Krooninen sairaus

tiivistelmä

Tarkoitus

PEGyloidun liposomit ovat tärkeä lääke kantajia, jotka voivat passiivisesti kohdistaa kasvain tehostetun läpäisevyyttä ja säilyttäminen (EPR) vaikutus neoplasmassa vaurioita. Tämä tutkimus osoitti, että kasvaintaakkaa määrittää kasvaimeen ja myös kasvaimen vaste, syövän hoito PEGyloitu liposomaalisen huumeita on C26 /tk-luc paksusuolen syöpä-laakeri hiirimallissa.

Methods

Tyhjä PEGyloidun liposomeja (Nanox) ja ne kapseloidaan VNB (NanoVNB) leimattiin in-111 saamiseksi InNanoX ja InVNBL korkealla leimaussaanto ja radiokemiallinen puhtaus (kaikki 90%). BALB /c-hiirillä joko pieniä (58,4 ± 8,0 mm

3) tai suuri (102,4 ± 22,0 mm

3) C26 /tk-luc kasvaimia oikeaan selkä kylki oli laskimoon NanoVNB, InNanoX, InVNBL, tai Nanox kontrollina, joka 7 päivä 3 kertaa. Terapeuttinen tehokkuus arvioitiin laihtuminen, kasvaimen kasvun estäminen (käyttäen jarrusatulat ja bioluminesenssi kuvantaminen) ja hengissäsäilymisosuus. Isotooppikuvantamisessa kasvain hiiren tehtiin aikana ja sen jälkeen.

Tulokset

biologisen jakautumisen tutkiminen InVNBL paljasti selvän käänteinen korrelaatio (

r

2 = 0,9336 ) välinen kasvaimeen ja kasvaimen massan vaihteli 27,6-623,9 mg. Kaikki kolme liposomaalinen lääkkeitä osoitti parempaa terapeuttista tehoa pienessä kasvain hiirillä kuin suuren kasvain hiirillä. Kasvain hoidettujen hiirien InVNBL (yhdistelmä lääke) osoittivat korkeimmat kasvaimen kasvun esto ja hengissäsäilymisosuus verrattuna käsiteltiin NanoVNB (chemodrug vain) ja InNanoX (radionuklidien vain). Erityiset kasvain kohdistaminen ja lisäsi merkittävästi kasvaimeen jälkeen määräajoin hoidon InVNBL osoituksena isotooppikuvantamiseen erityisesti hiirillä pieniä kasvaimia.

Johtopäätös

merkittäviä eroja tuloksia syövän hoidossa ja molekyylitason kuvantamisen välillä sisältämiin eläimiin pienten ja suurten kasvainten paljasti, että kasvain taakka on kriittinen ja syrjiviä tekijä syövän hoidossa käyttäen PEGyloitu liposomaalinen huumeita.

Citation: Lin YY, Kao HW, Li JJ, Hwang JJ, Tseng YL, Lin WJ, et ai. (2013) kasvaintaakkaa neuvottelut Syövän hoito pegyloidulla Liposomal Drugs. PLoS ONE 8 (5): e63078. doi: 10,1371 /journal.pone.0063078

Editor: Chin-Tu Chen, The University of Chicago, Yhdysvallat

vastaanotettu: 25 tammikuu 2013; Hyväksytty: 28 maaliskuu 2013; Julkaistu: May 10, 2013

Copyright: © 2013 Lin et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat avustuksia National Health Research Institutes (Miaoli, Taiwan, ROC) (97A1-NMPP01-007) ja Department of Health, Taipei kaupunginhallitus (99001-62-034 ja 10001-62-013). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Yun-Long Tseng työskentelee Taiwan Liposome Company, jonka yhtiö myös Nanox ja NanoVNB tätä tutkimusta varten. Nanox ja NanoVNB ovat tuotteita Taiwanin Liposome Company. Ei ole muita patentteja, tuotteiden kehittämiseen tai kaupan tuotteiden julistaa. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja.

Johdanto

Perinteiset syöpälääkkeiden näytteillä monia haitallisia vaikutuksia, jotka johtuvat systeemisestä myrkyllisyydestä tai epäspesifinen kertyminen normaalit kudokset. Lipid-nanohiukkasia on laajalti käytetty lääkeaineen aineina pienimolekyylisiä syöpälääkkeiden parantaa farmakokineettisen profiilin ja terapeuttinen teho [1]. Liposomit ovat itsestään kokoonpano kolloidisia partikkeleita muodostuu lipidikaksoiskerroskalvoja että liittää pieni tilavuus vesipitoisessa väliaineessa lääkkeen kapselointi [2]. Kehittäminen Pintamukaeltujen liposomien viime vuosikymmenen aikana on uudestaan ​​kiinnostunut kliininen käyttö syövän hoitoon. Päällystämällä liposomeja hydrofiiliset polymeerit, kuten polyetyleeniglykoli (PEG) antaa heille muoto steerisen esteen vuorovaikutus plasman proteiineihin, kuten opsoniineina ja lipoproteiinien [3]. Sisällyttäminen PEG-johdettua lipidien liposomeihin estää myös liposomiin-indusoitua komplementtiaktivaatiota [4] ja pakenee pyydystäminen mononukleaarisessa fagosyyttijärjestelmässä [5]. Niinpä PEGyloitu liposomit pysyvät verenkierrossa pitkiä aikoja, mikä antavat ansaan aineiden farmakokineettinen profiili lipidikantaja- pikemminkin kuin vapaa huumeiden [6].

PEGyloidun liposomit voivat kuljettaa lääkkeitä ja tarjota passiivista kohdistaminen kasvaimiin vahvistetulla läpäisevyyttä ja säilyttäminen (EPR) vaikutus läpi vuotava vasculatures kasvaimen [1], [7]. Kuitenkin jotkut fysiologiset esteet rajoitettu toimituksen makromolekyylien kasvaimen, kuten heterogeeninen veren virtausta, esiin kasvaimen nesteen välinen paine, ja suuri kuljetusmatkojen kasvaimen interstitium [8]. Beaney

et al.

Osoitti, että kasvaimen verisuonten tilavuus kasvaa alkuvaiheessa kasvaimen kehitystä, kun taas pienenee kasvain kasvaa [9]. Nekroottinen alueet tulevat laajentamalla ja keskimääräinen veren virtausnopeus on laskenut suuressa kasvain. Kohotettu interstitiaalinen nesteen paine on suuri kasvaimen vähensi myös transvaskulaarisen toimitus makromolekyylien [10]. Nämä vaikutukset voivat vähentää osaltaan liposomien ekstravasaation ja heikentää terapeuttinen teho on suuri kasvain.

vinorelbiini (VNB) on puolisynteettinen alkaloidi (5′-nor-anhydro-vinblastiini), joka eroaa muista by substituution catharantine osan molekyyliin [11]. Vinka-alkaloidien tiedetään estävän solujen lisääntymisen kautta keskeytyminen mikrotubuluksia palautuvia sitovia tubuliiniin, mikä johtaa sukkularihmaston liukeneminen ja metafaasissa pidätetty jakamalla soluissa [12]. VNB on suotuisa toksisuusprofiili ja aktiivisuus monenlaisia ​​ihmisen maligniteettien, mukaan lukien ei-pienisoluinen keuhkosyöpä, rintasyöpä, munasarjasyöpä, ja ruokatorven okasolusyöpä [13], [14], [15]. In-111, radionuklidi yleisesti käytetty isotooppikuvantamiseen (t

1/2 2,81 päivää, 172 ja 247 keV fotonien emission), voi lähettää keskimäärin 14,7 Auger elektronit kohti rappeutuminen [16]. Auger elektronit-emittoivat radionuklidit ovat erittäin myrkyllisiä soluille, kun sisäistää sytoplasmaan, varsinkin jos sisällytetty DNA, voi aiheuttaa kromosomivauriosta ja on ehdotettu kasvainten vastaisina aineina [17], [18], [19], [20].

tässä tutkimuksessa pyrimme arvioimaan vaikutuksen kasvaimen kokoa terapeuttista tehoa, kun käsitellään

111In radionuklidi ja /tai VNB chemodrug kapseloitu PEGyloitu liposomeja C26 /tk-luc paksusuolen karsinooma-laakeri hiirimallissa. Kasvain otto post laskimoon annetun InVNBL hiirissä, jotka kantoivat erikokoisia kasvaimet tutkittiin. Nanox (PEGyloidun liposomeja ajoneuvon kontrollina) ja kolmenlaisia ​​liposomaalisen huumeita, NanoVNB (Nanox kapseloidaan VNB kemoterapiaan), InNanoX (Nanox sisältävän In-111 isotooppihoidon) ja InVNBL (Nanox kuljettavat sekä VNB ja In-111 yhdistelmä hoito), käytettiin hoitamaan hiiriä, jotka otetaan erikokoisia C26 /tk-luc paksusuolen syöpä. Vaikutus kasvaimen taakan kasvaimen hoidon eri liposomaalisen huumeita tutkittiin. Isotooppikuvantamisessa hiirissä käsitelty InNanoX ja InVNBL tehtiin myös aikana hoidon.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics selvitys eläimen työn

Eläinten Tutkimus oli toteutetaan noudattaen täysin suosituksia opas hoito ja käyttö Laboratory Animals National Laboratory Animal Centerissä. Protokolla hyväksyi Institutional Animal Care ja käyttö komitea National Yang-Ming University, Taiwan. (Lupa-numero: 980818 ja 991208). Kuvantamisen tutkimukset tehtiin alle 1-3% isofluraanianestesiassa. Kaikki eläimet lopetettiin hiilidioksidilla narkoosi, ja yritettiin minimoida kärsimyksen.

Materiaalit

Soluviljely materiaalit saatiin GIBCO BRL (Grand Island, NY, USA). Poly-Prep® kromatografiakolonniin (40 x 8 mm) ja puhdistamalla geelillä ostettiin Bio-Rad (Hercules, CA, USA) ja Sephadex ™ G-50 Fine geeli hankittiin Amersham Biosciences (Pittsburgh, PA, USA). 8-hydroksikinoliini (oksiini) ostettiin Sigma-Aldrich Corporation (St. Louis, MO, USA). Ei-kantaja-lisättyä

111InCl

3 (0,05 M HCl, 37-370 MBq) saatiin Institute of Nuclear Energy Research (Taoyuan, Taiwan). Kaikki muut kemikaalit hankittiin Merck (Whitehouse Station, NJ, USA).

Solun viiva ja kasvain hiirimallissa

C26 /tk-luc hiiren koolonkarsinooma vakaa solulinja oli lahja professori Hwang. Todettiin, ja sitä käytettiin kuten on kuvattu edellisessä julkaisuissa [19], [21] ja pidettiin RPMI 1640, johon oli lisätty 10% naudan sikiön seerumia. BALB /c-hiiriä (5- 6-viikon ikäiset) hankittiin National Laboratory Animal Center (Taipei, Taiwan). Hiiret inokuloitiin subkutaanisesti 2 x 10

5/100 ui C26 /tk-luc solujen oikeaan selkä kylki. Tuumorin koko arvioitiin perustuu kaavaan: (pituus x leveys

2) /2. Kolme hiiriin istutettiin välein 2 päivää kasvaa C26 /tk-luc karsinooma eri kokoa (

n

= 12, tuumorin tilavuus kattaa erilaisia ​​27,6-623,9 mm

3) varten, jossa arvioitiin kasvain taakka InVNBL ottoa. Muut hiiret inokulaation jälkeen 12 ja 14 päivää (kasvaimen koko oli 58,4 ± 8,0 mm

3 ja 102,4 ± 22,0 mm

3) olivat valmiita käytettäväksi terapeuttisen tehon tutkimuksiin.

valmistaminen liposomaalisen huumeiden Nanox, NanoVNB, InNanoX ja InVNBL

PEGyloidun liposomit, Nanox, koostuivat distearoyylifosfatidyylikoliini (DSPC), kolesterolia, ja polyetyleeniglykoli-distearoyylifosfatidyylietanoliamiini (PEG-DSPE) (moolisuhde, 3:2:0.045). Nanox Sitten kapseloidaan VNB (350 ug VNB /umol fosfolipidi) tuottaa NanoVNB. Sekä Nanox ja NanoVNB saatiin Taiwan Liposome Company (Taipei, Taiwan). Nanox ja NanoVNB leimattiin

111In-oksiinia varaa InNanoX ja InVNBL. Merkinnöissä menetelmää yksityiskohtaisesti edellisessä raportissa [22]. Lyhyesti,

111In-oksiini liuotettiin 20 ul: aan etanolia ja lisättiin 80 ui tislattua vettä, ja inkuboitiin sitten 2 ml: lla Nanox /NanoVNB 30 minuutin ajan 37 ° C: ssa, jolloin saatiin InNanoX ja InVNBL. Fosfolipidikonsentraatio Kaikkien näiden liposomaalisen lääkkeet oli 5,90 umol /ml.

Laadunvalvonta

111In-leimatun liposomaalisen lääkkeiden InNanoX ja InVNBL

loukkuun In-111 sisällä Nanox /NanoVNB analysoitiin lataamalla noin 100 ui

111In-leimatun tuotteen pylvääseen, joka sisälsi Sephadex ™ G-50 Fine geeli ja eluoimalla normaalilla suolaliuoksella. Merkinnöissä tehokkuus määritettiin jakamalla radioaktiivisuuden PEGyloitu liposomeihin jakeet erottamisen jälkeen kanssa radioaktiivisuuden kokonaismäärästä ennen erottamista. Partikkelikoko Nanox /NanoVNB ja InNanoX /InVNBL määritettiin käyttämällä Zetasizer Nano ZS (Malvern, Worcestershire, UK).

vaikutus kasvaimen taakkaa InVNBL sisäänottoa biojakaantumi- tutkimuksessa

Hiiret eri kasvaimen kokoa (

n

= 12) olivat laskimoon (iv) ruiskutettiin 3,7 MBq /100 ui InVNBL ja sitten lopetettiin 48 tuntia injektion jälkeen CO

2 tukehtumisen. Tuumorit leikattiin irti ja punnittiin. Radioaktiivisuus Kasvainten mitattiin Wallac 1470 Wizard Gamma laskuri (GMI, Inc., Ramsey, Minnesota, USA). Data ilmaistiin prosentteina injektoidusta annoksesta grammaa kohden kasvainta (% ID /g), ja suhde InVNBL otto ja kasvaimen taakkaa tutkittiin.

hoito-protokollaa ja terapeuttinen teho arviointi liposomaalisen lääkkeiden kasvain hiiret

liposomaalinen lääkkeet hoito aloitettiin, kun kasvaimen taakkaa hiirten saavutti 58,4 ± 8,0 mm

3 (pieni-kasvain ryhmä) ja 102,4 ± 22,0 mm

3 (iso-kasvain ryhmä), vastaavasti. Kaikki käsittelyt tehtiin päivänä 0, 7 ja 14 (yhteensä 3 annosta) laskimonsisäisenä injektiona. Neljä pientä kasvaimen ryhmät (

n

= 6 kussakin ryhmässä) ja neljä suurta kasvain ryhmät (

n

= 9 kussakin ryhmässä) ja hiiriä käsiteltiin NanoVNB (3 mg VNB /kg), InNanoX (In-111, 37 MBq), InVNBL (3 mg VNB /kg kehon painoa, In-111, 37 MBq) ja Nanox (kontrollina), vastaavasti [18], [19]. Terapeuttinen tehokkuus arvioitiin perustuen kehon painon, tuumorin kasvun estäminen (määritetään käyttämällä jarrusatulat ja bioluminesenssi kuvantaminen, ilmiö fotonivuon bioluminenssin kuvantamisen kehittämisessä kasvaimet liittyi kasvaimen koon [19]) ja hengissäsäilymisosuus. Tuumorin koko mitattiin kolme kertaa viikossa dokumentoida kasvaimen kasvua. Kasvainten koot ilmoitetaan keskiarvona ± SEM. Keskimääräinen kasvaimen kasvun esto (MGI) [19], [23], [24] on laskettu seuraavan kaavan mukaisesti: tehostaminen terapeuttinen teho, kun yhdistetään lääkkeet hoidon arvioitiin käyttämällä yhdistelmä-indeksi (CI) [23], [25]: CI = odotettavissa kasvaimen kasvun esto /havaittu keskimääräinen kasvaimen kasvun esto; odotettavissa kasvaimen kasvun esto yhdistetyn lääkehoidon = kasvaimen kasvun estäminen lääkeaineen ainoastaan ​​A × keskimääräinen kasvaimen kasvun estäminen lääkeaineen B vain. Tässä tutkimuksessa lääke A on NanoVNB ja lääke B on InNanoX. Yhdistelmä on suurempi kuin 1 osoittaa synergististä vaikutusta, kun taas alle 1 osoittaa alle additiivinen vaikutus. MGI ja CI määritettiin 25 päivän kuluttua hoidon aloittamisesta. Hengissäsäilymisosuus hiirien ja johdettujen keskimääräinen eloonjääminen (MST) ja mediaani eloonjäämisaika [26] kirjattiin. Hiiret lopetettiin kun kasvaimen taakka oli suurempi kuin 2500 mm

3. Koe lopetettiin 50 päivää hoidon aloittamisen jälkeen.

Bioluminescence kuvantaminen (BLI) B

bioluminenssi kuvantaminen kasvainta kantavien hiirten tehtiin nimetyt ajankohtina (päivä 0, 4, 7 , 11, 14 ja 25, Fig. 1) napaan hoidon aloittamisesta. Hiiriin intraperitoneaalisesti 150 mg /kg d-lusiferiini 15 minuuttia ennen kuvan hankkimista. Hiiret nukutettiin 1-3% isofluraanilla (Abbott Laboratories, Queenborough, Kent, Englanti) ja siirrettiin lämmitettyä vaiheeseen kammiossa ja jatkuva altistuminen 1-3% isofluraania kestävän sedaation aikana kuvantaminen. Fotonit lähtevä hiiristä (sijoitettu altis)

in vivo

hankittiin 1 min käyttäen IVIS50 Imaging System (Xenogen, Alameda, USA). Alueet etujen (ROI) peräisin näytettyjen kuvien vedettiin ympärille kasvain ja määrällisesti fotonit /sekunti (ph /s) käyttäen Living Image ohjelmisto (Xenogen).

Hiiriä käsiteltiin liposomaalisen lääkkeiden (NanoVNB, InNanoX , InVNBL ja Nanox kontrollina) päivänä 0, 7 ja 14. isotooppikuvantamiseen C26 /tk-luc paksusuolikarsinooma kantavien hiirten käsiteltiin InVNBL suoritettiin päivänä 2, 9, 16 ja 22. Bioluminascence kuvantaminen suoritettiin Day 0, 4, 7, 11, 14 ja 25.

isotooppikuvantamiseen

isotooppikuvantamiseen kasvainta kantavien hiirten suoritettiin 48 h kunkin hoidon jälkeen (päivä 2, 9 ja 16, Fig. 1) ja 8 vuorokauden kuluttua kolmannesta hoitoa. Hiiret käsiteltiin 37 MBq (1,0 mCi) ja InVNBL /InNanoX häntälaskimon kautta nukutettiin 1-3% isofluraania käyttäen höyrystimen järjestelmän (A.M. Bickford, Wales Center, NY, USA). Dual head gamma kamera (E. Cam Useista Sydän, Siemens, Munich, Saksa) varustettu 4 mm pinhole kollimaattori ICON P tietokonejärjestelmä (Siemens, Munich, Saksa) käytettiin isotooppikuvantamisessa. Hiiret pantiin altis sängyllä. Kuvat hankittiin 256 × 256 matriisi 20 minuuttia, ROI vedettiin yli kasvain alueelle ja samalla alueella kopioitiin contralateral lihas. Kasvain-to-lihas suhde (T /M) laskettiin perusteella laskee pikseliä kohti alueilla etuja.

Tilastollinen

Opiskelijan t-testiä käytettiin ryhmää vertailuja. Arvot

p

0,05 pidettiin merkittävinä.

Tulokset

valmistelu ja laadunvalvonta InNanoX ja InVNBL

leimaussaanto ja radiokemiallinen puhtaus ja InNanoX ja InVNBL olivat kaikki yli 90%. Radiokemiallinen puhtaus InNanoX ja InVNBL 37 ° C: ssa inkuboinnin jälkeen hiiren plasmassa oli 91,8 ± 3,6% ja 92,1 ± 2,5%: iin 24 tunnin, 85,6 ± 4,2% ja 84,8 ± 5,1% 72 h (

n

= 3), vastaavasti, osoittivat korkea

in vitro

vakauden näistä liposomaalisen huumeita. Partikkelikoko InNanoX ja InVNBL oli 98 ± 5,6 nm, ja 100 ± 5,3 nm, kun

111In-oksiini merkintöjä, vastaavasti, samanlainen kuin Nanox ja NanoVNB (96 ± 3,3 nm, ja 98 ± 7,9 nm).

vaikutus kasvaimen taakkaa InVNBL sisäänottoa biojakaantumi- tutkimuksessa

oli selvä käänteinen korrelaatio kasvain ottoa InVNBL ja kasvaimen massan, jolla on määritelty kerroin

r

2 = 0,9336 (Fig. 2). Kasvain otto InVNBL laski eksponentiaalisesti 85-10% ID /g, kun kasvain massa nousi 30-650 mg. Ei ole merkittävää eroa normaaliin elimissä sisäänottokyvyt of InVNBL ei havaittu hiirillä eri kokoinen kasvaimia. Jakelu InVNBL erilaisissa kudoksissa C26 /tk-luc on kasvain lähettää suonensisäinen injektio (infektion jälkeen) on eritelty edellisessä tutkimuksessa [19]. Kasvain otto InVNBL pidetään yhä till 48 h infektoinnin jälkeen sekä kasvava kasvain-to-verta suhde, ja sitten laski asteittain. Kriittinen elimet olivat runsaasti reticularendothelial järjestelmässä, esim. maksassa, pernassa ja ohutsuolessa.

Terapeuttinen tehokkuus arviointi liposomaalisen lääkkeiden kasvainta kantavien hiirten

NanoVNB, InNanoX, InVNBL ja Nanox (kontrollina) oli yksittäin annettiin hännän suonet kasvainta kantavien hiirten päivänä 0, 7 ja 14, kun kasvaimen koko saavutti 58,4 ± 8,0 mm

3 (pieniä kasvaimia vastaan) ja 102,4 ± 22,0 mm

3 (iso-kasvain ryhmiä). Molemmissa pienen kasvain ja suuret-kasvain ryhmien maksimaalinen kehon painonpudotus havaittiin InVNBL saaneilla hiirillä 25 päivän kuluttua 1

st hoitoon (Fig. 3). Suuren kasvain ryhmä, keskimääräinen kehon painon menetys InVNBL-käsitellyillä hiirillä oli 10,6%, kun taas, että InNanoX- ja NanoVNB-käsitellyillä hiirillä oli vain 1,1 ja 1,7%. Pienissä-kasvain ryhmä, InVNBL-hoidetut hiiret menettivät 10,1% painon, kun taas käsitelty InNanoX ja NanoVNB sai keskimäärin 6,6 ja 11,4% painon. Kehon painon muutokset meidän hoidossa tutkimukset olivat merkitsevästi vähemmän kuin 20%, täyttää yleiset vaatimukset lääkeaineen hoito-protokollaa [18].

hiirillä suuri kasvain (

n

= 9 kussakin ryhmässä, A) ja ne, joissa pieni kasvain (

n

= 6 kussakin ryhmässä, B) injektoitiin suonensisäisesti Nanox (•), InNanoX (▽), NanoVNB (▪) tai InVNBL (◊) at 0, 7, ja 14 päivän kuluttua ensimmäisestä injektiosta (nuoli, kolme injektiota yhteensä). Nolla ajankohta ilmaisee hoidon aloittamista. Tiedot ilmaistiin keskiarvona ± SEM

Kasvaimen kasvu seurattiin jarrusatulat mittaamalla (kolmesti viikossa) ja bioluminesenssi kuvantaminen (vain suuren kasvaimen ryhmät) nimetyissä ajankohtina till päivä 25 jälkeen 1

st hoitoa. Sillä hiirillä, joilla oli suuria kasvaimia (Fig. 4A), yhdistelmähoitona (InVNBL) saavutti suurimman kasvaimen kasvun esto (kasvaimen koko = 1102 ± 213,1 mm

3

p

0,01), minkä jälkeen kemoterapia (NanoVNB, kasvaimen koko = 1835 ± 432,0 mm

3

p

0,05), ja sen jälkeen isotooppihoidon (InNanoX, kasvaimen koko = 2312 ± 366,9 mm

3

p

0,05) verrattuna kontrolliryhmän (Nanox, kasvaimen koko = 2996 ± 370,6 mm

3) 25 päivän kuluttua 1

st hoitoa. Keskimääräinen kasvaimen kasvun esto (MGI) ja InVNBL-, NanoVNB- ja InNanoX-käsitellyillä hiirillä oli 0,356, 0,604 ja 0,762, vastaavasti (taulukko 1). Sillä hiirillä, joilla on pieni kasvain (Fig. 4B), merkittävin tuumorin kasvun suppressio havaittiin yhdistelmähoidon (InVNBL, kasvaimen koko = 80,4 ± 9,58 mm

3

p

0,01) , jonka jälkeen kemoterapiaa (NanoVNB, kasvaimen koko = 138 ± 33,9 mm

3

p

0,01) ja sitten isotooppihoidon (InNanoX, kasvaimen koko = 304 ± 39,6 mm

3

p

0,01) verrattuna kontrolliryhmän (Nanox, kasvaimen koko = 3235 ± 411,2 mm

3) 25 päivän kuluttua 1

st hoitoa. Keskimääräinen kasvaimen kasvun esto (MGI) ja InVNBL-, NanoVNB- ja InNanoX-käsitellyssä ryhmässä oli 0,007, 0,031 ja 0,076, vastaavasti (taulukko 1). Verrattiin suuren kasvain ryhmä, hiiret pienten kasvainten ryhmä näytetään merkittävästi parempi kasvaimen kasvun inhibition hoidon jälkeen InVNBL, NanoVNB ja InNanoX (

p

= 0,001, 0,008 ja 0,001, vastaavasti). Synergististä kasvaimen kasvun inhibition vaikutus osoitettiin yhdistelmähoidon (InVNBL) hiirillä, joilla oli suuria kasvaimia (CI = 1,29, taulukko 1). Sillä hiirillä pieniä kasvaimia, vaikka ne hoidettiin radionuklidin-alone tai chemodrug-alone liposomaalisen lääkkeitä osoitti huomattavaa kasvaimen kasvun estäminen, synergistinen vaikutus ei voitu havaita yhdistelmähoitoa.

hiirillä suuri kasvain (

n

= 9 kullekin ryhmälle, kasvaimen tilavuus 102.4 ± 22,0 mm

3 A) ja ne, joissa pieni kasvain (

n

= 6 kussakin ryhmässä kasvaimen tilavuus 58,4 ± 8,0 mm: n

3, B) injektoitiin suonensisäisesti Nanox (•), InNanoX (▽), NanoVNB (▪) tai InVNBL (◊) 0, 7, ja 14 päivän kuluttua ensimmäisestä injektiosta (nuoli, kolme injektiota yhteensä). Nolla ajankohta ilmaisee hoidon aloittamista. Points, kasvaimen kokoa; baareja, S.E.M.

hengissäsäilymisosuudet käsiteltyjen hiirten eri PEGyloidun liposomaalisen lääkkeet esitetty kuvassa. 5. hiirillä pieni kasvain elivät pidempään kuin ne otetaan suuri kasvain kaikenlaisia ​​hoito-. Sopusoinnussa havaitut tulokset kasvaimen kasvun inhibition tutkimuksessa InVNBL-käsitellyistä hiiristä omistama korkein hengissäsäilymisosuus verrattuna käsiteltiin NanoVNB tai InNanoX suuri kasvaimen ryhmiä. Keskimääräinen elinaika (MST) ja mediaani elinaika lääkehoitoa saaneen hiiriä tiivistetysti taulukossa 2. suuren kasvain ryhmä, MST saaneista InVNBL (44,6 ± 5,00 päivää,

p

0,05) ja InNanoX (30,9 ± 3,21 päivää,

p

0,05) on merkittävästi pidempi verrattuna verrokkihiiriin ( Nanox, 21,6 ± 2,08 päivää). Pienille-kasvain ryhmä, hiirten MST käsitelty eri järjestelmien (InVNBL, NanoVNB ja InNanoX) olivat kaikki 50 päivää (loppuun selviytymisen tutkimus) paitsi kontrolliryhmässä (Nanox, 25,5 ± 2,33 päivää). Tulokset osoittivat selvästi, että kasvain taakka on kriittinen syövän hoidossa, kun niitä käsitellään PEGyloitu liposomaalisen huumeita.

hiirillä suuri kasvain (

n

= 9 kullekin ryhmälle, A) ja ne, joissa pieni kasvain (

n

= 6 kussakin ryhmässä, B) injektoitiin suonensisäisesti Nanox (•), InNanoX (▽), NanoVNB (▪) tai InVNBL (◊) 0, 7 ja 14 päivää sen jälkeen, kun ensimmäinen injektio (nuoli, kolme injektiota yhteensä). Hiiret lopetettiin kun kasvaimen tilavuus on yli 2500 mm

3.

Seuranta kasvaimen kasvua bioluminenssina kuvantaminen (BLI) B

kasvaimen kasvua suuren kasvain- kantavien hiirten jälkeen -liposomilääkeaineen hoidon peräkkäin seurattiin BLI ajaksi 25 päivän jälkeen hoidon aloittamista (Fig. 6). Fotonivuon kasvaimen ROI peräisin bioluminenssin kuvia hiirten kaikki kasvoi ensimmäisten 4 päivää lähettää 1

st hoidon, joka vastaa kasvaimen lisääntyvän taakan hiirten neljässä hoitoryhmässä (Fig. 4A). Myöhemmin aikana hoidon till päivä 25, lisäys kasvaimen fotonivuon in InVNBL saaneilla hiirillä tuli huomattavasti vähemmän verrattuna hoidettiin NanoVNB ja InNanoX, kun taas kontrolliryhmän hiirten kasvoi nopeasti vastauksena nopeasti kasvava kasvaimia. Tulokset BLI paljasti dramaattinen kasvaimen kasvun inhibitio hiirissä, käsiteltiin InVNBL.

suuri kasvaimen hiiret, jotka saivat erilaisia ​​liposomaalinen lääkkeet intraperitoneaalisesti 150 mg /kg d-lusiferiini 15 minuuttia ennen kuvan hankinnan, nimetyt ajankohtina. Fotonit lähtevä hiiristä (sijoitettu altis) hankittiin 1 minuutti. Hiiret nukutettiin 1~3% isofluraania samalla kun se käy kuvantaminen.

isotooppikuvantamiseen

Koko kehon isotooppikuvantamiseen suoritettiin 2 vuorokautta kerta hoidon ja 8 päivän kuluttua kolmas injektio hiirillä, jotka hoidettiin

111In sisältäviä liposomaalisen lääkkeitä, InNanoX ja InVNBL (Fig. 7). Merkittävät radioaktiivisuus kerääntymistä kasvaimen ja maksassa havaittiin. Kasvain kertymistä kasvoi edelleen kunkin hoidon jälkeen (yksi injektio viikossa, yhteensä kolme annosta; taulukko 3). Spesifinen kasvaimeen (ilmaistuna pulsseina /pikseli) oli 28,00 ± 4,75, 47,18 ± 3,68 ja 54,54 ± 12,23 varten InNanoX saaneilla hiirillä; 34,20 ± 5,05, 55,94 ± 2,89 ja 73,90 ± 15.06 varten InVNBL hoidetuissa hiirissä suurten kasvainten ryhmä 2 vuorokauden kuluttua kunkin hoidon. Pienille-kasvain ryhmä, erityiset kasvain otto ja kasvu lähettää kunkin hoidon olivat jopa suuremmat (taulukko 3). Kasvain-to-lihas suhde (T /M) saavutettiin 5,53 ± 2,44 varten InNanoX saaneilla hiirillä ja 9,60 ± 2,58 varten InVNBL saaneilla hiirillä 3

rd hoito, suurempia kuin suurissa-kasvain ryhmä ( 3,63 ± 1,50 ja 3,93 ± 1,18, vastaavasti).

isotooppikuvantamiseen suoritettiin 20 minuutin ajan 48 tunnin kuluttua lääkkeiden annon (37 MBq /100 ui injektiota kohti) ja 8 päivää viimeisen kuurin . Hiiret nukutettiin 1~3% isofluraania kaikille kuvantamisen. Kasvain kyhmyt on merkitty punaisella nuolilla.

Keskustelu

Tämä tutkimus osoitti passiivinen kohdentamista ja selektiivinen kerääntyminen kasvaimeen injektion jälkeen liposomaalisen huumeiden on C26 /tk-luc kasvain ksenograftimallissa. Käänteinen profiili välinen tiettyjä kasvaimeen ottoa InVNBL ja syöpäkasvain tässä tutkimuksessa havaitut kaikui aiemmissa raporteissa. Harrington

et al.

Ovat raportoineet, että kun kasvaintaakkaa olivat 0,1 g, 0,1-1,0 g ja 1,0 g, erityiset liposomiottoon olivat 15,1 ± 10,8, 5,9 ± 2,2 ja 3,0 ± 1,3% ID /g, vastaavasti [27]. Korkeaa liposomiottoon pienemmissä kasvaimia johtui niiden suhteellisesti suurempi verisuoni volyymit käsittää kehittymätön, vuotavat uudissuonittumisen. Kasvain otto injektion jälkeen muiden makromolekyylikonjugaatteihin, kuten EGF ja VEGF, osoitti myös samansuuntaisesti eri kasvaimen koon [20], [28]. Paitsi kasvain, korkea radioaktiivisuus kertyminen elimissä riched in retikulaarisen endoteelin järjestelmässä, kuten maksan ja pernan, havaittiin (tuloksia ei ole esitetty). Kuitenkin olemme aiemmin osoittaneet, että hallinto InVNBL johtivat hyväksyttävää myrkyllisyyden histopatologisten tutkimusten ja hematologian analyysit [18], [19] eläinkokeissa.

Gutmann

et al.

On raportoitu että pään ja kaulan kasvainten soluvälinesteessä paine kasvoi merkittävästi kasvaimen koon ja oli hyvä korrelaatio kasvaimen [29]. Hilmas

et al.

Osoittivat, että molemmat tarkoittaa verisuonten pinta-ala ja aluksen pituus per mm

3 kasvaimen väheni nopeasti 35-100 mm

3 kasvaimen koon ja nekroottista pinta-ala kasvoi vähemmän kuin 5% kasvaimissa 35 mm

3: sta yli 40% kasvaimista yli 1500 mm

3 [30]. Pienille-kasvain ryhmä (58,4 ± 8,0 mm

3) tässä tutkimuksessa merkittävästi kasvaimen kasvua estyi kaikissa kolmessa hoito-ohjelmissa: yhdistelmä hoito (InVNBL, MGI = 0,007), chemodrug hoito (NanoVNB, MGI = 0,031 ) ja isotooppihoidon (InNanoX, MGI = 0,076). Alempi soluvälinesteestä paine, enemmän mikrovaskulaarisessa ja vähemmän nekroottinen tilavuus pienempi kasvain voi parantaa ekstravasaatio liposomaalisen huumeita, ja siten synergiavaikutuksesta yhdistelmähoitoa ei voida havaita (CI = 0,16). Jotta suuren kasvain ryhmä (102,4 ± 22,0 mm

3), synergistinen kasvaimen kasvun esto osoitettiin yhdistelmähoitona (InVNBL, CI = 1,29). Käsittelemällä

olevaan 111In tai VNB kapseloitu -liposomilääkeaineen johtanut ainoastaan ​​rajoitetusti kasvaimen kasvun estäminen (InNanoX, MGI = 0,762; NanoVNB, MGI = 0,604). Köyhä terapeuttinen teho InNanoX saattaa johtua epätasainen huumeiden levittämiseen suurimmissa kasvain. Lyhyen valikoima Augur elektroneja säteilevä In-111 ei tehokkaasti vaurioittaa kasvainsoluja etäisyyden. Kasvain microenvironment on kasvaimen koon liittyviä, vaikuttaisi kertymistä ja microdistribution PEGyloidun liposomaalisen huumeiden kasvain, ja edistää terapeuttisen tehon. Kaikki, sen jälkeen käsittelemällä kasvaimen kantavien hiirten kanssa NanoVNB, InNanoX ja InVNBL, optimaalinen kasvaimen ohjaus ja korkein eloonjäämisaste saavutettiin yhdistelmähoitoa, jota seuraa kemoterapiaa ja sen jälkeen isotooppihoidon (Fig. 4, 5 ja taulukot 1, 2) .

Yhdistelmä hoito on kehittynyt hoito strategia syövän hoidossa. Oletetaan, että voimme parantaa hoidon tehoa eri hoitomuodot on synergistisiä syöpää ehkäisevistä vaikutuksista, joilla on alentunut toksisuus tai sivuvaikutukset [31]. Strategia yhdistetyn radionuclide- ja Chemo-hoito on saavutettu parempi kasvaimen hoidon tehoa ja pienempi myrkyllisyys normaaleille kudoksille [32]. Viimeaikaiset lähestymistapa käyttää PEGyloidun liposomeja siirtää sekä radionuklidien ja chemodrug [24], [33]. Chen, Behr, Howell ja Mariani

et al.

Ovat osoittaneet, että Auger elektronit-säteilijät (esim In-111 ja I-125), saattaa esiintyä biologiset vaikutukset ja tuumorin vastaista tehokkuutta samanlainen tyypillinen korkea-LET säteilylle, kuten kuten α-aiheuttajia, oletetaan, että Auger elektronit-aiheuttajia ovat sisäistäneet soluihin, tai jopa solutumien [20], [34], [35], [36]. Todellakin, Auger elektroni-päästöjen aiheuttajat rappeutunut naapurustossa DNA tuottavat merkittävän määrän kemiallisesti reaktiivisia radikaalilajien (esim OH ·, H ·, e

–

(aq) jne.), Jotka voivat aiheuttaa DNA double säikeen katkoksia. Edelstein

et al.

Ovat osoittaneet, että vinorelbiinin voi voimistaa antituumorivaikutusta säteilyn ja on solusyklin riippuvainen [37]. Maksimaalinen vaikutus saavutetaan silloin, kun soluja G2 /M-vaiheessa. Terasima ja Sinclair

et al.

Ovat osoittaneet, että soluja myöhään G2 /M-vaiheen ovat enemmän säteilylle kuin muissa vaiheissa [38], [39]. Fukuoka

et al.

Ovat raportoineet, että vinorelbiini, jopa minimaalisesti myrkyllinen pitoisuus, saattaa herkistää ihmisen NSCLC-solujen ulkoisen säteilyn kohtalaisen [40]. Tutkimuksessamme, vinorelbiini, lisäksi sen sytotoksista vaikutusta, voi toimia radioherkistäjä paksusuolen karsinooma kasvainsolujen pidättämällä ne G2 /M-vaiheessa. G2 /M-pidätti kasvainsolujen tulisi herkempiä apoptoosin jonka säteilyä radionuklidi, In-111.

Noninvasiivinen molekyylikuvantaminen kuten positroniemissiotomografia, yhden fotonin emission tietokonetomografiaa, magneettikuvausta ja optisen kuvantamisen on vähitellen laajentunut lääkekehitysyhtiö prekliinisissä tutkimuksissa [41], [42].