Krooninen sairaus

tiivistelmä

Aim

Tutkia LMP10 ilmentymisen ja sen mahdollisista vaikutuksista kliinistä tulosta ihmisen papilloomaviruksen (HPV) positiiviset ja HPV-negatiiviset Nielurisoista ja pohjan kielen okasolusyöpä (TSCC ja BOTSCC).

Background

tulos on parempi HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC verrattuna matching HPV-syöpäkasvain, jossa noin 80% vs. 40% 5 vuoden taudista vapaan eloonjäämisen (DFS ) vähemmän aggressiivinen hoito kuin nykypäivän kemosädehoito. Koska nykyinen hoito aiheuttaa usein haitallisia sivuvaikutuksia, vähemmän tehohoitoa, jossa jatkuva elossaololuku olisi houkutteleva vaihtoehto. Kuitenkin muita markkereita yhdessä HPV asema on tarpeen valita potilaita ja tätä varten LMP10 ilmaisua tutkitaan täällä rinnakkain HPV- statuksesta ja kliiniseen tulokseen.

Materiaalit ja menetelmät

Vuodesta 385 potilasta diagnosoitu vuosien 2000 ja 2007 Karoliinisen yliopistosairaalan, 278 formaliinilla parafiiniin upotettuja TSCC ja BOTSCC koepaloja, joiden tiedetään olevan HPV-DNA-asema, testattiin LMP10 ydin- ja sytoplasmista ilmaisun (osa positiivisten solujen ja värjäytymisen intensiteetti). Aineisto sitten korreloi kliiniseen lopputulokseen.

Tulokset

Puuttuvasta /alhainen verrattuna kohtalainen /korkea LMP10 ydin- osa positiivisten solujen korreloi paremmin 3 vuoden DFS HPV -positiivinen potilasryhmälle (log-rank p = 0,005), mutta ei HPV-negatiivinen ryhmä. HPV-negatiivisten potilaiden ryhmässä, toisin kuin HPV-positiivisia ryhmässä, kohtalainen /korkea LMP10 solulimafraktio ja heikko /kohtalainen /korkea LMP10 sytoplasmisen intensiteetti korreloi paremmin 3 vuoden DFS (p = 0,003 ja p = 0,001) ja 3-vuoden kokonaiselinaikaa (p = 0,001 ja 0,009).

Johtopäätös

LMP10 ydinvoiman ilmentymistä HPV-positiivisten ryhmässä ja LMP10 sytoplasmista ekspressiota HPV-negatiivisten potilaiden ryhmässä korreloi parempi kliininen tulos.

Citation: Tertipis N, Haeggblom L, Nordfors C, Grün N, Näsman A, Vlastos A, et al. (2014) korrelaatio LMP10 Expression ja kliinistä tulosta ihmisen papilloomaviruksen (HPV) Positiivinen ja HPV-negatiiviset Nielu ja Base of Tongue syöpä. PLoS ONE 9 (4): e95624. doi: 10,1371 /journal.pone.0095624

Editor: Anthony WI. Lo, Kiinan University of Hong Kong, Hongkong

vastaanotettu: 07 helmikuu 2014; Hyväksytty: 27 maaliskuu 2014; Julkaistu: 21 huhtikuu 2014

Copyright: © 2014 Tertipis et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Ruotsin Cancer Foundation 120417; Ruotsin Medical Research Council K2011-56X-15282-07-06; Tukholman Cancer Foundation 121043; Henning ja Ida Perssons Foundation; Karolinska Institutet 2013fobi37387; Tukholman maakäräjät 520007; Kuningas Kustaa V Juhlarahasto; Cancer ja Allergy Foundation. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Co-kirjailija Torbjörn Ramqvist on PLoS One Editorial hallituksen jäsen. Tämä ei muuta meidän noudattamista PLoS One Pääkirjoitus politiikan ja kriteerit.

Johdanto

Vuonna 2007 International Agency for Cancer Research (IARC) myönsi ihmisen papilloomaviruksen (HPV) kuin riskitekijä nielun okasolusyöpä (OPSCC) tietojen perusteella muiden ja meidän [1], [2], [3], [4]. Lisäksi HPV-positiiviset OPSCC, jossa nielurisojen ja pohjan kielen okasolusyöpä (TSCC ja BOTSCC) osuus 80% tapauksista, on parempi ennuste verrattuna vastaaviin HPV-syöpäkasvain (80% vs. 40% -60 % 3 vuoden taudista vapaan eloonjäämisen (DFS) [1], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11], [12]. Samanaikaisesti hiljattain lisääntymistä HPV-positiivisten OSCC monissa maissa, parantava hoito pään ja kaulan levyepiteelisyöpä (HNSCC), mukaan lukien OPSCC, on tullut aggressiivisempia esim kemosädehoidon mikä lisää vakavia haittavaikutuksia [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22], [23], [24] . Vähemmän aggressiivinen hoito olisi todennäköisesti riittää useimmille potilaille, joilla on HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC, jossa HPV on yleisin ja jossa HPV on suurin vaikutus eloonjäämiseen [25]. kuitenkin ennen kapeneva hoitoa, muita markkereita yhdistelmänä HPV asema olisi hyötyä valita potilaille, joilla on HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC erittäin todennäköisesti suotuisa hoitovaste [26], [27], [28], [29], [30], [31], [32] . Viimeaikaiset tutkimukset ovat tunnistaneet markkereita, esim. poissa /alhainen HLA-luokan I tai CD44 voimakkuuden ilmaisun, tai korkea CD8 + kasvain soluttautua lymfosyyttien (TIL) laskee HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC, jotka kaikki osoittautuneet suotuisat ennustavat tekijät ja osoittavat 95-100% todennäköisyydellä 5 vuoden tauti tautivapaalle [26], [27], [28], [29], [30], [31], [32]. Valitettavasti edellä biomarkkerit vain tunnistaa murto-osa kaikista potilaista, joilla on hyvä todennäköisyys hyvin hoidossa ja että ylimääräisiä biomarkkereiden on ylläolevan tarvitaan.

LMP10 (pienimolekyylipainoisen proteiinin 10) on beta alayksikköä 20S proteasomin, tunnistettiin kolmas IFN-g indusoitavissa yksikön Nandi et al 2006 [33]. Yhdessä lmp2 ja LMP7, LMP10 rakentaa ns immunoproteasome toimiva upon tehostettua immuunivastetta. Komponenttina antigeenin koneet (APM), LMP10 on sekaantunut koulutusjakson peptidin trimmausta aikana peptidin esittelemän HLA-molekyylejä. Viat eri APM komponentit on monissa kasvaimissa ja ovat osoittaneet korrelaatio kliinisten tutkimusten tulosten kanssa potilaista [34], [35], [36], [37].

Tässä tutkimuksessa, siksi tutkitaan LMP10 ilmentyminen HPV-positiiviset ja HPV-negatiiviset TSCC ja BOTSCC, 278 potilaalla diagnosoitiin vuosina 2000-2007 Karoliinisen yliopistosairaalan, ja yhteys on LMP10 ilmaisun selviytymiseen.

potilaat, Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

tutkimus suoritettiin eettisissä 2005 /431-31 /4, 2005 /1330-32 ja 2009 /1278-31 /4 Regional eettisen komitean Karolinska Institutet, Tukholma, Ruotsi. Kirjallinen suostumus saatiin kaikilta tutkimukseen osallistuneet.

Potilaille ja Biopsies

aikana 2000-2007, 385 potilasta diagnosoitu TSCC ja BOTSCC (määritelty ICD-10 koodit: C09, C01 0,9 vastaavasti) Karoliinisen yliopistosairaalan, tunnistettiin Ruotsin Syöpärekisteri. Näistä 278 potilasta, joilla diagnostinen esikäsittely koepaloja, aiemmin testattu HPV-DNA ja on käytettävissään riittävät tiedot, otettiin mukaan tässä tutkimuksessa [27]. 258 potilasta hoidettiin parantava tarkoitus sitten sisältyvästä selviytymisen analyysiin. Perinteiset sädehoidon (RT) (2,0 Gy /päivä, +6,5-7viikko, kokonaisannos 68 Gy) tai nopeutetun RT (1,1 + 2,0 Gy /vrk 4,5 viikkoa, kokonaisannos: 68 Gy) annettiin 192/258 ( 74,4%) potilaista, kun taas 66/258 (25,6%) potilaista oli myös induktion kemoterapiaa ja samanaikaisesti RT. Interstitiaalinen säteily (Brakyhoito) annettiin myös joillekin potilaille (78 Gy täysin). Potilaat, joilla solmukohtien tautia kävi kauladissektio 6-8 viikon kuluttua valmis RT. Potilaita seurattiin 3 kuukauden välein 2 ensimmäisen vuoden aikana ja 6 kuukauden välein aikana kolmas vuosi, ja niiden selviytyminen tiedot saatiin potilaiden kirjaa. Tutkimus suoritettiin eettisissä 2005 /431-31 /4, 2005 /1330-32 ja 2009 /1278-31 /4 Regional eettisen komitean Karolinska Institutet, Tukholma, Ruotsi.

HPV Analysis

HPV-DNA 27 HPV-tyyppien ja betaglobin analysoitiin helmi-pohjainen multiplex määritys on Magpix väline (Luminex Corporation), kuten aiemmin on kuvattu [30].

immunohistokemia

lyhyesti, formaliinilla parafiiniin (FFPE) Tuumorinäytteiden diat (4 pm) poistui-paraffinized ksyleenissä ja niihin lisätään etanolin pitoisuuksien alentamista. Sen jälkeen ne kuumennettiin sitraattipuskurissa (pH 6,0) antigeenin haku. Epäspesifinen estettiin 1,5% hevosen seerumia laimennettiin fosfaatilla puskuroidulla suolaliuoksella (PBS). Parafiinisektioista inkuboitiin yön yli + 8 ° C: ssa primaarisen vasta-aineen, MECL-1 C-2 (anti-LMP10 vasta-Santa Cruz Biotechnology), kosteassa kammiossa seurasi sekundaarinen vasta-sovellus ja standardin ABC-HRP sarja antigeeninosoituksella . Kromogeenin-3′-diaminobenzydine (DAB) käytettiin visualisointi. Hematoksyliinia haettu counterstaining seurasi nestehukka etanoliin kohoavien ja ksyleeni.

arviointi immunohistokemia Värjäys

LMP10 sytoplasmista ja tumavärjäystä myös negatiivisia ja positiivisia kontrolleja (kuvio 1), arvioitiin kaksi riippumatonta tutkijaa sokkoutettu tietojen ja kliinisistä tuloksista, on samanlainen kuin aiemmin kuvattu [32]. Osa pahanlaatuisia soluja värjättiin LMP10 tumassa ja sytoplasmassa arvioitiin erikseen semi-kvantitatiivisesti 4 laadut prosenttiosuuksien värjättyä kasvainsolujen: 0 (0%), 1 (1-25%), 2 (26-75% ) tai 3 (76-100%). Intensiteetti värjäyksen pisteytettiin erikseen ja arvioidaan poissa, heikko, kohtalainen, ja vahva värjäytyminen. Värjäytymisen intensiteetti määriteltiin vertaamalla intensiteetti värjäytyminen pahanlaatuisia soluja, jossa värjäys sisäisten kontrollien (normaali imukudos) erää kohti. Kun harvoissa tapauksissa, joissa värjäytyminen samassa näytteessä ei edes, intensiteetti suurin osa soluista käytettiin analyysissä. Värjäystä ja arviointia HLA-luokan I antigeenejä tehtiin samassa kasvain näytteet kahdessa aikaisemmissa tutkimuksissa kuten muualla on kuvattu [27], [28].

(A): Heikko /kohtalainen sytoplasmista ekspressiota LMP10; (B): Kohtalainen /ydinvoiman ja poissa sytoplasmista ilmaus LMP10; (C): Ei lainkaan tai havaita LMP10 ydin- ja sytoplasmista ilmaisun; (D): Kohtalainen ydin- ja sytoplasmista ilmaus LMP10. Suurennos 400X.

Tilastollinen analyysi

Sekä potilaan ominaisuudet ja kategorisen datan analysoitiin käyttämällä Chi square-testi tai vertailua varten keskiarvoja, opiskelija T-testiä. Kaksisuuntainen p-arvot (5%: n merkitsevyystaso) on raportoitu kaikissa analyyseissä. Survival mitattiin päivinä diagnoosi kunnes tapahtuma sattui, tai vasta 3 vuotta diagnoosin kun potilaat sensuroitiin. Kuolema johtuu tahansa syystä (tapahtuma) sisällytettiin määritelmään kokonaiselinaika (OS), kun taas vain taudin uusiutumisen (TSCC tai BOTSCC) käytettiin laskettaessa taudista elinaika (DFS). Erityisesti kuolema potilaista ilman edeltävää toistuminen sensuroitiin päivänä 0 laskettaessa DFS. Kaplan-Meier estimaattori käytettiin DFS ja käyttöjärjestelmän, ja erot selviytymisen potilaista testattiin käyttämällä log-rank-testi. Coxin suhteellisten riskien mallia käytettiin laskettaessa säätää ja oikaisemattomien hazard ratio (t). Kaikki laskelmat ja analyysit suoritettiin käyttäen IBM Corp., SPSS Statistics, version 21,0.

Tulokset

Potilaat, Kasvainten ominaisuudet ja HPV

ominaisuudet 278 potilasta, 195 (70%) ja TSCC ja 83 (30%), jossa BOTSCC ja niiden kasvaimet ovat esitetty taulukossa 1. Kaikkiaan 207/278 (74%) ja kasvaimet olivat HPV-positiivisia. Potilaat, joilla on HPV-positiivisia kasvaimia olivat nuorempia (keskiarvo ja mediaani-ikä 60) kuin ne, joilla on HPV-syöpäkasvain (keskiarvo ja mediaani-ikä 64 ja 62 vuotta) (p 0,001) (taulukko 1, ja tuloksia ei ole esitetty). Kaikkiaan 258/278 (92,8%) potilasta sai hoitoa parantava tahallisuus (taulukko 1), 199/207 (96%) niistä, joilla on HPV-positiivisia kasvaimia (mediaani-ikä 60 vuotta), ja 59/71 (83%) niistä, joilla on HPV-syöpäkasvain (mediaani-ikä 62 vuotta). Vain 258 potilasta hoidettiin parantava tarkoitus sisällytettiin analyysiin 3 vuoden DFS ja OS.

LMP10 Expression ja HPV TSCC ja BOTSCC

LMP10 ydin- ja sytoplasmista ilme oli arvioidaan kaikki 278 potilasta, ja esimerkkinä kuviossa 1. LMP10 ydin- ilmaisua ei osoittanut mitään merkittävää eroa TSCC ja BOTSCC ryhmiä, ei ole suhteessa osa-positiivisten solujen kanssa eikä värjäytymisen intensiteetti (p = 0,115 ja p = 0,313, taulukko 2). Kuitenkin osa LMP10 sytoplasmisen positiivisten solujen oli suhteellisesti korkeampi HPV-positiivisia verrattuna HPV-negatiivinen (p = 0,033), kun taas ei ollut merkitsevää eroa LMP10 sytoplasman intensiteetti värjäyksen ryhmien välillä (p = 0,211, taulukko 2).

LMP10 tumavärjäystä ja HPV status Korrelaatio Kliinisen Outcome

LMP10 ydin- ilmentyminen arvioitiin sekä osa positiivisten solujen tumassa, ja intensiteetti ydinaseiden värjäys, ja se korreloi selviytymisen 258 potilasta hoidettiin parantava tahallisuus (havainnollistettu Kaplan-Meier -käyrät kuvioissa 2 ja 3).

A ja D: DFS (A) ja OS (D ) ja TSCC ja BOTSCC riippumatta HPV tilan kasvain. B ja E: DFS (B) ja OS (E) potilaista HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC. C ja F: DFS (C) ja OS (F) potilailla, joilla on HPV-negatiivisten TSCC ja BOTSCC.

A ja D: DFS (A) ja OS (D) TSCC ja BOTSCC riippumatta HPV tilan kasvain. B ja E: DFS (B) ja OS (E) potilaista HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC. C ja F: DFS (C) ja OS (F) potilailla, joilla on HPV-negatiivisten TSCC ja BOTSCC.

Puuttuvasta /matala (≤25%), verrattuna kohtalaisen /korkea ( 26-100%), osa LMP10 ydin- positiivisten solujen korreloi paremmin 3 vuoden DFS koko potilasryhmässä ja potilaille, joilla on HPV-positiivisia kasvaimia, mutta ei potilailla, joilla on HPV-syöpäkasvain (log-rank-testi , p = 0,002, p = 0,005 ja p = 0,688 vastaavasti) (kuvio 2 A-C). Ei kuitenkaan ollut merkitsevää eroa 3 vuoden OS, verrattaessa vastaavia parametreja, koko ryhmä, HPV-positiiviset ja HPV-negatiiviset ryhmät (log-rank testi, p = 0,115, p = 0,158 ja 0,561 vastaavasti) ( Kuvio 2 D-F).

Puuttuvasta, verrattuna heikko /kohtalainen /voimakas (läsnä), LMP10 ydin- intensiteetti värjäyksen korreloi paremmin 3 vuoden DFS koko ryhmälle (p = 0,01) ja HPV-positiivisten (p = 0,037), mutta ei HPV-negatiivisten ryhmässä (p = 0,473) (Kuva 3A-C). 3 vuoden OS tämä havaittiin ainoastaan ​​koko potilasryhmälle (p = 0,014) (kuvio 3 D).

mahdollinen vaikutus LMP10 ydinvoiman ilmaisun sekä LMP10 ydin- intensiteetti värjäyksen jatkettiin erikseen HPV-positiiviset ja HPV-negatiiviset ryhmät.

Coxin monimuuttuja-regressioanalyysi tehtiin potilaille, joilla on HPV-positiiviset ja HPV-syöpäkasvain erikseen, mukaan lukien osa LMP10 ydin- positiivisten solujen tai LMP10 ydinaseiden intensiteetti, ikä ja kasvain vaiheessa osalta 3 vuoden DFS ja 3 vuoden OS. HPV-positiivisten ryhmä poissaolevan /pieni osuus verrattuna kohtalainen /korkea osa LMP10 positiivisten solujen oli vielä määräävänä paremmin 3 vuoden DFS (p = 0,027) (taulukko 3), mutta ei iästä tai vaiheessa (p = 0,079 ja p = 0,744) (tuloksia ei ole esitetty). Lisäksi mikään näistä parametrit olivat tekijöitä 3-vuoden OS, paitsi iän (p = 0,006, tuloksia ei ole esitetty) (taulukko 3). LMP10 ydinaseiden intensiteetti värjäytymisen ei saavuttanut tilastollista merkittävyyttä joko 3-vuoden DFS tai 3-vuoden OS (taulukko 3). Vastaava analyysi HPV-negatiivinen ryhmä ehdotti, että ydin- LMP10 ilmaisu ei ollut vaikutusta hoitotulokseen tässä ryhmässä (3 vuoden DFS ja 3 vuoden OS) (taulukko 3).

LMP10 Sytoplasmiset värjäys ja HPV status Korrelaatio Kliinisen Outcome

LMP10 sytoplasmista ilmentyminen arvioitiin sekä osa positiivisten solujen ja värjäyksen voimakkuuden ja sen korreloi selviytymisen 258 potilasta hoidettiin parantava tahallisuus (havainnollistettu Kaplan-Meier käyrät kuvioissa 4 ja 5).

A ja D: DFS (A) ja OS (D) TSCC ja BOTSCC riippumatta HPV tilan kasvain. B ja E: DFS (B) ja OS (E) potilaista HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC. C ja F: DFS (C) ja OS (F) potilailla, joilla on HPV-negatiivisten TSCC ja BOTSCC.

A ja D: DFS (A) ja OS (D) TSCC ja BOTSCC riippumatta HPV tilan kasvain. B ja E: DFS (B) ja OS (E) potilaista HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC. C ja F: DFS (C) ja OS (F) potilailla, joilla on HPV-negatiivisten TSCC ja BOTSCC.

kohtalainen /korkea verrattuna puuttuvan /pieni osa LMP10 sytoplasman positiivisten solujen korreloivat parempaan 3 vuoden DFS potilaille, joilla HPV-syöpäkasvain, mutta ei koko potilasryhmässä, eikä potilaiden HPV-positiivisia kasvaimia, (log-rank testi, p = 0,003, p = 0,488 ja p = 0,086 , vastaavasti (kuva 4 A-C). Jotta 3 vuoden OS vastaava korrelaatio oli merkittävä sekä HPV-negatiivinen ja koko ryhmälle, mutta ei HPV-positiivinen ryhmä (log-rank testi, p = 0,001, p & lt 0,001 ja p = 0,159, tässä järjestyksessä), (kuva 4 D-F).

Heikko /kohtalainen /korkea (läsnä) LMP10 sytoplasmista intensiteetti värjäyksen verrattuna poissa LMP10 värjäys korreloi paremmin 3 vuoden DFS potilaille, joilla on HPV-syöpäkasvain, mutta ei koko ryhmälle tai potilaille, joilla on HPV-positiivisia kasvaimia (log-rank-testi p = 0,001, p = 0,219, ja 0,368, vastaavasti) (kuvio 5 A-C). sillä 3 vuoden OS vastaava korrelaatio oli merkittävä sekä HPV-negatiivinen ja koko ryhmälle, mutta ei HPV-positiivinen ryhmä (log-rank-testi p = 0,009, p = 0,01 ja p = 0,334, vastaavasti (kuva 5 D -F).

mahdollinen vaikutus LMP10 sytoplasmista ilmaisun jatkettiin erikseen HPV-positiiviset ja HPV-negatiiviset ryhmät (taulukko 3). Sillä, että Coxin monimuuttuja-regressioanalyysi tehtiin potilaille, joilla on HPV-positiiviset ja HPV-syöpäkasvain, mukaan lukien osa LMP10 sytoplasmisen positiivisten solujen, ikä ja vaihe, osalta 3 vuoden DFS ja 3 vuoden OS. Vastaava analyysi suoritettiin LMP10 sytoplasmisen intensiteettiä. Potilaille, joilla on HPV-syöpäkasvain, sekä kohtalainen /korkea osa LMP10 sytoplasmisen positiivisia soluja, ja läsnäolo LMP10 sytoplasmista värjäytymistä ei korreloi paremmin 3 vuoden DFS (p = 0,014 ja p = 0,006, vastaavasti) (taulukko 3 ). Vastaavat luvut 3 vuoden OS olivat p = 0.010 ja p = 0,051 (taulukko 3). Ikä ja vaihe eivät saavuttaneet tilastollista merkittävyyttä analyysissä potilailla, joilla HPV-syöpäkasvain (tuloksia ei ole esitetty).

Vastaava analyysi HPV-positiivinen ryhmä ehdotti, että sytoplasmista LMP10 ilmaisu ei ollut vaikutusta kliiniseen tulokseen (3 vuoden DFS ja 3 vuoden OS) (taulukko 3).

LMP10 Expression, HLA luokka I Expression ja HPV status Korrelaatio Kliinisen Outcome

Viimeaikaisissa tutkimuksissa olemme osoittaneet, että poissa tai alhainen HLA-luokan I ilmentyminen korreloi paremmin selviytymisen potilailla, joilla on HPV-positiivisten TSCC ja BOTSCC, kun oli päinvastainen potilaille, joilla on HPV-negatiivisten TSCC ja BOTSCC [27], [28]. Tutkia, korrelaatio LMP10 ilmaisun ennustaa selviytymisen riippumaton HLA luokan I ilmentymisen tai ei, kaksi Coxin monimuuttuja-regressioanalyysisarjoissa osalta 3 vuoden DFS tehtiin, jossa HLA-luokan I saadut Näsman et al [27].

ensimmäisessä analyysissä, HPV-positiiviset TSCC ja BOTSCC tutkittiin ja analyysi sisältyi osa LMP10 ydin- positiivisten solujen, ikä, vaihe ja HLA-luokan I ilmentymisen määritys kuten intensiteetti HCA2-värjäystä. Kuten esitetään taulukossa 4, sekä LMP10 ja HCA2 intensiteetti olivat riippumattomia ennustajia 3 vuoden DFS.

Toisessa analyysissä, HPV-negatiivinen TSCC ja BOTSCC tutkittiin ja analyysi sisälsi osa LMP10 sytoplasminen positiivisia soluja, ikä, vaihe ja osa HLA luokka I positiivisia soluja analysoitiin HCA2-värjäys. Kuten esitetään taulukossa 4, sekä osa LMP10 ja HCA2 positiiviset solut olivat riippumattomia ennustajia 3 vuoden DFS.

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa tutkittiin LMP10 ilmaisua sekä ydin- ja sytoplasman osastojen suhteessa HPV- statuksesta ja kliinistä tulosta 195 TSCC ja 83 BOTSCC tapauksissa. LMP10 ydin- ja sytoplasmista ekspressiota, mukaan lukien sekä osa-positiivisten solujen ja värjäytymisen intensiteetti oli samanlainen HPV-positiivisia, ja HPV-syöpäkasvain, lukuun ottamatta sitä suurempi osa LMP10 sytoplasman positiivisten solujen HPV-positiivisia ryhmässä.

Lisäksi, puuttuvan /pieni osa LMP10 positiivisten solujen tumassa, sekä läsnä tuman värjäytymisen intensiteetti korreloi paremmin 3 vuoden DFS potilailla, joilla on HPV-positiivisia kasvaimia, mutta ei niille, joilla on HPV-syöpäkasvain . Päinvastainen löydettiin sytoplasmista LMP10 värjäystä, jossa kohtalainen /korkea osa positiivisten solujen ja heikko /kohtalainen /korkea intensiteetti korreloi paremmin 3 vuoden DFS ja OS HPV-negatiivinen, mutta ei HPV-positiivisten ryhmässä.

syynä eron suhteen ydin- ja sytoplasman LMP10 värjäys ja selviytymisen HPV-positiiviset ja HPV-negatiivisten ryhmien ei ole ilmeinen. Aiemmissa tutkimuksissa LMP10 sytoplasminen ilmentyminen on arvioitu virtsarakon ja ruokatorven syöpä sekä osa-positiivisten solujen ja värjäytymisen voimakkuus, mutta ei osoitettu olevan prognostinen vaikutusta [34], [35], [37]. Kuitenkin näissä tutkimuksissa ei ollut erillinen analyysi ydin- ja sytoplasmista ilme. Tässä tutkimuksessa arviointi ja analysointi ydin- ja sytoplasmista värjäytymistä toimitti lisätietoja.

Tietääksemme ei ole olemassa ennen tutkimuksia LMP10 ilmaisun suhteessa eloonjäämisen HNSCC. Meissner

et al.

Osoitti korrelaatio selviytymisen HNSCC sekä lmp2 ja LMP7 [38] ja tuoreessa tutkimuksessa, ilmaus LMP7 korreloi myös selviytymiseen syljen syöpä [39]. Kuitenkin kasvaimia ei analysoitu läsnäolo HPV tahansa näistä tutkimuksista.

Havainto, että alhainen ydin- LMP10 ilmentyminen korreloi paremmin 3 vuoden DFS HPV-positiivisia ryhmässä, kun taas vastaava korkea sytoplasmisen LMP10 ilmaus korreloi paremmin 3 vuoden DFS HPV-negatiivinen ryhmä ehdottaa useita seurauksia. Ensinnäkin, meidän tutkimus osoittaa, että LMP10 voidaan käyttää prognostisena markkerina potilaille, joilla on joko HPV-positiivisia tai HPV-syöpäkasvain. Olemme aiemmin pystyneet osoittamaan, että biomarkkereiden, että samaa reittiä, HLA luokan I ilmentymisen, voidaan käyttää ero tapa ennustaa kliinistä tulosta HPV-positiiviset ja HPV-syöpäkasvain. Siten poissa /alhainen HLA-luokan I ilmentymisen on myönteinen ennustetekijä potilaille, joilla on HPV-positiivisia kasvaimia, kun taas tilanne on päinvastainen potilaille, joilla on HPV-syöpäkasvain, joissa suuri HLA luokan I ilmentymisen on hyötyä [27]. Siten sekä suhteessa HLA luokka I ja LMP10 ilmaisun suhteessa selviytymisen oli eroja HPV-positiivisten ja HPV-syöpäkasvain, vaikka nämä olivat selvempiä HLA luokka I. Erityisesti mistä osoituksena monimuuttujamenetelmin taulukon 4, ilmaus LMP10 ja HLA-luokan I olivat riippumattomia ennustajia selviytymisen sekä HPV-positiiviset ja HPV-syöpäkasvain. Taustalla mekanismeja säätelyyn LMP10 ja HLA-luokan I ilmentyminen näiden kasvainten tulisi siis ainakin osittain olla erillisiä.

Ei tiedetä, jos läsnäolo HPV voi vaikuttaa LMP10 ilmaisun suoraan, ja vaikka tämä on asia, mekanismi asetuksen taustalla ei ole tiedossa. On osoitettu, että HPV-E5 on potentiaalia alas-säädellä HLA-luokan I [40]. Olipa E5 vaikuttaa myös ilmaus LMP10 on, tietojemme mukaan ei ole tutkittu. On osoitettu, että ihmisen papilloomavirukset on kyky säädellä HLA luokka I raskaan ketjun sekä joitakin antigeenin koneet komponenttien transkription tasolla [41]. Kuitenkin transkription säätely esim. lmp2 promoottori havaittiin olevan riippuvainen proteiinin E7 HPV18 ja matalan riskin HPV-6b muttei E7 HPV16. Tämä viittaa siihen, että on olemassa mahdollinen ero solujen aiheuttamia E7-proteiinin HPV16: ja HPV18. Huomionarvoista, suurin osa TSCC ja BOTSCC tapauksissa on positiivinen HPV16. Olipa ilmentyminen LMP10 voidaan säädellä E7 on, tietojemme mukaan ei ole tutkittu. Huomattakoon, että tässä tutkimuksessa osa LMP10 sytoplasman positiivisten solujen oli suurempi HPV-positiivisia verrattuna HPV-negatiivinen ryhmä. Kuitenkin, ei ollut merkitsevää eroa LMP10 sytoplasman intensiteetti värjäyksen ryhmien välillä. Tämä osoittaa mahdollisuus joidenkin muttei voimakasta sääntelyn HPV näissä kasvainsoluissa.

On joitakin rajoituksia tutkimuksessamme. Ensisijaisesti tutkimus on takautuva, mutta tämä ei saa vaikuttaa tuloksiin. Lisäksi oli vähemmän HPV-negatiivinen tapauksissa joka on suora esitys korkea HPV esiintyvyys OSCC potilailla Ruotsista tänään.

Yhteenvetona tämä tutkimus osoittaa, että LMP10 ekspressiota TSCC ja BOTSCC korreloi taudeille elinaika sekä potilaiden HPV-positiiviset ja HPV-syöpäkasvain ja on mahdollista käyttää kliinisessä ympäristössä. Koska ydinvoiman LMP10 ilmaus ennustaa potilaiden elinaikaa HPV-positiivisia kasvaimia, kun taas sytoplasminen LMP10 ilmaus korreloi selviytymisen HPV-syöpäkasvain, LMP10 ilme olisi analysoitava suhteessa kasvaimen HPV- statuksesta.

Kiitokset

Kiitämme Caitrin Jane Crudden varten huolellisesti käsittelyn käsikirjoitus.