Krooninen sairaus

tiivistelmä

Haiman adenokarsinooma (PDAC) potilailla on suurin riski kehittää kuihtuminen, joka on suora syy laadun heikkeneminen elämän ja lyhyempi selviytymistä. Uusien biomarkkereiden tunnistamiseen potilaalla on riski kuihtuminen ovat tarpeen ja voi olla merkittävä vaikutus kliiniseen hallintaan. Täällä tutkimme ennusteen arvioinnissa ja yhdistys

SELP-rs6136

,

IL6-rs1800796

ja

AKT1-rs1130233

polymorfismien Kakeksiaan in PDAC. Tehtiin genotyypin DNA verinäytteistä testin ja validointi kohortteja 151 ja 152 Chemo-naiivi paikallisesti kehittynyt /metastaattinen PDAC potilaista. Yhdistys

SELP-rs6136

,

IL6-rs1800796

ja

AKT1-rs1130233

polymorfismien Kakeksiaan sekä korrelaatio kakeksia ja ehdokas polymorfismien ja kokonaiselinaika olivat analysoidaan. Akt ilmaisun ja fosforylaatiota Lihasbiopsiat arvioitiin erityisten ELISA-menetelmällä.

SELP-rs6136-AA

ja

AKT1-rs1130233-AA /GA

genotyypit liittyy lisääntynyt riski sairastua kuihtuminen molemmissa kohorteissa (

SELP: p

= 0,011 ja

p

= 0,045;

AKT1: p

= 0,004 ja

p

= 0,019 varten ensimmäisen ja toisen ikäluokat, vastaavasti), kun taas potilaat kuljettavat

AKT1-rs1130233 -GG

selvisivät huomattavasti kauemmin (

p

= 0,002 ja

p

= 0,004 varten ensimmäisen ja toisen ikäluokat, vastaavasti). Vuonna Monimuuttuja-analyysissä

AKT1-rs1130233-AA /GA

genotyyppien olivat merkittäviä ennustajia lyhyempiä selviytymisen, suurentunut kuolemanriski 1,7 (

p

= 0,002) ja 1,6 (

p

= 0,004), ensimmäisen ja toisen kohortteja, vastaavasti. Tämä saattaa selittyä alennettua fosforylaatio Akt1 lihaksessa koepalat potilaista kätkeminen

AKT1-rs1130233-AA /GA

(

p

= 0,003), suosimalla apoptoosin induktio. Lopuksi

SELP

ja

AKT1

polymorfismit voivat olla merkitystä riskin kuihtuminen ja kuoleman PDAC potilaille, ja pitäisi arvioida tarkemmin suuremmissa tulevaisuudentutkimusta.

Citation: Avan A, Avan A, Le Large TYS, Mambrini A, Funel N, Maftouh M, et al. (2014)

AKT1

ja

SELP

polymorfismit Veikkaa riski Kuihtuminen in Haimasyöpä Potilaat. PLoS ONE 9 (9): e108057. doi: 10,1371 /journal.pone.0108057

Editor: Francisco X. Real, Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO), Espanja

vastaanotettu: toukokuu 24, 2014; Hyväksytty: 19 elokuu 2014; Julkaistu: 19 syyskuu 2014

Copyright: © 2014 Avan et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi- ja sen tukeminen Information tiedostoja.

Rahoitus: Tämä työ oli osittain tukevat avustuksia Alankomaat Organization for Scientific Research, Veni avustus (hanke numero 91611046 (Elisa Giovannetti)) ja Stimuleringfonds Open Access (Elisa Giovannetti), CCA Foundation 2012 (Amir Avan, Elisa Giovannetti, Godefri- J. Peters), Research Council klo Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad (Amir Avan, Majid Ghayour-Mobarhan), Istituto Toscano Tumori (Elisa Giovannetti, Niccola Funel, Ugo Boggi) ja AIRC starttirahan (Elisa Giovannetti). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

kuihtuminen on monitekijäinen, systeeminen oireyhtymä ominaista patologinen kuihtuminen luurankolihasten ja rasvakudoksen massaa, joka johtaa lausutaan laihtuminen. Se voi sattua useita kroonisia sairauksia, mutta se on kaikkein useimmin havaittu samanaikaisesti pahanlaatuinen kasvain [1]. Erityisesti potilaat, joilla haiman adenokarsinooma (PDAC) on korkein esiintyvyys kuihtuminen, ja kokevat usein vakavin tämän sairauden oireita [2]. Viimeaikaiset tutkimukset osoittivat, että nykyiset preoperative kakeksia vähentää leikkauksen jälkeinen tulos PDAC potilaiden [3], [4]. Kehittyneissä PDAC läsnäollessa kakeksian liittyy myös huonompi ennuste, ja vakauttaa paino voi olla ratkaiseva pidentää elinaikaa [5]. Lisäksi kakeksia vähentää toleranssi systeemisiä hoitoja ja dramaattisesti vaikuttaa elämänlaatuun [6].

Laajat prekliinisissä ja kliinisissä tutkimuksissa on arvioitu taustalla olevien mekanismien kakeksian PDAC, paljastaen monimutkainen useiden toisiinsa potilas- ja syöpä-yksittäisiä komponentteja. Useat hormonit ja tuumorista peräisin tekijät voivat osaltaan kudosten hajoamista ja ruokahalun säätelyyn, mikä ruokahaluttomuus ja väsymys, kun taas oireita kuten krooninen kipu, pahoinvointi ja haiman vajaatoiminta, sekä haitalliset vaikutukset syöpähoitoihin, saattaa vähentää ruokahalua ja ravinnonsaanti [7].

kuitenkin, toisin kuin kakektisilla potilailla, joilla on krooninen haimatulehdus, PDAC potilailla, joilla on kakeksia on merkittävästi vähentynyt hemoglobiini ja albumiini tasolla liittyy systeeminen reaktio sekä kasvaimen ja tulehduksellisten prosessien [4]. Erityiset proinflammatoristen sytokiinien, kuten interleukiini 1-beetan (IL-1β), interleukiini-6 (IL-6), tuumorinekroositekijä-alfa (TNFa), ja interferoni-gamma on osoitettu liittyvän etenevä painonlasku, läpi akuutin vaiheen proteiini, vaste maksassa [8] – [10]. Tämä systeeminen tulehdus voi myös välittää sen toimintaa kautta paikallisia tulehdusreaktioita signaloinnin, aktivoidaan tumatranskriptiotekijä kB (NF-kB), ja molemmissa hiiri malleja ja lihas Biopsianäytteet NF-kB-välitteisen Pax7 dysregulation noussut esiin syitä lihassurkastumatilaan vuonna PDAC [11]. Lisäksi kuihtuminen tasapaino anabolism ja katabolian proteiinien kallistuu kohti catabolic tilassa johtuvat aktivoituu ubikitiinipromoottori proteasomin ja autophagy järjestelmiä, jotka edistävät proteiinia erittely sekä vähentyneestä Akt-aktiivisuutta, joka vähentää proteiinisynteesiä [1], [ ,,,0],12]. Sääntely lihas eriyttäminen on todellakin riippuu aktivoitumista signaalitransduktion Cascades kanssa monimutkainen osallistuminen keskeisten kinaasien, kuten seriini /treoniinikinaasi Akt, ja aikaisemmat tutkimukset osoittivat, että Akt on olennaista edistää proteiinisynteesiä ja solujen eloonjäämistä ja estää proteiinien hajoaminen [13], kaikki tämä näyttö tukee sen biologista merkitystä esillä kuihtuminen.

Vaikka muuttuja tuotannon proinflammatoristen sytokiinien, NF-kB aktivaation ja Akt fosfory- asema riippuu useista kliinisistä ja patologiset tekijät, on yhä enemmän näyttöä, että geneettinen vaihtelut saattavat myös vaikuttaa näihin avaintekijöitä kuihtuminen. Erityisesti

G-

alleelin

IL6-rs1800796

polymorfismi liittyy pienentynyt eloonjääminen ja lisääntynyt alttius kakeksian Kiinan PDAC potilailla [14]. Lisäksi järjestelmällistä tutkimusta perintötekijöistä kuihtuminen, ulos 92 mahdollisten kandidaattigeenejä 184 polymorfismien Syöpään liittyviä kuihtuminen, 42 polymorfismit poikki 33 geenit on tunnistettu, joilla on toiminnallinen tai kliinistä merkitystä useammassa kuin yhdessä tutkimuksessa [15]. Näistä 42 polymorfismien, 13 oli enemmän kuin yksi vaikutus kliinisiä piirteitä liittyy syöpäkakeksialle (eli tulehdus, rasvakudoksen massaa ja /tai vähärasvaisen massa, ja vähentää selviytymistä). Edelleen polun analyysi näistä ehdokkaista paljasti 4 geenejä (

ADIPOQ

,

IL6

,

NFKB1

ja

TLR4

) Yhteenkytkennän kahden mahdollisen suuret verkot osallistuvat syövän kehittymisen kuihtuminen. Kuitenkin tuoreessa tutkimuksessa käyttämällä näitä valittu polymorfismien vain

C-

alleelin yhden nukleotidin polymorfismi (SNP)

rs6136

–

SELP

todettiin liittyvän laihtuminen 10%, sekä ensimmäisessä tutkimuksessa kohortin 775, mukaan lukien 114 PDAC potilasta ja validointi kohortissa 101 syöpäpotilasta, mukaan lukien 6 PDAC potilaille [16].

SELP

-geeni koodaa 140 kDa: n proteiinin tallennettu alfa-rakeet verihiutaleiden ja Weibel-Palade elinten endoteelisolujen, jolloin muutkin solukalvoon aikana verihiutaleiden aktivoitumista ja degranulaatio ja toimii solun adheesiomolekyyli ( CAM) välittävä vuorovaikutus aktivoitujen endoteelisolujen tai verihiutaleita kanssa leukosyyttejä aikana ensiaskeleet tulehdus [17].

kuitenkin suurin tutkimus syövän kakektisia potilaita (N = 1797), joista 35 PDAC potilaille, epäonnistunut validoida ennakoivaa roolia 9 ehdokas SNP [18]. Yksi mahdollisista selityksistä ei pysty vahvistamaan geneettinen yhdistys voi olla geeni-ympäristö suhteet spesifisiä tutkittu taudin. Edellinen analyysi kannatti roolia

IL6-rs1800796

ja

SELP-rs6136

SNP kuten alttius biomarkkereita PDAC kakeksian [13], [15], kun taas meidän viimeaikaiset tutkimukset paljastivat keskeinen toiminnallista roolia on

AKT1-rs1130233

SNP [19]. Siksi esillä olevassa tutkimuksessa arvioitiin yhdistyksen näiden ehdokas polymorfismien

AKT1

,

IL6

, ja

SELP

geenejä Kakeksiaan on koko väestöstä 303 PDAC potilaiden , kaksi erillistä ikäluokat.

Materiaalit ja menetelmät

kuihtuminen fenotyyppi määritelmä

Jotta potilaalla ei kakeksia olivat selvästi erotettava, käytimme ”2011 International konsensus, ”jonka mukaan kakeksian määritellään tahaton laihtuminen on yli 5% kehon painosta tai laihtuminen yli 2% vuonna jo heikentyneisiin yksilöitä, joiden painoindeksi (BMI) on alle 20 kg /m

2 yli 6 kuukautta [20].

potilaat

nykyisessä tutkimuksessa valitsimme ensimmäisen kohortin 151 potilailla, otettiin välillä 31 maaliskuu 2004 ja 10. tammikuuta 2009 ja toinen /validointi kohortin 152 potilaat, otettiin välillä 15 tammikuu 2009 ja 15. tammikuuta 2013. Kaikki sopivaa potilasta kemiallis-naiivi potilaalla on diagnosoitu histologisesti vahvistettu paikallisesti edennyt tai metastaattinen PDAC, käsitellään Carraran Civic-Hospital (Carrara, Italia).

etiikka

Kaikki potilaat antoivat kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen näytteen keräämiseen ja analysointiin ja tutkimus on saanut hyväksynnän eettisen komitean Carraran Civic-Hospital (Carrara, Italia) ja eettisen komitean Pisan University Hospital (Pisa, Italia) kuin seurantatutkimus tutkimuksen protokollan nimeltä ”farmakogenetiikan gemsitabiinin liittyvien geenien haimasyöpä: korrelaatio kliinisten tutkimusten tulosten kanssa ja siedettävyyttä”. Vastuussa tutkijat varmistaa, että tämä tutkimus tehtiin mukaan Helsingin julistuksen, Euroopan suuntaviivat Good Clinical Practice, sekä asianomaisten kansallisten ja alueellisten viranomaisten vaatimusten.

genotyypin

Perimän DNA uutettiin verinäytteet laboratorion Medical Oncology (VUmc, Amsterdam, Alankomaat) käyttäen QIAamp DNA Mini-Kit mukaan valmistajan protokollan (Qiagen, San Diego, CA). Pitoisuus ja puhtaus DNA: t määritettiin kanssa NanoDrop-1000-detektori (NanoDrop-Technologies, Wilmington, USA). Genotyypin analyysi

rs1800796

,

rs6136

, ja

rs1130233

polymorfismien suoritettiin käyttäen Taqman-pohjainen PCR-reaktiot suoritettiin 12,5 ul kokonaistilavuus, käyttäen 20 ng DNA: ta laimennettuna TaqMan Universal Master Mix spesifisiä alukkeita ja koettimia (SNP genotyypin Määritykset tuotteita C__11326893_10, C__11975277_20, ja C__7489835_10, vastaavasti). ABIPRISM-7500 väline (Applied Biosystems, Life Technologies, Foster City, CA) varustettu SDS version 2.0 ohjelmisto käytettiin arvioimaan alleelinen sisältö kunkin näytteen levyssä lukemalla tuotettu fluoresenssi.

analyysi Akt ilmaisun ja fosforylaatiota homogenisoitiin Lihasbiopsiat

Aikaisemmat tutkimukset arvioitiin suhteet

AKT1

polymorfismien kanssa AKT1 mRNA ja proteiinin ilmentyminen in lymphoblastoids ja keuhkosyövän soluihin [19], [21], mutta tietoja ei ole saatavilla korrelaatio

AKT1-rs1130233

ja Akt1- proteiinin ilmentymiseen ja fosforylaatio tilaansa luustolihasten. Siksi keräsimme vatsalihakset koepaloja saatujen resektio ensisijainen PDAC. Pieniä kudoksen paloja (noin 100 mg) jäädytettiin välittömästi nestemäisessä typessä käyttäen isopentaani, leikkauksen jälkeen yliopistollisessa sairaalassa Pisan (Pisa, Italia), protokollan mukaisesti hyväksymän paikallisen sairaalan eettisen komitean. Yhteensä 18 näytettä chemonaive potilaista (yhdeksän varten

AKT1-rs1130233-AA /GA

ja yhdeksän

AKT1-rs1130233-GG

genotyyppi, kuten määritetään alustavien Genotyyppausanalyysiin verestä näytteet, vastaavasti) arvioitiin.

jäädytettyjä kudokset homogenisoitiin käyttäen mikro-Dismembrator, kuten aiemmin on kuvattu [22]. Jäädytetty jauhe uutettiin 2,5% w /v sulfosalicyl happoa ja sentrifugoitiin (10 min, 8000 rpm), ja proteiinin pitoisuus uutteissa määritettiin käyttämällä Biorad-proteiinin määritys (Life Science, Bio-Rad Laboratories BV, Veenendaal, Alankomaat ). Yhteensä Akt1- ja Akt1 fosforylaatio seriinillä 473 (Akt [pS473]) arvioitiin erityisiä ELISA-määritykset (Invitrogen, Life Technologies), ja normalisoidaan standardikäyriin of Human-total-Akt1- ja Human-fosfo-Akt1, sekä proteiinipitoisuus, kuten aiemmin on kuvattu [23].

tilastot

Väestörakenteen ja kliinisten tietojen verrattiin poikki genotyyppi käyttäen Pearsonin χ

2 ja logistinen regressio. Yhteisymmärryksessä aiempien tutkimusten, korrelaatio ehdokas genotyyppien tehtiin yhdistämällä harvinaisempia homotsygoottinen ja heterotsygoottinen genotyyppien [24].

Sen arvioimiseksi, kakeksia ja muista kliinisistä muuttujista sekä ehdokas polymorfismit vaikuttavat kliinisistä tuloksista, yleinen (OS) käyrät analysoitiin hoitopäivänä alkavat päätepisteen (kuolema tai sensurointi) mukaan Kaplan-Meier menetelmällä, ja verrattiin log-rank. Merkittävä prognostisten muuttujia yhden muuttujan analyysissä oli mukana Monimuuttuja-analyysissä, käyttämällä Coxin suhteellisten riskien mallia. Tämä analyysi sisältyi askel alaspäin menettely perustuu uskottavuusosamäärä, jossa riskisuhde (HR) laskettiin arvioida suuruuden ja suunnan vaikutus. Oikaistu asianmukaisesti vääriä positiivisia raportti todennäköisyys analyysi polymorfismien suoritettiin mukaisesti Wacholder menetelmä [25].

Kaikki näytteiden analysointi tehtiin sokkona suhteessa kliiniseen tulokseen. Aineisto analysoitiin SPSS-20 ohjelmisto (IBM, IL, USA). Kaikki analyysit olivat kaksipuolisia ja tilastollista merkittävyyttä asetettiin

p

-arvo 0,05.

Tulokset

Kliiniset ominaispiirteet ja lopputulos

potilaiden perustason ominaisuudet ja niiden yhteyksiä kliinisiin tuloksiin on koottu taulukkoon 1. OS tietoja saatavilla kaikista potilaista.

ensimmäisessä kohortti oli 147 kuolemantapausta (tapahtuma osuus 97,4%), kun taas neljä potilaat olivat elossa ilman etenemistä ollessaan validointi kohortissa oli 144 kuolemantapausta (tapahtuma osuus 94,7%) ja kahdeksan potilasta oli elossa ilman etenemistä vihdoin yhteystiedot (tammikuu 2014), jossa mediaani seuranta-ajan elävien potilaiden 31,4 kk ( alue, 28,4-32,7). Mediaani ensimmäisessä ja toisessa kohortteja oli 12,5 kuukautta (95% CI: 10,9-14,1) ja 12,0 kuukautta (95% CI: 9,9-14,1), tässä järjestyksessä.

Ensimmäisessä ja toisessa kohortteja potilaiden OS oli huomattavasti lyhyempi potilailla, joiden ikä oli yli 65 vuotta, ja miessukupuoli (

p

= 0,031 ja

p

= 0,044), tässä järjestyksessä, kun taas muut potilasryhmät eivät liittyneet lopputulokseen.

Potilaat validointi kohortissa oli vertailukelpoinen jakautuminen laihtuminen, ja demografiset ominaisuudet olivat myös melko samanlaisia ​​välillä ikäryhmät. Tärkeää on, kuihtuminen oli merkitsevästi yhteydessä lyhyempi OS molemmissa kohorteissa (

p

= 0.00006 ja

p

= 0,005, tässä järjestyksessä). Ensimmäinen ryhmä koostui 53 kakektisia potilaita (35,1%), joiden mediaani 9,9 kk (95% CI: 8,4-11,4), verrattuna 14,3 kuukautta (95% CI: 12,4-16,2) kuin kakektisia potilaita, kun taas validointi ryhmä koostui 59 kakektisia potilaita (38,8%), joiden mediaani oli 9,1 kk (95% CI: 6,9-11,2), verrattuna 14,2 kuukautta (95% CI: 12,7-15,7) kuin kakektisia potilaita (kuviot 1a- B).

(A ja B) Kaplan-Meier-eloonjäämiskäyrät mukaan kakeksian, että ensimmäisen ja toisen kohortin potilaista. (C ja D) Kaplan-Meier-eloonjäämiskäyristä mukaan

AKT1-rs1130233

polymorfismi ensimmäisen ja toisen kohortin potilaista.

p

-arvot laskettiin log-rank-testi. OS: Kokonaiselossaoloaika.

polymorfismit ja kakeksia

tutkimiseksi, onko yhdistyksen välillä kuihtuminen ja

IL6-rs1800796

,

AKT1-rs1130233

ja

SELP-rs6136

polymorfismien, suoritimme genotyypitys käyttämällä genomista DNA: ta ääreisveren näytteistä.

Aikaisemmat tutkimukset eivät osoittaneet eroja polymorfismit analysoidaan kasvaimissa ja normaaleissa kudoksissa [26], [ ,,,0],27]. Koska korkean tason geenivahvistus syöpäsoluissa voi aiheuttaa homotsygoottisia genotyypit yksilöissä Heterotsygoottisesti ituradan teimme alustavia tutkimuksia

AKT1

polymorfismien 45 pariksi näytteitä ituradan ja syöpä-DNA, joka osoittaa identtinen yksilöiden välisiä genotyyppien välillä normaalin ja pahanlaatuisten kudosten [19]. Siksi osallistuneista potilaista tässä tutkimuksessa tehtiin genotyypin DNA uutetaan käytettävissä verinäytteistä. Genotyypin onnistuneesti toteutettiin kaikissa DNA-näytteet, eikä poikkeamia ilmennyt näytteissä analysoitiin kahtena kappaleena (noin 10%).

Ensimmäisessä kohortin potilaista villityypin

SELP-rs6136

genotyyppi (

AA

) oli taajuudella 46,4%, kun taas

AC

ja

CC

genotyyppiä todettiin 43,7% ja 9,9%: lla potilaista, vastaavasti. Sillä

IL6-rs1800796

polymorfismi, taajuudet

GG

,

GC

ja

CC

genotyypit olivat 59,3%, 37,4% ja 3,3% vastaavasti. Mitä

AKT1-rs1130233

polymorfismi,

GG

,

GA

ja

AA

variantit havaittiin 52,8%, 39,3% ja 7,9% tapaukset, vastaavasti. Samanlaisia ​​tuloksia havaittiin toisessa kohortissa potilaiden, kuten on raportoitu taulukossa 2. Itse asiassa mitään merkittäviä eroja mitattiin sekä demografiset ominaisuudet ja taajuudet ehdokas Monimuotoinen genotyypit kahdessa kohorttia PDAC potilaista.

Kaikki polymorfismien seurasi Hardy-Weinberg tasapainoa, koska lasketaan

SNP analysaattorin

(https://snp.istech21.com/snpanalyzer/2.0/, taulukko S1) ja niiden alleeliset taajuudet olivat verrattavissa raportoitu valkoihoinen väestön ja NCBI ja NCI-SNP500 tietokantoja. Mitään merkittäviä korrelaatioita välillä havaittiin genotyypin ja demografiset ominaisuudet (ts ikä ja sukupuoli, tuloksia ei ole esitetty).

Ryhmittämällä potilaalla on

IL6-rs1800796

–

GG versus

ne, joilla on

GC

tai

CC

genotyyppien emme löytäneet yhdistyksen kanssa kakeksia (taulukko 2). Vastaavasti korrelaatiota ei havaittu

AKT1-rs1130233

genotyyppi ja kakeksia, huomattavasti suurempi osuus potilaista kätkeminen ainakin yksi

-allele ottaa kakeksia (ts 37 ulos 81,

vs.

16 pois 70

GG

potilaille,

p

= 0,004). Kuten on esitetty taulukossa 2,

SELP-rs6136

polymorfismi oli myös merkitsevästi (

p

= 0,011), joka liittyy kakeksiaan. Erityisesti 44% potilaista kätkeminen

SELP-rs6136

–

AA

varianttien kokenut kuihtuminen, verrattuna 24%: lla potilaista kätkeminen

SELP-rs6136

–

AC /CC

genotyyppi.

Merkillistä, havaitsimme samanlaisia ​​tuloksia validointi kohortin potilaista, jotka osoittavat, että henkilöt, jotka kantavat

AKT1-rs1130233-GG

genotyyppi tai

C

-allele että

SELP-rs6136

polymorfismi oli alennetuin riski kuihtuminen (taulukko 2). Nämä tulokset vahvistettiin ehdoton logistinen regressio, joka laskennallinen syrjäisimmillä alueilla ja niiden 95%: n luottamusväli yhdistettäväksi kakeksian fenotyyppi kunkin yksittäisen SNP, kuten esitetty taulukossa S2.

polymorfismit ja lopputulos

Koska kuihtuminen on keskeinen tekijä syöpään liittyvä kuolema, me arveltu, että ehdokas polymorfismit liittyvät kakeksia voi vaikuttaa kliiniseen lopputulokseen.

univariate analyysi,

AKT1-rs1130233

polymorfismi oli yhteydessä huomattavasti ero OS. Erityisesti huomattavasti pidempi eloonjäämisen potilailla havaittiin kätkeminen

GG

genotyyppi (14,3 kuukautta; 95% CI: 12,1-16,5), verrattuna potilailla kuljettavat

GA Twitter /

AA

genotyyppi, joilla oli mediaani 10,3 kk (95% CI: 8,1-12,4;

p

= 0,002; Kuva 1C). Samanlaisia ​​tuloksia havaittiin validointi kohortti: potilaiden kanssa

GA

ja

AA

genotyyppien oli huonompi ennuste (mediaani 9,9 kuukautta, 95% CI: 8,6-11,1), verrattuna potilaat kätkeminen

GG

genotyyppi (14,3 kuukautta, 95% CI: 11,7-16,8;

p

= 0,004, taulukko 3, kuvio 1 D). Pitääkseen vähintään todennäköisyys löytää tilastollisesti merkitsevä ero puhtaasti sattumalta, tavanomainen nimellinen taso (

p

= 0,05) on alennettu 0,017 by Bonferroni säätö monivertailuja. Kun Bonferroni säädön,

AKT1-rs1130233

SNP oli vielä merkittävästi korreloi OS. Sen sijaan

SELP-rs6136

ja

IL6-rs1800796

polymorfismien eivät liittyneet lopputulokseen, kuten esitetty taulukossa 3.

Monimuuttuja-analyysissä kuihtuminen ja ikä 65 oli merkitsevästi liittyy lisääntynyt kuoleman riski (taulukko 4). Coxin suhteellinen vaara regressiomallin myös osoitti ennustetekijöiden merkitystä

AKT1-rs1130233

polymorfismi. Erityisesti

GA Twitter /

AA

genotyyppi muodostunut merkittävä ennustaja lyhyempiä selviytymisen, lisääntynyt kuoleman riski 1,7 (95% CI: 1,2-2,4;

p

= 0,002) ja 1,6 (95% CI: 1,2-2,3; p = 0,004), ensimmäisen ja toisen kohortteja vastaavasti.

AKT1-rs1130233

ja ilmaus Akt1- ja fosfo-Akt1 luustolihasten

merkittävä yhdistys

AKT1-rs1130233

polymorfismi kakeksiaan ja kliiniseen tulokseen sai meidät suorittamaan parhaillaan tutkimusta sen roolista tasolla ja aktiivisuus Akt1 paneelissa lihaksen koepaloja. Kuten on esitetty kuviossa 2, näytteet

GA

tai

AA

genotyyppien oli suuntaus merkittävästi alhaisempi proteiinin ilmentymisen (noin -30%) Akt1 verrattuna näytteiden

AKT1-rs1130233-GG

genotyyppi (

p

= 0,050). Nämä tulokset olivat samanlaisia ​​kuin vähenemiseen fosfo-Akt1 tasoilla, tuloksena on huomattavasti alempi keskimääräinen taso fosforylaationa Ser437 Akt1

GA /AA

näytteitä verrattiin

GG

näytteitä (

p

= 0,006). Kun kuitenkin normalisoitui fosfo-Akt1 tasoilla koko-Akt1 saavuttamiseksi kussakin näytteessä havaitsimme, että kaikki paitsi yhdessä tapauksessa näytteitä

GA /AA

genotyyppi oli pienempi suhde fosfo- Akt1- ja yhteensä Akt1 vs. näytteiden

GG

genotyyppi (Fig. S1,

p

= 0,003). Nämä tiedot viittaavat siihen, että

AKT1-rs1130233

–

GA /AA

genotyyppien voi siirtää edelleen alhaisempaa ja Akt1, ja siten vähentää antiapoptoottisten aktiivisuutta tämän keskeisen säädin apoptoottisten signalointi.

Bar graafeja, jotka havainnollistavat keskiarvo ± SD ilmentymisen yhteensä Akt1 (A) ja fosfo-Akt1 (B) lihasnäytteet potilaista, joilla ero

AKT1-rs1130233

genotyyppien (N = 9 näytettä kussakin ryhmässä) *

p

0,05.

keskustelu

Tässä tutkimuksessa osoitimme, että on tärkeää

AKT1-rs1130233

polymorfismi kuin ennakoiva merkkiaine riski kuihtuminen ja kuoleman potilailla, joilla on paikallisesti edennyt tai metastaattinen PDAC. Meidän farmakogeneettiset analyysi havaitsi assosiaation kakeksia ja

SELP-rs6136-AA

genotyyppi suostumuksella aikaisemmassa tutkimuksessa 120 PDAC potilailla [16].

Käänteisesti tilastollisesti merkitsevää korrelaatiota havaittiin, että

G-

alleelin

rs1800796

polymorfismi

IL6

geeni, joka liittyy lisääntynyt alttius kuihtuminen ja laski elinaika II vaiheen ja III Kiinan PDAC potilaille [14]. Nämä eroavuudet voivat ehdottaa, että farmakogeneettisten yhdistykset eivät aina toistettavissa tutkimuksissa populaatioissa eri etnisiin ryhmiin, sekä erilaisissa kliinisissä vaiheissa. Kuitenkin vähäisempi alleeli taajuuksilla, on noin 4%, meidän ikäluokat, rajoitti suuresti tilastollista analyysiä varten tämän polymorfismin. Suurempi tutkimukset homogeeninen asetukset potilaista ovat välttämättömiä tutkia roolia syntymässä biomarkkerit ennen suunnittelua mahdollisille tutkimuksissa.

PDAC potilailla on suurin riski kehittää kakeksian joukossa maha kasvaimia, ja on osoitettu, että kuihtuminen on korreloi huonon ennusteen, vähensi käsittely toleranssi ja vähentää merkittävästi elämänlaatua näistä potilaista [28], [29].

Kuihtuminen voi johtua monimutkainen vuorovaikutus mekanismeja kuten lääketieteellisiä ongelmia, kuten diabetes , kasvain vaiheessa ja pohjukaissuolen tai sappitiekivistä tukkeuma, joka aiheuttaa kipua, pahoinvointi, dysfagia, gastropareesi, haiman vajaatoiminta ja imeytymishäiriö [30]. Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että myös hermo invaasio, joka esiintyy yleisesti PDAC, liittyy kuihtuminen. Hermovaurio alkaen PDAC voi todellakin aktivoida astrosyytit, joka myöhemmin aiheuttaa lipolyysiä ja lihasten surkastumista [31]. Lisäksi kasvu sympaattisen hermoston aktiivisuus saattaa aiheuttaa lipolyysiä rasvakudoksessa ja lihasten surkastumista [32]. Näiden lisäksi mekaanisista tekijöistä, useita muita mekanismeja on ehdotettu ajaa patofysiologiaan PDAC kakeksian ja on todisteita, että anoreksia ja hyperkatabolismi voidaan laukaista sytokiinien, kiertävän hormonit, neuropeptidit, välittäjäaineiden ja tuumorista peräisin tekijät.

Useat tutkimukset osoittivat, että kohonneet sytokiinien, kuten IL-6, liittyi laihtuminen ja huonon ennusteen PDAC potilailla [8] – [10]. Kuitenkin muuttuja alttius kakeksian voi olla myös johtuen potilaan genotyyppi, sekä kattava farmakogeneettisten tutkimus osoitti yhdistyksen kakeksian kanssa

rs6136

polymorfismi geenin

SELP

. Tämä geeni koodaa soluadheesiota proteiinin P-selektiini, joka havaittiin voimistuvan hiiren ja rotilla malleja johtuvan riutumisen akuutteja ja kroonisia inflammatorisia loukkaukset [16]. Näistä tiedoista kävi ilmi, että P-selektiini on merkittävä rooli sekä eläinmalleissa ja kakektisilla syöpäpotilailla. Kuitenkin tietoja ei ole vielä saatavilla rooliaan riskitekijä tai mahdollisena välittäjänä kakektisen prosessin.

Koska apoptoosin on raportoitu tapahtuvan tuhlaa lihaksen kuihtuminen, useissa muissa tutkimuksissa arvioitiin avainasemassa Akt1 kehittämisessä syöpäkakeksialle [33] – [35]. Akt1 on seriini /treoniini-kinaasi toimii kriittinen välittäjänä kasvutekijän aiheuttaman selviytymistä. Survival tekijät voivat tukahduttaa apoptoosin transkription riippumattomalla tavalla aktivoimalla Akt1, joka sitten fosforyloi ja inaktivoi komponenttien apoptoottisen koneiston [32], [36]. Lisäksi luustolihasten, Akt1- on erittäin keskeinen rooli valvonnassa sekä lihasten proteiinisynteesiä, kautta mTOR, ja proteiinien hajoaminen, kautta transkriptiotekijät FoxO perheen. Tämä viittaa siihen, on keskeinen asema liiallinen lihasmassan liittyy useita sairauksia, mukaan lukien myopatioiden ja lihasdystrofioiden, sekä kakeksia liittyy systeemisiä sairauksia, kuten syöpä, diabetes, sepsis ja sydämen vajaatoiminta [13]. Schmitt ja kollegat osoittivat Kakeksian liittyvä menetys Akt-riippuvaisen signaloinnin ihmisen luustolihasten kakektisia potilaita verrattuna ei-kakektisia potilaita käyttäen lihas koepalat 16 PDAC potilailla, joille pancreatectomy [33]. Erityisesti

AKT1

on erittäin polymorfinen geeni, ja funktionaalinen SNP saattavat vaikuttaa Akt1- tasoilla ja vaikutus apoptoosin induktion [21].

Siksi nykyisessä tutkimuksessa selvitimme yhdessä kakeksia ja ennusteen arvioinnissa ehdokas toiminnallisten polymorfismien

IL6-rs1800796

,

AKT1-rs1130233

ja

SELP-rs6136

ensimmäisessä kohortin 151 potilailla, joilla on paikallisesti edennyt tai metastaattinen PDAC . Sitten validoitu tulokset monistamalla yhdistyksen tutkimuksen itsenäisesti palvelukseen ryhmän 152 potilasta.

Parhaan tietomme tämä on ensimmäinen tutkimus demostrating että henkilöt, jotka kantoivat

– alleeli

AKT1-rs1130233

polymorfismi oli suurentunut riski sairastua kuihtuminen. Lisäksi nämä potilaat selvisivät huomattavasti lyhyempi, verrattuna potilaisiin kuljettaa

GG

genotyyppi. Merkillistä, Coxin suhteellisen vaarat regressiomallin käytetään Monimuuttuja-analyysissä kuvataan itsenäisen ennustetekijöiden arvo

AKT1-rs1130233

.

On huomioitava, että

AKT1-rs1130233

on synonyymi polymorfismi eli polymorfismi, jossa muutos tukikohdan DNA-sekvenssi ei muuta koodattu aminohappo johtuen redundanssin geneettisen koodin. Koska synonyymi SNP eivät muuta koostumusta proteiinituotteen, ne ovat pitkälti oletettu ei kohdistu havaittavia vaikutuksia geenien toiminnan tai ilmiasun. Kuitenkin tutkimukset keinotekoinen paikka- suunnatun hiljainen mutageneesi synonyymi kodonien useita geenejä tukevat oletusta, että muuttunut käännös kinetiikka mRNA aiheuttama muuttunut käännös kinetiikka ja taitto, saattavat vaikuttaa lopulliseen proteiinin konformaatioon [37]. Lisäksi Kimchi-Sarfaty ja yhteistyökumppanit osoittivat, että P-glykoproteiini-inhibiittorit siklosporiinin ja verapamiilin olivat vähemmän tehokkaita proteiineja vastaan, jotka oli valmistettu polymorfisten haplotyyppien, jotka eivät muuta aminohapposekvenssiä, mutta hidastaa ribosomin liikennettä vastaava mRNA alueilla [38] . Nämä muutokset voivat siten vaikuttaa cotranslational taittuvat reitin, jolloin eri lopullinen rakenne ja toiminta. Vaikka emme voineet testata tätä hypoteesia, koska niillä ei ole konformaatiosta herkkiä monoklonaalisia vasta-aineita Akt1, aiemmat tutkimukset eri kudosten tyyppejä osoitti, että

AKT1-rs1130233-AA

variantti korreloi alemman

AKT1