Krooninen sairaus

tiivistelmä

Afrikkalainen amerikkalainen potilailla, joilla peräsuolen syöpä näyttää korkeampi kuolleisuus kuin valkoihoinen kollegansa. Biologia saattaisi olla osittainen rooli, ja ennen tutkimusten mukaan korkeampi esiintyvyys mikrosatelliittien epävakaus (MSI) joukossa syöpiä peräisin Afrikkalainen amerikkalaiset, vaikkakin potilaiden MSI syöpiä ovat parantuneet eloonjäämisen yli joilla on ei-MSI syöpien, laskuri tuloksista havaittiin Afrikkalainen amerikkalainen potilailla. CD8

+ T-solujen tunkeutuminen paksusuolen syöpä on postively korreloi MSI kasvaimia, ja se liittyy myös parempi lopputulos. Täällä, käytimme 503-henkilö, väestöpohjaiset paksusuolisyövän kohortti sisältää 45% Afrikkalainen amerikkalaiset määrittää, alle sokaissut olosuhteissa kaikista epidemiologisia tietoja, esiintyvyys MSI ja liittyy CD8

+ T-solujen tunkeutuminen sisällä syövät. Joukossa valkoihoinen syöpiä, 14% oli MSI, kun taas Afrikkalainen amerikkalainen syöpiä osoittanut 7% MSI (

P

= 0,009). Kliinisesti MSI syövät välillä rotujen olivat samankaltaisia; keskuudessa microsatellite vakaa syöpiä, Afrikkalainen amerikkalainen potilaat olivat nuorempia, naisten, ja jossa proksimaalinen syöpiä. CD8

+ T-solut olivat suuremmat MSI syövissä (88,0 vs 30,4 /hpf,

P

0,0001), mutta ei ollut eroa rotujen. Hyödyntämällä tätä väestöpohjainen kohortti, Afrikkalainen amerikkalainen syövät osoittavat puolet MSI esiintyvyys valkoihoiset ilman muutosta CD8

+ T-solujen tunkeutuminen, jotka voivat edistää niiden korkeampi kuolleisuus paksusuolen syöpä.

Citation: Carethers JM, Murali B, Yang B, Doctolero RT, Tajima A, Basa R, et ai. (2014) vaikutus Race microsatellite Epävakaus ja CD8

+ T Cell tunkeutuminen paksusuolen syövän. PLoS ONE 9 (6): e100461. doi: 10,1371 /journal.pone.0100461

Editor: Hassan Brim, Howard University, Yhdysvallat

vastaanotettu: 20 helmikuu 2014; Hyväksytty: 23 toukokuu 2014; Julkaistu: 23 kesäkuu 2014

Copyright: © 2014 Carethers et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus rahoitettiin osittain National Cancer Institute Kattava Kumppanuudet vähentää Cancer Health erot (CPRCHD) myöntää U54CA132384 ja U54CA132379 sekä avustukset R01 DK067287, U01 CA162147, ja P30 DK034987. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

kuolleisuus paksusuolen syöpä on korkeampi Afrikkalainen amerikkalaiset kuin valkoihoisilla jokaisessa vaiheessa taudin [1], [2]. Vaikka kuolleisuus ero voisi olla osittain liittyy kliinisiin hoitoon tai liitännäissairauksia, se voi olla myös osuudet erot sisällä syöpään [3]. Ennen tutkimukset ovat olleet riittämättömiä määrä Afrikkalainen amerikkalaiset riittävästi tutkia rotuerojen kasvaimen ominaisuuksista, jotka voivat vaikuttaa kuolleisuutta [4], [5].

mikrosatelliittien epävakaus (MSI) on geneettinen biomarkkeri hypermutatoitavien paksusuolisyöpien vetämänä inaktivoimalla DNA mismatch korjaus (MMR) -järjestelmä [6], [7]. Sen läsnäolo kuvaa parempaan lopputulokseen potilaille verrattuna samaan lavastettu paksusuolen syöpäpotilaiden ilman MSI [3]. Tämä voi johtua osittain neoantigeenien syntyy mutaation lukukehyksen sisällä koodaavilla alueilla spesifisten geenien seurauksena inaktivaation DNA MMR paksusuolen syövän epiteelisolujen, houkuttelee tiettyjä immuunijärjestelmän soluja, jotka voivat auttaa sisältää kasvain ja rajoittaa etäpesäkkeiden [7], [8]. Erityisesti MSI paksusuolen syövät liittyy lisääntynyt intraepiteliaalisten CD8

+ T-solujen verrattuna microsatellite vakaa (MSS) syövät [8] – [10], ja monet MSI syövät osoittaa ”Crohnin kaltainen” lymfaattisessa ”granuloma” reaktio histologisesti sisällä epiteelin osa adenokarsinooma [7] – [9]. MSI syöpiä muodostavat 15-20% kaikista paksusuolen syövistä, on diploidisoluissa ja ovat kääntäen verrannollisia alleelisille menetys. MSI syövät ovat todennäköisemmin mucinous ominaisuuksia ja huono erilaistumista histologian, ja -70% sijaitsevat proksimaalisesti pernan flexure koolonissa. MSI syövät saattavat edetä nopeammin kuin MSS syöpiä [7], [11], ja voi ajaa sessile sahalaitaiset adenoomia osaksi syöpiä [12], [13]. Lisäksi potilailla, joilla on vaiheen II /III MSI syövät eivät paranna niiden säilymistä 5-fluorourasiilin kemoterapian [14], [15].

Colon syövät päässä Afrikkalainen amerikkalaiset jakaa joitakin kliinisiä ja epidemiologisia ominaisuuksia MSI syöpiä , mutta ei muita. Esimerkiksi Afrikkalainen amerikkalaiset ovat enemmän taipumusta proksimaaliseen paksusuolen syöpiin ja polyypit, että syövän etenemiseen voivat olla nopeampia perustuu nuorempien syövän diagnosointiin [1], [2], [16]. Jotkut raporttien mukaan enemmän mucinous ominaisuuksia anectdotally vuonna Afrikkalainen amerikkalainen koolonsyöpien [1]. Nämä ominaisuudet viittaavat siihen, esiintyvyys MSI olisivat suhteellisesti korkeampi Afrikkalainen amerikkalainen paksusuolen syöpiin. Kääntäen, Afrikkalainen amerikkalaiset ovat yleensä sellaisia ​​pitkälle edennyttä tautia, ja niillä huono 5 vuoden pysyvyys toisin kuin potilailla, joilla on MSI syöpiä [1]. Nämä ominaisuudet viittaavat siihen, MSI olisivat suhteellisesti matalampi Afrikkalainen amerikkalainen paksusuolen syöpiin. Arviointi Afrikkalainen amerikkalainen koolonsyöpien MSI on ollut niukkaa vain kaksi ryhmää julkaistuaan tietoja, yksi esittää MSI taajuus 23% (7 31 näytettä) ja toisessa 48% (10 21 näytettä) keskuudessa Afrikkalainen amerikkalainen syöpiä [ ,,,0],4], [5], mikä viittaa suuremmat keskimääräinen tiheys. Molemmat ryhmät käytössä tallennetaan näytteiden sidoksissa rotuun data; kumpikaan ovat tutkimukset populaatiossa. Esillä olevassa tutkimuksessa käytimme väestöpohjaisen paksusuolisyövän kohortti määrittämiseksi tarkemmin taajuus MSI Afrikkalainen amerikkalainen paksusuolen syöpiin. Tuloksemme osoittavat, että on olemassa puolet taajuus MSI keskuudessa Afrikkalainen amerikkalainen koolonsyöpien verrattuna valkoihoinen paksusuolen syöpiin, mikä viittaa siihen, että kun Afrikkalainen Amerikkalainen on diagnosoitu paksusuolen syöpä, hyöty parantunut eloonjääminen liittyy MSI syöpiin on rajoitetumpi tässä potilasryhmässä.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaat ja näytteet

tiedot kerättiin osana North Carolina Colon Cancer Study (NCCCS), väestöpohjaisen, tapaus-verrokki tutkimuksessa 33 peräkkäisiä maakunnat Keski- ja Itä North Carolina, mukaan lukien sekä maaseudulla että kaupungeissa [17]. Maakunnat valittiin tarjoamaan riittävää edustusta Afrikkalainen amerikkalainen ja maaseudun asukkaat, ja välttää asian tai valinta kuvioita, jotka haittaisivat tapauksessa toteaminen ja /tai noudattamisesta. Institutionaalinen Review Board of University of North Carolina School of Medicine hyväksyi alkuperäisen tutkimussuunnitelman.

Kotelot tunnistettiin välillä 01 lokakuu 1996 ja 01 syyskuu 2000 käyttäen nopean toteamista järjestelmä toteutetaan yhteistyössä Pohjois-Carolina Keski Syöpärekisteri. Hyväksyttävät tapaukset olivat vuotiaita 40 ja 80 v, oli patologisesti vahvistanut invasiivisia adenokarsinooma, ja asunut 33-läänin alueella. Kaikki kelvolliset Afrikkalainen amerikkalainen potilaat kutsuttiin osallistumaan. Satunnaisotannalla valkoihoisiin samankaltaisten ikä (± 5 vuotta) ja sukupuoli vedettiin tarjota yhtä monta Afrikkalainen Amerikan ja valkoihoinen tapauksissa. Ohjaimet alle 65-vuotiaiden samasta 33-läänin alueella valittiin Department of Motor Vehicles rekisterin tietokantaan ja ohjaa 65-vuotiaat valittiin Terveydenhuollon rahoitus Administration tietokantaan.

935 potentiaali paksusuolen syöpätapausta tunnistaa (464 Afrikkalainen amerikkalainen, 471 valkoihoinen), lääkärit evätty pääsy 31 Afrikkalainen amerikkalaiset ja 35 Caucuasians, kontakti oli puutteellinen 29 Afrikkalainen amerikkalaiset ja 29 valkoihoisilla ja 81 Afrikkalainen amerikkalaiset ja 45 valkoihoisten kieltäytyi osallistumasta. Yleinen yhteistyö rate (haastateltiin /haastateltiin + evätty) oli 84%: 79% for Afrikkalainen amerikkalaiset, 89% for valkoihoisilla. Lisäksi 33 potilasta ulkopuolelle, koska laatu haastattelu arvioitiin riittämätön. Näin ollen oli 643 tapauksia: 294 Afrikkalainen amerikkalaiset ja 349 valkoihoisilla. Yleinen yhteistyö korko valvonnan oli 62%: 59% for Afrikkalainen amerikkalaiset ja 65%: n valkoihoiset; 1048 tarkastuksia, 437 Afrikkalainen amerikkalainen ja 611 valkoihoinen osallistujia.

Kotelot ja valvonta valittiin käyttäen satunnaistettua rekrytointi saavuttaa ikä, rotu, ja sukupuolen suhteen optimoitu tilastollisia tehokkuutta. Afrikkalainen amerikkalainen tapausta ylinäytteitetyn saamiseksi 01:01 valkoihoinen: afrikkalainen amerikkalainen suhde, ja kontrollit näytteet vastaamaan jakelun rotu, ikä ja sukupuoli tapauksista.

Tissue kerättiin aikaan kirurgian ja kiinnitettiin formaliiniin. Arkistoitu formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut (FFPE) kudosta säädetty DNA eristys ja immunohistokemia (IHC) tutkimuksissa kuvata tässä. Oli 503 yhteensä tapausten käytettävissä kudosta analyysia tätä tutkimusta varten. University of California San Diego, San Diego State University, ja Michiganin yliopiston Human aiheet valiokunnat hyväksyivät tutkimuksen käyttävät näitä nykyisiä patologiset näytteet.

DNA Extraction ja mikrosatelliittimerkkien Analysis

DNA uutettiin formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut kudokset kunkin potilaan paksusuolen ja peräsuolen kasvaimen ja ympäröivän normaalin kudoksen [14]. Kukin alue microdissected tunnistettiin patologi on viite hematoksyliinillä ja eosiini värjätään dia. Unstained kudos viipaleita vieressä viittaus dia oli microdissected mukaan alueita tunnistettiin viite dia leikkausspaattelia käyttäen terää. Dissekoiduissa Näyte parafiini mikrofuugiputkessa ksyleenillä, ja DNA puhdistettiin etanolilla ja GeneReleaser (BioVentures, Murfeesboro, TN) mukaisesti valmistajan suositusten mukaisesti. Sen jälkeen näytteet käsiteltiin 200 ug /ml proteinaasi K: n (Sigma, St. Louis, MO) ja inkuboitiin 55 ° C: ssa 5 tunnin ajan. Proteinaasi K tuhoutui kuumentamalla näyte 95 ° C: ssa 15 minuuttia, ja näytteet otettiin heti jäässä ja varastoidaan polymeraasiketjureaktion (PCR) analyysi.

määrittämiseksi MSI, käytimme NCI- suositeltava paneeli 5 mikrosatelliittimarkkerin (BAT25, BAT26, D5S346, D2S123, ja D17S250) luokitella kasvain kuin MSI-korkea (liittyy inaktivaatio DNA MMR), ja MSI-Low tai mikrosatelliitti vakaa (MSS), jotka eivät liity DNA MMR inaktivointi. MSI-High määriteltiin vähintään 2 markkereita, jotka osoittavat uusia alleeleja verrattuna ei-kasvainkudoksen, MSI-L kuin 1 merkki romaani alleeli, ja MSS koska mitään markkeri kanssa romaani alleelien. Koska samankaltaisia ​​piirteitä MSI-Low ja MSS kasvaimissa [7], nämä kaksi ryhmää kuuluivat yhteen meidän kohortissa. Yksi pohjamaali kustakin mikrosatelliittimerkki markkeri pari oli radio-pääte- merkittyä kanssa

32P tai fluoresoivasti leimattuja. PCR suoritetaan mikropaloitelluista templaatti-DNA: n reaktiossa, joka sisälsi 0,125 pmol kutakin pääte- merkittyä ja ”kylmä” alukkeita, 0,25 U Taq-DNA-polymeraasia, 40 uM dNTP-kantaliuosta, ja lopullinen pitoisuus 1,5-2,0 uM magnesium. PCR-tuotteet denaturoitiin 95% formamidi, ja elektroforeesi 6% polyakryyliamidigeelillä, joka sisälsi 7,5 M ureaa. Geelit kuivattiin sitten ja altistettiin autoradiografialla ja röntgenfilmiä tai Phosphorimager (Molecular Dynamics, Sunnyvale CA). Vaihtoehtoisesti PCR-reaktioita hyödyntäen fluoresoivasti leimattuja alukkeita lähetettiin suoraan DNA: n sekvensointia.

geneettisiä analyysejä paatuivat ja toteutetaan erikseen ja riippumattomasti epidemiologista tietoa kerätään tutkimuksessa.

Immunohistokemia ja CD8

+ T-solumäärät

Jos haluat suorittaa immunohistokemiallisesti CD8

+ T-solujen formaliinikiinnitetyt, parafinoidut näytteet ensin parafiini ksyleeniin ja nesteytyksestä. Endogeeninen peroksidi aktiivisuus estettiin 3% vetyperoksidia 20 minuuttia. Antigeeni haku suoritettiin mikroaaltouunissa 10 minuutin ajan 10 mM sitraatti (pH = 6,0) ja 0,05% Tween 20. Jäähdytyksen jälkeen, ei-spesifisten proteiinien sitoutuminen blokattiin 1% BSA: ta PBS: ssä, ja hiiren monoklonaalinen anti-ihmis-CD8-vasta-ainetta (DakoCytomation, Clone C8 /144B, Carpinteria, CA), lisättiin yön yli 4 ° C: ssa. Soluja visualisoitiin käyttäen DakoCytomation LSAB2 System-HRP kit, valmistajan ohjeiden suuntiin. Objektilasit vastavärjättiin Mayerin hematoksyliinillä, huuhdeltiin ammoniumhydroksidilla, kuivattiin ja peitettiin. Näytteet analysoitiin sitten valomikroskoopilla.

solumäärien kukin dia arvioitiin alhaisella teholla (50X) aloja, jotka oli korkein pitoisuus värjättyjen solujen. Kolme suuritehoinen kentät (HPF = 100X) valokuvattiin ja intraepiteliaalisten CD8

+ T-solut laskettiin itsenäisesti jokaisessa HPF kaksi tarkkailijaa. Jos laskee pitäneet 10%, kaksi tarkkailijaa arvioi valokuvan yhteen ja sitten uudelleen laskea itsenäisesti. Tulokset kahdesta tarkkailijaa laskettiin keskiarvo.

Tilastollinen analyysi

Analyysit suoritettiin käyttäen SAS (versio 9.1; SAS Institute, Inc., Cary, NC) ja jotka perustuvat 2-puolinen

P

arvoja. Tilastolliset analyysit kuvailevia arvot olivat seuraavat: jatkuvien muuttujien, T-testiä; kategorisen ja patologiset arvot, Fisherin testiä. Laskimme odotusarvo suhteet (OR) ja 95%: n luottamusväli (95% CI) käyttäen ehdoton logistista regressiomalleja (käyttäen Proc Logistic moduulin SAS). Seuraavat kovariaatit katsottiin sisällytettäväksi monimuuttujakalibrointiin malleja yhdessä MSI syöpiä: ikä (jatkuva), sukupuoli (mies, nainen), syöpä vaihe (luokitellaan leikkauksen aikana), rotu (Afrikkalainen Amerikan, valkoihoinen), mucinous kasvain ( kyllä, ei), kasvain eriyttäminen, tulehduskeräytymää, ja syövän sijainti paksusuolessa (oikeanpuoleinen määritelty proksimaalisesti pernan taipeet). Merkittäviä yhteisvaikutuksia nähtiin välillä rotu ja kasvaimen päällä, ja siellä oli heikko assosiaatio vuorovaikutus MSI asema ja ikä. Mallit rakennetaan osoittavat molemmat näistä vuorovaikutusten.

saaduista tiedoista CD8

+ T-solujen määrä on /HPF kokonaismäärän analysoitujen näytteiden eivät seuranneet normaalia, Gaussin jakauma; Näin ollen, ei-parametriset tilastolliset testit olivat tarpeen arvioida merkitystä mitään eroa kahden ryhmän välillä kussakin analyysejä. Mann-Whitney

U

koe suoritettiin sen määrittämiseksi, onko kahden itsenäisen näytteen sarjaa oli tietojen jakaumat vaihtelevan merkittävästi. Tilastolliset analyysit CD8

+ T-solujen määrässä tehtiin käyttämällä

IBM SPSS Statistics

, versio 21.0.0.0 (IBM Corporation, 2012).

P

arvojen 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

tulokset

hyödynnettiin 503 hengen, tosi väestöpohjaiset paksusuolisyövän kohortti mahdollisille keruu 33 läänissä Pohjois-Carolinassa, joka oli suunniteltu oversample Afrikkalainen amerikkalaiset kohortin (North Carolina Colon Cancer Study, NCCCS) [17]. On tärkeää huomata, että MSI analyysit paatuivat ja toteutetaan erikseen ja riippumattomasti epidemiologista tietoa kerätään tutkimuksessa. Niistä 503 paksusuolen syöpiin, 227 (45%) olivat Afrikkalainen amerikkalaiset, ja 276 (55%) oli peräisin valkoihoisilla. Kaikkiaan 54 (11%) syövistä osoitti MSI. Kuitenkin esiintyvyys MSI syövissä vaihteli Afrikkalainen amerikkalaiset ja valkoihoisilla. Oli 39/276 (14%) valkoihoisten MSI syöpien, verrattuna 15/227 (7%) Afrikkalainen amerikkalaiset MSI syöpiä (taulukko 1 ja kuva S1). Verrattuna MSS syöpiin, MSI syövät liittyi valkoihoisiin (

P

= 0,009), joka on mucinous histologian (

P

= 0,0004), huono eriyttäminen (

P

= 0,03), joka on ”Crohnin kaltainen” imukudoksen ja intraepitheilial lymfosyyttisen reaktio (

P

= 0,0001), ja sijainti proksimaalisessa paksusuolessa (

P

0,0001) (taulukko 1). Ei ollut eroa iän, sukupuolen, tai syöpä vaihe välillä potilasta MSI ja MSS ryhmiä. Lukuun ottamatta rotuun ero, havainnot liittyvät MSI kasvainten aiemmin tiedossa ja palvella vahvistamaan tietomme. Suoritimme vaiheittaisen regressio arvioidaan kaikki kliinis yhdistysten, ja rotu, tulehduskeräytymää, ja kasvaimen sivusto jäi lopulliseen malliin. Oli merkittävää vuorovaikutusta rotuun ja kasvainpaikkaa. Potilaat, joilla on MSI syöpiin on kerroinsuhde (OR) on 3,21 läsnäolo Crohnin kuten histologian, ja ovat vähemmän todennäköisesti Afrikkalainen amerikkalaiset (joko proksimaalista syöpiin, OR = 0,26, tai distaalinen syöpien, OR = 0,16) tai valkoihoiset kanssa distaalinen syöpiä (OR = 0,12) (taulukko 2). Lisäämällä ikä, joka oli heikosti liittyvää MSI mutta ei rotu, ei merkittävästi muuttanut näitä kertoimet suhdeluvut vaiheittain regressiomalli.

arvioitiin, oliko eroja rotujen sisällä MSI tai MSS syöpä ryhmiä. Emme löytäneet eroa Afrikkalainen Amerikan ja valkoihoinen potilaalla on MSI syöpiä, vaikka oli suuntaus Afrikkalainen Amerikan syöpiä olevan peräisin nuorempia ja naispotilaita (taulukko 1). Joukossa MSS syöpiä, Afrikkalainen amerikkalainen potilaat olivat huomattavasti nuorempia (62,6 vs. 64,8 vuotta,

P

= 0,02), todennäköisemmin nainen (56% vs. 43%,

P

= 0,008), ja todennäköisemmin proksimaaliseen paksusuolen kasvain (54% vs. 44%,

P

= 0,04) (taulukko 1). Tuloksemme koskevat Afrikkalainen amerikkalainen MSS syöpiä on yhdenmukainen Afrikkalainen amerikkalainen naisilla, joilla kehittyneempiä adenomatoottisten polyypit [18], ja näkijä ja American Cancer Society tietoa johdonmukaisesti osoittavat varhaisemmassa iässä ja muita yleisemmin proksimaalisesta koolonsyöpien keskuudessa Afrikkalainen amerikkalainen potilaiden verrattuna valkoihoisilla [1 ], [2].

pystyimme määrittämään lukumäärän intraepiteliaalisten CD8

+ T-solujen sisällä 475 syöpiä havaita minkäänlaista eroa rotujen, kuten korkeammat numerot on liitetty MSI syöpiin [9] ja parantunut eloonjääminen [3], [19]. MSI syövät olivat korkeammat keskimääräiset CD8

+ T-solujen määrässä verrattuna MSS syöpiä (88,0 vs. 30,4 /hpf,

P

0,0001) (kuvio 1), ja tämä ero oli läsnä välillä MSI ja MSS syövät alkaen Afrikkalainen amerikkalainen potilaista (76,8 vs 32,2 /hpf,

P

= 0,0057) ja valkoihoisiin (95,5 vs. 29,5 /hpf,

P

0,0001) (kuvio 2) . Joukossa MSI syöpiä, ei ollut eroa keskimääräisissä CD8

+ T intraepiteliaalisten soluinfiltraatio välillä Afrikkalainen amerikkalaiset ja valkoihoisten; Samoin ei ollut eroa rotujen keskuudessa MSS syöpiä (kuvio 1). Tuloksemme on sopusoinnussa yhdistyksen välillä CD8

+ T-solujen intraepiteliaalisten tunkeutuminen ja MSI syöpiä. Vaikka emme havainneet eroa yleisen keskiarvon CD8

+ T-solujen määrä on välillä rotujen (kuva 2), keskimääräinen CD8

+ T-solujen määrä oli johdonmukaisesti alhaisempi Afrikkalainen amerikkalaiset verrattuna valkoihoiset (paitsi MSS syövät), jossa vähän tai ei lainkaan edustusta yläkvartiili CD8

+ T-solujen määrässä (kuvio 2A ja kuvio 1BC). Siten syövät erittäin korkea soluttautumista CD8

+ T-solut olivat useammin ja joitakin vertailuja lähes yksinomaan valkoihoisiin.

(A) immunohistokemia CD8

+ T-solujen sisällä pahanlaatuiset epitheilial rauhaset on paksusuolen syöpä. Huomautus läsnäolo intraepiteliaalisten CD8

+ T-solut (

upotettavat

). (B) CD8

+ T-solujen määrä on välillä MSI ja MSS syöpiä. (C) CD8

+ T-solujen määrä on MSI syöpien välillä rotuja. (D) CD8

+ T-solujen määrä on MSS syöpien välillä rotuja. Huomautus ei ole eroa Afrikkalainen amerikkalaiset ja valkoihoisten verrataan MSI tai MSS syöpiä. Numero päällekkäin täpläbloteissa ovat keinoja; rekki edustaa keskimääräinen lukumäärä joukossa syöpiä.

(A) CD8

+ T-solujen määrä on välillä rotujen, riippumatta microsatellite epävakautta. (B) CD8

+ T-solujen määrä on välillä MSI ja MSS syövät päässä Afrikkalainen amerikkalaiset. (C) CD8

+ T-solujen määrä on välillä MSI ja MSS syöpiä peräisin valkoihoisilla. Numero päällekkäin täpläbloteissa ovat keinoja; rekki edustaa keskimääräinen lukumäärä joukossa syöpiä.

Keskustelu

Tämä väestöpohjaisen tutkimus osoittaa uusi havainneet, että paksusuolen syövät peräisin Afrikkalainen amerikkalainen potilailla on puolet taajuudesta MSI verrattuna valkoihoiset, ilman havaittavaa muutosta laajuus intraepiteliaalisten CD8

+ T-solujen tunkeutuminen. Tämä havainto on ristiriidassa kahden muissa tutkimuksissa [4], [5], jotka eivät olleet väestöpohjainen ja joka hyödyntää tallennettuja näytteitä sidoksissa rotuun tietoja, ja uskomme, että tämä tutkimuksen suunnittelu ero on syy vastakkaisia ​​tuloksia tutkimuksesta toiseen. MSI on hyvä prognostinen markkeri verrattuna samaan lavastettu potilaalla on MSS kasvaimia [3], pienempi taajuus MSI keskuudessa Afrikkalainen amerikkalainen koolonsyöpien ehdottaa, että tämä voi osittain myötävaikuttaa korkeampi mortlity alkaen paksusuolensyöpä havaittu tässä rotuun ryhmässä [1], [2], [20].

poissaolo erittäin CD8

+ T-solujen määrä on keskuudessa Afrikkalainen amerikkalainen syöpiä voisi ehdottaa muutoksen immuunijärjestelmän toimintaa, ja tämä tulee olemaan selvitettävä tarkemmin. Emme kuitenkaan tunnistettu mitään eroja verrattaessa keskimääräistä CD8

+ T-solujen tunkeutuminen määrä välillä rotuja MSI syöpien tai MSS syöpiä, mikä viittaa siihen, että kilpailu

sinänsä

ei ole määräävä tekijä CD8

+ T infiltraatiota. Tuloksemme vahvistaa vahvan yhteyden CD8

+ T-solujen tunkeutuminen ja MSI tilan paksusuolensyöpä, johdonmukaista sen havainnon kanssa, että neoantigeenien ohjaavat DNA MMR puutos ja myöhemmin lukukehyksen kohdegeenien on operatiivinen [8], samoin CD8

+ T-solut, jotka liittyvät parannettu säilymiseen paksusuolensyöpä [19]. Vahva yhteys MSI aseman ja CD8

+ T-solujen tunkeutuminen voisi päätellä, että CD8 + T-solut ovat syynä havaittu parantunut tulos MSI kasvaimia. Esimerkiksi potilailla, joilla on MSI koolonsyöpien eivät hyödy 5-FU kemoterapiaa useissa tutkimuksissa, ja 5-FU hoito saattaa jopa laskea eloonjäämiseen näillä potilailla [14], [15]. Voi olla, että adenokarsinoomasoluja vialliset DNA MMR-toiminto ovat resistenttejä 5-FU, mutta että CD8

+ T-solut ovat herkkiä 5-FU, jossa on 5-FU hoito tappaa hyödyllinen vaikutus CD8

+ T-solujen infiltraatiota [13]. Puuttuminen erittäin CD8

+ T-solujen joukossa Afrikkalainen Amerikan syöpiä voisi simuloida samanlainen vaikutus kuin teorian, 5-FU potilaiden hoitoon MSI syöpiä.

Toinen biomarkkereiden viallisten DNA MMR satunnaisissa kolorektaalisyövissä on kohonnut mikrosatelliittimarkkereita muutokset valittuihin tetranucelotide toistoja, tai EMAST, löytyy jopa 60% ja peräsuolen syöpiä ja aiheuttamat somaattiset inaktivaation hMSH3 [21], [22]. EMAST liittyy etäpesäkkeitä ja huonon ennusteen [23], [24] ja näyttää olevan kaksi kertaa niin yleisiä peräsuolen syöpiä peräisin Afrikkalainen amerikkalaiset verrattuna valkoihoiset [24]. Niinpä osuus EMAST, huono prognosticator potilaille, joilla on paksusuolen syöpä, yhdistettynä alentunut esiintyvyys MSI, hyvä prognosticator yhdessä muodostavat kaksi biologisista prosesseista mukana tulehdus ja vikoja DNA MPR jotka saattavat pahentaa tulos Afrikkalainen amerikkalainen potilaiden paksusuolen syöpä.

Tuloksemme osoittavat myös hallitseva proksimaaliseen luonne paksusuolisyövän Afrikkalainen amerikkalaiset joka ei johdu MSI. Tai data on yhdenmukainen ennalta SEER ja American Cancer Society data [1], mutta korostaa oikeanpuoleista luonne syöpien puuttuessa MSI kasvaimia. Miksi on enemmän proksimaalisessa paksusuolisyöpää Afrikkalainen amerikkalainen potilailla ei tiedetä. Kuitenkin tämä on vaikutuksia lähestymistapa paksusuolen syövän seulontaan tässä potilasryhmässä.

Yhteenvetona löydämme puolet esiintyvyys MSI keskuudessa Afrikkalainen amerikkalainen potilailla, joilla on paksusuolen syöpä verrattuna Causcasian potilaille ilman muutosta CD8

+ T-solujen tunkeutuminen. Tämä havainto saattaa edistää Afrikkalainen amerikkalaiset ”korkeampi kuolleisuus paksusuolen syöpä.

tukeminen Information

Kuva S1.

jakelu MSI ja MSS kasvaimia keskuudessa Afrikkalainen Amerikan ja valkoihoinen potilasta NCCCS.

doi: 10,1371 /journal.pone.0100461.s001

(TIFF) B

Kiitokset

kirjoittajat kiittää Vianca Villegas, Reyna Melendez, Angelique Hill, ja Onnekas Ene apunaan immunovärjäyksen ja luetellaan solujen määrä.