamista tahansa kokeen.

Kolmekymmentäkuusi aikuinen mies rottaa jaettiin satunnaisesti seuraaviin viiteen ryhmään kuusi rottaa kunkin: negatiivinen kontrolli ryhmä (nämä rotat saivat ihonalaisen injektioita normaalia suolaliuosta ja annettiin suun kautta 10% Tween 20 päivässä 10 viikon ajan), syövän kontrolliryhmään (nämä rotat saivat ihonalaisen injektiot 15 mg /kg AOM kerran viikossa kahden peräkkäisen viikon ajan. ne annettiin suun kautta 10% Tween 20 (5 ml /kg) päivässä), positiivinen kontrolliryhmä (nämä rotat saivat ihonalaisen injektiot 15 mg /kg AOM kerran viikossa kahden peräkkäisen viikon ajan ja seurasi intraperitoneaalitestissä injektiot 35 mg /kg 5-fluorourasiilin 4 viikkoa) ja molemmissa hoitoryhmissä (nämä rotat ensin saanut ihonalainen ruiske 15 mg /kg AOM kerran viikossa kahden peräkkäisen viikon ajan ja suun kautta Cu (BrHAP)

2 Schiffin emäs yhdisteen annoksilla 2,5 mg /kg tai 5 mg /kg 10 viikkoa) [5]. Kokeiden aikana rotat punnittiin ja tarkkailtiin päivittäin myrkytysoireiden.

pisteytys poikkeavien kryptissa

Jos haluat tallentaa esiintyvyys ACF, sijainnit ja lukumäärät kryptissa rekisteröitiin 10 viikkoa sen jälkeen, kun viimeinen AOM injektion. Tätä varten rotat tapettiin suuri annos ksylatsiinin ja ketamiinianestesiassa, ja niiden kaksoispisteet uutettiin ja huuhdottiin kylmällä fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS) ja sitten pitkittäin avataan peräaukon peräsuoleen. Sillä topografisia analyysi, 0,2% metyleenisiniä käytettiin tahrata paksusuolen ja paksusuolen havaittiin limakalvojen ylöspäin Nikon preparointimikroskooppia. ACF pisteet laskettiin lukumäärän perusteella poikkeavan kryptat pesäkkeitä, jotka tunnetaan pesäkkeitä, jotka sisältävät enemmän kuin kaksi poikkeava crypts. Lukumäärä ACF kohti kaksoispiste ja luku poikkeavan kryptissa kussakin keskitytään määritettiin.

histologinen luokitus ACFs

formaliiniin (10%) käytettiin korjata paksusuolen yksilöt seuraava käsittely parafiini kudos-käsittely kone (Leica, Saksa). Sitten kudokset upotettiin parafiiniin lohkot ja leikattiin 5 um: n osia. Leikkeet värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla (H 0,05.

Tulokset

Äkillinen myrkyllisyys Tutkimuksessa

Kuten raportoitu meidän aiemmin julkaistu artikkeli, sovellus kupari (II) Schiffin emäksen yhdiste ei tuottanut mitään merkkejä hematologian, seerumin biokemiallinen poikkeavuus, tai maksan tai munuaisten toksisuutta. Siten tämä kompleksi näyttää olevan turvallisia käyttää [13].

Ruumiinpainot ja seerumin biokemia analyysit chemopreventive potentiaalin Cu (BrHAP)

2

Merkittäviä eroja ei havaittu rottien ruumiinpaino eri ryhmien (taulukko 1). Taulukot 2 ja 3 havainnollistavat seerumin biokemia analysoi veren kerätään ajosuunta eläimistä tutkimiseksi parametrien maksan ja munuaisten toimintaa verrattuna niiden ajoneuvojen ryhmää.

ACF taajuus

kasvain määrällisesti analyysit kaksoispisteiden jotka värjättiin metyleenisinistä välittömästi eläinten lopettamisen jälkeen on esitetty yhteenvetona taulukossa 4. Kuva S1 näyttää topografisia näkymät metyleenisiniliuoksen-värjättyä paksusuolen kudoksiin eri ryhmiin. ACFs oli erottaa ympäröivän normaalin crypts niiden lisääntynyt kokoa, lisääntynyt etäisyydet levy on pohjapinta pintoja solujen, ja helposti havaittavissa pericryptal alueilla. Ei mikroskooppisia muutoksia ei havaittu normaalissa kontrolliryhmässä, ja huomattavasti suurempi määrä ACFs kirjattiin syövän kontrolliryhmässä. Ryhmissä, jotka saivat kupari (II) kompleksi osoitti merkittäviä vähennyksiä ACF numerot (72,2% ja 74,7%;

p

0,05). Jakautuminen ACFs syövän kontrolliryhmän keskittyi keskellä paksusuolen syövän kontrolliryhmässä, ja kupari (II) kompleksi-käsiteltyjen ryhmien osoitti merkittävästi vähentää distaalisen, keskimmäinen ja proksimaalinen ACF jakaumat verrattuna syövän kontrolliryhmään ( taulukko 5).

Histologinen arviointi

makroskooppinen patologinen erot paksusuolessa kudoksissa eri ryhmien osoitti, että ACFs sisälsi kapea luminaalisen epiteelisolujen ja epämuodostunut pikarisolut pitkänomaisia ytimeksi. Tappiot solun polariteetin ja lisäykset mitoosien havaittiin myös dysplastic ACFs verrattuna normaaliin pyöreitä soluja basaalisesti sijaitsevat ytimiä. Histologinen kuvia paksusuolen kudoksiin positiivisesta kontrolliryhmässä näytteillä määrän vähentämisen solujen patologinen eroja, ja samanlainen väheneminen havaittiin suun kautta kupari (II) kompleksi hoitoryhmissä (kuva S2).

Immunohistokemia

immunohistokemiallinen PCNA proteiinivärjäys paksusuolen osat pois azoxymethane ryhmästä paljasti ylössäätöä proteiinin. Positiivinen kontrolliryhmä osoitti pienempi määrä positiivisia soluja verrattuna azoxymethane ryhmään, ja samanlaiset tulokset havaittiin kupari (II) kompleksin käsitellyissä ryhmissä. PCNA-positiivisten solujen (%) paksusuolen kudoksen syövän kontrolliryhmässä oli 100%, kun taas PCNA-positiivisten solujen (%) hoidetusta ryhmästä olivat 47,4% ja 35,4%, tässä järjestyksessä (

p

0,05 taso verrattuna syövän kontrolliryhmään.

Western blot-analyysit

Western blot analyysit paljastivat, että Bax (23 kDa) proteiinin väheni -regulated syövän kontrolliryhmässä ja että Cu (BrHAP)

2 kompleksi lisäsi tämän proteiinin ilmentymisen. Cu (BrHAP)

2 monimutkainen ja 5-fluorourasiilin aiheuttamat down-asetusten COX-2 (69 kDa) ja Bcl2 (26 kDa) proteiinien hoidetussa rotilla verrattuna syövän kontrolliryhmään. Proteiini ilmaisuja Länsi-blotit kvantitatiivisesti käyttäen Image J ohjelmisto. Tiheydet että syöpä ryhmä (A) on asetettu 1 ja suhteelliset tiheydet positiivisen ja käsiteltyjen ryhmien piirrettiin. Tiedot ovat keskiarvo ± SEM. Tilastollinen merkittävyys ilmaistuna p 0,05 (kuva 2).

A) Colon limakalvon ryhmän alttiina AOM. B) Colon limakalvon ryhmässä käsiteltiin 5-fluorourasiilin kanssa. C) Colon limakalvon ryhmässä käsiteltiin 2,5 mg /kg kupari (II) kompleksi. D) Colon limakalvon ryhmässä käsiteltiin 5 mg /kg kupari (II) kompleksi. COX-2, ja Bcl2 ekspressio lisääntyi ja Bax ilmentyminen väheni hoitoryhmässä verrattuna AOM kontrolliryhmään. β-aktiini käytettiin sisäisenä kontrollina vahvistaa yhtäläiset näyte lastaus. Image J ohjelmaa käytettiin arvioimaan proteiinin ilmentymisen. Kaikki arvot ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskivirhe keskiarvon. Keskimääräinen ero oli merkitsevä p 0,05 taso verrattuna syövän kontrolliryhmään.

Antioksidantit entsyymin toimintaa

Cu (BrHAP)

2 kompleksi lisäsi merkittävästi tasojen SOD, CAT ja GPX in homogenisoitiin paksusuolen näytteissä verrattiin syövän kontrolliryhmän (

p

0,05). Taso MDA oli merkittävästi vähentynyt Schiffin emäksen monimutkainen saaneissa ryhmissä, ja syöpä kontrolliryhmään osoitti säätely ylöspäin ilmentymistason MDA (

p

0,05) (kuva 3).

) Negatiivinen paksusuolen ryhmä, B) ryhmä altistettiin AOM, C) ryhmässä, jota käsiteltiin 5-fluorourasiilin, D) ryhmä hoidettiin 2,5 mg /kg kupari (II) kompleksi, E) ryhmässä, jota käsiteltiin 5 mg /kg kupari (II) kompleksi. Kaikki arvot ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskivirhe keskiarvon. Keskimääräinen ero oli merkitsevä p 0,05 verrattuna syövän kontrolliryhmään.

Keskustelu

Syövän lääkekehityksen oleva biologinen strategioista käyttää siirtymävaiheen metallia kemiaa kohdistaa syövän kasvua reittejä ja aktivoida syöpäsolun apoptoosin on kehitetty vähentää vakavuutta syövän potilaille [30], [31].

Tuoreen tutkimuksen mukaan, joka ehdottaa, että ohjatakseen syövän kasvua, se ei riitä luottaa yhtenäisiin solu- tai fysiologisen tapahtuman, etsii tekijöitä, joilla on ohjaava rooli useiden tuumorigeenisemmiksi tapahtumiin ja niihin liittyviä mekanismeja on erittäin tärkeää [32], [33]. Schiff-emäs yhdisteiden ryhmiä on tutkittu laajasti niiden suojaavien vaikutusten. Kupari monimutkainen on kyky estää solujen toiminnan kannalta soluproliferaation, ja näin päätellä, leviämisen merkkejä ja korkeus apoptoosin polkuja [10], [15]. Edellisessä tutkimuksesta osoitti, että proteasomiestäjät apoptoosin ja on potentiaalia syöpää rooleja [34], [35]. Tutkimus Xiao

et al

. [36] paljasti inhiboiva rooli Schiffin emäksen kuparin vastaan ​​proteosomin aktiivisuutta, jolloin apoptoosin lisäämiseksi.

Esillä olevassa tutkimuksessa osoitimme, että Cu (BrHAP)

2 voidaan vähentää ACF muodostumista ja siksi paksusuolen kasvaimen esiintymistiheys rotilla. Mekanistisesti yhdiste osoitti lupaavia chemopreventive vaikutuksia vastaan ​​ACF muodostumista estämällä kasvainsoluproliferaation ja kontrolloi spesifisten keskeisten proteiinien ja mitokondrioiden apoptoosin induktio. Näyttää siltä, ​​että ohjaamalla antioksidanttientsyymejä ”ekspressiotasoja, yhdisteen kanssa, on tärkeä rooli inhiboinnissa ACF muodostumiseen (kuviot 1, 2, 3).

Kun eläinmalleja käytetään tutkimuksessa, kliiniset ja toksikologiset tutkimukset uusia synteettisiä yhdisteitä ovat ratkaisevia turvallisuuden varmistamisesta ja näiden yhdisteiden tehoa. Kuten raportoitu meidän aiemmin julkaistu artikkeli, LD

50 Cu (BrHAP)

2 tässä tutkimuksessa havaitut voidaan pitää turvallisina perustuvat maailmanlaajuiseen yhdenmukaistetun järjestelmän luokitusta ja merkintöjä kemikaalien [15], [28]. Siten tuloksemme osoittivat toksikologinen turvallisuus suun kautta tämän yhdisteen, koska ei ollut merkkejä poikkeava käyttäytyminen tai laihtuminen. Ei havaittu merkittäviä eroja käsitellyissä ryhmissä verrattuna kontrolliryhmään kannalta maksan ja munuaisten toimintaa. Siten meidän havainnot tukevat looginen tämän uuden synteettisen Schiffin emäksen yhdiste.

karsinogeeninen yhdiste dimetyyli diatsee–1-oksidi (azoxymethane) on osoittautunut pystyy tuottamaan paksusuolen kasvainten antamisen jälkeen urosten tietyn ajanjakson ajan [37]. Koot ja lukumäärät poikkeavasta crypt pesäkkeitä käytetään väli- biomarkkereita ja korreloi riskiä sairastua paksusuolen syöpään. Näin ollen, koot ja lukumäärät poikkeavan crypt foci tarjota nopea toimenpide yhdisteiden seulomiseksi, jotka voivat olla tehokkaita tukahduttamaan kehittämiseen paksusuolen syöpä [38] – [40]. Kuten aiemmin on selitetty, läpi apoptoosin aktivoimalla mitokondrioiden reitin, kuparin monimutkainen on kyky estää syöpien [10]. Tämä tutkimus osoitti, että hallinto Cu (BrHAP)

2 annoksilla 2,5 mg /kg ja 5 mg /kg vähensi merkitsevästi koko AOM aiheuttamaa paksusuolen ACF muodostumista ja multicrypt poikkeava krypta kasvua 72% ja 74% (

p

0,05), vastaavasti.

läsnäolo PCNA käytettiin markkerina solujen lisääntymistä (joka on tärkeä rooli syövän etenemisen) paksusuolen kudoksiin, koska PCNA osoittaa solun extra jako valmiudet [41] – [43]. Tutkimukset eläinmalleissa osoittavat, että epänormaali epiteelisolujen proliferaatio on yksi varhaisimmista merkkejä preneoplasian [44] – [45]. Perustuu tutkimuksen Deschner EE

et al

. [46], käsiteltyjen eläinten kemikaalia paksusuolen syöpää aiheuttava aine paljasti suuremman leviämisen alueen ja korkeamman merkintöjä indeksi verrattuna vehikkelillä käsiteltyyn ryhmään. Mukaan immunohistokemiallinen tutkimuksen tulokset, Cu (BrHAP)

2 indusoi paksusuolikudos suojaa alaspäin säätäminen PCNA. Siksi potilailla, joita hoidettiin yhdisteellä oli pienempi leviämisen alueen ja alemman merkintöjä indeksi, joten solut eivät enää olleet kasvukierroksen (

p

0,05). Samanlainen väheneminen lisääntyvissä solun tuma-antigeenin kerrottiin aiemmin tutkimuksessa, joka osoitti onnistunut kemopreventiossa vastaan ​​AOM aiheuttamaa paksusuolen syövän eläinmallissa [47]. Siten yhdiste, jota käytetään tässä kokeessa voi estää ACF muodostumista muuttamalla solujen proliferaatiota. Useita tekijöitä immuunijärjestelmän apoptoosireitin kriittisiä rooleja selviytymisen tai kuolemaan solujen, ja nämä tekijät ovat vuorovaikutuksessa ja vaikuttavat lopulliseen tulokset [47]. Induktion paksusuolensyöpä kanssa AOM aiheuttaa oksidatiivista vammoja seuraavat lipidiperoksidaatiolta tuotanto paksusuolen soluissa ja punasolujen, jotka aiheuttavat lisääntynyttä erittymistä kokonaisproteiinista ja albumiini munuaisten kautta, mikä puolestaan ​​johtaa korkeus urean pitoisuuksia veressä. Tämä prosessi voi olla rooli etiologiassa paksusuolensyöpä rotilla [48] – [49] välinen tasapaino ROS kehossa on olennaista solujen toiminnan ja apoptoottisen väylän precancerous soluissa [50]. Jos ei ole tehokas sääntely, ylimääräinen ROS vahingoittaisi proteiineja, lipidejä tai DNA ja puolestaan ​​estää normaalin toiminnan ja modulaatio geeniekspression, solusyklin, solujen aineenvaihduntaa, soluadheesion ja solukuolemaa [51]. Schiffin pohjainen yhdiste käytettiin tässä tutkimuksessa oletetaan on kyky tasapainottaa nämä ROSS. Vaikutusmekanismi on tämä yhdiste voi olla kautta vapaa radikaaleja ja sammutus muodostumista singlettihappea, joka suojaa paksusuolen oksidatiivista stressiä vastaan ​​ja stimuloi paksusuolen korjausmekanismeja. On mahdollista, että yhdisteellä on suojaavia vaikutuksia ACF muodostumista ja paksusuolen vammoja endogeenisen oksidatiivisen entsyymiä, jotka ovat mukana paksusuolen puolustusjärjestelmän, kuten (CAT), (SOD) ja (GPX), jotka ovat vastapainona oksidatiivisen stressin aiheuttamaa AOM. Tässä tutkimuksessa osoitettiin, että AOM hallinto aiheutti vakavia vahinkoja rotan endogeeninen antioksidantti järjestelmä, jota edustaa häiriö oksidatiivisen stressin entsyymien (CAT, SOD ja GPX) toiminta, joka alensi niiden tason ohella lipidiperoksidaatio joka oli ominaista ylössäätöä MDA tasoilla.

Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet rooli toiminnan lisääntymisestä antioksidantti entsyymejä (SOD, CAT ja GPX), jotka aiheuttamien antituumoriaineista, että mekanismi chemopreventive hoito [ ,,,0],52].

in vivo

arvioinnissa antioksidantteja tehty tässä tutkimuksessa osoitettiin merkittävästi kohonneet SOD, CAT ja GPX toimintaa potilailla, joita hoidettiin Cu (BrHAP)

2. Kuitenkin vähensi lipidiperoksidaatio ehdotti merkittävä lasku MDA tasoilla. Vaikka tämä tulos ei ollut merkittävä, koska vaikutus Cu (BrHAP)

2 neutralointi myrkyllisiä yhdisteitä, jotka on valmistettu muuntamalla AOM on erittäin myrkyllinen aineenvaihduntatuote, tasot kokonaisproteiinin, albumiinin ja urea palautettiin normaaliarvot [53]. Jotta voitaisiin edelleen tutkia chemopreventive aktiivisuutta tätä yhdistettä paksusuolen syövän ja mekanismia taustalla vaikutus, ilmauksia Bax, proapoptoottiset proteiinit, B-solulymfooma 2 (Bcl-2) (joka on antiapoptoottisten vaikutukset) ja syklo-oksygenaasi 2 (COX-2 ) eri ryhmissä analysoitiin. Western blot-määritystä käytettiin tässä tutkimuksessa spesifisten proteiinien homogenisoitiin uutettiin paksusuolen. Nämä proteiinit on olennaiset rooleja uusien syöpälääkkeiden [54]. Bcl-2 on tärkeä rooli prosessin valvonnassa solukuoleman estämällä eri apoptoosin signaaleja. Sen sijaan, Bax-proteiinin on rooli vapauttaa tekijä, joka edistää apoptoosia sytoplasmaan. Näin ollen tasapaino ilmauksia Bcl-2: n ja Bax on tärkeä prosessi solukuoleman [52] – [55]. COX-2 on raportoitu olevan yli-ilmentynyt alkuvaiheessa, ja COX-2-tasoja on raportoitu lisääntyvän etenemistä syöpä. COX-2 on nopeutta rajoittava entsyymi biosynteesissä prostanoidien, jotka lisäävät proliferaatiota, apoptoottiset vastus ja angiogeneesin aikana paksusuolen syövän synnyn. Ekspression COX-2: ta säädellään ylöspäin AOM aiheuttaman paksusuolen kasvaimia. Down-regulation of COX-2 on osoitettu olevan ratkaiseva merkitys syöpälääke aiheuttama tukahduttaminen AOM aiheuttaman tuumorigeneesiä eläinmallissa [53]. Tuloksemme paljasti, että Cu (BrHAP)

2 lisäsi ilmentymistä BAX-proteiinin, joka on ristiriidassa aiemman tutkimuksen Zhang

et al

. [56], jotka on raportoitu, että induktio BAX-proteiinin ilmentymisen johti apoptoosin käyttäen Schiffin emäs kupariyhdistettä, ja alas-säädellä ilmentymistä COX-2: n ja Bcl-2-proteiinien, ja tämä malli ilmaisun muuttuu vahvasti siihen, että apoptoosin on aiheuttama kautta mitokondrioiden kautta. Ma

et al

. [10] osoittivat myös syövän vaikutusta uuden Schiffin emäksen kupari (II) kompleksin aktivoitumisen kautta mitokondrioiden kautta. Tuloksena Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli samanlainen edellisessä julkaistu tutkimus on sama yhdiste, joka paljasti sen tehokkaampi vaikutus maha-ehkäisyyn. Tuloksena osoitettiin, että kompleksi pystyi vähentämään merkittävästi Bax-proteiinin ilmentymisen [15]. Aiemmat arvioinnit tehokkaan kemopreventiivisiä aineita ovat myös paljastaneet samaa mallia Bax, Bcl-2, ja COX-2-proteiinin ilmentymisen [52], [53].

Johtopäätökset

tuloksen perusteella tämän tutkimuksen chemopreventive potentiaali Cu (BrHAP)

2 osoitettiin vähennykset numerot ACFs jotka voivat johtua alas-säätely soluproliferaatiota edistävät proteiinit syöpäsoluissa ja korkeus tasojen antioksidantti entsyymejä. Western blot analyysit paljastivat, että kupari (II) kompleksi aktivoidaan apoptoosin kautta mitokondrioiden-reitin alaspäin säätäminen COX-2 ja Bcl-2 ja ajan säätelevä Bax.

tukeminen Information

Kuva S1.

Topografiset näkymät paksusuolen limakalvoa. A) Normaali paksusuolen limakalvolla. B) Colon limakalvon ryhmän alttiina AOM. C) Colon limakalvon ryhmässä käsiteltiin 5-fluorourasiilin kanssa. D) Colon limakalvon ryhmässä käsiteltiin 2,5 mg /kg kupari (II) kompleksi. E) Colon limakalvon ryhmässä käsiteltiin 5 mg /kg kupari (II) kompleksi. Rotan koolonkudoksessa värjättiin metyleenisinistä. Suurennus: 20x.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0091246.s001

(TIF) B Kuva S2.

histologinen tutkimus paksusuolisyövän rotilla. A) Normaali paksusuolen limakalvolla.