Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

ihmisen papilloomavirus (HPV ) liittyy pään ja kaulan alueen syövät (HNCs) ovat luoneet merkittävän määrän tutkimusta kiinnostusta viime aikoina. Johtuen yleisyydestä HNCs ja puute riittävästi tietoa korkean riskin HPV (HR-HPV) infektio Pohjois -East alueella Intiassa, tämä tutkimus suunniteltiin tutkimaan hr-HPV-infektio, sen tyypit ja sen yhdessä elämäntapa tottumukset kuten tupakan, alkoholin kulutus jne

Methods

yhteensä satakuusi ensisijainen HNC Tuumorinäytteiden kerättiin. Nämä näytteet analysoitiin hr-HPV-DNA (13 HPV-tyypit) käyttäen hybridi talteenotto 2 (HC2) määritys ja genotyypitys tehtiin E6 nested multiplex-PCR (NMPCR).

Tulokset

Läsnäolo HR-HPV vahvistettiin 31,13% (n = 33) ja 24.52% (n = 26) HNC potilaiden nested multiplex-PCR (NMPCR) ja HC2 määritys vastaavasti. Niistä hr-HPV positiivisia tapauksia, kolmestatoista HR HPV-tyypit analysoidaan vain kaksi yleistä genotyyppiä, HPV-16 (81,81%) ja sen jälkeen HPV-18 (18,18%) havaittiin. Merkittävää yhteyttä ei havaittu hr-HPV-infektio alkoholin kulutus (p 0,001) ja tupakan pureskelu (p = 0,02) in HNC tapauksissa. Verrattuna HPV-18-infektiota HPV-16 havaittiin merkittävästi tupakointiin liittyviä pureskelusta (p = 0,02) tapa.

Johtopäätökset

Tutkimus osoitti, että tupakka pureskelua ja alkoholin kulutus voi toimia riskitekijöiksi hr-HPV-infektio HNCs Pohjois-idän alueella Intiassa. Tämä oli ensimmäinen tutkimus Pohjois-East India joka myös arvioi kliininen sovellettavuus HC2 määritystä HNC potilasnäytteiden. Ehdotamme, että alkoholin, tupakan ja hr HPV-infektio vaikuttavat synergistisesti tai täydentävät toisiaan prosessissa HNC kehittymistä ja etenemistä tässä tutkimuksessa väestöstä.

Citation: Kumar R, Rai AK, Das D, Das R , Kumar RS, Sarma A, et al. (2015) Alkoholi ja tupakka lisää riskiä korkean riskin HPV-infektio pään ja kaulan syöpäpotilaiden: Tutkimus Pohjois-East Region of India. PLoS ONE 10 (10): e0140700. doi: 10,1371 /journal.pone.0140700

Toimittaja: Jeffrey S. Chang, National Health Research Institutes, Taiwan

vastaanotettu: toukokuu 24, 2015; Hyväksytty: 28 syyskuu 2015; Julkaistu 16. lokakuuta 2015

Copyright: © 2015 Kumar et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi.

Rahoitus: tuettiin Department of Biotechnology, Ministry of Science and Technology, Intia (Grant No. BT /04 /NE /TBP /2010 ja Grant No. BT /Med /NE-SFC /2009) saamat AR ja AKR, vastaavasti [https://www.dbtindia.nic.in/].

kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä olemassa.

Johdanto

pään ja kaulan alueen syöpä (HNC) esiintyvyys vastaa noin 25-30% kaikista syöpätapauksista Intiassa [1]. HNC on monitekijäinen ja monivaiheinen sairaus, joka vaikuttaa anatominen sivustot kuten huuli, suuontelon, nenän ja nenän sivuonteloiden, nenä- nielun, nielu, suuontelon, hypopharynx, kurkunpään jne [2]. Ratkaiseva riskitekijät ovat tupakan, alkoholin käyttö, pähkinä pureskelua, muuttuvat seksuaalinen käyttäytyminen jne, jotka ovat vastuussa useimpien HNC taakka. Vuonna HNC potilailla 50 vuotta ja yli ikä, yhdistysten kanssa näitä keskeisiä riskitekijöitä ovat hallitseva. Tupakoinnin ja alkoholiin liittyviä karsinogeeneja olla tärkeä rooli kehittämisessä HNC todennäköisesti läpi immunosuppressiota [3-6]. Solunulkoiseen ja solunsisäiseen osastoon, tupakansavu synnyttää hiukkasia, kaasumainen tiivisteet ja veden liuenneet aineet. Major luokiteltu mutaatioita ja syöpää aiheuttavien komponenttien savuke on nikotiinia, tervaa, ammoniakkia, hiilimonoksidia, hiilidioksidia, formaldehydi, akroleiini, asetonia, bentsopyreenit, hydroxyquinone, typen oksideja ja kadmiumia. Tervaa ja nikotiinia tupakansavua vaikuttavat synnynnäisen immuunivasteen ja lisätä alttiutta infektioille [7, 8]. Alkoholin kulutus pidetään myös yhtenä riskitekijöitä, jotka voivat edistää syövän synnyn. Kansainvälinen Agency for Research Cancer Maailman terveysjärjestö on luokitellut alkoholia ryhmä 1 karsinogeeniksi [9]. Ihmisen papilloomaviruksen (HPV) kannattivat ensimmäisen kerran Syrjänen et al (1983) riskitekijänä erityisesti suun ja nielun ja suun syöpä [10]. Sen alaryhmä HNC tapauksissa HPV yhdistys on tunnustettu nuorempien ikäryhmässä (alle 50 vuotta) potilailla, joilla ei tapana tupakan ja alkoholin kulutusta [11, 12]. HPV-genomi-DNA oli enimmäkseen havaittu PCR perustuva menetelmä ja tutkimukset ovat osoittaneet, että jopa 60% HNC tapauksissa olla HPV positiivinen [13, 14]. Syy-yhteyttä välillä HPV ja pään ja kaulan alueen syöpä on edelleen ristiriitainen johtuen ristiriitaisia ​​todisteita [15, 16]. HPV yhdessä HNC on oletettu merkitys johtuu havainnoista, että HPV positiivisia HNC tapauksissa on hyvä ennuste verrattuna HPV negatiivisten tapausten [17-21]. Mahdollisia leviämisteiden HPV HNC voi olla suullinen seksuaalista käyttäytymistä aikuisilla ja perinataalisesti lähetyksen vastasyntyneen lapsilla. Erityisesti suuontelon, nielun ja kurkunpään, epiteelisolut ovat alttiimpia HPV-infektio [2, 22-26]. HPV-tyypit luokitellaan korkean riskin (HPV-16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73 ja 82) ja matalan riskin (HPV-26, 30, 34, 53, 66, 67, 69, 70, 73, 82, 85) perusteella niiden karsinogeeninen. HPV-16 ja HPV-18 korkean riskin tyyppi on pidetty suuria maksuihin genotyyppien HNC [27, 28].

kantasolupankit lukiertosäätelijöistä, p53, pRB ja p16 ovat tärkeitä tuumorisuppressorigeeneille olevan merkittävässä rooli solusyklin sääntelyn koulutusjakson ja syöpä [29]. Nämä geenit olla tärkeä rooli ylläpitää genomista eheys ja solusyklin, ja valvonta apoptoosin [30, 31]. High Risk HPV (HR-HPV) tyyppien 16 ja 18 pääasiassa harjoittaa karsinogeeninen ilmaisun kautta E6 ja E7 onkoproteiini. E6-onkogeenin aktivaatio johtaa hajoamiseen p53 kautta vuorovaikutus E3 ubikitiinipromoottori ligaasilla E6AP [31, 32]. Aktiivinen E7 huonontaa retinoblastoomaproteiinin tuumorisuppressoriproteiinia (pRb), jonka johdosta transkriptiotekijä E2F stimuloidaan ja aiheuttaa yli-ilmentyminen p16 INK4a, joka on sykliiniriippuvainen estäjä [31, 32]. Välttäessään edellä mainittu isäntä huoltajia solusyklin, HPV-geenien hallitsemaan solujen lisääntymistä, joka johtaa hallitsemattomaan solunjakautumisen.

The North Eastern (NE) alueella Intiassa on korkean iän huomioon esiintyvyys (AAR) per 1, 00000 henkilöt HNCs Intiassa [33]. Kaikista Väestöpohjaisissa syöpärekisterit (PBCR), The Kamrup Urban piiri (KUD) NE alueella Intiassa sijoittui toiseksi (AAR-156,3) naisilla ja neljäs (AAR-185,2) miehillä kaikkien syövän sivustojen esiintyvyys. AAR johtava HNC sivustojen KUD PBCR on seuraava: kieli 9.4 (mies), 3,2 (nainen); mouth 7,7 (mies), 7,6 (naaraat); hypo nielun 7,7 (uros) ja 7,6 (naiset); kurkunpään 8,2 (uros). Tupakka liittyvät syövät (TRC) osuus 40%, mutta 50% miehillä taas naisilla se oli 30%, mutta 40% kaikista HNC tapausten KUD PBCR [33]. Väestöstä NE alueen edustaa ainutlaatuista etnisyys, erottuva elämäntapa ja ruokailutottumukset joka voi olla tärkeä tehtävä monimutkaisen ympäristö- ja geneettiset tekijät, jotka voivat liittyä korkea esiintyvyys HNC tällä alueella. On puute riittävästi tietoa hr-HPV asemaa HNC tapauksissa NE Intiassa. Tutkimuksen tavoitteena oli tutkia yleisyyttä hr-HPV-infektion ja niiden yhdessä betaL mälli märehtiä, tupakointi, tupakka, alkoholin kulutus ja kliinis-patologinen ominaisuudet potilaista. Esillä olevassa tutkimuksessa, E6 nested multiplex-PCR-menetelmää käytettiin herkän ja tyyppi-spesifisiä HPV-infektioita, joka perustuu vahvistus viruksen E6 /E7-onkogeenin, kuten aiemmin on kuvattu [28, 34]. Hybrid Capture 2 (HC2) testi, joka on FDA-USA hyväksytty ja WHO suositteli toteamiseen HPV kliinisistä näytteistä kohdunkaulan epiteelinsisäisen leesioita (CINs) on sovellettu ensimmäisen kerran HR-HPV havaitseminen HNC yksilöiden NE Intia .

Materiaalit ja menetelmät

potilaiden ominaisuudet

kaikkiaan 106 HNC potilasta otettiin tähän tutkimukseen (mies 73, nainen 33). Kasvaimen kudosnäytteitä saatiin pään ja kaulan onkologian kirurgian yksikkö Dr. Bhubaneswar Borooah Cancer Institute (BBCi), Regional Cancer Center, Guwahati, Intia. Histopatologisesti vahvisti HNC tapausta otettiin aikana lokakuun 2011 syyskuuhun 2013. demografiset ja elämäntapaa tiedot kerättiin käyttämällä valmiiksi suunniteltu kyselylomakkeen avulla henkilökohtainen haastattelu. Kerätty tieto demografiset muuttujat mukana ikä, sukupuoli, kansallisuus, koulutus, sosioekonominen asema, elintapatekijät alkoholia, tupakointi, pähkinä pureskelua ja muiden elintarvikkeiden tottumukset. Amerikkalainen sekakomitea Cancer TNM lavastus käytettiin lavastus ja diagnoosin. Potilaat kerrottiin tutkimuksesta ja kirjallinen suostumus saatiin ennen keräämistä näytteistä. Tutkimus hyväksyi institutionaalisten eettinen komitea Dr. Bhubaneswar Borooah Cancer Institute (BBCi), Guwahati, Assam (Intia).

Perimän DNA erillään kasvainkudoksen

kudosbiopsianäytteet kerättiin 1 ml tilavuuteen fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS), ja genominen DNA uutettiin homogenisoitua kudosta käyttäen QIAamp DNA mini -pakkausta (Qiagen, Saksa) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Määrä ja laatu eristetyn genomisen DNA varmistettiin Nano-spektrofotometrillä (Bio-fotometri, Eppendorf, Saksa) ja agaroosigeelielektroforeesilla vastaavasti.

korkea -risk HPV-DNA havaitseminen Hybrid Capture 2 (HC2) Pitoisuus

Perimän DNA eristettiin biopsianäyttei- potilaista suspendoitiin näytteen kuljetuselatusaineeseen (STM) (Qiagen, Saksa) ja läsnäolo HPV havaittiin HC2 korkean riskin HPV-DNA-testi

™ kit (Qiagen, Saksa) ohjeiden valmistajan. Potilaan STM näytteet, kemiluminesenssiosoitusta 13 yleisin h-HPV-tyypit (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, ja 68) suoritettiin käyttäen automatisoitua DML 2000 Luminometer järjestelmä (Digene, USA). Valosignaalit mitattiin suhteellisina valoyksiköinä (RLU), jossa valon intensiteetti osoittaa läsnäolon tai puuttumisen kohde-DNA: n testattu näyte. Keskimääräinen RLU-arvo suuren riskin HPV kalibraattori positiivisen kontrollin näytteiden pidettiin positiivisena sulku (CO) arvo. Potilaat analyysinäytteestä RLU /CO-arvo suhde ≥ 1 korkean riskin HPV koetin katsottiin ”positiivinen”, jotka liittyvät johonkin hr-HPV-tyypit (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56, 58,59 ja 68). Puuttuminen HR-HPV-DNA alle määritysrajan on merkitty vuonna näytteessä RLU /CO 1. Kun RLU = CO se antaa läsnä noin 5000 viruskopioiden näytteessä. Kaksi vahvistettua tapausta kohdunkaulan syövän hr-HPV positiivisuus käytettiin myös kunkin testauksen ja kantaja-DNA negatiivisena kontrollina [35, 36]. Testiraportit muodostettiin kohti muotoa Hybrid Capture

TM ohjelmisto ver. 2.0. Kaikki näytteet testattiin kahdesti ja näytteitä hr HPV myönteinen tulos sekä koeajo vasta pisteytettiin hr HPV positiivisia.

E6 nested multiplex-PCR (NMPCR) HPV genotyypityksen

näytettä oli h-HPV-DNA: n HC2 määrityksessä analysoitiin tarkemmin HPV genotyypitys. Sisäkkäisiä E6 PCR-reaktio 1

st kierros tehtiin 20 ul: n tilavuudessa käyttäen 25-100 ng genomista DNA: ta, 1 x Maxima Hot Start PCR-puskuria, 1,5-2,0 mM MgCI

2 (Thermo Scientific, USA), 250 nM kunkin alukkeita (Metabion, Saksa), 250 uM kutakin dNTP: tä ja 0,5 U Maxima Hot Start Taq DNA-polymeraasia (Thermo Scientific, USA). Terminen pyöräily edellytys 1

st kierroksen E6 PCR oli: Denaturation- 95 ° C 5 min, 38 amplifikaatiosykleissä kanssa Denaturation- 95 ° C 30 sekuntia, Annealing- 55 ° C 45 sekuntia, laajennus- 72 ° C 90 s, ja lopullinen laajennus- 72 ° C: ssa 7 min. 1

st kierros E6 PCR-tuote (630bp) käytettiin mallina (1 ui) varten 2

toinen kierros sisäkkäisiä reaktion HPV genotyypityksen käyttää multiplex joukko HPV-tyypin alukkeita. Reaktion tilavuus ja aineosia olivat samanlaisia ​​kuin edellä on mainittu. 2

nd kierros nested PCR edellytys HPV genotyyppitestien oli samankaltainen 1

st kierroksen muutoksia vain Annealing- 55 ° C 40 sek ja laajennus-72 ° C 45 sekuntia [34]. Kaikki PCR-tuotteet visualisoitiin 2% agaroosigeelissä (Amresco, USA) värjättiin etidiumbromidilla (Amresco, USA) Gel Doc XR

™ -järjestelmä (Bio-Rad, USA). HR-HPV positiivisia kohdunkaulan okasolusyöpä näytteitä DNA: ta käytettiin positiivisena kontrollina kuhunkin PCR aikavälillä. Alukesekvenssejä kuvataan taulukossa 1.

Tilastollinen analyysi

Aineisto esitetty keskiarvona ± SD tai taajuuksilla (%). Χ² testi ja Fisherin tarkkaa testiä käytettiin tunnistamaan yhdistyksen välillä kliinis-patologinen ominaisuudet ja hr-HPV- statuksesta. Univariate analyysi tehtiin laskemalla kertoimet suhdeluvut (syrjäisimmät alueet) yhdessä 95%: n luottamusväli (CI) ja P ≤0.05 pidettiin merkitsevyystaso. Epi-info Version 6 ohjelmistoa käytetään tilastolliseen analyysiin

Tulokset

Ominaisuudet potilaan

Tutkimuksessa (n = 106), 68.86%: lla potilaista ( n = 73) oli miehiä ja 31,13% oli (n = 33) naisilla. Potilaiden ikä vaihteli 25-80 vuotta (keskiarvo = 53,41 vuotta). Yli kolme neljäsosaa (80,18%) potilaista oli maaseudulla, loput (19,56%) olivat puoliksi kaupunkialueilla ja taajamissa. Ei-kasvissyöjä ruokavalion tapa raportoivat 92%: lla potilaista (taulukko 2). Tutkimus ryhmittelyä kumpaankaan ”hr-HPV positiivisia ’(n = 33) tai” HPV negatiivinen (n = 73), joka perustuu läsnäolosta hr-HPV-DNA. Demografiset potilaiden ominaisuuksiin ja niiden ruokailutottumukset mainitaan taulukossa 2. demografiset tekijät eivät merkittävästi yhteydessä hr-HPV-infektio (p 0,05). Ulos 106 tapauksissa anatominen sivustot joukossa kliinis-patologisten ominaisuuksien potilaista oli suuontelon 81,13% (n = 86), nielu 4,71% (n = 5), hypopharynx 2,83% (n = 3), kurkunpään 8,49% ( n = 9) kohdassa (taulukko 3). Prosenttiosuudet potilaista diagnosoitu pitkälle HNCs oli vaiheen III 24.52% (n = 26), IVA- 55.66% (n = 59) ja IVB 5,66% (n = 6). Okasolusyöpä oli hallitseva 85,85% (n = 91) histologinen tyyppi tässä tutkimuksessa väestöstä.

hr-HPV havaitseminen ja sen yhdessä Väestö- ja kliinis-patologinen ominaisuudet

korkean riskin HPV-DNA havaittiin nested multiplex-PCR (NMPCR) in 31.13% (n = 33) ja hybridi talteenoton 24.52% (n = 26) HNC potilaista. Herkkyys ja negatiivisia positiivisia ennustavasti havaittiin olevan 100% kunkin; spesifisyys ja positiivinen ennustearvo (PPV) havaittiin 91,19% ja 78,78% vastaavasti. Tämä testi on luokiteltu 93,29% tapauksista oikein ja käyrän alapuolinen alue on löydetty 89,50% (p 0,001), 95% CI (81,30% – 97,80%). Vahvista biologisesti aktiivisen HPV: t, p16 ilmentymistä analysoitiin HPV-positiivisia, ja HPV-negatiiviset tapaukset, ja yli ilmentyminen p16 havaittiin HPV-positiivisten tapausten, joka on epäsuora indikaattori läsnäolo HPV (tuloksia ei ole esitetty). Vuonna HC2 tutkitut näytteet, keskimääräinen RLU-arvo oli välillä 99-3466, ja keskimääräinen positiivinen cut off (CO) arvo hr-HPV oli 347 (Qiagen, Saksa) kohti opetusta. Korkea riski HPV positiivisia tapauksia genotyypattiin HPV alatyyppien käyttäen E6 nested multiplex-PCR. Aluke yksityiskohdat käytetty E6 sisäkkäisiä multiplex-PCR [29] mainitaan taulukossa 1. HR-HPV positiivisia tapauksia tarkemmin yksivariantti analysoitiin elämäntapa tottumukset ja merkittävää yhteyttä välillä havaittiin hr-HPV positiivisuus ja alkoholin kulutus (OR = 7,56; 95% CI. 2,64-22,19, p 0,001) kuten taulukossa 2. alkoholi juomari näytteet ovat osoittaneet kantamaan hr-HPV-infektio verrattuna ei-juovat. Varoa synergistisen tai täydentävä vaikutus välillä tupakan ja alkoholin tottumukset, havaitsimme merkittävää yhteyttä hr-HPV-positiivisuuden (OR = 3,09; 95% CI. 1,00-9,65, p = 0,02), mutta kun tapauksia tupakoitsijoita ja alkoholitottumuksiin olivat yhdessä analysoitiin ja laskettiin huomasimme, että ei ollut merkittävää yhteyttä hr-HPV positiivisuus. Betel pähkinä chewers oli myös osoittanut lisää hr-HPV-infektio. Niistä hr-HPV-positiivisten tapausten (n = 33), 39,40% (n = 13) potilasta oli tupakka ei-chewers ja 60,60% (n = 20) olivat tupakan chewers. Tupakoimattomilla ryhmä 69,69% (n = 23) on enemmän todennäköisyys hr-HPV-infektion verrattuna tupakoitsijoiden 30.31% (10). Potilaat asuvat maaseudulla on enemmän hr-HPV positiivisuus 87,88% (n = 29) verrattuna puoliksi kaupunkien 9,09% (n = 3) ja kaupunkien 3,03% (1%) ulkopuolelta. Ei ollut merkittävää yhteyttä välillä havaittu hr-HPV-infektio ja sukupuoli, betel mälli, tupakka chewers, Tupakointi, ravinnon tapa, ikä ja asuinpaikka (taulukko 2).

joukossa hr-HPV positiivisia tapauksia (n = 33), suuontelon 72,72% (n = 24), kurkunpään 6,06% (n = 2), hypopharynx 6,06% (n = 2), ja nielu 15,15% (n = 5) oli h-HPV-DNA (taulukko 3). Oli merkittävä assosiaatio hr-HPV-infektion ja nielun kasvainpaikkaa (p = 0,01). Suurin osa HR-HPV positiivisia tapauksia 90.90% (30 33) esitettiin pitkälle III, IV A tai IV sairaus. Histologisesti, 90.90% hr-HPV positiivisia tapauksia olivat okasolusyöpä, 6,06% oli verrukoosinen syöpä ja 3,03% muita karsinoomia (rauhasmainen kystinen karsinooma, kara solun pahanlaatuinen) (taulukko 3). Ei ollut merkittävää yhteyttä TNM kasvaimen vaiheesta, histologian laatu ja morfologia kanssa hr HPV-positiivisuuden (p 0,05). Kun HNC tapauksia analysoitiin elämäntapaan liittyvien tekijöiden, alkoholin kulutuksen todettiin merkittävästi liittyvän hr-HPV-infektio (p 0,001) (taulukko 2). Seuraavaksi analysoimme HR-HPV- statuksesta suuontelossa syövissä yksin (taulukko 4) ja verrattuna tupakointi, tupakka, alkoholi, pähkinä käyttöä ja totesi, että oli merkittävää yhdistys hr-HPV positiivisuus ja alkoholin kulutus (OR = 2,98; 95% CI. 0,95-9,43, p = 0,03). Löytää synergistinen tai täydentävä vaikutus tupakan ja alkoholin tottumukset, mistä yhden muuttujan analyysissä todettiin, että on olemassa merkittävä yhdistys hr-HPV positiivisuus tupakkaan ja alkoholitottumuksiin (OR = 2,94; 95% CI. 0,95-8,88, p = 0,05 ) (taulukko 4). Mutta kun analysoitu tapauksessa tupakoitsijoiden ja alkoholitottumuksiin yhdessä, ei merkittävää yhteyttä löydettiin hr-HPV positiivisuus.

Association of HPV-tyyppien 16 ja 18 Demografiset ja kliinis-patologisten ominaisuuksien

joukossa hr HPV positiivisia tapauksia, HPV-16 oli läsnä 81.81% (n = 27) ja HPV-18 18,18% (n = 6) tapauksista. Tupakan chewers oli huomattavasti kasvanut riski HPV-16-infektio (p = 0,02), mutta ei HPV-18. Riski HPV-16 positiivisiksi on 11,88 kertaa enemmän chewers verrattuna ei-chewers 95%: n luottamusväli (+1,01-317,2). Kuitenkin Tupakointi ei osoita mitään merkitystä verrattuna tupakoimattomiin (OR- 0,14) 95% CI (+0,01-1,28). HPV-18 positiivisuus löydettiin 5 tapauksessa (83.33%) ei-chewers verrattuna chewers. HPV-16-infektion tupakoitsijoilla todettiin olevan suurempi (p = 0,05) verrattuna HPV-18 (taulukko 5), vaikka hr-HPV-DNA havaittiin merkitsevästi alkoholinkäyttöön liittyvien (taulukko 2), mutta viitaten HPV – 16 yksin tai HPV-tyypin 18 yksin, ei ollut tällaista yhdistys löytyi sen. Suuontelossa 70,37% (n = 19), kurkunpään 7,41% (n = 2), hypopharynx 7,41% (n = 2), ja nielu 14,82% (n = 4) syöpäpotilailla on HPV-16, koska useimmat hallitseva hr-HPV-tyypille kun taas HPV -18 löydettiin vain suuontelon 83.33% (n = 5) ja nielu 16,66% (n = 1). Vuonna histologinen alatyyppi okasolusyöpä, HPV-16 löydettiin 25 tapauksessa (92,59%) ja HPV-18 5 tapauksessa (83.34%) havaittiin. HPV-16 oli hallitseva miehillä 66,66% (n = 18) sekä suhteellisesti korkea naisilla 33.44% (n = 9), kun taas HPV-18 oli miehillä 83,33% (n = 5) verrattuna naisilla 16,67% ( n = 1) tapauksessa. Betel mälli pureskelua, alkoholin kulutus, ikä, sukupuoli eivät osoittaneet mitään merkittävää yhteyttä läsnäolo HPV-16, 18 tyyppiä (p 0,05) (taulukko 5).

Keskustelu

Ihmisen papilloomavirus (HPV) on todettu etiologisena tekijänä osajoukko pään ja kaulan alueen syöpä erityisesti suun ja nielun syöpä [37]. Suurin osa HPV positiivisia liittyvän nielun syöpä potilaita ilmoitettiin olevan nuorempi ikä ja useimmiten ollut historian tupakka /alkoholi käyttää [38]. Jotkut tutkimusryhmät ovat kannattaneet että HPV positiivisia ja HPV negatiivinen HNC tapauksissa olisi pidettävä kahta erillistä kliinisiä, patologisia yhteisöihin ja hoitoyhdistelmien tarvitaan mekanismeja vastaavasti [37-39]. Kasvain hypoksia jae ja leviämisen kyvyt olivat merkittävästi vähentyneet HPV positiivisia kasvainsoluja säteilytyksen jälkeen verrattuna HPV-negatiiviset solut [40]. On osoitettu, että HPV-positiivinen paikallisesti edennyt HNC potilaat ovat osoittaneet merkitsevästi suurempi patologinen täydellinen vaste verrattuna HPV negatiivisten tapausten kemoterapiaa hoito [41]. Lukuisat tutkimukset ovat raportoineet HPV-DNA tunnistus HNSCC vaihtelevalla hinnat, havaitseminen tekniikoita sisältyvät in situ -hybridisaatio ja Etelä täplähybridisaatio (alempi herkkyys menetelmät) tai PCR (korkea herkkyys menetelmät) [42]. Lisäksi käytetyt menetelmät näytteenotto ja varastointi myös vaihdella. Puute yleisesti hyväksyttyjä standardoituja ja kliinisesti merkittävä menettely HPV havaitsemiseksi on herättänyt huolta niiden soveltamista rutiini kliinisessä ympäristössä. Tutkimuksemme on, ensimmäistä kertaa arvioitu sovellettavuutta HC2 määritys kliinisissä yksilöiden HNC tapausten NE Intiasta. Ehdotamme, että Hybrid Capture 2 (HC2) määritys, joka on hyväksynyt Food and Drug Administration (FDA, USA), HR-HPV tunnistus kliinisissä kohdunkaulanäytettä, voidaan myös käyttää HR-HPV havaitseminen HNC yksilöitä. Johtuen semikvantitatiivinen luonne HC2 määrityksen voi olla hakemuksen ennustetekijöiden arviointia hr-HPV HNC potilailla.

Käytimme E6 nested multiplex-PCR (NMPCR) HPV genotyypityksen, ja löysi HPV-16 81.81 % (n = 27) ja HPV-18 18,18% (n = 6) ja hr-HPV positiivinen (n = 33) tapaukset, joka on 31.13% of HNC potilaista (33/106). Tutkimuksemme data tukee aiempien tutkimusten Intiasta, joka oli löydetty HPV-DNA on välillä 22%: sta 73% suun syövistä [43-45]. Niistä (n = 33) HR HPV tapauksissa löysimme (n = 27) HPV 16, jossa 70.37%, 14,82%, 7,41%, 7,41% ja (n = 7) HPV-18 83.33%, 16,66%, 0 %, ja 0% suuontelon, nielun, kurkunpään ja hypopharyngeal syöpäpotilailla vastaavasti. Tutkimuksemme osoittaa korkeamman HPV-16, 18 tartuntojen määrä verrattuna aikaisempiin tutkimuksiin Intiasta [43-46]. Huomasimme, että suun ja nielun syöpä sivusto verrattuna muihin kasvain sivustoja on osoittanut merkittävän riskin korkean riskin HPV-infektio. Tuloksemme tukevat aiemmassa tutkimuksessa, jossa todettiin olevan yhteenliittymän nielun syövän kanssa suuren riskin HPV-infektio [47]. Epidemiology of HPV positiivisia nielun okasolusyöpä (OPSCC) ovat erillisiä HPV kielteisiä ja niille on ominaista nuorempina ja vahva yhteys seksuaaliseen käyttäytymiseen. HPV liittyy nielun syöpä (HPV-OPC) kasvaa esiintymistiheys ja on selvä kliininen, patologinen, molekyyli- ja epidemiologisten ominaisuuksien [38]. Ero havaintojemme kanssa muista tutkimuksista voidaan katsoa johtuvan eri menetelmiä, etninen variaatio, tuumorikohdat jne [48]. Tuloksemme osoittavat, että pähkinä pureskelua, tupakointi voi olla merkittävää yhteyttä hr-HPV-infektio. HR-HPV-positiivisuuden HNC tapauksissa oli pieni, jotka voivat hämmentää rooli pähkinä, tupakointi riskitekijöiksi HPV-infektio. Se osoitettiin Ang et al (2010), että HPV positiivisia nielusta syövän etenemisessä ei saa voimakkaasti yhteydessä tupakka tupakoinnin [47]. Mutta muut tutkimukset ovat osoittaneet tupakan yhteydessä HPV-infektio [49].

havaittu tietomme että tupakka chewers on huomattavasti korkeampi hr-HPV-infektio, poseeraa tupakan pureskelu kuin riskitekijä hr HPV-infektio. Nikotiinin ja sen altistuksen kesto soluun voi muuttaa antigeenin välittämä signalointireittejä [50]. Muutos antigeeni-välitteistä signalointia, tapahtumien immuunijärjestelmän solut voivat olla mekanismi, jolla nikotiini tai muiden ainesosien savukkeen estävät vasteen solun bakteeri /virusinfektioiden [50]. Ehdotamme, että tupakka liittyy karsinogeenien voi aiheuttaa muutoksia geneettisiä tapahtumia, jotka voivat johtaa molekyylimuutoksia, jolloin yksittäiset alttiita hr-HPV-infektio.

Tässä tutkimuksessa hr-HPV-infektio havaittiin merkitsevästi yhteydessä alkoholinkulutus HNC tapauksissa. Oh et al (2014) äskettäin osoittaneet, että h-HPV kuormitus ja alkoholin kulutus voi olla synergistinen vaikutus hr-HPV-infektion ja sen pysyvyys kohdunkaulan syövän [51]. Toinen tuore tutkimus on osoittanut, että alkoholin nauttiminen liittyi merkitsevästi lisääntynyt riski HPV-infektio miehillä [52]. Tämä tukee havainto, että alkoholin nauttiminen, voi toimia riskitekijä HPV-infektio.

Etanoli, olennaisena osana alkoholijuomien, hapetetaan asetaldehydin alkoholin (ADH). Asetaldehydi metaboloituu asetaatiksi aldehydidehydrogenaasit (ALDH). Huono suuhygienia ja tupakointi voi muuttaa suullisen bakteerikasvuston, joka voi johtaa lisääntyneeseen asetaldehydituottoon [53]. Eläinmalleissa, asetaldehydi on osoittautunut syöpää ja mutageeninen [54]. Geneettiset tekijät, kuten ADH /ALDH2 polymorfismi, puute ALDH2 tai alhainen ilmaisun ALDH2 ja alkoholin juomatavat raportoitu liittyvän suurempi riski pään ja kaulan alueen syöpä [55, 56].

Alkoholi voi myös muuttaa synnynnäisen immuunivasteen annoksesta riippuvaisella tavalla, mikä voi johtaa muuttuneeseen tulehdusreaktiota infektioon [57]. Koska immuunivaste näyttelee suurta roolia HPV-infektio, alkoholinkäyttö voi auttaa kiertäessään immuunivastetta HPV-infektio. Systeemiset immuniteetti komponentteja kuten sytokiinien seerumin taso on todettu lisätään pysyviä HPV-infektio tapauksia [58].

Tutkimuksemme antaa näyttöä siitä lisääntynyt haavoittuvuus HR-HPV-infektio tupakassa chewers ja alkoholin juovat enimmäkseen suuontelon syöpä potilailla. Havaintomme on hyvin tuettu edellinen HNC tutkimuksissa Intiasta ja maailmanlaajuisesti [14]. Vuodesta tapausten kokonaismäärä, kun tupakan pureskelu ja tupakointi analysoitiin HPV, yhdistykset eivät olleet merkitseviä (taulukko 2), kun pääosan väestöstä oli HPV-negatiivisia ja HPV positiivisia tapauksia olivat vähemmän. Mutta kun pureskelu tottumukset otettiin mukaan HPV positiivisia tapaukset, merkittävää yhteyttä todettiin (taulukko 4) osoittavat, että tupakka pureskelua ja alkoholin kulutusta toimivat riskitekijöitä HPV-infektio. Enemmän määrä nielun syöpiä tutkimuksessamme saattanut viedä arvioida paremmin alkoholin ja tupakan yhdessä hr-HPV näissä syövissä. Olemme keskittyneet pääasiassa hr HPV-DNA tunnistus käyttämällä uudempia menetelmiä kuten HC2 määritys ja E6-NMPCR joita vähemmän käytetään HNC. Alkoholi juominen ja tupakan pureskelu /tupakointi ovat yleisiä tapoja Koillis-Intian väestöstä. Mielestämme massa herkistyminen seulonnan avulla cum tietoisuutta ohjelmia HNC riskitekijöistä voi auttaa vähentämään HNC ilmaantuvuus NE väestön tulevaisuudessa.

Tästä voimme päätellä tämänhetkisiin tutkimuksen tietoja, hr-HPV-infektio voi olla yleisempää tupakan chewers, alkoholia juovat ja ne toimivat riskitekijöitä HPV-infektion HNC tapauksissa Koillis-Intiassa. Hybrid Capture 2 (HC2) määritys, koska sen korkea negatiivinen ennustearvo, spesifisyys ja herkkyys voi hakea hr HPV havaitsemiseksi HNC kliinisissä näytteissä.

Kiitokset

Tunnustamme yhteistyötä Pään ja kaulan alueen syöpäpotilasta, jotka osallistuivat tutkimukseen. Kiitämme myös Madhumita Dey ja Anindita Dutta varten arvokkaita ehdotuksia ja muokkaamalla käsikirjoituksen.