Krooninen sairaus

tiivistelmä

erilaisia ​​TGF-β-superperheen jäsen, makrofagin inhiboiva sytokiini-1 (MIC-1 /GDF15), on yli-ilmentynyt useimmat syövät, mukaan lukien eturauhassyöpä (PCa). Vaikka sen verenkierrossa liittyy syöpään lopputulokseen, rooli MIC-1 /GDF15 pelaa syövän kehittymisessä ja etenemisessä on puutteellisesti. Tutkia sen vaikutusta PCa kehitykseen ja leviämiseen, olemme käyttäneet TRAMP eturauhassyövän altis hiirillä ituradan poisto MIC-1 /GDF15 (TRAMP

MIC – /-). Keskimäärin TRAMP

MIC – /- hiiret kuolivat noin 5 viikkoa aiemmin ja oli suurempi eturauhasen kasvaimia verrattuna TRAMP hiiriin, jotka olivat villin tyypin MIC-1 /GDF15 (TRAMP

MIC + /+). Lisäksi tuolloin kuoleman tai eettisistä loppupiste, vaikka oikaistu elinikä, ei ollut merkittäviä eroja määrän hiirten etäpesäkkeitä välillä TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- ryhmät. Kuitenkin yhdenmukaisia ​​aiempien tietojen mukaan yli kaksi kertaa niin paljon TRAMP hiiriä yli-ilmentävät MIC-1 /GDF15 (TRAMP

fmsmic-1) oli etäpesäkkeitä kuin TRAMP

MIC + /+ hiirillä (p 0,0001). Olemme päätellä, että ituradan geenistä poistetaan MIC-1 /GDF15 johtaa lisääntyneeseen paikalliseen kasvaimen kasvua mikä laski selviytymisen sopusoinnussa yleinen suojaava rooli MIC-1 /GDF15 varhaisessa primaarikasvaimen kehitystä. Kuitenkin etenee sairaus, kuten olemme aiemmin mainittiin, MIC-1 /GDF15 yliekspressio voi edistää paikallista invaasiota ja metastaaseja.

Citation: Husaini Y, Lockwood GP, Nguyen TV, Tsai VW-W, Mohammad MG Russell PJ, et al. (2015) makrofaagianalyysi Inhiboiva Sytokiini-1 (

MIC-1 /GDF15

) Gene poistaminen Edistää syövän kasvu TRAMP Eturauhassyöpä Makuu hiiret. PLoS ONE 10 (2): e0115189. doi: 10,1371 /journal.pone.0115189

Academic Toimittaja: Hari K. Koul, Louisiana State University Health Sciences Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 08 elokuu 2014; Hyväksytty: 11 marraskuu 2014; Julkaistu: 19 helmikuu 2015

Copyright: © 2015 Husaini et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi.

Rahoitus: Tätä työtä tukee osittain avustuksia Cancer neuvoston New South Wales (https://www.cancercouncil.com.au/) ja The National Health ja Medical Research Council of Australia (NHMRC) (https://www.nhmrc.gov.au/). DAB on National Health ja Medical Research Council Biomedical Career Development Fellow. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat lukenut lehden politiikan ja ovat seuraavat ristiriitoja: DAB ja SNB ovat nimeltään keksijöiden omistamat patentit St Vincentin sairaalan, jotka liittyvät kliinisessä käytössä MIC-1 /GDF15 diagnostinen määritys ja modulatorisen hoito. St Vincentin sairaalan suostuu tekemään vapaasti saataville kaikki materiaalit ja tiedot on kuvattu tässä julkaisussa kohtuullisten pyyntöjen varten akateemista, ei-kaupallinen tutkimus. Koska oma materiaalien laatu, osapuolet täytyy solmia materiaalin siirtosopimuksen. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja. Mukana kirjoittamassa DAB on PLoS One Editorial hallituksen jäsen. Tämä ei muuta DAB: n sitoutuminen PLoS One Pääkirjoitus politiikan ja kriteerit.

Johdanto

Eturauhassyöpä (PCA) on yksi yleisimmin diagnosoitu syövistä miehillä. Se aiheutti arviolta 29480 kuolemantapausta Yhdysvalloissa vuonna 2014 ja se on toiseksi suurin syy syöpäkuolemista miehillä [1]. Huolimatta kliinistä merkitystä, ymmärrystämme ja sen biologia on epätäydellinen ja riippumatta leikkauksen alkuvaiheen tauti, sen hoito on palliatiivinen. Kuten useimmat, elleivät kaikki tuumorit, PCa näyttää muuttunutta ekspressiota monia geenituotteita, mukaan lukien sytokiinien ja kasvutekijöiden. Yhden sytokiinin yleisesti yli-ilmennetään monissa syövissä, mukaan lukien PCa, on MIC-1 /GDF15, poikkeava transformoivan kasvutekijä-β-superperheen [2]. Expression tämän sytokiinin on myös aiheuttama useimmat syövän hoitomuotoja ja sen seerumissa selvästi Syöpää lopputulokseen [3-9].

MIC-1 /GDF15 on detectible veressä kaikkien yksilöiden [10]. Sen ilmentyminen syövät ovat usein heijastuu nousee sen veressä, yleensä suhteessa vaiheessa ja laajuus kasvain [5,11-16]. Esimerkiksi on olemassa jatkuva nousu MIC-1 /GDF15 seerumissa kanssa eteneminen koolonpolyyppien, korkealaatuista dysplastic polyypit, paikallinen peräsuolen syöpä (CRC) ja sitten levitetään CRC [13]. Lisäksi potilailla, joilla on CRC, joilla on kohonnut seerumin MIC-1 /GDF15 tasojen esitys, on huonompi yleistä ennustetta ja aikaisemman taudin uusiutumisen [13,17]. PCA, MIC-1 /GDF15 seerumin tasot ovat itsenäinen ennustaja syövän esiintymisen [14] ja kehittyneempää tautien he ennustavat eloonjäämiseen ja luumetastaasipotilailla [12,16]. Korkea MIC-1 /GDF15 seerumin myös ennustaa diagnoosia ja /tai lopputuloksen monenlaisia ​​maligniteetteja, mukaan lukien melanooma [18,19], syövät haiman [15,20,21], kilpirauhasen [22,23], munasarja [ ,,,0],24] ja kohdun limakalvon [25].

potilailla, joilla on pitkälle edenneitä syöpiä, seerumin MIC-1 /GDF15 tasot yleensä nousevat normaalia keskimäärin noin 450pg /ml [13] ja 10,000-100,000 pg /ml tai enemmän [5] ja saattaa aiheuttaa syöpää anoreksia /kuihtuminen [26,27]. Tämä yhteinen syöpä komplikaatio välittyy toimia MIC-1 /GDF15 ruokintavaatimuksia keskuksia aivoissa ja voidaan peruuttaa neutraloivien vasta [26,27]. MIC-1 /GDF15 seerumin syövän vaikuttavat paitsi sen yli-ilmentyminen, mutta riippuu myös siitä, miten se käsittelee kasvain. Solunsisäiset käsittely johtaa poisto MIC-1 /GDF15 propeptidin ja diffuusio verenkiertoon erittymisen jälkeen. Kuitenkin, kuten propeptidi vuorovaikutuksessa kasvaimen stroomasta, käsittelemättömän erittyvä proteiini pysyy sitoutuneena solunulkoiseen matriisiin lähelle tuottaa kasvaimen [21,28]. PCA, lisääntynyt strooman MIC-1 /GDF15 liittyy parempia hoitotuloksia, erityisesti ne, joilla on matala-asteinen paikallinen eturauhasen kasvaimia (Gleason summa pisteet 6 tai vähemmän) [28], mikä viittaa siihen, että sen lisääntynyt paikallinen saatavuus on hyödyllistä. Sitä vastoin, suuri kiertävä pitoisuudet MIC-1 /GDF15 liittyy huono tulos [28]. Kuitenkin myös MIC-1 /GDF15 yli-ilmentymisen syöpä on suotuisa, haitallisia tai seka vaikutus sairauden lopputulos on vaikea vahvistaa, epidemiologisista tutkimuksista yksin.

in vivo

syöpään liittyvää toimintaa MIC-1 /GDF15, on tarkasteltu useissa -tuumoriksenografti tutkimusten vaihtelevin tuloksin. Esimerkiksi täytäntöön MIC-1 /GDF15 yli-ilmentymisen HCT-116 koolonsyöpäsoluihin [29] tai DU145 [30] PCa solulinjaa, ksenosiirrettyjä osaksi immuunivajavuustila hiiriin, vähensi kasvainten kokoa. Kasvaimia glioblastoomasolulinjan, jotka jäivät vaikuta MIC-1 /GDF15

in vitro

puolesta transfektio MIC-1 /GDF15, onnistuneet kehittämään kasvaimia nude-hiirissä [31]. Kirjoittajat ehdottivat, että MIC-1 /GDF15 ovat toimineet paikallisen kasvaimen mikroympäristössä estämään kasvaimen kasvua. Sen sijaan, kaataa MIC-1 /GDF15 ihmisen melanooman [18] ja hiiri glioblastoma [32] solulinja vähensi kasvua Siirto tehty kasvaimia. Edelleen ksenografteista PC3 PCa solulinjan käsitelty yliekspressoimaan MIC-1 /GDF15 kasvoivat nopeammin [33] ja kun ortotooppisesti istutettu, johti enemmän etäpesäkkeitä [34].

Toisin ksenograftimalleja immuunivajaissa hiirillä, karsinogeeni aiheuttama ja spontaanisti sairastua syöpään malleja tehdään immuuni hiirissä, jotka paremmin matkivat synnyssä syöpiä. Kemiallisesti aiheuttama syöpä malleja, siirtogeenisiä yliekspressio MIC-1 /GDF15 johtaa vastustuskyvyn uretaani aiheuttama keuhkosyöpä [35] ja azoxymethane aiheuttama paksusuolensyöpä [36]. Vaikka siirtogeeniset yliekspressio johti suoja näissä kahdessa tapauksessa, geenideleetio- ei muuttanut kehitystä diethylnitrosamine aiheuttamaa maksasyövän [37].

Itsestään kehittää syöpien siirtogeenisiä hiiriä usein parhaiten mukautua ihmisen syövissä ja kaikki perustuvat tutkimukset niiden käyttö viittaavat siihen, että MIC-1 /GDF15 on pääosin suojaava alussa tauti. Kehittäminen paksusuolen polyyppien ja syövän APC

min hiiret vähennetään siirtogeenisiä yliekspressio MIC-1 /GDF15 [36]. Edelleen, ituradan poistamista MIC-1 /GDF15 APC

min hiiret poistanut suojan päässä COX-estäjä sulindaakki [38]. Koska tämän luokan lääke on tunnettu ilmentymisen indusoimiseksi MIC-1 /GDF15 sekä hiirillä että miesten [38], nämä tiedot viittaavat siihen, että kasvaimen suppression voi olla riippuvainen ekspressio MIC-1 /GDF15 [38]. Edelleen Tätä näkemystä tukevat on tutkimus, jossa käytettiin näytteitä polyyppi Prevention Trial [39]. Tämä osoitti, että ei-steroidista tulehduskipulääkettä (NSAID) käyttäjillä oli korkeampi seerumin MIC-1 /GDF15 tasoa kuin ei-käyttäjien ja ainoastaan ​​NSAID käyttäjille kohonnut seerumin MIC-1 /GDF15 taso olivat suojassa koolonadenooma toistuminen [39, 40].

viime aikoina olemme arvioineet vaikutusta MIC-1 /GDF15 ilmentymisen vaikutus aikana syövän

T

ransgenic

denocarcinoma on

M

ouse

P

rostate (TRAMP) eturauhassyövän altis siirtogeenisiä hiiriä. TRAMP hiiret ilmentävät SV40 aikaisten geenien (T ja t; Tag) valvonnassa rotan Probasiinin (RPB) promoottori [41], jonka kohteena sen ilmentymisen eturauhasen epiteelissä. Heterotsygoottinen TRAMP uroshiirillä kehittyy etenevä eturauhasen syöpä, joilla on samat tautikirjona kuten todettu miehillä. Aikana 6-12 kuukauden nämä hiiret kehittämään asteittain lokalisoitu sitten kohdunkaulan syöpä, jolla on metastaattinen leviäminen kaukaisiin sivustoja, pääasiassa lantion imusolmukkeiden, maksan, munuaisten ja keuhkojen [42]. Meidän tiedot osoittavat, että TRAMP-hiirillä, jotka yli-ilmentävät MIC-1 /GDF15, on merkittävästi kasvanut eloonjäämisen alentuneeseen kasvun ja histologinen luokka primaarikasvaimen [43], mikä tukee edelleen hyödyllinen rooli MIC-1 /GDF15 alussa syöpä. Koska kasvain kehittynyt, nämä hiiret myös kehittänyt enemmän etäpesäkkeitä [43], mikä viittaa siihen, että MIC-1 /GDF15 yliekspressio voi olla vahingollisia toimia myöhäisessä vaiheessa syöpään. Ei ole muita tietoja siirtogeenisten syövän malleista, joissa vaikutus MIC-1 /GDF15 on pitkälle edenneitä syöpiä, on tutkittu.

On tärkeää ymmärtää siitä, että MIC-1 /GDF15 on biologiaa syöpien koska se on erittäin yli-ilmentää monia syöpiä ja sen ilmentyminen indusoi syöpähoitojen. Niinpä mikä tahansa vaikutus sillä on biologiaan syöpä on todennäköisesti ole kliinistä merkitystä. Edelleen lisää tietämystä tämän sytokiinin syövän, olemme päättäneet, kuinka MIC-1 /GDF15 puutos vaikuttaa kehittyminen PCa. Olemme hyödyntäneet TRAMP eturauhassyövän altis hiirillä, jotka myös kantavat ituradan poistetaan MIC-1 /GDF15 geeni (TRAMP

MIC – /-), tai villityypin MIC-1 /GDF15 (TRAMP

MIC + /+), vertailla eloonjäämisaste, kuvio Eturauhassyövän kasvun ja metastaaseja. TRAMP

MIC – /- hiirillä oli merkitsevästi suurempi eturauhasen kasvaimia ja lyhyempiä selviytymistä kuin TRAMP

MIC + /+ hiirillä, mutta ei ollut merkittävää eroa esiintyvyys ja osuus etäpesäkkeiden kahdessa hiiri riviä viittaa siihen, että eri mekanismit välittävät vaikutukset MIC-1 /GDF-15 paikallisiin ja metastaattisen PCa kehitystä. Nämä tulokset ovat yhdenmukaisia ​​aiempien tutkimusten tunnistamiseksi pitkälti suojaava rooli MIC-1 /GDF15 paikallisessa kasvun varhain syöpiä.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

tutkimus- ja eläinten hoito menettelyjä hyväksynyt Garvan Institute /St Vincentin sairaalan animal Experimentation eettisen komitean (Ethics No: 07/05, 10/05 ja 13/08) ja olivat yhtä mieltä Australian käytännesäännöt Care ja eläinten käyttöä tieteellisiin tarkoituksiin.

siirtogeenisiä hiiriä

Heterozygous mies TRAMP-hiirille (TRAMP

+/-) [41] kertyi pariutumisen TRAMP

+/- naisilla ( C57BL /6 taustalla) ei-siirtogeenisten C57BL /6 urosta. Hiiret, joiden ituradan poistetaan

MIC-1 /GDF15

geeni (MIC-1

– /-) [44], myös C57BL /6 taustalla olivat kasvatetaan TRAMP hiirten tuottamiseksi MIC 1

– /- hiirissä, joissa on TRAMP siirtogeenin (TRAMP

MIC – /-). PB-SV40: n T-siirtogeenin tunnistettiin käyttämällä DNA: ta hännän näytteitä ja PCR-alukkeet suunnattu PB-SV40 T-antigeenin sekvenssi: Pb-eteenpäin: 5′-CCGGTCGACCGGAAGCTTCCACAAGTGCATTTA-3 ’ja SV40Tag-reverse: 5′-CTCCTTTCAAGACCTAGAAGGTCCA-3 ”. MIC-1 /GDF15-geenin deleetio tunnistettiin käyttäen alukkeita MIC1Exon2for: 5’-GGCGGCGCACAGCTGGAACTGC-3 ’, jossa MIC1Exon2Rev: 5′-CAGCCCCGGGCCACCAGGTCAT-3′ (Villityypin pari) ja MIC-1 /GDF15KOfor: 5’-GAGAGGACTCGAACTCAGAACCA-3 ’, jossa MIC-1 /GDF15KORev: 5’-GAAGTTATATTAAGGGTTCCGCAAGC-3 ’(Knock-out pari). Hiirissä yli-ilmentävät MIC-1 /GDF15 ohjauksessa myeloidisolun erityinen c-fms-promoottori (MIC-1

fms) käytettiin kasvattaa TRAMP-hiirissä, että myös yli-ilmentävät MIC-1 /GDF15 (TRAMP

fmsmic-1 ). Kaksinkertainen siirtogeeniset TRAMP

fmsmic-1-hiiret luotiin risteyttämällä TRAMP

+/- naaraat homotsygoottista MIC-1

fms miehillä. MIC-1 /GDF15 siirtogeenin TRAMP

fmsmic-1 hiirissä tunnistettiin PCR: llä käyttäen alukkeita, Flag-eteenpäin: 5′-GACTACAAGGACGACGATGACAAG-3 ’ja MS8-reverse: 5′- CGAAGCCTACCGCGTGCACCGAG-3’. Käytetyt reaktio-olosuhteet olivat: denaturaatio 95 ° C: ssa 10 s, pariutuminen 60 ° C: ssa 20 s, ja pidennys 72 ° C: ssa 30 s.

Survival tutkimuksen

Perustuen tilastollinen teho analyysi näytteen koon, (Alpha virhe = 0,05, tilastollinen teho = 0,95), 35 TRAMP

MIC + /+ ja 35 TRAMP

MIC – /- hiiret jaettiin 4-6 viikon iässä, sillä selviytymisen tutkimus. Siitä lähtien hiiret punnittiin kerran viikossa ja seurataan kahdesti viikossa tuumorin koon ja laajuuden tunnustelemalla vatsan. Hiiret joko kuolleet tai lopetettiin, kun he pääsivät eettisiä päätepisteestä kasvaimen kokoa suurempi kuin 11mm x 11mm x 11mm, yli 20% painon tai tavata muita eettisiä loppupiste kriteerit eutanasian. Yleinen eloonjääminen Yksittäisten hiirien laskettiin syntymästä eettisiin päätepisteeseen tai kuolema kasvain. Survival jakelu arvioitiin käyttäen menetelmää Kaplan-Meier. Ruumiinavauksessa urogenitaalinen kompleksi (GU), joka koostuu eturauhasen (mukaan lukien selkä-, sivusuunnassa, vatsa- ja etulohkot), virtsaputken, ampullary rauhanen, rakkularauhanen (SV) ja virtsarakko poistettiin ja punnittiin. Eturauhasen leikattiin GU ja punnittiin erikseen. Paino GU ja eturauhasen kunkin hiiren normalisoitiin sen paino (elin paino /body paino).

Ensisijainen kasvaimen koon

Erillisessä kohortti että edellä, eturauhasen kasvaimen kasvua oli verrataan TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- hiirissä. Alussa tutkimuksen 88 TRAMP ja 88 TRAMP

MIC – /- hiirillä, 22 kunkin kunkin vaiheen, olivat ennalta käytettäviksi uhrataan eri ajankohtina varhaisesta pitkälle kasvaimen vaiheissa (8, 17, 25 ja 33 viikon iässä). Kunkin 88 hiiret ruumiinavaus, GU leikattiin ja eturauhasen erotettiin GU. Yhteensä GU ja eturauhasen paino tallennettiin ja normalisoitu luovuttajalle hiiren koko kehon paino (elin paino /body paino).

tunnistaminen kasvainetäispesäkkeiden

arvioimiseksi esiintyminen etäpesäkkeiden aikaan kuolemaan tai teurastusta TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- hiirissä, tutki eri kohortin TRAMP

MIC + /+ (n = 63) ja TRAMP

MIC – /- (n = 63). Vertailun vuoksi tutkimme myös vastaava määrä MIC-1 /GDF15 yli-ilmentävät TRAMP

fmsmic-1-hiiriä (n = 63), jonka PCa oli tiedetään liittyvän lisääntyneeseen etäpesäkkeitä [43]. Hiiret huolta ja lopetettiin käyttäen samoja kriteereitä kuten edellä selviytymisen tutkimuksessa. Tällä ruumiinavaus lantion imusolmukkeet, munuaisten ja maksan kasvaimet (jos olemassa) kerättiin ja kiinnitettiin 10% neutraaliin puskuroituun formaliiniin. Keuhkot leikattiin, punnittiin ja kiinnitettiin Bouinin kiinnitysainetta (Sigma-Aldrich) visualisoida ja laskea keuhkojen kasvain pesäkkeitä. Etäpesäkeleesioita kaikki elimet olivat laskettiin preparointimikroskooppia. Osa leesioiden vahvistettiin H 10 mg /g), verrattiin käyttäen Chi-square testi. p-arvot näkyvät *, p

0,05; **, P

0,01.

TRAMP

MIC – /- hiirillä on suuremmat eturauhasen kasvaimia ruumiinavauksessa

Tällä ruumiinavauksessa edellä -mentioned selviytyminen ryhmä TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- hiirissä, GU ja eturauhasen eristettiin ja niiden painot, painon suhteen korjattuna, kirjattiin. Huolimatta kuolee aikaisemmin kuin TRAMP

MIC + /+ hiirillä, TRAMP

MIC – /- hiirillä keskimäärin oli huomattavasti raskaampia eturauhasen kasvaimia kuolinhetkellä (Fig. 1 C, p = 0,0240). Edelleen TRAMP

MIC – /- ryhmä oli huomattavasti enemmän hiirillä, joilla on hyvin suuri eturauhasen kasvaimia (normalisoitu eturauhasen paino 10 mg /g) kuin TRAMP

MIC + /+ ryhmä (Fig. 1 D, p = 0,0027, Chi-square test). Ei ollut mitään merkittävää eroa yhteensä GU paino (Fig. 1 B) kahden hiirikantojen koska TRAMP

MIC + /+ oli merkittävästi suurempi SV kasvaimia kuin TRAMP

MIC – /- hiirissä (tuloksia ei ole esitetty). Nämä tiedot viittaavat siihen, että poistaminen

MIC-1 /GDF15

geeni liittyy lisääntynyt paikallinen eturauhasen kasvaimen kasvua TRAMP hiirillä, ehkä pienemmällä rakkularauhaseen hyökkäystä.

MIC-1 /GDF15 poisto Parantaa eturauhassyövän kasvun TRAMP hiirillä

edelleen arvioida MIC-1 /GDF15 eturauhassyövän kasvua, 4-6 viikon iässä, me ennalta osoitettu toinen kohortti 88 TRAMP

MIC + /+ ja 88 TRAMP

MIC – /- hiirillä teurastusta asteittain neljällä ajastimella osoittavat jopa 33 viikon ikään. Yhdenmukainen tietojen säilyminen tutkimusryhmän hiiriä, edellä, ei ollut merkittävää eroa normalisoitu GU ​​painot kahden hiiri riviä milloin tahansa vaiheessa havaittu (Fig. 2A). Kun tarkastelimme eturauhasen koko ei ollut detectible eroja keskimääräinen korjattu eturauhasen painot välillä TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- hiiren linjat viikolla 8 ja 17. Viikolla 25 ja 33, TRAMP

MIC – /- hiirillä oli 6,9 ja 8 kertaistanut korjattu keskimääräinen eturauhassyövän painoa vastaavasti verrattuna TRAMP

MIC + /+ hiirillä (Kuva. 2B) ja tämä ero oli tilastollisesti merkitsevä viikolla 33 ( p = 0,0098, 2 tie ANOVA).

korjattu kasvain painot (A) GU ja (B) prostates verrattiin TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- hiirillä ( n = 22 /ryhmä /ajankohtana) tapettiin 8, 17, 25 ja 33 viikon iässä. Tulokset analysoitiin käyttäen 2-tie ANOVA ja esitetään keskiarvona ± SEM. p-arvot on esitetty *, p

0,05.

MIC-1 /GDF15

geenin deleetio ei vaikuta etäpesäkkeitä

Koska etäpesäke on merkittävä kuolinsyy potilailla, joilla on ihmisen PCA arvioimme vaikutus

MIC-1 /GDF15

geenideleetio- esiintyvyys ja laajuus etäpesäkkeiden TRAMP hiirillä. Tutkimme erillinen kohortin 63 TRAMP

MIC + /+, 63 TRAMP

MIC – /- ja 63 MIC-1 /GDF15 yliekspressoivat TRAMP (TRAMP

fmsmic-1) hiiret, joita seurasi kuolemaan asti tai eettinen päätepiste. Jälkimmäinen ryhmä sisällytettiin positiivisena kontrollina, kuten edellisessä tutkimuksessa oli ilmoittanut TRAMP

fmsmic-1-hiirillä on enemmän etäpesäkkeitä, mutta hengissä kauemmin [43]. Kaplan-Meier selviytymisen analyysi vahvisti, että TRAMP

MIC – /- hiiret kuolevat huomattavasti aikaisemmin kuin TRAMP

MIC + /+ hiirillä (Fig. 3A, p

=

0,0267, log-rank-testi), johdonmukainen tietoja selviytymisen ryhmässä. Edelleen, TRAMP

fmsmic-1 hiiret kuolivat merkittävästi hitaammin kuin TRAMP

MIC + /+ hiirillä (Fig. 3A, p 0,0001, log-rank-testi) vahvistaa valinnan aikaisemmista julkaisemisesta [43]. Tässä kohortissa 19% TRAMP

MIC + /+ hiirille kehittyi makroskooppisesti detectible kaukainen elin etäpesäke tutkituista elimissä, mikä ei ollut merkittävästi erilainen kuin 14,2% TRAMP

MIC – /- hiirissä (Fig. 3B ). Ilmaantuvuus etäpesäkkeiden näissä kahdessa hiiri riviä oli merkittävästi vähemmän, että TRAMP

fmsmic-1 hiirissä, 59% josta kehittyi etäpesäkkeitä (Fig. 3B). Nämä tiedot osoittavat, että vaikka TRAMP

MIC – /- hiiret kuolevat huomattavasti aikaisemmin kuin TRAMP

MIC + /+ hiirillä (Kuva. 3A) ei ollut merkittäviä eroja ilmaantuvuus kaukaisten elin etäpesäke kahden hiiren riviä (kuvio . 3B). Sen sijaan, kuten aiemmin raportoitu, huomattavasti suurempi osuus TRAMP

fmsmic-1 hiiret osoittivat kaukainen elin etäpesäkkeitä verrattuna TRAMP

MIC + /+ tai TRAMP

MIC – /- hiirissä (Fig. 3B, p 0,0001, Chi-square test). Monimuuttuja logistinen regressio analyysi vahvisti, että yhä suurempi osuus TRAMP

fmsmic-1 hiirissä etäpesäkkeitä oli riippumaton niiden pidemmän eloonjäämisen kertaa (p 0,5) ja vain riippuvainen genotyypistä (p 0,0001). Edelleen, käyttämällä samanlaista lähestymistapaa, ettei ero osuus TRAMP

MIC – /- verrattuna TRAMP

MIC + /+ hiirillä etäpesäkkeitä, ei voida osuus niiden lyhyempiä eloonjääminen (p 0,5) .

(A) Survival tiedot TRAMP

MIC + /+ (n = 63), TRAMP

MIC – /- (n = 63) ja TRAMP

fmsmic-1 (n = 63) hiirillä on esitetty Kaplan-Meier juoni ja log-rank tilastotieto keskimääräinen elinaika on esitetty. (B) vertailu määrä TRAMP

MIC + /+ (n = 63), TRAMP

MIC – /- (n = 63) ja TRAMP

fmsmic-1 (n = 63) hiirillä, joilla on kaukainen organ etäpesäkkeitä aikaan kuolema on analysoitu käyttäen Chi-Square-testin.

keskustelu

Tämä tutkimus osoittaa selvästi, että ituradan poistaminen MIC-1 /GDF15 johtaa lisääntyneeseen paikalliseen primäärikasvain kasvu johtaa aikaisemman kuoleman TRAMP PCa altis hiirillä. Nämä tiedot ovat yhdenmukaisia ​​aiempien julkaisu osoittaa, että siirtogeenisiä yliekspressio MIC-1 /GDF15 pienenee paikallisten PCa kasvaimen kasvua ja lisää huomattavasti eloonjäämistä TRAMP hiirillä. Tämä tulos on yhdenmukainen tulosten toisessa siirtogeenisiä malli varhaisen syövän APC

min paksusuolen polyyppi altis hiirillä myös yli-ilmentävät MIC-1 /GDF15 [38]. Tämä vahvistaa väitteen, jonka MIC-1 /GDF15 näyttelee suojaava rooli varhaisessa paikallista kasvaimen kehitystä ja kasvua. Useat epidemiologiset tutkimukset viittaavat siihen, että tämä havainto voidaan kääntää ainakin joidenkin ihmisen syöpien. Esimerkiksi lisääntynyt paikallinen pitoisuudet soluväliaineen liittyy MIC-1 /GDF15 eturauhassyövässä koepalat yhteydessä alentuneeseen riski taudin etenemiseen, erityisesti alaryhmä varhain syövän ja Gleason arvosana 6 tai vähemmän. Tässä ryhmässä MIC-1 /GDF15 lokalisoitu kasvain matriisi oli yhden parhaista ennustaja kasvaimen uusiutumisen [28]. Potilailla päässä polyyppi ennaltaehkäisy tutkimus, korkeampi polyyppi ilmainen seerumin MIC-1 /GDF15 taso antoi suojan polyyppi toistuminen ja NSAID välittämä suojaus hävisi jos MIC-1 /GDF15 seerumissa ei koholla Tulehduskipulääkkeiden [39].

ilmeisesti ristiriitainen vaikutus MIC-1 /GDF15 paikallisista kasvaimen kasvua ja metastaattinen prosessi, että me aiemmin on kuvattu, on jälleen osoittanut tässä [43]. Siirtogeeniset yli-ilmentyminen johtaa pienempiin paikallisiin kasvaimia ja elinajan pitenemiseen, kuten TRAMP

cfmsmic-1 hiirissä ei enää kuole aikaisin paikallisten tauti. Riippumatta lisääntynyt elinaika, nämä samat TRAMP

cfmsmic-1-hiirillä on enemmän etäpesäkkeitä. Voisimme kuitenkin osoittaa eroa osuus hiirten etäpesäkkeitä välillä TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- hiirissä. Koska harvat hiiriä joko linjan kehittänyt etäpesäkkeitä kokeellisella päätepiste emme ehkä ole tutkittu riittävästi hiiriä olla varmoja, että mitään eroja. Lisäksi, kuten eturauhasen kasvaimia TRAMP

MIC + /+ hiirillä ilmaista pikku MIC-1 /GDF15 [43], se voi olla, että tämä malli on herkempi vaikutusten lisääntyneen ilmentymisen verrattuna geenin poisto.

Vaikka ei ollut merkittävää eroa etäpesäkkeitä välillä TRAMP

MIC + /+ ja TRAMP

MIC – /- hiirissä, voi olla eroja paikallisissa hyökkäystä. TRAMP

MIC – /- hiirissä, joilla on suurempi eturauhasen kasvaimia oli pienempi SV (tietoja ei esitetä), mikä viittaa siihen, että voi olla vähemmän SV hyökkäystä.

Miten MIC-1 /GDF15 voi käyttää vaikutuksia kasvaimen kasvuun ja leviäminen on epävarmaa. Selvittämisessä toimintamekanismi on suuresti haitannut koska henkilöllisyys sen reseptori on tuntematon. On oletettu, että reseptori on jäsenenä hyvin säilyneitä hetrotetrameric TGF-b-reseptori (TBR) superperheen, mutta on rajoitettu suoraa näyttöä tästä. On olemassa jonkin verran epäsuora todiste, joka perustuu vasta-saarto, että se voi käyttää TBRII [26,45] luokan 2-reseptorin käyttää TGF-b itse, mutta ei ole suoraa biokemiallinen tai geneettisen todisteita näitä tietoja. Signalointi cascade reseptorin kompleksin tai luokka I reseptoriin hyödyntää MIC-1 /GDF15 on tähän mennessä täysin tuntemattomia.

Nyt on lukuisia Julkaistujen tietojen roolista MIC-1 /GDF15 kasvaimen kasvuun ja leviämiseen kanssa hämmentävä erilaisia ​​tuloksia. Kokeista saadut tiedot käyttämällä ihmisen solulinjoja, joissa MIC-1 /GDF15 ilme on joko indusoitu tai tippuu alas, sitten ksenosiirrettyjä osaksi immuunivajausta hiiriin, ovat antaneet joskus ristiriitaisia ​​tuloksia [18,29-34]. Tutkimukset käyttäen siirtogeenisiä malleja spontaanisti kehittää syöpä, joka myös kantaa geneettisesti muunnettuja MIC-1 /GDF15 ilmaisun ja ehjän immuunijärjestelmä kaikki siitä suojaava rooli MIC-1 /GDF15 paikalliseen kasvainten kehittymiseen. Samanlainen vaikutus voidaan havaita kaksi mallia karsinogeeni aiheuttaman syövän transgeenisissä hiirissä yli-ilmentävät MIC-1 /GDF15, joilla on myös ehjä immuunijärjestelmä [35,36]. Kaikkein parsimonious selitys, joka voi selittää nämä ristiriidat on, että MIC-1 /GDF15 säätelee syöpälääkkeen immuniteetti, mikä puolestaan ​​säätelee syövän kasvua.

Kaiken tuloksemme tukevat tärkeä suojaava rooli MIC-1 /GDF15 kehittämisessä ja alkuvaiheen kasvun PCa ja todennäköisesti syöpää yleensä. Unravelling biologinen vaikutus MIC-1 /GDF15 kasvaimen kehittyminen ja biologia on käytännön merkitystä useista syistä. Suuri osa syöpien ilmaista sen, siinä määrin, että seerumin taso voi nousta jopa 10-100 kertaisesti ja aiheuttavat syöpää anoreksia /kuihtuminen. Edelleen, sen ilmentyminen lisääntyy kaikissa syövän hoitomuotoja kuten leikkaus, sädehoito ja kemoterapia. Niinpä mitään vaikutusta, että MIC-1 /GDF15 on paikallisia tuumoribiologiassa, erityisesti kasvain leviäminen vaikuttaa todennäköisesti eniten syöpäpotilaille, mikä lisää mahdollisuuksia, että modulaatio MIC-1 /GDF15 toimia hoidon aikana saattaa vähentää etäpesäkkeitä ja muita komplikaatioita syövän.