Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Suun levyepiteelisyöpä (OSCC) on kuudenneksi yleisin syöpä maailmassa. Tupakan kulutukseen ja HPV-infektio, sekä ovat merkittävä riskitekijä kehittämisen suun syövän ja aiheuttaa mitokondrioiden. Geneettiset polymorfismit xenobiotic-metaboloivia entsyymejä muokata tehostetta ympäristölle altistumisen, mikä osallistua merkittävästi geenien ja ympäristön vuorovaikutukset ja siten edistää yksilön herkkyys syöpään. Täällä olemme tutkineet yhdistyksen tupakan – betel puntaa pureskelua, HPV-infektio,

GSTM1-GSTT1

null genotyyppiä, ja kasvaimen vaiheissa mitokondriaalisen DNA (mtDNA) pitoisuus vaihtelu suun syöpäpotilailla.

Menetelmät /Principal havainnot

tutkimus koostuu 124 tapausta OSCC ja 140 verrokeilla toteutettiin PCR perustuva tunnistus tehtiin korkean riskin HPV käyttämällä konsensus aluketta ja multiplex PCR tehtiin havaitsemiseksi

GSTM1 -GSTT1

polymorfismi. Vertaileva ACt menetelmää käytettiin määritykseen mtDNA sisältöä. Riski OSCC lisääntyi kanssa lakkasi mtdna kopiomäärä (

P

trendi

= 0,003). Yhdistyksen välinen mtDNA kopioluvun ja OSCC riski oli ilmeinen joukossa tupakka – betel puntaa chewers sijaan tupakka – betel puntaa non chewers; vuorovaikutus mtDNA kopiomäärä ja tupakka – betel puntaa oli merkitsevä (

P

= 0,0005). Merkitsevää eroa ei havaittu

GSTM1

–

GSTT1

null genotyyppien (

P

= 0.04,

P =

0,001 vastaavasti) ja HPV-infektio (

P

0,001) ja mtDNA pitoisuus vaihtelua tapauksissa ja valvontaa. Positiivinen korrelaatio löydettiin väheneminen mtDNA sisällön kanssa kasvaimen vaiheessa (

P

0,001). Olemme raportoivat ensimmäistä kertaa yhdistyksen HPV-infektion ja

GSTM1-GSTT1

null genotyypit kanssa mtDNA sisältöä OSCC.

Johtopäätös

Tuloksemme osoittavat, että mtDNA sisältö kasvainkudoksissa muuttuu kasvaimen vaiheen ja tupakka-betel mälli pureskelua tottumuksia taas alhainen mtDNA sisällön ehdottaa invasiivisia toimien siten biomarkkeri havaitsemista OSCC.

Citation: Mondal R, Ghosh SK, Choudhuryn JH, Seram A, Sinha K, Hussain M, et al. (2013) mitokondrio-DNA Kopioi numero ja riski Oral Cancer: raportti Koillis-Intia. PLoS ONE 8 (3): e57771. doi: 10,1371 /journal.pone.0057771

Editor: Syed A. Aziz, Health Canada, Kanada

vastaanotettu: 19 marraskuu 2012; Hyväksytty: 24 tammikuu 2013; Julkaistu: 04 maaliskuu 2013

Copyright: © 2013 Mondal et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: tarvittavan infrastruktuurin tarjoamat Department of Biotechnology, Govt. Intiassa. Ei ulkoista rahasto tätä tutkimusta varten. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

OSCC, yleisin kasvain suuontelon, [1] ja kuudenneksi yleisin syöpä maailmassa, joka vastaa noin 5 prosenttia kaikista pahanlaatuisia kasvaimia maailmanlaajuisesti [2], [3]. Tilastollinen analyysi Kansainvälisen Agency for Research on Cancer (IARC) osoitti, että huuli ja suuontelon on kymmenes yleisin kasvain sivusto ihmisen [4]. Poltettavien tupakkatuotteiden ja betel mälli tai ilman tupakkaa ovat merkittäviä riskitekijöitä suuontelon syöpä Taiwanissa, Intiassa ja muissa naapurimaiden [5] – [7]. Koillis Intiassa, esiintyvyys tupakkaan liittyvien suusyöpä on noin 33% [8]. Tupakointi, alkoholin käyttö, poltettavia tupakkatuotteita, ja HPV (ihmisen papilloomavirus) infektiot ovat merkittäviä riskitekijöitä suuontelon syöpä, tupakoinnin ja alkoholin, jossa synergistiset vaikutukset [9], [10].

Kehitys syövän takia ympäristöön-geeni vuorovaikutus on hyvin havainnollistettu vaiheen I ja vaiheen II entsyymejä, jotka osallistuvat aineenvaihduntaan karsinogeenejä. Vaiheen I entsyymit ovat CYP (sytokromi P450), jotka ovat mukana aktivoimaan ympäristön prokarsinogeenien lisäämistä tai altistaa heidän toiminnallisia ryhmiä taas vaiheen II entsyymi kuten GST (glutationi S-transferaasi) osallistuvat detoxication aktivoitujen aineenvaihduntatuotteita karsinogeenien [11] . Tupakansavu on monimutkainen seos karsinogeenisten yhdisteiden ja savuton tupakka on runsaasti nitrosamiineja. Lisäksi samanaikainen käyttö betel mälli johtaa 50-kertainen reaktiivisia happiradikaaleja sukupolvi (ROS) [12], [13]. Rakenteellista deleetio Näiden geenien edustaa nolla genotyypin ja on liitetty suurentunut riski suusyövän [14].

Mitokondrioiden puutteet on pitkään epäilty olevan tärkeä rooli kehityksen ja etenemisen syövän [ ,,,0],15], [16]. Mitokondrioiden hengitysteiden toimintaa liittyy sukupolven ROS. Mitokondrioiden genomin on altis ROS ja muita genotoksisten vahinkojen puutteen vuoksi suojaavan histonien ja sen rajoitettu mtDNA korjaamisen ominaisuuksia. Mtdna kopioluku per solu ylläpidetään vakiona alueella vastaamaan energian tarve solun ylläpitää normaaleille fysiologisille toiminnoille. Se vaihtelee merkittävästi väestön keskuudessa 1000 10000 solua kohden [17] ja myös merkittävästi vaihtelee solutyypistä. On todennäköistä, että vaihtelut kopioluku mitokondrioita heijastavat nettotulokset geenien ja ympäristön vuorovaikutusta välillä tuntemattomia perinnölliset tekijät ja tasot oksidatiivisen stressin (epätasapainossa ROS tuotanto ja antioksidanttien), jonka aiheuttaa joukko endogeenisiä ja ulkoisten tekijöiden, kuten hormonit, iän, ruokavalion ja ympäristön hapettimien /antioksidantteja, ja reaktio oksidatiivisen vaurion, jotka kaikki uskotaan olevan riskitekijöitä erityyppisten syöpien kehitykseen [18] – [20].

mtDNA sisältö on liitetty mahdollisena biomarkkeri useissa syöpätyypeissä [21], [22]. Vähentynyt mtDNA sisältö oli ilmoitettu kilpirauhasen [21], munuaisten [23], [24], mahalaukun [25], rintojen [26], aiemmin käsitellyn pään ja kaulan [27], munasarjojen [28] ja maksasyöpä [29 ]. Sen sijaan, useat tutkimukset ovat osoittaneet lisääntynyttä mitokondrion pitoisuus eturauhasen [30], käsittelemätön pään ja kaulan [31], kohdun limakalvon [32], keuhkosyöpä [33], peräsuolen [34], [35] ja haimasyövän [36].

tavoitteena tässä tutkimuksessa oli selvittää yhdistyksen tupakan – betel puntaa pureskelua, HPV-infektio,

GSTM1-GSTT1

null genotyypit, jossa mtDNA sisältöä. Olemme myös arvioineet mtDNA sisällön kasvain ja korreloivat kasvaimen vaiheissa. OSCC on monitekijäinen ja dynaaminen tapahtuma, jossa lukuisia muutoksia edistävät sairauksien kehittymisestä. Siksi riski tupakan – betel puntaa pureskelua,

GSTM1-GSTT1

null genotyyppejä, HPV-infektio ja mtDNA liittyvä sisältö OSCC tutkittiin joka voi toimia mahdollisena molekyyli- biomarkkereiden varhaisia ​​suusyövän, ollessa yleisin syöpä Koillis alueella Intiassa.

Materiaalit ja menetelmät

Oppiaineet ja Näytteenotto

sata kaksikymmentäneljä OSCC potilaan jatkokäsittelyllä kasvainkudoksen /FFPE /suun moppi ja 140 ei-OSCC (ilman syöpä, joilla on tapana purutupakan-betelquid ja myöskään suvussa syöpä) iän ja sukupuolen verrokeilla puikko sisäkammioon, kerättiin heinäkuussa 2010 elokuu 2012 sairaaloista sekä kotoa kirjallisen Tietoon perustuva suostumus ja hyväksymiä IRB. Saatavuus tällaisen valvonnan yksin sairaalassa oli mahdotonta, koska suurin osa potilaista tulevat heidän sukulaistensa ei mahdu kriteereitä osoitettu että valvontaa tällä hetkellä tutkimuksessa. Koskevia tietoja ikä, sukupuoli, ammatti ja luonne kuluttaa tupakan betel mälli tapa (tupakointi tai poltettavien) ja alkoholin saanti OSCC koehenkilöillä otetun sairaalasta kirjaa ja henkilökohtaisten haastattelujen. Kaikki mahdolliset varotoimista vältetään ristikontaminaatio samalla kerätä sekä käsittelyä näytteitä.

Ethics selvitys.

Tämä tutkimus hyväksyttiin [Ei: IRB /CCHRC /01 /2010] Institutional Review Board (IRB), Cachar Cancer sairaalan ja tutkimuskeskus (CCHRC) (https://cacharcancerhospital.org), Meherpur, Assam, Intia.

DNA Isolation

DNA eristettiin ennalta alueita kasvainkudoksen, formaliinilla parafiiniin kudoksen (FFPE) ja suun moppi. Kudokset digestoitiin TES (50 mM Tris-HCI, pH 7,4, 25 mM EDTA, 150 mM NaCl) puskurissa ja inkuboitiin yön yli 55 ° C: ssa kudoksen digestioita. DNA eristetään seuraavaksi fenoli /kloroformi /isoamyylialkoholia menetelmä saostamalla sen jälkeen etanolilla ja suspendoitiin uudelleen TE: hen (10 mM Tris-HCI, pH 8,0, 1 mM EDTA), puskuria ja säilytettiin -20 ° C: ssa [37]. Bioline Eristä Genominen DNA MINIKIT (Bioline, UK) käytettiin eristämiseen genomi-DNA FFPE kudoksista valmistajan ohjeita noudattaen.

Multiplex PCR

GSTM1

ja

GSTT1

Analyysi

GSTM1

–

GSTT1

geenin polymorfismi käyttämällä

CYP1A1

geenin sisäisen valvonnan tehtiin multiplex PCR. Eteenpäin (F) ja taaksepäin (R) alukkeita monistamiseen käytettiin

GSTT1

oli F5′-TTCCTTACTGGTCCTCACATTCTC-3 ’ja R 5′-TCACGGGATCATGGCCAGCA-3’,

GSTM1

oli F5 ” -GAACTCCCTGAAAAGCTAAAGC-3 ’ja R5′-GTTGGGCTCAAATATACGGTGG-3’,

CYP1A1

oli F5′- ACTGCCACTTCAGCTGTCT ja R5′-GCTGCATTTGGAAGTGCTC vastaavasti [38], [39]. PCR-ohjelmaa käytetään monistamiseen oli seuraava: alkuperäistä denaturaatiovaiheen 94 ° C: ssa 2 min; 30 sykliä denaturointi 94 ° C: ssa 30 s; hehkutus 59 ° C: ssa 45 s ja pidennys 72 ° C: ssa 90-luvulla. Monistettu tuote havaittiin 1,5% agaroosigeelissä.

HPV havaitseminen ja Genotyypin

PCR-monistus HPV havaitseminen suoritettiin konsensusalukkeilla GP5 + /GP6 + seurasi alatyypin HPV-16 ja 18 [40], [41]. Reaktioseos ilman DNA-templaattia käytettiin negatiivisena kontrollina, ja että tunnetuilla DNA-templaattia käytettiin positiivisena kontrollina, joka tuotti PCR-tuotteiden odotettuja tuloksia. PCR-monistus suoritettiin neljäkymmentä sykliä. PCR-tuotteet analysoitiin elektroforeesilla 2% agaroosigeelissä. Molekyylipaino markkeri 50 bp ajettiin myös samanaikaisesti tunnistaa molekyylikoon PCR-tuotteiden.

Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR

StepOne ™ Real-Time PCR System (Applied Biosystems) on käytetään suorittamaan PCR vahvistusta mtDNA D-loop (C-suolikanavan) alue.

GAPDH

käytettiin ”taloudenhoito geeni” normalisoida kaikki kynnyksen (Ct) arvot. Eteenpäin (F) ja taaksepäin (R), alukkeita käytettiin monistamiseen C-suolikanavan alue oli F5 ”CAGGGTCATAAAGCCTAAATAG 3 ’ja R5’GAGGTAAGCTACATAAACTGTG3” (109 bp) ja GAPDH oli F5’GAAATCCCATCACCATCTTCC 3 ”ja R5” GAGCCCCAGCCTTCTCCATG 3’ (125 bp), vastaavasti. Kunkin 10 ui reaktiota, 1 ui tuntematon DNA: ta monistettiin, joka sisälsi 0,5 ui kutakin aluketta (20 pmol /ul), 5 ui 2X SYBR Green Mastermix (Applied Biosystems), ja 3 ui nukleaasin vapaata vettä. Reaaliaikaisen PCR-olosuhteet koostuivat alkudenaturaation ja Taq-polymeraasi aktivointi 95 ° C: ssa 10 minuuttia, jota seurasi 40 sykliä 95 ° C 45 sekuntia, 54 ° C: ssa 45 sekunnin ajan ja 72 ° C 1 minuutin ajan, ja sen jälkeen sulamiskäyrän analyysiä. Kukin mittaus toistettiin kolmena kappaleena ja ei-mallin ohjaus sisällytettiin kussakin kokeessa.

Voit selvittää määrät mtDNA ja nDNA läsnä näytteissä, keskimääräinen kynnyssykli numero (Ct) arvot nDNA ja mtDNA saatiin kussakin tapauksessa. Taso mtdna laskettiin käyttämällä delta Ct (ACt) keskimääräisten Ct mtDNA ja nDNA (ACt = CtmtDNA-CtnDNA) samalla hyvin kuin eksponentti 2 (2

-ΔCt).

tilastollinen analyysi

mediaanit ja taajuudet valitut ominaisuudet verrattiin tapausten ja kontrollien välillä käyttäen U-testi jatkuvaan ja Pearson chi-square kaikkien muiden kategorisen muuttujia. MtDNA kopioluku luokiteltiin kvartiileja perustuu jakautumisen valvontaa. Kertoimet suhde (OR) ja 95%: n luottamusvälit (CI) arvioitiin käyttämällä logistista regressiomalleja. Testi muutossuunta laskettiin mtDNA kopiomäärä jatkuvana muuttujana. Ei-parametriset Mann-Whitneyn testiä käytettiin testaamaan jos mtDNA sisällön muutos kasvain on erilainen OSCC tapausten ja kontrollien kanssa tai ilman HPV-infektio,

GSTT1

ja

GSTM1

null genotyypit.

P

-arvot alle 0,05 katsotaan tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

ominaisuudet OSCC aiheita ja valvontaa kuten taulukossa 1. Mitään tilastollisesti merkitseviä eroja tapausten välillä ja ohjaa aiheita iän (

P

= 0,82), sukupuoli (

P

= 0,2), saanti nykyinen hedelmien (

P =

0,94) , suolattu kuiva kala (

P

= 0,77) ja fermentoitu kala (

P

= 0,84). Kuitenkin huomattavia eroja havaittiin päivittäin tupakka-betel mälli saanti (

P

= 0,01) ja vihannesten (

P

= 0,04). Yksittäiset liittyvät riskitekijät suusyöpää tutkittiin. Kasvu riski OSCC on 2,2- kertainen (95% CI, 1,31-3,68;

P

= 0,002) joukossa tupakka-betelpähkinöiden mälli chewers joka on yksi tärkeimmistä vaikuttavia tekijöitä suun syöpä ja Koillis Intiassa tupakka pureskelu on yksi tavanomaiset käytännöt. PCR on onkogeenisten HPV-genomin suoritettiin käyttämällä konsensus-alukkeita GP5 + /GP6 + ja 450 bp: n vyöhyke havaittiin (kuvio 1A). Havaitseminen yhteisten riskin HPV yksittäisissä havaittiin olevan suurempi (kuvio 1 B) ja havaittiin 43.54% (54) tapauksissa ja 17,14% (24) kontrolleissa (taulukko 2). Kun genotyyppi HPV positiivista näytettä todettiin olevan suuri riski alatyyppi HPV18. HPV on liitetty yksi mahdollinen etiologiset tekijät OSCC ja esillä olevassa tutkimuksessa, riski OSCC kasvoi 3,72 -folds (95% CI, 2,11-6,56;

P

0,0001) takia HPV-infektio.

(A) edustaja agaroosigeelistä värjättiin etidiumbromidilla fragmentin koon määrittämiseksi (oletetulla koko ~450 emäsparia) ja polymeraasiketjureaktio (PCR) saanto yhteisen riskin ihmisen papilloomaviruksen (HPV ) genomit kontrollien ja suun syöpäpotilailla. (B) Pylväsdiagrammi, joka osoittaa korkea HPV in OSCC potilailla kuin hallinta perustuu PCR havaitsemiseen eristetyn genomisen DNA suullista moppi ja kudoksiin. (C) Multiplex PCR kaavoja

GSTM1

,

GSTT1

, ja

CYP1A

geenien erotettiin agaroosigeelielektroforeesilla, joka vastaa valvonta (kaista 1-10) ja suusyövän potilaat (kaistat 11-20).

CYP1A1

geeniä käytettiin sisäisenä positiivisena kontrollina. Kaistat 1,4,5,7,10,11,12,13,15,11 ja 18 edustaa läsnäolo sekä

GSTM1

ja

GSTT1

geenejä, ja kaista 2, 6 ja 14 edustaa null genotyyppejä sekä

GSTM1

ja

GSTT1

geenejä. Kaistat 3 ja 20 edustavat läsnäolo

GSTM1

geeni ja nolla genotyyppejä varten

GSTT1

geeni. Kaistat 4, 58, 16 ja 19 edustavat villi läsnäolo

GSTT1

geeni ja nolla genotyyppejä varten

GSTM1

geeni. (D) Pylväsdiagrammi, joka osoittaa jakautuminen

GSTM1

ja

GSTT1

null genotyyppien joukossa OSCC potilaiden ja verrokkien perustuu multiplex PCR havaitsemiseen eristetyn genomisen DNA: suun vanupuikolla ja kudoksia.

Multiplex PCR suoritettiin joukossa kaikki tapaukset ja nolla genotyyppi

GSTT1

tai

GSTM1

tai molempia havaittiin puuttuminen bändin kun havaittiin 1,5% agaroosigeelissä (kuvio 1 C). Havaitsimme

GSTM1

null genotyypin 47.58% (59) tapauksessa ja 26,42% (37) tarkastukset,

GSTT1

null genotyypin 41.12% (51) tapauksessa ja 22,85% (32) valvonta, molemmat

GSTT1

ja

GSTM1

null genotyypit olivat 28,22% (35) tapausta ja 5% (7) ohjaa vastaavasti (kuvio 1 D).

GSTM1

null genotyyppi on lisääntynyt suusyövän riskiä 2,52 kertainen (95% CI, 1,50-4,22;

P

= 0,0003) kuin nolla genotyypit tämän luokan geenin on yhdistetty numero syövistä, mikä johtuu todennäköisesti lisääntynyt alttius ympäristömyrkkyjen ja karsinogeenien, kun taas riski yhdistys

GSTT1

null genotyypin kanssa OSCC todettu olevan tilastollisesti merkitsevä (OR, 2,35; 95% CI, 1,38-4,01;

P

= 0,001) (taulukko 2). Edelleen riski kasvaa 7,7-kertainen OSCC sekä

GSTM1-GSTT1

null genotyyppien (95% CI, 3,17-18,67;

P

0,0001).

käyttämällä kvantitatiivinen PCR-menetelmiä, päätimme suhteellinen pitoisuus mtDNA suhteen

GAPDH

geenin 124 OSCC potilailla, joilla on eri kasvain vaiheessa ja normaalissa suun limakalvon soluista 140 yksilöille tauti (kuvio 2A). Kaiken suhteellinen mediaani mtDNA pitoisuus on huomattavasti alhaisempi tapauksissa (0,22 suhteellinen kappaletta) kuin kontrollit (0,89 suhteellinen kopiota) (

P

0,009). Jakelu mtdna sisällön tapausten ja kontrollien on esitetty kuviossa 2B. OSCC tapaukset alimmassa neljännekseen mtdna kopioluvun kokenut merkittävästi lisääntynyt riski 2,92 kertaiseksi suun syöpä (95% CI, 1,32-6,43) verrattuna korkeimmassa neljänneksessä (taulukko 3). Havaitsimme, että riski OSCC lisääntyi kanssa lakkasi mtdna kopiomäärä (

P

trendi

= 0,003).

(A) kvantitatiivinen PCR D-silmukka-alueen ja

GAPDH

geeni (käyrästä). D-silmukka-alue ja

GAPDH

ovat läsnä geenien löytyy mitokondrioiden ja ydinvoiman genomeja, vastaavasti. Käyttämällä kvantitatiivinen PCR näytteissä potilaasta ja ohjaus suhteellinen mitokondrion sisältö laskettiin. (B) jakauma mtDNA kopioida numeron OSCC ja valvontaa. (C) Mitokondrioiden pitoisuus pienenee kasvaimen vaiheessa: eri vaiheissa OSCC näytteiden vaiheen 0 vaiheeseen IV B suhteen log 2 RQ (log kertainen muutos).

Järjestö välillä mtDNA kopioiden määrä ja OSCC riski oli ilmeistä joukossa tupakan – betel puntaa chewers sijaan tupakan – betel puntaa ei chewers (taulukko 4); vuorovaikutus mtDNA kopiomäärä ja tupakka – betel puntaa oli merkitsevä (

P

= 0,0005). Samanlaisia ​​tuloksia havaittiin, kun tapausten ja kontrollien luokiteltiin tupakan betel puntaa chewers ja ei chewers perustuvat alhainen (≤1) ja korkea ( 1) mtDNA kopiomäärä, tupakka-betel mälli chewers alhaisen mtDNA kopioiden määrä on 3,54-kertainen kohonnut OSCC (95% CI, 1,59-7,87). Lisäksi merkittävä ero löydettiin mtDNA sisältöä tapausten ja kontrollien kanssa tai ilman HPV-infektion (

P

0,001). Samoin löysimme merkittävä ero

GSTM1

ja

GSTT1

null genotyypit kanssa mtDNA sisältöä tapausten ja kontrollien (

P

= 0.04 ja

P =

0,001 vastaavasti).

mtdna sisältö kasvainkudoksissa oli merkitsevästi korkeampi vaiheessa 0 ja 1 kasvaimia kuin IV vaiheessa kasvaimia,

P

0,001. Out of 124 tapausta 18,5% (23) oli vaiheen 0, 25% (31) kasvaimia oli vaiheen I, 27,4% (34) vaiheen III, 29% (36) oli vaiheen IV vastaavasti. Ei ollut näytteitä saatavilla kasvain vaiheessa II. MtDNA sisältö korreloivat kasvaimen vaiheesta, jossa havaittiin, että mtDNA sisältö vähenee kasvu kasvain vaiheessa (

P

0,001) (kuvio 2C).

Keskustelu

tapana purutupakka ja betelquid on endeeminen tapa koko Intian niemimaalle. Betel mälli on yleisesti nimitystä ”paan” Etelä-Aasian maissa. Tärkein aineosien betelpähkinöiden mälli ovat Piper betelpähkinät lehdet ja areca mutteri (siemen arekapalmu kasvi). Se on valmistettu kietomalla hienonnettu areca mutterin Piper betelpähkinöiden lehtiä, ja jotkut kalkki (kalsiumhydroksidin) ja tupakka tai zarda (maustettu tupakka) voidaan sisällyttää maun parantamiseksi; ainesosien yhdistelmien muuttuvat yksilöllisten mieltymysten. Tupakoinnista polttamalla tai pureskeltavaksi ajatellaan olevan merkittävä etiologinen riskitekijöitä kehittämiseen suusyövän ärsytyksen aiheuttamaa joudu suoraan kosketukseen limakalvojen suun.

kohonnut määrä tupakkaan liittyvien OSCC tapauksissa merkittävä huolenaihe Koillis alueella Intiassa. Kaikenlaisen tupakkatuotteiden tuottaa vapaita radikaaleja, jotka heikentävät antioksidantteja ja aiheuttaa hapettumista DNA, proteiinit ja lipidit [42], [43]. Antioksidantit-rikas elintarvikkeita kuten vihreä lehtivihannekset ja hedelmät, jotka saattavat vähentää oksidatiivista stressiä aiheutuu tupakasta [44], [45] ovat yleensä puuttuu ruokavaliosta [46], [47], syyt voivat olla huono sosiaalis -economic kunnossa ja myös tavanomainen käytäntö nautittavaksi.

Tässä tutkimuksessa selvitimme suuren riskin HPV-infektio, joka on tunnettu riippumaton aiheuttava aine suun syövän OSCC potilaille ja merkittävä ero mtDNA sisällön tapauksissa ja valvonta tai ilman HPV-infektion (

P

0,001) saadaan. Ei kuitenkaan raportoitu yhdistyksen HPV-infektion kanssa mtDNA kopiomäärä ovat olemassa, vaikka korrelaatio HPV-infektion kanssa mitokondriaalisen mutaatio ilmoitettiin tutkimuksen kohdunkaulan syövän [48]. Bak-proteiini on proapoptoottisten jäsen, joka paikantuu mitokondrioita, ja toiminnot apoptoosin. Poistaminen Bak-proteiinin HPV

E6

edistää selviytymistä HPV tartunnan saaneiden solujen viivyttämällä apoptoosin helpottaa siten kasvaimen kehitystä vastaavien vaihtelua mtDNA sisältöä, jolle tarkka mekanismi on vielä paljastettu. Olemme raportoivat ensimmäistä kertaa yhdistys HPV-infektion mtDNA sisällön vaihtelu.

Merkittävä ero

GSTT1

ja

GSTM1

null genotyypit kanssa mtDNA sisällön tapauksissa ja tarkastukset (

P

= 0.04 ja

P =

0,001) havaittiin. Läsnäolo Sekä

GSTM1

ja

GSTT1

ovat välttämättömiä detoxication syöpää aiheuttavien yhdistettä. Tärkein riskitekijä suusyövästä tupakointi, tupakka pureskelua ja betel mälli. Samanaikaista käyttöä betel mälli johtaa 50-kertainen reaktiivisia happiradikaaleja syntyy [12]. Lisääntynyt riskitekijä null

GST

kartuttamalla mtDNA mutaatioita entsyymin koska mahdollisesti pelaa sisällä mitokondriaalisen matriisin mtDNA suojakerroin aiheuttamia vahinkoja koskeva reaktiivisia hapen lajeja, jotka puolestaan ​​vaikuttavat mtDNA sisältöön ja voi johtaa syy of OSCC samoin [39]. Liitot GST null genotyyppien ja mtDNA sisältöä ei vielä ole raportoitu.

Alhainen mtDNA kopioida numeron tupakan betel puntaa chewers löytyy meidän tutkimuksessa ovat mukana suuri riski OSCC johtuu vapautumisen huomattavia määriä ROS. [49], jotka puolestaan ​​lisäävät mtDNA mutaation ihmisen suun kudoksiin. Kerääntyminen mtdna poistot ja myöhemmin sytoplasman erottelu näiden mutaatioiden solunjakautumisen aikana voisi olla merkittävimpiä alkuvaiheessa OSCC [50], [51]. Ehtyminen on mtDNA voi olla seurausta tukahduttaminen mitokondrioiden biogeneesin. MtDNA kopioluku syövän todennäköisesti riippuu useista tekijöistä, mukaan lukien mutaation mitokondrion genomissa, mikä käy ilmi D-silmukka-alueen, joka on erittäin altis sivusto hapettumista verrattuna muihin alueisiin mtDNA [52]. Havainnot Tämän tutkimuksen hyvin osoittaa riskiä OSCC ja mtDNA kopioluvun tupakkaan betel puntaa chewers tällä alueella. Emme arvioida syövän kudosnäytteet varten mtDNA määrittämistä ennen hoidon vuoksi sen ei saatavuuteen biorepositary. Siten emme voi määrittää mtDNA muutokset ennen kemoterapiaa. Tämä voi olla rajoitus tämäntyyppisessä tutkimuksessa, vaikka se tarjoaisi meille lisätietoja.

käänteinen korrelaatio mtDNA sisällön korreloivat histopatologisten kasvaimen vaiheen ja havaittu tutkimuksessamme tukivat samanlainen havainto jälkikäsittely syljen huuhtelee pään ja kaulan okasolusyöpä [27]. Kuitenkin lasku mtdna kopioluvun kasvainkudoksissa on raportoitu erilaisia ​​ihmisen syövissä, mukaan lukien HCC [53], [54], rintojen [55], [56], mahan [57], osteosarkooma [58] ja muut syövistä [59], [60]. Mekanismista alhainen mtDNA sisällön lisääntyneeseen kasvaimen kokoa ei ole selvä. Lisäksi todettiin, että vähentynyt mtDNA sisältö voi heikentää oksidatiivisen fosforylaation kapasiteettia, joka puolestaan ​​saattaa suosia nopeamman kasvun tai lisääntynyt invasiivisuus [61]. Yleensä laski mitokondrioiden toimintaa näyttää olevan sopeutumisen hapenpuuteympäristössä kiinteiden kasvainten aikana kehitetty vuodesta alhainen happipitoisuus aloittaa alempi oksidatiivisen stressin hypoksisissa olosuhteissa ja hypoksian indusoima tekijä (HIF) estää mitokondrioiden biogeneesin [62] tai häiritsee mitokondrioita by mitophagy [63 ] .Kun kasvain kasvaa koko ajan, solut ovat yhä hypoksinen, mitokondrioiden biogeneesin on vähentynyt [63]. Vaihtoehtoisesti laskua mtDNA jälkikäsittely voi heijastaa säteilyn vaikutusta, joka vaikuttaa mtDNA sisältöä tai mitokondrioiden määrä soluissa, jotka voivat olla vastuussa vähentämiseksi mtDNA.

Taakka suun sairauksien kuten suun syöpä, parodontiitin, ja hampaiden menetys voidaan pienentää puuttumalla yhteisiä riskitekijöitä, jotka sisältävät välttää tupakointia ja tupakan liittyvien tuotteiden ja myös alkoholin. Lisäksi harjoitellaan hyvä suuhygienia kuten oikea harja ja hammaslankaa päivittäin yhdessä rutiini puhdistus ja tarkastus, jonka hammaslääkäri voi vähentää suun sairaudet. Saanti hedelmiä ja vihanneksia voi myös suojautua suusyövän koska ne sisältävät runsaasti antioksidantteja. HPV on yksi riskitekijä suullinen syöpä ja luotettavin tapa estää tartunnan joko korkean riskin tai alhaisen riskin HPV on välttämällä iho-to-ihon suun kautta, peräaukon tai sukuelinten kosketuksiin toisen henkilön kanssa. Ne, jotka ovat seksuaalisesti aktiivisia, pitkällä aikavälillä aikavälillä molempia osapuolia yksiavioinen suhde tartuntaa kumppani on strategia lienee estää HPV-infektio.

Johtopäätös

Tuloksemme osoittavat, että mtDNA sisältö kasvaimen kudosten muuttuu kasvaimen vaiheen ja tupakka-betel mälli pureskelua tottumuksia. Huomattava poikkeama keskipitkän kantaman on yhteydessä huonoon säilymiseen. Korkea mtDNA sisällön voi osoittaa, että kasvaimia voidaan tehdä nopea kasvaimen kasvua, kun taas alhainen mtDNA sisällön ehdottaa invasiivisia toimien siten biomarkkeri havaitsemista OSCC.

Kiitokset

nöyrä tunnustus menee Department of Biotechnology (DBT), Govt. Intian tarjota infrastruktuuriin liittyvistä tilat (BT /MED /NE-SFC /2009) tutkimusten suorittamisen syövän. Lämmin kiitos kuuluu Cachar Cancer sairaalan ja tutkimuskeskus biorepository, Assam; Agartalata hallituksen Medical College, Lappi ja Naga Hospital Kohima, Nagaland, Silchar Medical College ja sairaala, Assam näytteiden keräämiseen.