Krooninen sairaus

tiivistelmä

Prediction eturauhassyövän ennuste on haastava ja ennustava biomarkkerit toistumisen jäävät hämäräksi. Vaikka prostataspesifisen antigeenin (PSA) on korkea herkkyys (90%), jonka PSA taso 4,0 ng /ml, sen alhainen spesifisyys johtaa monia vääriä positiivisia tuloksia ja huomattavaa ylihoito potilaiden ja sen suorituskyky alemmilla alueilla on huono. Ottaen histopatologisen ja molekyylitason heterogeenisyys eturauhassyövän, ehdotamme, että paneeli markkereita on parempi väline kuin yksi merkki. Testasimme paneelin markkereita koostuu anti-apoptoottisen proteiinin FLIP ja sen transkription sääntelyviranomaisten SP1 ja SP3 käyttämällä eturauhasen kudoksia 64 potilailla, joilla on toistuvia ja kertaluonteisia syöpä, joille tehtiin eturauhasen ensisijaishoitona eturauhassyövän ja seurattiin PSA mittausten vähintään 5 vuotta. Immunohistokemiallinen värjäys SP1, SP3, ja FLIP suoritettiin näiden kudosten ja pisteytetään perustuva osuus ja värjäyksen voimakkuuden. Ennustearvo FLIP /SP1 /SP3 allekirjoituksen kliiniseen lopputulokseen (uusiutumista vs. ei-toistuminen) tutkittiin kanssa logistinen regressio, ja yhdistelmät FLIP /SP1 /SP3 ja Gleason pisteet analysoitiin vaiheittaista (taaksepäin ja eteenpäin) logistinen malli. Syrjintä on merkkiaineiden tunnistettiin herkkyyttä spesifisyyden analyysin ja diagnostinen arvo FLIP /SP1 /SP3 määritettiin käyttäen käyrän alapuolinen alue (AUC) vastaanottimen operaattorin ominaiskäyrät. AUC FLIP, SP1, SP3, ja Gleason pisteet ennustamiseen PSA vika ja ei-vika oli 0,71, 0,66, 0,68, ja 0,76, tässä järjestyksessä. Kuitenkin tämä nousi 0,93 yhdistettynä. Näin ollen ”biomarkkereiden allekirjoitus” FLIP /SP1 /SP3 yhdistää Gleason ennustaa taudin uusiutumisen ja ositettu potilaille, joille voi hyötyä enemmän aggressiivinen hoito.

Citation: Bedolla RG, Gong J, Prihoda TJ, Yeh IT, Thompson IM, Ghosh R, et al. (2012) ennustearvo SP1 /SP3 /FLIP allekirjoitus Eturauhasen syövän uusiutumiseen. PLoS ONE 7 (9): e44917. doi: 10,1371 /journal.pone.0044917

Editor: Tšad Creighton, Baylor College of Medicine, Yhdysvallat

vastaanotettu: toukokuu 24, 2012; Hyväksytty: 09 elokuu 2012; Julkaistu: 13 syyskuu 2012

Tämä on avoin-yhteys artikkeli, vapaa kaikki tekijänoikeudet, ja saa vapaasti jäljentää, levittää, välittää, modifioitu, rakennettu, tai muuten käyttää kuka tahansa laillista tarkoitusta. Teos on saatavilla Creative Commons CC0 public domain omistautumista.

Rahoitus: Tätä työtä tukee osittain varoja Clinical Translational tiedepalkinto (CTSA) avustus (UL1RR025767); National Cancer Institute R01 CA 135451 ja Veterans Affairs-kunniapalkinnon 1 I01 BX 000766-01 (APK); R01 CA 149516 (RG); ja EDRN (UO1 054174, IT). Tekijät myöntävät antama tuki Cancer Therapy and Research Center University of Texas Health Science Center San Antonio kautta National Cancer Institute avustustuen # 2P30 CA 054174-17 (APK, IMT ja RG). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Eturauhassyöpä (PCA) on toiseksi suurin syy syöpään liittyvät kuolemat miehillä ja odotetaan aiheuttavan 28170 kuolemantapausta Yhdysvalloissa vuonna 2012 [1]. PCA yleensä vaikuttaa miesten yli 65-vuotiaita, mutta on edelleen veltto ja oireetonta useimmissa tapauksissa. Histopatologisen ja molekyylitason heterogeenisuus tauti tekee ennustamista ennuste haastavia. Vaikka PSA on yleisimmin käytetty seerumimarkkerina eturauhassyövän, sillä ei ole hyväksytty rajakohta korkea herkkyys ja spesifisyys ja johtaa usein vääriä positiivisia tuloksia [2] – [4]. Lisäksi tällä hetkellä ei molekyylimarkkereina joka voidaan luotettavasti ennustaa, syöpää edeltävät vauriot uusiutua tai kehittyä invasiivisen PCA [2] – [6]. Kelvollinen biomarkkereiden pitäisi olla seuraavat ominaisuudet: (i) tarkkuus (ei tulisi virheellisesti ennustaa positiivisia tai negatiivisia tuloksia); (Ii) valikoivuus (kyky diagnosoida taudin aikana taudin etenemisen); ja (iii) spesifisyys (kyky erottaa syöpä- peräisin ei-syöpä fenotyyppi). Vaikka PSA täyttää useimmat näistä kriteereistä ja on laajalti käytössä, sitä rajoittaa sen alhainen arvot erityinen ja valikoiva [2] – [6]. Koska yhä enemmän merkkejä ylihoito eturauhassyövän, on tärkeää tunnistaa ja vahvistaa uusia prognostisia markkereita, jotka ennustavat kliinisesti merkittävä eturauhassyöpä [6] – [10]. Tällaiset markkerit mahdollistavat kohdennettuja potilaiden hoitoon aggressiivisen kasvaimia ja välttämällä turhaa käsittelyä ja sen sivuvaikutukset potilailla, joilla indolent sairaus.

Tutkimus viime vuosikymmenen aikana on havaittu useita biomarkkereita, jotka liittyvät korkea Gleason asteen tauti [7] – [13]. Aiemmat tutkimukset laboratoriossamme löysivät korrelaation ilmaus FLICE-estävä proteiini (FLIP) ja kasvaimen ihmisen eturauhassyövän [13]. Erityisesti olemme huomanneet, että korkea-asteen Gleason kasvaimet osoittavat lisääntynyt FLIP värjäyksen verrattuna huonolaatuisen Gleason kasvaimet (p = 0,04) [13]. Kokeissa ymmärtää rooli FLIP asetuksen aikana eturauhasen syövän synnyn tunnistimme transkriptiotekijöiden SP1 ja SP3 tärkeinä säätelijöinä FLIP transkriptionaalista aktiivisuutta eturauhassyövän soluissa [13]. Olemme lisäksi osoittaneet, että SP1 trans-aktivoi FLIP promoottori kun SP3 estää SP1-välitteisen trans-aktivoitumisen, mikä syytetään rooli näiden tekijöiden aikana eturauhasen syövän synnyn. Kuitenkin, se ei ollut tiedossa, onko näistä merkeistä voidaan saavuttaa herkkyys ja tarkkuus tarpeen erottaa aggressiivinen alkaen indolent taudista. Täällä arvioimme onko ”biomarkkereiden allekirjoitus” FLIP, SP1, ja SP3 voi ennustaa kehitystä eturauhassyövän uusiutumisen immunohistokemiallisella arviointi kudosnäytteitä saatiin potilailta, joille tehtiin eturauhasen ensisijaishoitona eturauhassyövän ja havaittiin vähintään 5 vuotta PSA mittauksia. Osoitamme, että yhdistelmä FLIP, SP1, SP3, ja Gleason on erinomainen ennustaja biokemiallisten toistumisen. Viljelyala vastaanotin operaattori ominaiskäyrä FLIP, SP1, ja SP3 ennustettaessa PSA vika oli 0,71, 0,66, ja 0,68 vastaavasti; kuitenkin, kun nämä kolme merkkiä yhdistettiin Gleason pisteet AUC nousi 0,93. Tämän tason ennusteen PSA vika viittaa siihen, että tämä biomarkkereiden paneeli voisi olla tärkeä ennustaja biokemiallisten uusiutuminen.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaille ja kudokset

Käytimme kudokset GU kudoksesta arkiston Teksasin yliopiston Health Science Center, San Antonio, TX, jolle kirjallinen suostumus hyväksyntä saatiin Institutional Review Board (Protocol määrä HSC 20050234H oikeus kudospankilla ja tietokanta Urologiset sairaudet) The University Texas Health Science Center, San Antonio, TX. Nämä potilaalle tehtiin eturauhasen ensisijaisena hoito eturauhasen syöpä yliopistollisen sairaalan ja Etelä-Texas Veterans Health Care System, Audie Murphy Veterans Administration Hospital San Antonio, Texas. Nykyisessä tutkimuksessa, kudokset käytettiin 64 tunnistamattomia potilaista (hyväksymä Institutional Review Board yliopiston Texas Health Science Center at San Antonio). Potilaiden ikä oli 51-76 vuotta, mediaani-ikä 63 vuotta (taulukko 1). Tapaukset luokiteltiin toistuva jos PSA oli havaittavissa ja nousi 0,2 ng /ml tai suurempi, kuten varmistettiin toisella PSA-testi. Potilaat ilman toistuminen ollut havaittavissa PSA-arvot tai PSA 0,2 ng /ml aikana vähintään 60 kuukauden seuranta-ajan jälkeen eturauhasen. 64 aiheita, 30 oli toistuva syöpä (47%) ja 34 oli ilman toistumisen (53%). Gleason tulokset olivat merkittävästi erilaisia ​​ryhmien välillä (p = 0,0001): 82,35% ei-toistuvat tapaukset (PSA ei vika) oli matala Gleason grade [5-7 (3 + 4)], kun taas 76,66%: n PSA toistumisen tapauksissa (PSA vajaatoiminta) oli korkea Gleason grade [7 (4 + 3) 9].

Enimmäisarvosana tälle näyte oli 0, 6, ja 0 FLIP, SP1, ja SP3 vastaavasti. B. H 1, ≤1%; 2, 1-10%; 3, 10-33%; 4, 33-66%; 5, 66-100% positiivista värjäytymistä. Intensiteetti pisteet (IS) edustaa keskimääräistä värjäytymisen intensiteetti kasvainsolujen: 0, ei värjäystä; 1, heikko; 2, kohtalainen; 3, vahva värjäytyminen. Osuus pisteet ja intensiteetti pisteet lisättiin saamiseksi kokonaispistemäärästä (TS), jonka alueella 0 8.

alapuolella oleva alue ROC käyrät laskettu yhdistelmä FLIP, SP1, SP3, Gleason pisteet, ja niiden vuorovaikutukset antaa arvo 0,93 osoittaa erinomaista syrjiä kertaluonteiset ja toistuvia tapauksia.

tilastolliset menetelmät ja analyysi

Association of FLIP /SP1 /SP3 biomarkkereiden allekirjoituksen kliinisten tutkimusten tulosten kanssa (toistuminen vs. ei-toistuminen) arvioitiin käyttämällä useita tilastollisia menetelmiä. Keskimääräinen värjäystä pistemäärät proteiinin ilmentymistä näissä kahdessa ryhmässä verrattiin Wilcoxonin-sum test. p-arvot 0,05 pidettiin merkittävinä. Ennustearvo kunkin merkin (FLIP, SP1, ja SP3) ja kliininen tulos (uusiutuminen tai ei toistuminen) ensin tutkittu yksilöllisesti logistinen regressio, ja sitten lisäaine ennustearvon FLIP /SP1 /SP3 allekirjoitus ja missä määrin ne vuorovaikutuksessa keskenään ja Gleason pisteet tutkittiin kanssa taaksepäin valinta malli. Syrjintä on merkkiaineiden tunnistettiin herkkyyttä spesifisyyden analyysin ja diagnostinen arvo FLIP /SP1 /SP3 allekirjoituksen määritettiin käyttäen käyrän alapuolinen alue (AUC) vastaanottimen operaattori (ROC) käyriä. Muuttujia p 0,15 jäivät [14] parantaakseen tarkkuutta merkitsevä (p 0,05) muuttujat raportoitu. Lopullista mallin Hosmer-Lemeshowin hyvyyttä suoritettiin. Merkitys tasot ja AUC ROC käyrä raportoidaan. Analyysi suoritettiin käyttäen SAS versiossa 9,2 (SAS Institute Inc.) ja STATA versio 9.2 (STATA Corporation).

Tällä todennäköisyydellä rajakohtaa 0,45 sekä herkkyys (80%) ja spesifisyys (85,3 %) tämän yhdistelmän markkereita on korkea, mikä osoittaa erinomaista syrjintä voiman yhdistelmä.

tulokset

tässä tutkimuksessa arvioitiin ilmentymistä antiapoptoottinen proteiini FLIP ja sen transkriptio sääntelyviranomaisten Sp1 ja SP3 immunohistokemiallisella arviointi kudosnäytteitä saatu 64 potilasta, joille tehtiin eturauhasen kuin ensisijainen hoito eturauhasen syöpä. Potilailla oli vähintään 60 kuukautta kestäneen seurannan PSA mittausten ja vain ne, joilla on havaittavissa PSA 60 kuukauden katsottiin olevan ei-uusiutuva sairaus. Lisääntyvää PSA jälkeen eturauhasen käytettiin korvikkeena päätepisteenä Huonon lopputuloksen. PSA ei-vika määriteltiin PSA-tasot huomaamaton tai 0,2 ng /ml vähintään 5 vuotta sen jälkeen, kun eturauhasen eikä muita merkkejä toistumisen kuten etäpesäke. PSA epäonnistuminen määriteltiin PSA 0,2 ng /ml, joka kasvoi 5 vuotta tämän eturauhasen [15]. Vähäisen otoskoko ainoastaan ​​kaksisuuntaisia ​​yhteisvaikutuksia tutkittiin ja PSA ei lisätty Gleason pisteet. Ensinnäkin, vertasimme ilmaus FLIP, SP1, ja SP3 ryhmien välillä käyttäen immunohistokemia ja todettu merkittäviä eroja PSA vika ja ei-vika ryhmien ilmaisua FLIP, SP3, ja SP1 (Wilcoxonin-summa, kuvio 1 ja kuva 2). Kuten näkyy rasiakuvaajien kuvassa 1, löysimme huomattavia eroja keskimääräisen koko IHC pisteet välillä kertaluonteisia ja toistuvia tapauksia varten SP1 (p = 0,019), SP3 (p = 0,011), ja FLIP (p = 0,0019) . Olemme myös Gleason meidän analyysi, koska tämä tulee olemaan vaikutusta lopputulokseen. Gleason tulokset meidän 64-potilaan kohortin olivat merkittävästi erilainen toistuvien ja kertaluonteisten ryhmissä (p = 0,0001; tuloksia ei ole esitetty). On syytä mainita, että tämä ei välttämättä ole, kuten tutkimukset ovat osoittaneet, että Gleason luokka 7 itsessään voi olla merkittäviä [16]. Meidän kohortti, 50% eturauhasen tapauksista oli Gleason 7: (29,69% oli 3 + 4 ja 20,3% oli 4 + 3). Niistä 29.69%, jotka olivat 3 + 4, 41,2% oli kertaluonteiset ja 16,67% oli toistuvia tapauksia. Toisaalta, on 20,3% ja aggressiivisempi 4 + 3 ryhmittely, 8,8% oli kertaluonteiset ja 33,33% oli toistuvia. Nämä tiedot viittaavat siihen, että erot FLIP, SP1, ja SP3 välillä biokemiallisesti toistuvien ja kertaluonteisten ryhmät ovat merkittäviä.

Kotelot yläpuolella rajakohta 0,45 (katkoviiva) ennustetaan uusiutua. Vuorovaikutus FLIP ja SP3 näkyy yksivärinen viivoja X-akselilla. B. Ennustettu todennäköisyys toistumisen kun Gleason on korkealaatuista 7 (4 + 3) eri tasoilla SP1 (0, 3, ja 6) ja SP3 (0-6) funktiona FLIP (0-8) vuorovaikutus. Tapaukset yläpuolella rajakohta 0,45 (katkoviiva) ennustetaan uusiutua. Vuorovaikutus FLIP ja SP3 näkyy yksivärinen viivat X-akselilla.

Perustuu merkittäviä eroja havaittu biokemiallisesti toistuvien ja kertaluonteisten ryhmät, me seuraavaksi lasketaan herkkyys ja spesifisyys generoitu data [16] – [17]. Univariate logistinen regressio FLIP, SP1, SP3, ja Gleason arvosana johtivat AUC varten ROC käyrät 0,71, 0,66, 0,68, ja 0,76, vastaavasti (kuva 3).

Kun otetaan huomioon edellä esitetyt tulokset selvitimme ennustavia arvo merkkiaineiden avulla monimuuttuja logistinen malli, jossa on taaksepäin valinta, joka sisältyy Gleason (korkea vs. matala) (p = 0,14), FLIP (p = 0,07), ja SP1 (p = 0,08) kuin tärkeimmät vaikutukset ja yhteisvaikutuksia FLIP SP3 (p = 0,02), SP1 (0,11), ja Gleason (p = 0,03) sekä vuorovaikutusta SP3 ja Gleason (p = 0,014), toiseksi aikavälin vaikutuksia. Nämä vuorovaikutukset olivat merkittävästi toisistaan ​​kertaluonteiset ja toistuvia ryhmiä. Muuttujia p 0,15 säilytettiin varten Hosmer-Lemeshowin hyvyyttä mallin, käyttäen PSA vika vs. muu vika kuin riippuva muuttuja. Malli oli hyvä istuvuus, jossa chi-neliö arvo 8,8 ja p = 0,4, AUC varten ROC käyrä 0,93 (kuva 4). Optimaalisella rajakohta 0,45, herkkyys oli 80% ja spesifisyys oli 85,29%, jolloin luokitellaan oikein 83%: ssa tapauksista (kuva 5).

Kuvassa 6 potilasta, jotka ennustetaan toistua perustuu näihin biomarkkereita. Sekä Gleason ja PSA yksin herkkyydet alle 80% siksi tämä malli on parannus markkereita käytössä. Meidän logistinen regressio ennusteen juoni osoittaa, että yhdistelmä FLIP, SP1, ja SP3 lisäksi Gleason on prognostisia PSA vika ja ei-vika. Kun piirretään mallin tulokset ennustettu todennäköisyys toistumisen Y-akselilla ja vuorovaikutusta FLIP-SP3 Gleason grade (matala tai korkea) X-akseli, voimme selvästi nähdä vaikutuksen vuorovaikutuksen kahden merkin välillä ja vaikutuksen Gleason luokalla, ja myös vaikutuksen SP1 kolmella tasolla (pisteet 0, 3, ja 6). Kuviossa 6 A B, kaikissa tapauksissa suuremmat rajakohta 0,45 (katkoviiva) ennustetaan olevan toistuva. Jokaisen kasvu värjäytyminen pisteet SP3 yhdessä kasvua FLIP, uusiutumisen riskiä nousee jopa alhaisella Gleason arvosana 5-7 (3 + 4). Kuitenkin, kun Gleason arvosana on korkea 7 (4 + 3) -9 ja SP1 on korkea (6), riski kasvaa dramaattisesti. Kun FLIP on 4 (vaihteluväli 0-8) ja Gleason laatu on korkea, sekä SP3 ja SP1 täytyy olla lähellä 0 tapausta varten olevan ei-toistuva, mutta kun SP1 pisteet on 3, tapauksissa FLIP pisteet 4 ovat toistuva kun SP3 on ≥1 (kuvio 6 A ja B). Tämä malli osoittaa, että FLIP, SP1, ja SP3 tasot yhdessä Gleason arvosana voi olla hyvä ennustaja riskiä biokemiallisten uusiutumisen jälkeen eturauhasen. Kuva 6 osoittaa, että tietylle arvon SP3 pisteet (riippumaton SP1 pisteet), ennustettu todennäköisyys toistumisen lisääntyy FLIP värjäys kun Gleason oli alhainen, mikä viittaa mahdollista yhteisvaikutusta. Toisaalta, kun Gleason oli korkea, vaikka ennustettu todennäköisyys toistumisen lisääntyi FLIP värjäys kun SP1 tilanne oli 0 tai 3, kun SP1 pistemäärä oli 6, emme nähneet tätä vuorovaikutusta, mikä viittaa siihen, että Gleason ja SP3 riittävät ennustamiseen toistumisen (taulukko 2).

esitetyt tiedot tässä käsikirjoitus näyttää olevan tärkeää, että FLIP /SP1 /SP3 allekirjoituksen ennustamiseen biokemiallisten uusiutuminen tässä Potilaskohortti. Meidän aiemmin julkaistu tutkimukset osoittivat, että on tärkeää transkriptiofaktoreiden SP1 ja SP3 transkription säätelyyn FLIP [13]. Nykyiset tiedot viittaavat siihen, että nämä proteiinit ovat merkittäviä toimijoita toistumiseen eturauhassyöpää. Lisäksi geenien kokeet, joissa käytetään eturauhassyövän solulinjoissa viittaavat siihen, että Sp1 fysiologisesti säädellä FLIP (tuloksia ei ole esitetty). Nämä tulokset viittaavat siihen, että FLIP ilmentymistä säätää positiivisesti SP1 kasvainsoluissa ja että kohdistaminen SP1 /SP3 /FLIP voisi olla mahdollinen avenue kliinisessä hoidossa toistuvia eturauhassyöpää. Me spekuloida, että SP1 /SP3 voi estää FLIP promoottorin aktiivisuutta, aktivoitumiseen johtavat apoptoottisen signalointi.

Keskustelu

Tehokas kliinisessä hoidossa PCA on haitannut merkittävästi kasvaimensisäisenä heterogeenisyys yhdistettynä täysin ymmärretty molekyyli- liittyvien tapahtumien taudin kehitystä ja sen jälkeen uusiutumisen seuraavat perinteiset hoidot [18] – [19]. Siksi on olemassa täyttämätön tarve uusien menetelmien ja /tai aineita PCA hallintaan. Koska yksittäiset geneettistä vaihtelua ja heterogeenisyys taudin, yksilöllisten lähestymistavat ovat kriittisiä onnistuneen hallinnan PCA. Kehittää tällaisia ​​yksilöllisiä hoitotapaa, on tärkeää tunnistaa paneelin biomarkkereiden tai ”biomarkkereiden allekirjoitus”, jota voitaisiin käyttää ositusta potilaille mukaan vastaavat erityisiin hoitoihin [20] – [21]. Vaikka seerumin PSA seulonta on laajalti käytetty, PSA on seuraavat rajoitukset kuin varhaisen havaitsemisen biomarkkerit [20] – [23]: (i) kohonneet seerumin PSA on havaittu ei ainoastaan ​​eturauhasen syöpä, mutta myös hyvänlaatuisen eturauhasen liikakasvun potilaille, siis PSA ei ole spesifinen eturauhasen syöpään, ja (ii) PSA ei ole riittävän herkkä osoittamien eturauhassyöpä Prevention Trial (PCPT), joka osoitti, että 15% miehistä, joilla PSA taso 4 ng /ml oli eturauhasen syöpä ja 15% näistä potilaista oli korkea Gleason asteen tauti. Lisäksi kaksi satunnaistettua tutkimusta osoitti vaatimaton vaikutus PSA eturauhassyöpään kuolleisuutta, mikä viittaa merkittävän riskin negatiivisten koepala ja ylidiagnostiikka ja ylihoito on laiska syöpä. Vaikka lukuisia markkereita kuten α-methyacylCoA-rasemaasi (AMCAR), rasvahapposyntetaasi (FASN), ERG, ja eturauhasen-erityinen kalvo (PSMA), on tunnistettu perustuen prekliinisissä tutkimuksissa ja osoitettu liittyvän tulosten kanssa eturauhassyövän jälkeen kirurginen hoito käyttäen ihmisen kudosnäytteitä, hyvin harvat näistä ovat ennustearvoa riippumaton perinteisten ennustetekijöiden kuten Gleason pisteet, patologinen vaiheessa ja esikäsittely PSA-arvot [5] – [6]. Parhaan tietomme mukaan ei tällä hetkellä ole herkkiä markkereita seurata tauti uusiutuu.

Tässä tutkimuksessa arvioitiin ilmentymistä antiapoptoottinen proteiini FLIP ja transkriptiofaktoreiden SP1 ja SP3 immunohistokemiallisella arviointi kudoksen näytteet on saatu 64 potilasta, joille tehtiin eturauhasen kuin ensisijainen hoito eturauhasen syöpä. Uskomme, että tämä on ensimmäinen raportti FLIP, SP1, ja SP3 ilmaisun ja korrelaatiota näiden proteiinien biokemiallisesti toistuvia PCA näytteitä. Vaikka lisääntynyt ilmentymä SP1, SP3 tai FLIP osoittivat merkittäviä eroja PSA vika ja ei-vika tapauksissa erikseen ne eivät ole vahvoja ennustavat huonon kliinisen tuloksen perustuen AUC PSA vika käytetään korvikkeena lopputulos: koko ROC käyrä FLIP, SP1, SP3, ja Gleason ennustajana PSA vika ja ei-vajaatoimintatapaukset oli 0,71, 0,66, 0,68, ja 0,76 vastaavasti. Toisaalta, biomarkkerin allekirjoitus SP1 /SP3 /FLIP yhdistettynä Gleason saavuttanut AUC 0,93. Nämä tulokset osoittavat erinomaista syrjiä PSA vika ja ei-vajaatoimintatapaukset ja viittaavat siihen, että tämä biomarkkereiden allekirjoitus on tärkeä ennustaja todennäköisyys biokemiallisten toistumisen. Tämä on merkittävää, koska nykyinen diagnoosimenettelyistä voi erottaa aggressiivinen ja kliinisesti veltto sairaus, mikä lisää miehiä hoidetaan sairauden kuin on välttämätöntä. Kolmen-geenin allekirjoitus yhdistettynä Gleason arvosana oli tarkka 83% ajasta meidän kohortissa.

Havainto, että SP1 /SP3 ja FLIP voi olla ennustavia kliinisen tuloksen voi heijastaa heidän tärkeä rooli eturauhassyövän. Lisääntyvät SP1 /SP3 /FLIP saattavat liittyä apoptoottisia kestävyys ja etenemiseen biokemiallisten uusiutumisen tai etenemisen matala- ja korkean riskin eturauhassyövän. Cellular FLICE-inhibitorinen proteiini (c-FLIP) on typistetty muoto kaspaasi-8, joka on osoitettu olevan kriittinen rooli resistenssin kehittyminen hoito syöpäsoluja estämällä apoptoosin välittämän kuolemaan reseptorin signalointi [24] – [ ,,,0],25]. Näin ollen FLIP yliekspressoituu erilaisia ​​syöpiä, ja tämän yli-ilmentyminen on osoitettu määrittämiseksi terapeuttisia vastus [26] – [35]. Lisäksi, yliekspressio FLIP on korreloitu huonon ennusteen paksusuolen, virtsarakon, ja urothelial syövät [26] – [35]. Viimeaikaiset tutkimukset laboratoriossamme osoitti, että yksilöt korkealaatuisesta eturauhassyövän esiintyy enemmän ilmaus FLIP kuin tuonti huonolaatuisen kasvaimia [13]. Lisäksi olemme osoittaneet, että FLIP säädellään kopiointia kautta modulaatio transkriptiofaktoreiden SP1 ja SP3 ja että esto FLIP esti eturauhasen kasvainten kehittymistä prekliinisissä eläinmallissa [13]. SP1 ja Sp3 kuuluvat Zn-sormen perheen transkriptiotekijöiden, joiden on osoitettu säätelevän liittyvien geenien solujen eri prosesseissa syövän synnyn, mukaan lukien erilaistuminen, apoptoosi, solumigraatio, ja solusyklin etenemisen [36] – [38]. SP1 SP3 on samanlaisia ​​rakenteellisia ominaisuuksia, kuten erittäin konservoitunut DNA: ta sitovan domeenin ja näin ollen sitoutua DNA samankaltaisella affiniteetilla. Vaikka Sp1 on tunnettu trans-aktivaattori, Sp3 toimii sekä aktivaattoria ja repressorina riippuen solujen yhteydessä. Vaikka tutkimukset SP3 ja syövän puuttuvat, SP1 tasojen on osoitettu olevan koholla erilaisia ​​syöpiä, kuten rinta-, kilpirauhasen, hepatosellulaarinen, haiman, peräsuolen, maha-, ja keuhkosyöpä [38]. Lisäksi epänormaali SP1 proteiinin tasot ovat korreloineet syövän vaiheessa ja huonon ennusteen. Niinpä esto SP1 tai sen seurannaisvaikutuksia alas normaalille solun tasolle vähenee yleensä kasvaimen muodostumisen, kasvun ja etäpesäkkeiden. On huomionarvoista, että olemme aikaisemmin osoittaneet, että SP1 trans-aktivoi FLIP eturauhassyöpäsoluissa, kun taas SP3 estää tätä trans-aktivoitumisen [13]. Näiden tietojen perusteella odotimme nähdä käänteisen yhdistyksen välillä SP1 ja SP3 näistä näytteistä. Kuitenkin havaittiin positiivinen yhteys viittaa siihen, että SP1 ja SP3 on samanlainen toiminnallista roolia yhteydessä kasvaimen microenvironment vaikka muut tekijät, kuten pieni otoskoko, voitaisiin myös edistää näitä havaintoja. Tuloksemme viittaavat siihen, että FLIP ilmaisua voidaan säätää positiivisesti SP1 kasvainsoluissa ja että kohdistaminen SP1 /SP3 /FLIP voisi olla potentiaalinen avenue kliinisen hoidon toistuvia eturauhassyöpää.

Tämä on ensimmäinen raportti kuvaamaan kolmen geenin allekirjoitus, joita voidaan käyttää arvioimaan, onko potilaan syöpä uusiutuisi seuraavat tiettyä hoitoa. Tällainen työkalu olisi merkittävä vaikutus kliiniseen eturauhassyövän hoito. Aiemmat tutkimukset raportoitu, että AR ja Pakt värjäys ennustaa toistumisen jälkeen eturauhasen [17], [39] ja on mahdollista, että yhdistämällä nämä markkereita kanssa Tämän tutkimuksen voi edelleen parantaa ennustuksen uusiutumisen. Suurempi seurata selvitykset, myös validointi Näiden havaintojen avulla itsenäinen aineistoja, ovat perusteltuja arvioimaan hyödyllisyyttä biomarkkereiden allekirjoituksen. Replikointi Näiden tulosten ja sisällyttämistä kaikkien tiedossa ennustetekijöiden tutkimuksessa vahvistaisi myös voimassaolon biomarkkereiden allekirjoituksen, yksin ja yhdessä. Yhteenvetona tietomme osoittavat, että SP1 /SP3 /FLIP allekirjoitus yhdessä Gleason arvosana ennustaa toistumisen eturauhassyövän ja että sen kliinisten sovellusten ehkä välttää tarpeetonta aggressiivinen interventioita, mikä parantaa elämänlaatua ja vähentää terveydenhuollon liittyviä kuluja.

Translational osuma

Vaikka prostataspesifisen antigeenin (PSA) on laajalti käytetty havaitsemiseksi eturauhassyöpä, on tarpeen biomarkkereiden (t), jotka luotettavasti ennustaa eturauhassyövän uusiutumisen. Olemme aiemmin tunnistettu transkriptiotekijöiden SP1 ja SP3 säätelijöinä antiapoptoottinen proteiini FLIP käyttäen soluviljelymalleissa. Myöhemmät tutkimukset osoittivat, että esto eturauhasen kasvainten kehittymistä prekliinisissä eläinmallissa oli mukana alas-säätely FLIP ja SP1. Täällä tutkimme mahdollista käyttöä näiden geenien ennustajina eturauhassyövän ennustetta. Me takautuvasti analysoitiin kudoksia potilailta, joilla on toistuvia ja kertaluonteisia eturauhassyöpä, joille oli tehty eturauhasen ensisijaishoitona ja seurattiin vähintään 5 vuotta PSA mittauksia. Kuuluvilla alueilla vastaanotin toimii ominaiskäyrät yksittäisten merkkiaineiden FLIP, SP1, SP3, ja Gleason pisteet ennustamiseksi PSA vika ja ei-vika oli 0,71, 0,66, 0,68, ja 0,76 vastaavasti. Tämä parani 0,93, kun merkkiaineita yhdistettiin Gleason ja niiden vuorovaikutusta pidettiin. Näiden analyysien perusteella, voimme päätellä, että ”biomarkkereiden allekirjoitus” FLIP /SP1 /SP3 voi ennustaa taudin uusiutumisen ja kerrostuvat potilaat hyötyvät todennäköisesti enemmän aggressiivinen hoito. Nämä tulokset antavat tukea myös kohdistettu SP1 /SP3 /FLIP akseli eturauhassyövän hallintaan ja takaa lisätutkimuksia käyttäen suurempaa näytemäärää ja lisää kliinisiä aineistoja.

Kiitokset

Kiitämme Shellye R Lampkin (Department of Pathology) ja David R Rodriguez, (Greehy Lasten Cancer Institute) yliopiston Texas Health Science Center for apua immunohistokemiaa ja valmistelu malli kaavioita, vastaavasti. Kiitämme Donna P Ankerst ja Xiaoyu Shi, Department of Urology asiantuntevista kommentteja käsikirjoituksen.