PLoS ONE: paljastaminen kohdistu suoraa MiR-19a Mukana Keuhkosyöpä Progression
tiivistelmä
Micro RNA: t (miRNA) säätelemään kohdegeenien posttranscriptionally pariksi epätäydellisesti mRNA on sekvenssispesifisellä tavalla. Noin 30% ihmisen geenejä säädellään miRNA, ja yhden miRNA kykenee vähentämään tuotannon satojen proteiinien avulla epätäydellinen liittäminen, kun miRNA-mRNA: n sitoutumisen. Viime aikoina todisteita siitä miRNA kehittämiseen keuhkosyövässä on syntymässä. Erityisesti, miR-19a, joka on erittäin ilmaistaan pahanlaatuisten keuhko- syöpäsoluja, pidetään avain miRNA kasvaimien synnyn. Kuitenkin sen suora tavoitteet pysyvät underreported. Esillä olevassa tutkimuksessa olemme keskittyneet kuusi mahdollista miR-19a kohdegeenien valitsema miRNA kohde ennusteen ohjelmisto. Arvioida näiden geenien suoraa miR-19a kohdegeenien, teimme lusiferaasi, pull-down, ja western blot määrityksissä. Lusiferaasiaktiivisuus Plasmidien kunkin miR-19a-sitoutumiskohta havaittiin vähenevän, kun taas lisääntynyt lusiferaasiaktiivisuus havaittiin, kun läsnä oli anti-miR-19a lukittu nukleiinihappo (LNA). Avattavasta määritys osoitti biotinyloitua miR-19a sitoutua AGO2 proteiinia ja neljä kuudesta potentiaalisia kohde-mRNA:. Western blot-analyysi osoitti, että ekspressiotasot neljän geenien muuttui riippuen hoidon miR-19a matkivat tai anti-miR-19a-LNA. Lopuksi
FOXP1
,
TP53INP1
,
TNFAIP3
, ja
TUSC2
tunnistettiin miR-19a tavoitteita. Tutkia toiminnon näiden neljän kohdegeenien keuhkosyövän soluja, LK79 (joka on suuri miR-19a ilmaus) ja A549 (joka on huonosti miR-19a ilmaisu) käytettiin. Ekspression neljän kohdeproteiineissa oli korkeampi A549 kuin LK79 soluissa. Neljä miR-19a kohde cDNA ekspressiovektorit tukahdutetaan solujen elinkykyä, pesäkkeiden muodostumista, muuttoliikkeen ja hyökkäys A549 ja LK79 soluja, mutta LK79 transfektoitujen solujen
FOXP1
ja
TP53INP1
cDNA osoittanut mitään eroa kontrolliin verrattuna solujen invaasiomääritys.
Citation: Yamamoto K, Ito S, Hanafusa H, Shimizu K, Ouchida M (2015) paljastaminen kohdistu suoraa MiR-19a Mukana Keuhkosyöpä Progression. PLoS ONE 10 (9): e0137887. doi: 10,1371 /journal.pone.0137887
Editor: Partha Mukhopadhyay, National Institutes of Health, Yhdysvallat