Krooninen sairaus

tiivistelmä

seulonta

EGFR

mutaatio on keskeinen molekyyli testi hallintaan keuhkosyöpäpotilaita . Tulokset potilailla, joilla on mutaatio, jotka saavat EGFR-tyrosiinikinaasi-inhibiittoria tiedetään olevan parempi eri etnisten populaatioissa. Kuitenkin taajuus

EGFR

mutaatioiden ja kliinisen vasteen useimmissa muissa etnisissä populaatioissa, kuten Intiassa, vielä löytäjäänsä. Teimme Retrospektiivinen analyysi Intian keuhkosyöpään potilailla, jotka hoidettiin suun kautta tyrosiinikinaasiestäjiksi. Suurin osa potilaista tutkimuksessa oli adenokarsinooma ja olivat tupakoimattomia. 39/111 potilasta positiivisiksi

EGFR

kinaasialue mutaatiot määräytyy Taqman perustuu reaaliaikainen PCR. Kokonaisvaste suun TKI-terapialle oli 30%. Potilaat, joilla on aktivoiva mutaatio

EGFR

vastausprosentti oli 74%, kun taas vaste potilailla, joilla villityypin

EGFR

oli 5%, mikä oli tilastollisesti merkitsevää eroa. Ilman taudin etenemistä potilailla, joilla on

EGFR

mutaatioista oli 10 kuukautta, kun 2 kuukautta

EGFR

mutaatio negatiivisilla potilailla. Kokonaiselossaoloaika oli 19 kuukautta

EGFR

mutaatio potilasta ja 13 kuukautta mutaation negatiivisilla potilailla. Tutkimuksessa korostetaan

EGFR

mutaatio tärkeänä ennustava merkkiaine vastaus suulliseen tyrosiinikinaasiestäjiksi Intian väestöstä.

Citation: Noronha V, Prabhash K, Thavamani A, Chougule A, Purandare N , Joshi A, et al. (2013)

EGFR

Mutaatiot Intian Keuhkosyöpä Potilaat: Clinical Korrelaatio ja lopputulos EGFR Kohdennettu Therapy. PLoS ONE 8 (4): e61561. doi: 10,1371 /journal.pone.0061561

Editor: John D. Minna, Univesity Texas Southwestern Medical Center at Dallas, Yhdysvallat

vastaanotettu: 14 tammikuu 2013; Hyväksytty: 11 maaliskuu 2013; Julkaistu: 19 huhtikuu 2013

Copyright: © 2013 Noronha et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: AD on tuetaan Intermediate apurahan päässä Wellcome Trust /Department of Biotechnology Intiassa Alliance. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

valtava tieteen edistysaskeleet viime vuosikymmenellä ovat helpottaneet perusteellisesti luonnehdinta eri tautien alatyyppejä, joka perustuu niiden geneettisiä profiileja. Tällä on syvällisiä vaikutuksia ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC), joka on yleisin syy syöpäkuolemista maailmanlaajuisesti [1]. Hoito-pienisoluisen keuhkosyövän aiemmin perustui pääasiassa potilaan liittyvät tekijät, kuten ikä, suorituskyky tila ja co sairauksia. Kuitenkin viime aikoina molekyylitason edistysaskeleet ovat muuttaneet käsittely maisemaa NSCLC. Keskeiset molekyylitason muutokset, kuten mutaatio kasvutekijän reseptorin (

EGFR

) osallistuvat solujen lisääntymisen ja solujen eloonjäämisen kasvainten [2], [3].

On havaittu, että potilaat, jotka reagoivat hyvin EGFR estäjä satama tietyt mutaatiot

EGFR

eksonit 18, 19 tai 21. Nämä mutaatiot toimivat markkereita ennustamiseen vaste potilailla suun tyrosiinikinaasiestäjiksi suunnattu EGFR tyrosiinikinaasin. Lisäksi mutaatio

EGFR

eksoni 20 tiedetään olevan vastuussa kehittynyt resistenssi tämän hoidon [4]. EFGR tyrosiinikinaasin estäjät (TKI) on mullistanut hoito NSCLC. Potilailla, joiden kasvaimet satama

EGFR

mutaatio, käyttö EGFR-TKI on johtanut lisääntyneeseen vaste ja jatkaminen ilman taudin etenemistä [5].

EGFR

mutaatiot ovat todennäköisempiä potilailla aasialaista alkuperää, jotka ovat naisia, ei koskaan-tupakoitsijoita ja on adenokarsinooma [6]. Kuitenkin on hyvin vähän tietoa esiintymisestä

EGFR

mutaatiot Intian väestöstä ja aktiivisuus EGFR TKI. On vain yksi tutkimus kertoo Intiasta

EGFR

mutaatioita keuhkosyöpä, joka keskittyy lähinnä epidemiologian potilaiden satama nämä mutaatiot [7].

Esitämme Ensimmäisessä tutkimuksessa Intiasta joka korreloi EGFR-mutaatio potilaan asemaan, niiden kliiniseen tulokseen kun hoitaa suun kautta EGFR TKI. Tutkimuksemme tavoitteena oli suorittamalla mutaation havaitseminen DNA uutetaan Formaliini Kiinteät parafiiniin (FFPE) keuhko koepaloja NSCLC potilaiden, ja korreloida mutaatiostatus vastaukseen ja kliinisen tuloksen potilaan EGFR täsmähoitoihin.

Materiaalit ja menetelmät

Tämä tutkimus oli retrospektiivinen analyysi potilaille, joilla on edennyt NSCLC saavat suun kautta EGFR-TKI, johon EGFR-mutaatio asema määritettiin. Projektin hyväksyi Institutional Review Board (IRB) ja eettisen komitean (EY) Tata Memorial Hospital (Mumbai, Intia). Tutkimus seurattiin tutkimuksen seurantaryhmän Tata Memorial Hospital. Koska tämä oli retrospektiivinen analyysi, IRB ja EY luopua tarve tietoon perustuvan suostumuksen. Potilaat valittiin sattumanvaraisesti perustuu saatavuuteen koepalan lohkon tietokannasta ylläpidetään Medical Oncology osastolle Tata Memorial Hospital. Nämä potilaille aloitettiin suullinen TKI osana tavanomaista hoitoa. DNA uutetaan FFPE lohkoja analysoitiin EGFR-mutaatio aseman. Tulos mutaatiostatus sokaisi hoitavasta lääkärin. Tiedot kerätään mukana väestötiedot, lähtötilanteen ominaisuudet kuten tupakointi, histopatologia ja kliinisten tulosten mukaan lukien myrkyllisyys arviointi, vastaus TKI, eteneminen, hoitoa samalla etenemistä ja eloonjäämistä. Vaste arvioitu RECIST v 1.1. Toksisuus oli porrastettu CTCAE, v4.03. Progression määriteltiin kliinisen heikentymisen tai radiologisia etenemistä. TT tehtiin välein 2-4 kuukautta tai riippuen potilaan oireista. Aineisto analysoitiin SPSS, v 15. etenemisestä vapaa elinaika laskettiin alkaen alkaa suun TKI päivämäärän progression (joko oire heikkenemistä tai radiologisia etenemisen) tai kuolema mistä tahansa syystä. Kokonaiselossaoloaika laskettiin alkaen diagnoosia kuolema mistä tahansa syystä. Seuranta-ajan mediaani laskettiin elossa potilaiden jona diagnoosista jona viimeinen seurannan. Tutkimus suoritettiin noudattaen Helsingin julistuksen ja kansainvälisen yhdenmukaistamista suuntaviivoja hyvää kliinistä.

kerääminen potilasnäytteeseen

FFPE lohkot potilaista kerättiin Pathology osasto Tata Memorial Hospital. Hematoksyliinillä ja eosiini värjätään osastoja lohkoja kiinnitettiin objektilaseille ja tarkastella mikroskoopilla ja vahvistettiin, että kasvain – alue oli yli 75% kudosmassasta.

Mutaatio analyysi TaqMan pohjainen reaaliaikainen PCR-tekniikalla

Kun otetaan huomioon korkea esiintymistiheyden spesifisten mutaatioiden eri väestöissä ympäri maailmaa, päätettiin suorittaa TaqMan perustuu reaaliaikaista PCR-tekniikkaa mutaation havaitsemisen avulla antureista, jotka voivat pariutua nimenomaan mutantti tai villityypin alleelin. Mutaatiot tutkittu olivat kehyksessä deleetioita eksonissa 19, L858R pistemutaatio eksonissa 21, ja G719C pistemutaatio eksonissa 18. Määritys suoritettiin 384-kuoppaisille reaktion levyjen (Applied Biosystems), ja reaktio suoritettiin 5 ui, joka sisälsi 2,5 ui Taqman perusseosta (Applied Biosystems), alukkeiden loppupitoisuuteen 9 uM ja koettimien lopullinen konsentraatio 2 uM; jäljellä oleva tilavuus tehtiin enintään 5 ui PCR-laatuista vettä. Reaktio suoritettiin 50 ° C: ssa 2 minuuttia ja 95 ° C: ssa 10 minuuttia, minkä jälkeen 40 sykliä 95 ° C 15 sekuntia ja 60 ° C: ssa 1 minuutti, Applied Biosystems 7900 HT kone.

tilastolliset testit

Kaikki tilastolliset analyysit tehtiin SPSS-ohjelmiston version 15.0. Ero osuudet verrattiin Chi square testi ja merkityksen arvo asetettiin 0,05. Kaplan Meierin käyrä piirrettiin varten ilman taudin etenemistä ja kokonaiselinaika kuukausina. Log rank testiä käytettiin vertaamaan PFS ja OS eri ryhmissä.

Tulokset

Ominaisuudet tutkimuspopulaation

tammi 2010 heinäkuuta 2012, oli 111 potilasta jotka oli otettu tutkimukseen, joilta biopsianäytteestä oli saatavilla, mutaation havaitseminen onnistuneesti suoritettu, suullinen TKI käytettiin hoidon ja koko kliinistä yksityiskohdat olivat saatavilla. Väestörakenne potilaista on esitetty taulukossa (taulukko 1).

TaqMan perustuu reaaliaikainen PCR-tekniikkaan perustuva seulonta

EGFR

mutaatioita

Mutaatio tunnistus tulokset olivat positiivinen 39 potilaalla. Näistä 29 potilasta havaittiin olevan positiivinen kehyksessä deleetion eksonissa 19. L858R pistemutaatio eksonissa 21 havaittiin 9 potilaalla ja G719C pistemutaatio eksonissa 18 havaittiin 1 potilaalla. Useimmat edellä mutaatioista olivat heterotsygoottisia lukuun ottamatta yhtä potilasta, jossa L858R-mutaation havaittiin olevan homotsygoottinen variantti (taulukko 1).

Kliininen Correlation ja vastaus suun tyrosiinikinaasi-inhibiittorilla (TKI) B

Niistä 39 potilasta, jotka löytyivät kätkeminen aktivoivan mutaatioita, 29 potilaalla oli osittainen vaste suun kautta TKI-terapialle, 6 potilaalla oli stabiili tauti, kun taas 4 potilaalla oli etenevä sairaus kuin paras vastaus (taulukko 2). Vuonna 72 potilaille, joille ei ole aktivoiva mutaatio havaittiin 4 potilaalla oli osittainen vaste, 22 potilaalla oli stabiili tauti ja 46 oli etenevä sairaus. Täten vaste suullinen TKI mutaation positiivisilla potilailla oli 74%, kun taas vasteasteen mutaatio negatiivisilla potilailla oli 5%. Chi-square testi paljasti huomattavan korrelaatio mutaatio potilaan tila ja vaste havaittiin, jossa ap arvo 0,001.

Survival by

EGFR

mutaatio tila

mediaani seuranta-aika oli 18 kuukautta (vaihteluväli: +16,4-19,7kuukautta). Arvioitu mediaani PFS koko kohortin potilaista oli 4 kuukautta (95% CI: +2,5-+5,5kuukausi). Arvioitu mediaani PFS EGFR mutantti potilailla oli merkitsevästi pidempi 10 kuukauden aikana (95% CI: 8-11,9 kuukautta) verrattuna arvioituun mediaani PFS EGFR-negatiivisilla potilailla mikä oli 2 kk (95% CI: 1,5-2,5 kuukausi) , p = 0,000 log rank -testi (Mantel Cox) (kuva 1a). Arvioitu mediaani kaikille potilaille oli 13 kk (95% CI: 10,7-15,3 kuukautta). Arvioitu mediaani EGFR positiivisilla potilailla oli 21 kk (95% CI: 12,4-25,6kuukausi), kun taas että EGFR-negatiivisilla potilailla oli 10 kuukautta (95% CI: 7,4-12,6 kuukausi), p = 0,001 log rank -testi ( Mantel Cox) (kuva 1b).

(A) etenemisestä vapaa elinaika (PFS) varten

EGFR

mutantti potilailla oli 10 kuukautta (95% CI: 8-11,9 kuukautta), kun taas arvioitu mediaani PFS

EGFR

mutaatio negatiivisilla potilailla oli 2 kuukautta (95% CI: 1,5-2,5 kuukausi), p = 0,000 log rank -testi (Mantel Cox). (B) Overall (OS) ja

EGFR

mutantti potilailla oli 21 kk (95% CI: 12,4-25,6 kuukautta), kun taas arvioitu mediaani OS

EGFR

mutantion negatiivisilla potilailla oli 10 kk (95% CI: 7,4-12,6 kuukausi), p = 0,001 log rank -testi (Mantel Cox).

myrkyllisyys liittyy suun kautta tyrosiinikinaasiestäjä (TKI) B

tärkeimmät toksisuudet totesi olivat ihon ja ruoansulatuskanavan, kuten esitetään taulukossa 3. Muut toksisuudet todettiin 2 potilaalla sisältyy ruokahaluttomuus, väsymys ja mukosiitti. 62 potilasta ei kokenut myrkyllisyyttä.

Keskustelu

Worldwide, se on nyt tunnettu, että molekyylimarkkereita, erityisesti EGFR aktivoivat mutaatiot, tunnistaa potilasalaryhmässä NSCLC, jonka tulos on parempi tyrosiinikinaasin EGFR suunnattu hoitojen [5]. Kuitenkin on olemassa riittävästi tietoja Intiasta koskien EGFR-mutaatio ja vastauksen ja tulosten perusteella hoidetuilla potilailla tyrosiinikinaasin EGFR: n estäjien. Esitämme ensimmäisen kliiniset tiedot Intiasta koskien EGFR-mutaatio pienisoluista keuhkosyöpää ja kliininen tulos näiden potilaiden suun TKI-terapialle.

Suurin osa (81%) potilaista tutkimuksessamme olivat tupakoimattomia, joka on merkittävä osa (48%) oli naisilla ja suurin osa potilaista (96%) oli adenokarsinooma. Täten selvästi tämä oli kliinisesti rikastunut populaatio jotka valittiin suun TKI-terapialle perustuu kliinisiin parametreihin ja meidän kohortin voi olla todella edustava todellinen keuhkosyövän potilaalle allas Intiassa [8], [9].

tutkimuksessamme 39 ulos 111 potilasta, eli 35% potilaista havaittiin satamaan

EGFR

mutaatio. Edellisessä tutkimuksessa Intiasta havaittu, että mutaatio oli 51,8% [7]. On todennäköistä, että molemmat tutkimuksemme ja ennen Intian raportin yliarvioi esiintyvyys

EGFR

mutaatio, koska otoskoko on pieni ja kliinisesti valikoiduilla potilailla. Maailmanlaajuisesti ilmaantuvuus

EGFR

mutaatioita on hyvin tunnettu ja sen on raportoitu esiintyvän nopeudella 10-15% Pohjois-amerikkalaiset ja eurooppalaiset, 19% Afrikkalainen-amerikkalaiset ja noin 30%: in Itäaasialaiset [10] – [13]. Olemme havainneet, että 35 39 potilailla, joilla on

EGFR

mutaatioiden (90%) oli tupakoimattomien, kun taas 53 70 potilasta, jotka olivat EGFR-mutaatio negatiivinen (76%) oli tupakoinnin historiaa. Mitä tasa predilection, 27 39 potilailla, joilla on

EGFR

mutaatioiden (69%) oli naisia, kun taas 46 72 potilailla, joilla on

EGFR

-negatiivinen kasvaimia (64%) oli miehiä. Koska valtaosa potilaista tutkimuksessamme oli adenokarsinooma (96%) ja kaikki potilaat olivat Intiasta, on mahdotonta kommentoida korrelaatio patologian tai etnisen osoitteeseen

EGFR

mutaatio asema.

tyypin osalta

EGFR

mutaatioita havaittiin 74%: lla potilaista havaittiin olevan kehyksessä poistetaan eksonissa 19, 23% oli L858R pistemutaatio eksonissa 21, ja vain 2,5%: lla potilaista oli G719C kohta eksonissa 18. raportoitu kirjallisuudessa, noin 45 54% EGFR mutaatioita ovat lukukehyksessä deleetiot eksonissa 19, kun taas noin 40%

EGFR

mutaatiot ovat missensemutaatioita in L858R eksonin 21 ja välillä 4-9%: n mutaatioiden on raportoitu eksonin 20 [5].

toksisuus todettiin myös potilailla oli samanlainen kuin on kuvattu kirjallisuudessa, vaikkakin vähemmän toksisuutta ei havaittu kuin mitä on kuvattu aikaisemmin. Meillä ei ole kyse interstitiaalinen keuhkosairaus seurauksena suun TKI-terapialle. Vuonna IPASS tutkimuksessa 66% potilaista kehittyi ihottumaa ja 47%: lla potilaista koki ruoansulatuskanavan toksisuutta. Taannehtivuus meidän analyysi voi olla yksi syy siihen, miksi toksisuutta havaittiin jonkin verran; mutta Intian potilailla voi esiintyä vähemmän toksisuutta seurauksena EGFR kohdennettuja hoitomuotojen johtuu useista tekijöistä, kuten etnisyys, tumma iho, erilaisia ​​ruokavaliotaan ja muita rotuerojen.

Kokonaisvasteen suun TKI-terapialle oli 30%. Potilaat, joilla on aktivoiva mutaatio

EGFR

vastausprosentti oli 74%, kun taas vaste potilailla, joilla on villin tyypin EGFR oli 5%, mikä oli tilastollisesti merkittävä ero, p 0,001. Tämä on hyvin samankaltainen kuin mitä on raportoitu kirjallisuudessa, joiden vaste on 72% vuonna mutantti positiivisilla potilailla, ja vastausprosentti oli 1,1% mutantti negatiivisilla potilailla [5]. Hieman korkeampi vaste meidän mutantti negatiivisilla potilailla todennäköisesti tarkoittaa, että emme pystyneet havaitsemaan

EGFR

mutaatio, kun se oli itse asiassa läsnä, tai että on olemassa muita geneettisiä tapahtumia

EGFR

tai vaihtoehtoisen reitin, joka siirrettävä herkkyys suun TKI huolimatta puute

EFGR

mutaatio. Muut tutkimukset raportti vaihteleva hoitovaste suun TKI in

EGFR

negatiivisilla potilailla. Tutkimuksessa, Han et al, vastausprosentti gefitinibille oli 25,9% EGFR mutaatio negatiivisilla potilailla, verrattuna 84,6% EGFR mutantti potilailla [14]. Yang et ai raportoi 20% vaste gefitinibin

EGFR

negatiivisilla potilailla, kun Han et al raportoitu vastausprosentti oli 13,7% [14], [15]. Syynä monenlaisia ​​vastausprosentteja suun TKI potilailla, joilla ei havaita pitää mukanaan

EGFR

aktivoiva mutaatio, on, koska eri herkkyyksiä menetelmän käytetään havaitsemaan

EGFR

mutaatio. Tutkimuksessamme 4 potilaalla havaittiin satamaan aktivoimalla mutaatioita EGFR tyrosiinikinaasialueeseen havaittiin olevan resistenttejä Gefitinibi niiden 2-3-kuukauden seuranta scan. Tämä saattaa olla johtuen mahdollisesti laatimalla johdettuun mutaatioiden tuloksena on kehittynyt resistenssi EGFR kohdennettuja hoitoja. Näin ollen on tarpeen tarkastella lisää markkereita tehokasta ennusteen vaste EGFR-TKI: ja se on myös tarpeen saada koepaloja primaarikasvaimen myöhemmin aikana hoidon läsnäolon havaitsemiseksi johdetun mutaatioita, jotka voivat muuttaa vaste potilaiden lääkkeiden [6].

Mitä selviytymisen, arvioitu elinaika ilman taudin etenemistä (PFS) kaikille potilaille oli 4 kuukautta. PFS potilailla, joilla EGFR-mutaatio oli merkitsevästi pidempi 10 kuukautta, verrattuna arvioitu PFS 2 kuukautta

EGFR

negatiivisilla potilailla, p = 0,000 log rank -testi. Arvioitu kokonaiselinaika kaikille potilaille oli 13 kuukautta. Arvioitu mediaani niistä potilaista, joilla

EGFR

aktivoivia mutaatioita oli merkitsevästi pidempi 21 kuukauden ikäisinä, verrattuna arviolta mediaani 10 kuukauden

EGFR

negatiivisilla potilailla, p = 0,001 log rank-testi. Päivitetyssä selviytymisen tulokset IPASS tutkimuksen, mediaani PFS vuonna mutaatio positiivisilla potilailla oli 9,5 kuukautta vs. 1,5 kuukautta mutaation negatiivisilla potilailla, kun taas OS mutaatio positiivisilla potilailla oli 21,6 kuukautta vs. 11,2 kuukautta vuonna

EGFR

– negatiivisilla potilailla. Heidän tutkimuksessaan sairastavilla potilailla

EGFR

aktivoivia mutaatioita, Maemondo ym raportoitu PFS 10,8 kuukaudesta OS 30,5 kuukautta gefitinibiä [16]. Siten eloonjääminen tulokset meidän potilaat ovat samanlaisia ​​tuloksia aikaisemmin raportoitu kirjallisuudessa.

Näin Intian potilailla, joilla EGFR aktivoivia mutaatioita on huomattavasti parempi hoitovaste, elinaika ilman taudin etenemistä ja eloonjäämiseen hoidettiin EGFR kohdennettuja hoitoja.