Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Kiertävä angiogeenisten tekijöiden on muuttunut potilailla metastasoituneen kolorektaalisyövän saavien bevasitsumabi. Arviointi muutokset VEGF-ligandien voi tarjota oivalluksia mahdollisia resistenssimekanismit.

Methods

PIGF, VEGF-A, VEGF-C ja VEGF-D mitattiin kahdelta kohortin potilaista . Juokseva plasmanäytteet saatiin löytö kohortin 42 hoidetuilla potilailla kemoterapiaa ja bevasitsumabin. Vahvistuspiippaus ryhmä koostui plasmanäytteistä peräisin poikkileikkaus 403 potilasta ennen kemoterapiaa, tai sen jälkeen eteneminen on hoito tai ilman bevasitsumabia.

Tulokset

löytö kohortti, VEGF-C nostettiin ennen etenemistä ja etenemiseen (+ 49% ja + 95%: lla, p 0,01), joka on aiemmin raportoitu kohonneet PIGF. VEGF-D lisättiin (+ 23%) on etenemistä (p = 0,05). Vuonna validointi kohortin näytteet saatiin potilailta etenemisen jälkeen on hoito bevasitsumabiin oli korkeampi PIGF ja VEGF-D (+ 43% ja + 6%, p = 0,02, p = 0,01, vastaavasti) verrattuna hoitamattomien potilaiden mutta ei vahvista lisäys VEGF-C nähdään ensimmäisessä kohortissa. Potilaat, jotka eteni kemoterapiaa bevasitsumabiin oli merkittävästi kohonneet PIGF (+ 88%), mutta ei VEGF-C ja VEGF-D verrattuna potilaisiin kemoterapiaa yksinään. Kohoamista PIGF ja VEGF-D ilmestyi ohimeneviä ja palautuivat lähtötasolle kanssa puoliintumisaika on 6 viikkoa.

Johtopäätökset

korotukset PIGF ja VEGF-D havaittiin etenemisen jälkeen kemoterapiaa bevasitsumabin . Nämä muutokset näyttävät olevan palautuvia hoidon lopettamisen jälkeen. Nämä ligandit liittyvät vastustuskyvyn bevasitsumabia sisältävien kemoterapiaa metastasoituneen kolorektaalisyövän, mutta syy-yhteys on vahvistamatta.

Citation: Lieu CH, Tran H, Jiang Z-Q, Mao M, Overman MJ, Lin E, et al. (2013) yhdistys Alternate VEGF ligandit, joilla on vastustuskykyä VEGF Therapy in metastasoituneen kolorektaalisyövän. PLoS ONE 8 (10): e77117. doi: 10,1371 /journal.pone.0077117

Editor: Zhuang Zuo, UT MD Anderson Cancer Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 24 kesäkuu 2013; Hyväksytty: 29. 2013. Julkaistu: 15 lokakuu 2013

Copyright: © 2013 Lieu et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Rahoituslähde : Conquer Cancer Foundation Young Investigators Award (https://www.conquercancerfoundation.org/) CL, ja tutkimus avustusta vuorokausirytmin Technologies Limited (https://circadian.com.au/) SK Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Tekijät haluavat julistaa yksi eturistiriitoja kirjoittajalle S.K. alkaen Circadian Technologies. Tutkimusrahoitusta saatiin Circadian Technologies. Ei ole muita asiaan koskevia ilmoituksia työhön, konsultointi, patentit, tuotteiden kehittämiseen, tai kaupan tuotteita. Kirjoittajat vahvistavat, että tämä ei muuta niiden noudattamista kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamiseen ja materiaaleja, yksityiskohtaisena online-oppaassa tekijöille.

Johdanto

Angiogeneesi on keskeinen prosessi sekä kasvaimen kasvua ja metastaattisen taudin leviämisen [1,2]. Aikana tuumorigeneesiprosessin tasapaino proangiogeeninen tekijät, kasvutekijät, ja sytokiineja, jotka säätelevät angiogeneesiä häiriintyy ja ”angiogeenisten kytkin” tunnustetaan yhä nopeutta rajoittava toissijainen tapahtuma monivaiheinen karsinogeneesissä [2-5]. Verisuonten endoteelin kasvutekijä A: n (VEGF-A) on keskeinen kasvutekijä endoteelisolujen potilailla, joilla on CRC [6,7]. Lisäyksen monoklonaalinen vasta-aine, bevasitsumabi, on parantanut eloonjäämisaste potilaiden metastasoituneen kolorektaalisyövän [8,9].

Huolimatta kliinistä hyötyä tarjoamia bevasitsumabi, on myös hyvin tunnettua, että monet potilaat ovat palautuneet ennalleen angiogeneesi huolimatta edelleen VEGF-A saarto [10]. Prekliiniset työ on ehdottanut, että vaihtoehtoinen proangiogeeninen tekijät voivat moduloida herkkyys anti-VEGF-A-hoidon ja mahdollistaa regrowth kasvaimeen liittyvien verisuonistossa [11-13]. Jäsenten VEGF-signaloinnin perheen syrjään VEGF-A on liitetty angiogeneesiin, kuten istukan kasvutekijä (PIGF), VEGF-C, ja VEGF-D: [14,15]. Kuitenkin rooli vaihtoehtoisen VEGF ligandien angiogeneesissä edelleen kiistanalainen. Joitakin tietoja kirjallisuudessa raportissa, että PIGF parantaa patologinen angiogeneesi aloittamalla cross-talk välillä VEGFR-1 ja VEGFR-2, mutta muut tutkimukset ovat epäonnistuneet vahvistaa nämä havainnot [16-19]. VEGF-C on liitetty angiogeneesiin rintasyövän ja sen on osoitettu synergisesti emäksinen fibroblastikasvutekijä ja VEGF-A aiheuttaa angiogeneesiä, mutta toinen tutkimus on ehdottanut, että VEGF-C indusoi verisuonten muutoksia ilman näyttöä uusien angiogeneesiä [20 -22]. On vähemmän tietoa roolista VEGF-D ja angiogeneesiä, mutta tutkimuksessa todettiin CRC havaittu, että pienempi ilmentyminen VEGF-D liittyi enemmän hyötyä hoidosta bevasitsumabilla [23].

Sytokiiniagonistit ja angiogeenisten tekijöiden (valuuttalisiin) moduloidaan potilailla metastasoituneen kolorektaalisyövän saatuaan bevasitsumabia sisältävää kemoterapiaa [24,25]. Eräässä tutkimuksessa Bevasitsumabin peräsuolen syöpä, bevasitsumabi monoterapia huomattavasti plasman PIGF sekä ilmaiset VEGF-A [25]. Sytokiinianalyysi yhden haaran, vaiheen II tutkimuksen FOLFIRI ja bevasitsumabin osoittivat, että vaihtoehtoinen proangiogeeninen sytokiinien moduloidaan kemoterapiaa ja bevasitsumabi ja korotukset nähtiin ennen taudin etenemistä potilasalaryhmässä [24]. Kuitenkin tässä tutkimuksessa ei täysin arvioida vaihtoehtoista VEGF-ligandien eivätkä sallia erottaminen erillisten vaikutusten solunsalpaajahoito ja bevasitsumabi. Ensisijaisena tavoitteena Tämän tutkimuksen on siis määritellä muutoksiin vaihtoehtoisessa VEGF ligandit, kuten PIGF, VEGF-C ja VEGF-D, saavilla potilailla bevasitsumabia sisältävää kemoterapiaa.

Methods

Kaikki tutkimukseen liittyy ihmisen osallistujien hyväksyi Institutional Review Board, University of Texas MD Anderson Cancer Center. Kaikki osallistujat, jos niiden kirjallinen suostumus osallistua tähän tutkimukseen. Eettisen toimikunnan yliopiston Texas MD Anderson Cancer Center hyväksyi tämän lupamenettelyssä. Kaksi ikäluokat arvioitiin tämän tutkimuksen aikana (kuva 1). Löytö kohortti kehitettiin plasmasta hankittiin 42 potilaalla metastasoituneen kolorektaalisyövän kohdellaan vaiheen II kliinisessä tutkimuksessa FOLFIRI ja bevasitsumabin [24]. Laskimoverta vedettiin EDTA-putkiin ja käsitellään välittömästi plasman lähtötilanteessa, ennen kutakin kemoterapiajakson (kuten näyte 2 viikon kuluttua yhden aine bevasitsumabi ensimmäisessä jaksossa), kun ensimmäinen restaging, ja tuolloin etenemisen. Plasma kokoelma mukana sarja sentrifugoinnin heikentävistä verihiutaleita, jotka on muulla tavoin osoitettu vaikuttavan vapaa sytokiinitasoja. On retrospektiivinen katsaus tietokonetomografia kuvantamisen tunnistimme plasma näyte liittyy paras röntgenkuvissa kaikilla potilailla. Tämä näyte (tästä lähtien merkitään ”ennen etenemistä”) edusti vaiheessa ennen potilaalle kehittyy progressiivinen tauti.

Löytö kohortti peräisin plasmasta saatu 42 potilasta metastasoituneen kolorektaalisyövän kohdellaan yksihaaraisessa vaihe II tutkimuksessa FOLFIRI ja bevasitsumabin. Plasma saatiin lähtötilanteessa, välittömästi ennen kutakin kemoterapiasyklin ja aikaan etenemistä. Validointi kohortti hyödynnetty poikkileikkauksen potilaiden metastasoituneen kolorektaalisyövän joille tehtiin kertaluonteinen plasman keräämisestä vuosina 2002 ja 2008.

validointi kohortti hyödynnetty poikkileikkauksen potilaiden metastasoituneen kolorektaalisyövän joille tehtiin kertaluonteinen plasma kerääminen vuodesta 2002 ja 2008. yksi verinäyte 784 potilasta metastasoituneen kolorektaalisyövän saatiin, kun ensimmäinen vierailu meidän keskelle. Veri kerättiin EDTA-putkiin ja tehtiin sentrifugoimalla 2800rpm 10 minuuttia -22 ° C: ssa, jota seuraa aliquoting plasma otetaan 0,5 ml kylmäpulloon ja varastointia -80 ° C: ssa. Näytteitä kerättiin toistettiin sentrifugoimalla heikentävistä verihiutaleiden ennen pakastamista. Kaikki hoitohistorioissa tarkistettiin etukäteen hoitoyhdistelmien ennen hoidon kesto, aika viime kemoterapiaa tai bevasitsumabi plasman näytteen keräämistä, ja määrä Metastaaseja. Potilaat jaettiin 3 ryhmään, joka perustuu aiempaan hoitoon aikaan plasman näytteenotto: potilaat ennen minkään syöpähoitoa (ryhmä A), potilaat etenevät kemoterapiaa bevasitsumabin (ryhmä B), ja potilaat etenee on kemoterapiahoidon että mukana bevasitsumabin (ryhmä C).

Hyväksytty paria näytteet tunnistettiin sallimaan vertailun ryhmät A ja C, ja erillinen paria tunnistettu vertailla ryhmät B ja C. valvomiseksi taudin taakkaa ja ennen hoitoa, potilaan näytteitä oli sovitettu useita Metastaaseja (ryhmät A, B, C), ennen kemoterapiaa kesto ja aika viime kemoterapian annoksesta näytteenottoa (ryhmät B, C). Vastaavat tehtiin R käyttäen Optmatch rutiinia, jolloin 169 pareittain ryhmät A ja C, ja 65 paria ryhmät B ja C [26].

Plasmanäytteet sulatettiin rinnakkain ja analysoitiin kahtena kappaleena. Näytteet sijoitettiin satunnaisesti levyille pitäen pariksi näytteitä samalla levyllä. Kunkin yksittäisen näytteen, kerroin varianssianalyysi (CV%) laskettiin, ja toistetaan analyysi, jos CV% oli yli 25%. Tasot sytokiinien, mukaan lukien VEGF-A: n ja PIGF mitattiin multiplex helmi määrityksen (BioRad Pro Human Sytokiiniagonistit 23- ja 27-Plex Assay). VEGF-C ja VEGF-D mitattiin entsyymi-immunologiset määritykset (R 0,05 merkitys. Spearmanin korrelaatiokertoimet laskettiin arvioida korrelaatio aika viime kemoterapian annoksesta näytteenottoa ja erityisiä sytokiinitasoja. Tiedot piirrettiin käyttämällä vioplot paketin R [28]. Aineisto sopivat yksivaiheinen log hajoaminen tunnistaa puoliintumisajan korotusten. Korrelaatio sytokiinien tasot arvioitiin Pearsonin korrelaatiokertoimet laskettiin log-transformoituja sytokiini arvoja. Sen arvioimiseksi, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D, tai PIGF oli prognoosi-, arvioitavissa potilaista ei ennen hoitoa ryhmä sisällä validointi kohortin jaettiin kahteen ryhminä perustuen heidän mediaani sytokiinitasoja ja analysoitiin käyttäen yhden muuttujan analyysi (Kaplan -Meier) ja monimuuttujamenetelmin (Cox-regressio). Kaikki laskelmat suoritettiin käyttäen SAS (SAS Institute, Cary, NC).

Tulokset

Pariksi plasmanäytteet otettiin 42 potilasta löytö kohortin ja 403 potilasta validointi kohortissa. Potilaiden ominaisuudet on esitetty taulukossa 1. validointi kohortin näytteet saatiin mediaani 3 viikon kuluttua hoidon hoito-kemoterapiaa yksinään tai kemoterapian kanssa bevasitsumabiin. Näytteitä hyvin yhteen varten ennalta määrätyt muuttujat.

Discovery kohortti

Validation kohortti

Ei kemoterapiaa (ryhmä A) B Kemoterapia w /Bev (ryhmä C)

Kemoterapia w /o Bev (ryhmä B) B Kemoterapia w /Bev (ryhmä C)

lukumäärä samples1791691696565Number of Patients421691696565Age, vuotta (mediaani) 5758535353Male (%) 43% 58% 62% 57% 62% Ensisijainen Disease Site (%) Rectum14% 13% 15% 23% 20% Colon86% 87% 85% 77% 80% adenokarsinooma histologia (%) Kohtalaisen Differentiated86889895100 Huonosti Differentiated1412250Number metastaasien (avg) 1.71.71.71.41.4Duration ennalta kemoterapiaa (kk) N /AN /A656Prior kemoterapia Sai 5-fluorourasiili /Kapesitabiini (%) 00100100100 oksaliplatiinipohjaisen (%) 00894088 Irinotekaani-Based (%) 00584345 Bevasitsumabi (%) 001000100 EGFR-estäjä (%) 0026615Last kemoterapiaa näytteenottoa (päivää) N /AN /AN /A3529Average LDH13721129821616821Median Verihiutaleiden CountN /A333222238229Table 1. Ominaisuudet potilaiden mukana tutkimuksessa.

CSV Lataa CSV

VEGF-D, ja PIGF lisätään ajankohtana Progression Kemoterapia kanssa Bevasitsumabilla

hoidon jossa FOLFIRI + bevasitsumabi löytö kohortin VEGF-C nostettiin ennen etenemistä ja aikaan etenemiseen (+ 49% lähtötilanteesta [p = 0,045] ja + 94% [p = 0,004], tässä järjestyksessä) (taulukko 2 ja kuva 2). Nämä löydökset olivat samanlaisia ​​kuin aiemmin raportoitu muutoksia tästä kohortti PIGF [24]. VEGF-D lisättiin ajankohtana etenemisen (+ 23%, p = 0,04), mutta toisin kuin VEGF-C, VEGF-D ei lisätä ennen etenemistä (-1%, p = 0,84) .

DISCOVERY KOHORTTI

Baseline

Post-Bevasitsumabilla

Post-FOLFIRI + B

ensimmäinen Restaging

Ennen Progression

Progression

parametri

tarkoittaa (pg /ml) B mediaani (pg /ml) B keskiarvo (s /ml) B mediaani (pg /ml) B% lähtötilanteesta

keskiarvo (s /ml) B mediaani (pg /ml) B% lähtötilanteesta

keskiarvo (s /ml) B mediaani (pg /ml) B% lähtötilanteesta

keskiarvo (s /ml) B mediaani (pg /ml ) B% lähtötilanteesta

keskiarvo (s /ml) B mediaani (pg /ml) B% baseline

PlGF12.612.417.420.6166%23.023.2187%N/AN/AN/A29.929234%21.620.4165%VEGF-C1020.3936.61026.6891.595%947.3850.091%1002.7991.7106%1461.91393.3149%1748.91813.3194%VEGF-D238.2240.5244.5243.1101%247.7238.599%272304.1126%232.7249.1104%331.5295123%Table 2. Vaihtoehtoinen VEGF-ligandia sytokiinitasoja.

CSV Lataa CSV

hoidon jälkeen FOLFIRI ja bevasitsumabin löytö kohortin VEGF-C nostettiin ennen etenemistä ja aikaan etenemistä. Nämä löydökset olivat samanlaisia ​​kuin aiemmin raportoitu muutoksia tästä kohortti PIGF. VEGF-D lisättiin ajankohtana etenemisen, mutta toisin kuin VEGF-C, VEGF-D ei lisätä ennen etenemistä. Vuonna validointi kohortin PIGF oli kohonnut potilailla aikaisemmin kemoterapiaa ja bevasitsumabi. VEGF-D myös minimaalisesti kohonnut potilailla aikaisemmin kemoterapiaa ja bevasitsumabi, mutta kohonneita VEGF-C nähdään löytö kohortissa ei toistettu validointi kohortissa.

Jotta vahvistaa toteamukset löytö kohortti, vertasimme muutokset VEGF ligandeja hoitamattomista potilaista ja sovitettu aikaisemmin hoidettu kemoterapiaa ja bevasitsumabin (taulukko 3). Yhdenmukainen löytö kohortin kemoterapia bevasitsumabiin ryhmällä oli korkeampi PIGF (+ 32%, p 0,0001). Samoin määriä VEGF-D olivat koholla potilailla aikaisemmin kemoterapiaa ja bevasitsumabi, vaikka suuruus kasvu oli pienempi kuin nähdään ensimmäinen kohortti (+ 6%, p = 0,018). Korkeus on VEGF-C tasoilta löytö kohortti ole toistettu validointi kohortin, mikä sen sijaan osoitti alhaisempi VEGF-C (-36%, p 0,0001) potilailla aiemmin hoidettu kemoterapiaa ja bevasitsumabin.

VALIDATION COHORTNo Kemoterapia (ryhmä A) Kemoterapia kanssa Bev (ryhmä C) Kemoterapia ilman Bev (ryhmä B) Kemoterapia kanssa Bev (ryhmä C) Parametermean (pg /ml) mediaani (pg /ml)% verrattuna Group CMean (s /ml) mediaani (pg /ml)% verrattuna Group Amean (pg /ml) mediaani (pg /ml)% verrattuna Group CMean (pg /ml) mediaani (pg /ml)% verrattuna Group BPlGF36.93470%54.248.7143%31.933.153.13%63.762.3188.22%VEGF-C1138889.6136%751.4652.773%770.358695.55%737.6613.3104.66%VEGF-D326.5308.595%363.6325.7106%374.6354.193.31%404.8379.5107.17%Table 3. Validation Kohortin.

CSV Lataa CSV

arvioitiin myös VEGF-A hoitamattomien potilaiden ja kemoterapiaa saavilla potilailla bevasitsumabin. Hoitamattomassa ryhmässä, mediaani taso VEGF-A oli 760pg /ml (SD 1474pg /ml), ja kemoterapiaa bevasitsumabin ryhmä, mediaani taso VEGF-A oli 534pg /ml (SD 599pg /ml). Kemoterapiassa bevasitsumabiin ryhmä, VEGF-A-tasot olivat merkittävästi korkeammat mediaani 1740pg /ml (SD 3702pg /ml), mutta tulkinta määriä VEGF-A kemoterapiassa bevasitsumabin ryhmän häpeään johtuen läsnäolosta bevasitsumabia sidottu VEGF-A.

Lisääntynyt PIGF johtuu Bevasitsumabilla Hoito

Koska suunnittelu löytö kohortin voinut erottaa erillistä vaikutusta kemoterapiaa ja bevasitsumabi, vertasimme potilailla, jotka olivat saaneet kemoterapiaa yksinään potilaisiin, jotka olivat saaneet ennen bevasitsumabin ja kemoterapiaa. Verrattuna kemoterapiaa bevasitsumabin ryhmä, kemoterapia bevasitsumabiin oli merkittävästi kohonneet PIGF (+ 72%, p 0,0001). Kuitenkin, ei ollut eroa VEGF-C (+ 5%, p = 0,64) ja VEGF-D (+ 7%, p = 0,18) potilailla, jotka saivat kemoterapiaa yksinään ja potilailla, jotka saivat ennen kemoterapiaa ja bevasitsumabi. Jos tämä havainto on vahvistettu, se ehdottaa, että mahdolliset muutokset VEGF-C ja VEGF-D voi johtua vaikutus sairauden etenemiseen ja ennen kemoterapiaa eikä suoraa seurausta bevasitsumabi.

VEGF-A korreloi ilman taudin etenemistä ja kokonaiselinaika

Sen arvioimiseksi, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D, tai PIGF oli prognoosi-, potilaalla, että ei ennen hoidon ryhmä sisällä validointi kohortin jaettiin kahteen ryhminä perustuen heidän mediaani sytokiinitasoja. Lähtötasot VEGF-C, VEGF-D, ja PIGF ei korreloi kliinisiä tuloksia. Kuitenkin yhden muuttujan analyysiin, matalan VEGF-A-hoitoon liittyy pitempi tautivapaa (p = 0,001) ja kokonaiseloonjääminen (p = 0,013), kuten on aiemmin osoitettu (kuva 3) [29]. Tämä korrelaatio ei ollut tilastollisesti merkitsevä monimuuttujamenetelmin. Ei ollut korrelaatiota tason tahansa VEGF-ligandiin ja myöhemmän vaiheen kliinisiä tuloksia potilaiden aiemmin hoidettu tai bevasitsumabin (kuva 3).

Sen arvioimiseksi, VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D, tai PIGF oli prognoosi-, potilaalla, hoitamattomassa ryhmässä jaettiin kahteen ryhminä perustuen heidän mediaani sytokiinitasoja. VEGF-C, VEGF-D, ja PIGF ei korreloi kliinisten tulosten. Kuitenkin VEGF-A liittyi pidempi etenemisestä vapaa ja kokonaiselossaolo. Ei ollut korrelaatiota tason tahansa VEGF-ligandiin ja myöhemmän vaiheen kliinisiä tuloksia potilaiden aiemmin hoidettu tai bevasitsumabin.

Kohonnut PIGF ja VEGF-D kemoterapian jälkeen ovat ohimeneviä

Spearmanin korrelaatiota menetelmää sovellettiin määrittämiseen korrelaatio aikaan lopullisen kemoterapiaa näytteenottoa ja erityisten sytokiinien tasot validointi kohortissa. Tasot PIGF ja VEGF-D korreloi negatiivisesti aikaan viime bevasitsumabi hallinnon plasman keräämisestä (p 0,0001) viittaa siihen, että kohonneet Näiden sytokiinien olivat ohimeneviä eivätkä yllä poiston jälkeen bevasitsumabia sisältävän kemoterapian (kuva 4). Mitään tällaista korrelaatiota ei havaittu potilailla kemoterapiaa yksinään. Sen määrittämiseksi, puoliintumisaika on nousu, data sovitettiin yhden vaiheen log vaimennuskäyrää. Puoliintumisaika varten PIGF havaittiin olevan 1,6 kuukautta (95% CI 1,4-1,9), ja puoliintumisaika VEGF-D: n havaittiin olevan 1,5 kuukautta (95% CI 1,2-2,0).

Spearmanin korrelaatiota menetelmää sovellettiin määrittämiseen korrelaatio aika viime kemoterapian annoksesta näytteenottoa ja erityisiä sytokiinitasoja. Tasot PIGF ja VEGF-D oli negatiivinen korrelaatio aika viime bevasitsumabi annoksesta näytteenottoa (p 0,0001) viittaa siihen, että kohonneet Näiden sytokiinien olivat ohimeneviä eivätkä yllä poiston jälkeen bevasitsumabia sisältävien kemoterapiaa. Ei rappeutuminen VEGF-C havaittiin.

korrelaatio VEGF ligandien kanssa vaihtoehtoisen sytokiinien

Ennen tutkimukset eivät arvioineet korrelaatio VEGF perheenjäsenten keskenään tai vaihtoehtoinen angiogeeninen ja tulehdussairauksien sytokiineja. Tutkia näitä suhteita, käytimme toinen käsittelemättömän potilaan kohortin arvioida sytokiinien, jotka korreloivat yhden tai useamman VEGF-ligandiin perheenjäseniä. Olemme havainneet, että useat sytokiinit korreloivat voimakkaasti VEGF-A, VEGF-C, ja PIGF (kuvio 5). Mielenkiintoista, VEGF-D osoitti hyvin vähän korrelaatiota muiden sytokiinien. PDGF-BB: korreloi voimakkaasti VEGF-A, VEGF-C, ja PIGF: n ja IFN-ɣ korreloi sekä VEGF-A: n ja VEGF-C. VEGF-A: n ja VEGF-C: tä myös korreloi toistensa kanssa, mutta ei ollut merkittävää korrelaatiota muiden VEGF-ligandit.

Useita sytokiinejä korreloivan hyvin VEGF-A, VEGF-C, ja PIGF. VEGF-D osoitti hyvin vähän korrelaatiota muiden sytokiinien. PDGF-BB: korreloi voimakkaasti VEGF-A, VEGF-C, ja PIGF: n ja IFN-ɣ korreloi sekä VEGF-A: n ja VEGF-C. VEGF-A: n ja VEGF-C: tä myös korreloi toistensa kanssa, mutta ei ollut merkittävää korrelaatiota muiden VEGF-ligandit.

Keskustelu

Tämä tutkimus edustaa suurta arviointi vaihtoehtoinen VEGF ligandit jälkeen edennyt VEGF-hoidon ja kemoterapian prospektiivisessa kohortissa ja retrospektiivinen Potilaskohortti metastasoituneen kolorektaalisyövän. Analyysi Näiden erityisten sytokiinien osoittaa, että vaihtoehtoinen VEGF ligandeja moduloidaan bevasitsumabi ja kemoterapiaa. PIGF on aiemmin osoitettu olevan koholla ennen etenemistä ja aikaan etenemistä on bevasitsumabi hoito [24,25]. Suuremmassa retrospektiivinen kohortin nämä nousuja PIGF nähtiin jälkeen kemoterapiaa ja bevasitsumabin mutta ei sen jälkeen pelkkää kemoterapiaa, mikä viittaa siihen, että havaitut muutokset PIGF ovat erityisiä potilaita, jotka saavat bevasitsumabi. PIGF plasmassa ja kasvainten korreloi kasvaimen vaiheesta, verisuonten, toistumisen, etäpesäke, ja selviytymistä erilaisissa kasvaimissa [30,31] ja on myös osoitettu lisäävän solun herkkyyttä VEGF-A [32]. Tuloksia satunnaistetusta faasin III tutkimuksessa Ziv-aflibersepti (dual-estäjä PIGF ja VEGF-A) potilailla, jotka ovat edenneet ennen kemoterapiaa osoittavat, että jatkuva VEGF perheenjäsenten hyödyttää potilaita, joilla on hankittu vastustuskyky bevasitsumabi, vaikka lisätutkimuksia tarvitaan erottamaan vaikuttavien eri PIGF ja VEGF-A esto. Ihmisen kasvainsolulinjoja estivät anti-PIGF vasta, yksi tutkimuksessa todettiin, että tehoa anti-PIGF korreloivat voimakkaasti VEGFR-1 ilmentymisen kasvainsoluissa mutta ei angiogeneesiä torjuvina [33].

Levels VEGF-C kohosivat mahdollinen kohortin ennen etenemistä ja aikaan etenemistä potilailla etenee on bevasitsumabi hoito. Kuitenkin tämä korkeus ei voinut vahvistaa meidän suurempi retrospektiivinen kohortissa. Lisäksi ei ollut eroa välillä nähdään, joilla on kemoterapialla yksin ja kemoterapiaa saavilla potilailla ja bevasitsumabi. On epäselvää, miksi korkeus VEGF-C ei voinut vahvistaa. Toistuva jäädytys-sulatus ja laajennettu huoneenlämpöaltistus ei olennaisesti muuttanut VEGF-C tasolle. Vaikka verihiutaleet köyhdytettyä sentrifugoimalla, voi olla mahdollista vuotaa hieman Näiden sytokiinien verihiutaleiden säiliöiden käsittelyn aikana. Heterogeeninen potilasryhmää edustaa mahdollinen rajoitus validointi kohortissa. On myös mahdollista, että nousuja nähdään VEGF-C mahdollinen kohortin voi muodostua enemmän ohimenevät, jotka eivät ole havaittavissa keskimääräinen 4 viikon kuluttua bevasitsumabi toisessa kohortissa. Koska puoliintumisaika bevasitsumabi on 20 päivää, tämä voi olla myös vaikuttaa tuloksiin nähty VEGF-C.

Modest nousuja havaittiin VEGF-D potilailla etenee on bevasitsumabi hoito. Tämä nousu vahvistettiin retrospektiivinen kohortin mutta suuruusluokka korkeus on epäselvä biologista merkitystä. Ei ollut tilastollisesti merkitsevää eroa, joilla on kemoterapialla vain ja joilla on kemoterapialla bevasitsumabiin, vaikka suuruus lisäys oli samanlainen. On myös syytä huomata, että VEGF-D ovat hyvin tiukasti säädeltyä, joilla on alhainen potilaiden välinen vaihtelu. Sitä vastoin VEGF-C oli suurempi vaihtelua väestöstä, noin 4 kertaa suurempi keskihajonta. Tämä saattaa viitata, että hieman vaihtelua VEGF-D voi aiheuttaa suurempia biologisia vaikutuksia, mutta jatkotutkimuksia täytyy suorittaa, jotta voidaan arvioida biologisen muutosten vaikutus VEGF-D.

Sisällä retrospektiivinen kohortin huomasimme, että tasot PIGF ja VEGF-D oli negatiivinen korrelaatio aika viime bevasitsumabi annoksesta näytteenottoa. Tämä viittaa siihen, että muutokset PIGF ja VEGF-D aikaan röntgenkuvissa eteneminen ovat väliaikaisia ​​lopettamisen jälkeen bevasitsumabi. Mikä tärkeintä, ei ollut ajallista muutosta PIGF ja VEGF-D potilailla kemoterapiaa vain. Nämä havainnot on selkeä seuraus siitä, milloin terapeuttisia aineita, joiden kohteena vuorottelevat VEGF ligandeja. Hoidettaessa potilaita, joilla aineilla suunnattu vaihtoehtoisen VEGF-ligandien aikaan bevasitsumabia resistenssin tai ennen radiologisesti eteneminen saattaa tuottaa suurimman terapeuttinen teho kuin tasot vaihtoehtoisen VEGF ligandien olisi korkein tuolloin. Vaikka sytokiinivasteita bevasitsumabista ovat ohimeneviä, on epäselvää onko tämä vastaus edustaa pysyvä uusitaan angiogeneesin, jota voidaan hyödyntää kanssa Uusien hoitomuotojen. Tulevaisuuden kliiniset tutkimukset voi yrittää tutkia ajoituksen lisäksi näiden aineiden koordinoidusti plasman sytokiinien tasoja.

Ennen tutkimukset eivät arvioineet korrelaatio VEGF perheenjäsenten keskenään tai vaihtoehtoinen angiogeeninen ja tulehduksellisten sytokiinien. Tuloksemme viittaavat siihen, että VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D, ja PIGF eivät kuulu samaan angiogeeninen vaste, ja sen sijaan korreloivat tasoilla vaihtoehtoisen angiogeenisten sytokiineja. Kohonnut vaihtoehtoinen VEGF ligandit eivät todista, että nämä ligandit aiheuttavat palauttaminen angiogeneesin ja kliinisen vastus. Samoin meidän data myös nostaa hypoteesia, että nousuja vaihtoehtoisissa VEGF ligandeja näyttävät liittyvän suuremman kokoelma kiertävän angiogeenisten tekijöiden, jotka voidaan yhteisesti osallisena palauttamisessa angiogeneesiä. Nämä yhdistykset ovat tärkeitä rajaamiseksi myöhemmissä tutkimuksissa, koska monimutkaisuus angiogeneesin mukaan monet näistä sytokiinien ja kemokiinien toimivat yhdessä tuottaa mikroympäristölle tukevaa varten uudissuonittumisen. Suun tyrosiinikinaaseihin on kehitetty laaja tehoaa erilaisia ​​tyrosiinikinaasien, kuten regorafenib joka on viime aikoina osoittanut eloonjäämishyötyä tulenkestävien CRC potilailla [34].

Tämä tutkimus on useita rajoituksia. Koska plasma otettiin potilailta vain kerran vaiheessa validointi kohortin sarja mittauksia plasmaa valuuttalisiin eivät voineet tutkia. Pituus esikäsittelyä oli myös heterogeeninen molemmissa ryhmissä B ja C, vaikka näytteitä sovitetun hoidon kesto sekä aika viime kemoterapian annoksesta näytteenottoa tilille tätä eroa. On mahdollista, että vaihteleva aikatauluja bevasitsumabia käytettiin validoinnissa kohortin jotka voivat vaihdella kuin tiukka protokolla-pohjainen hoito Bevasitsumabin löytö kohortissa. On myös epäselvää, kuinka hyvin verenkierrossa VEGF ligandien todella heijastavat kasvain microenvironment. On näyttöä siitä, että antiangiogeenisesti hoitomuodot voivat saada aikaan isännän vasteen sijasta pahanlaatuisen soluvasteen, joka edistää terapeuttisen vastus [35]. On myös vaikea määrittää, mikä suuruuden muutos sytokiinien tasot olisivat tarpeen herättää biologisen vasteen. VEGF-reseptoreja on myös osoitettu olevan tärkeä rooli kasvainten hoidettu anti-VEGF-hoidon, koska viimeaikainen tutkimus on osoittanut, että lokus VEGFR1 korreloi lisääntynyt VEGFR1 ilme ja huono tulos bevasitsumabiin hoitoon [36]. Lopuksi, tämä tutkimus osoittaa yhdistys vaihtoehtoisen ligandien bevasitsumabiin vastus, mutta ei pysty osoittamaan todellista aiheuttajaa vastus mekanismi. Lisätutkimuksia tarvitaan joko prekliinisissä tai asettaminen kliinisen tutkimuksen vastaamaan näihin kriittisiin kysymyksiin.

VEGF-ligandien muu kuin VEGF itse liittyy bevasitsumabia sisältävän kemoterapian resistenssin metastaattisen CRC. Edelleen prekliinisissä työ voi auttaa selventää joka angiogeenisten tekijöiden voidaan kohdistaa, jotta tukahduttaa kasvaimen angiogeneesiä. Lisätutkimuksia tarvitaan myös määrittää, jos nämä muutokset ovat aiheuttajaa varten antiangiogeenisesti vastus. Kun viime kaksi uutta aineiden kohdistaminen VEGF signalointi, käännöstiede on kriittinen tunnistaa paras asetus hyödyntää antiangiogeenisestä hoitoja.