Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Seuraukset virheellisten homologisen rekombinaation (HR) ei ymmärretä satunnaista munasarjasyövän, eivätkä mahdolliset roolia HR muiden proteiinien kuin BRCA1 ja BRCA2 määritelty selvästi. On kuitenkin selvää, että puutteet HR ja muut DNA korjaukseen väyliä ovat tärkeitä tehokkuutta nykyisten hoitomuotojen. Oletamme, että osajoukko satunnaista munasarjakarsinoomat hautoisi poikkeamia HR polkuja, ja että BRCAness profiilin (puutteet HR tai muuta DNA korjaukseen väyliä) voivat vaikuttaa hoitovaste ja selviytymisen hoidon jälkeen platinaa huumeita. Kliininen saatavuus BRCAness profiilin potilailla ja /tai kasvaimia pitäisi parantaa hoitotuloksia.

tavoite

Jos haluat määrittää BRCAness profiilia satunnaista munasarjakarsinoomaprote- ja onko BRCA1, PARP, FANCD2, PTEN, H2AX, ATM, ja p53-proteiinin ilmentyminen korreloi hoitovaste, taudin uusiutumisen, ja toistumista elinaika.

Materiaalit ja menetelmät

Protein mikrosiruanalyysi munasarjasyövän kudosta käytettiin määrittämään proteiinin ekspressiotasot määritelty DNA: n korjaukseen proteiineja. Korrelaatio kliinisten ja patologisten parametrit 186 potilailla, joilla on edennyt pitkälle III-IV ja 3. asteen munasarjasyöpä analysoitiin Chi square, Kaplan-Meier menetelmä, Coxin suhteellinen riskin malliin, ja kumulatiivinen ilmaantuvuus toiminto.

Tulokset

korkea PARP, FANCD2 ja BRCA1 ilmaisuja merkittävästi korreloivat keskenään; kuitenkin kohonnut p53-ilmentyminen liittyy vain korkea PARP ja FANCD2. Kaikista potilaista, 9% uusiutui ensimmäisen vuoden. Niistä varhain toistuva potilaista, 41%: lla oli korkeita PARP, FANCD2 ja P53, verrattuna 19,5%: lla potilaista ilman varhaisen uusiutuminen (p = 0,04). Naiset, joilla on korkea PARP, FANCD2 ja /tai P53 oli ensimmäisen vuoden kumulatiivinen syövän esiintyvyys 17% verrattuna 7% muille ryhmille (P = 0,03).

Johtopäätökset

Potilaat, joilla on samanaikaisesti korkea PARP, FANCD2 ja p53-proteiinin ilmentyminen on lisääntynyt riski varhaisen munasarjasyövän uusiutuminen ja platinaa vastarintaa.

Citation: Wysham WZ, Mhawech-Fauceglia P, Li H, Hays L, syyrialaisten S, Skrepnik T, et ai. (2012) BRCAness profiili Sporadic munasarjasyövän ennustaa tauti uusiutuu. PLoS ONE 7 (1): e30042. doi: 10,1371 /journal.pone.0030042

Editor: Jun Li, Sun Yat-sen University Medical School, Kiina

vastaanotettu: touko 9, 2011; Hyväksytty: 08 joulukuu 2011; Julkaistu: 11 tammikuu 2012

Copyright: © 2012 Wysham et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat Sherie Hildreth munasarjasyöpä (SHOC) Foundation. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Munasarjojen syöpä on toiseksi yleisin gynecologic maligniteetti ja yleisin kuolinsyy naisten gynekologista syöpää. Noin 21000 munasarjasyövän tapausta diagnosoidaan vuosittain, ja noin 14000 kuolemantapaukset munasarjasyöpä tapahtuu vuosittain [1]. Vaikka merkittäviä parannuksia on tehty viime vuosikymmenten pidentää mediaani elinikä jälkeen munasarjasyöpä diagnoosin, alle 30%: lla potilaista voidaan hoitaa optimaalisella kirurgisten cytoreduction ja standardi adjuvanttihoitoa jossa platinaa sisältävä aine, ja pitkän aikavälin selviytyminen on ole parantunut [2].

Potilaat, joilla on mutaatioita BRCA1 tai BRCA2 geenit osallistuvat korjaamiseen kaksijuosteisen DNA taukoja homologisen rekombinaation (HR), on lisääntynyt herkkyys platina kemoterapiaa, mikä parantaa niiden yleistä selviytymistä tulos [3] – [5]. Lisäksi solut, joilla on ennestään vikoja HR koulutusjakson (BRCA1 tai BRCA2-mutaatio) voidaan kohdistaa toinen osuma muodossa eston pohjan Leikkauskorjauksessa (BER) polku, joka johtaa solun kuolemaan. Tämä käsite synteettisten kuolleisuutta – yhdistelmä kaksi geneettisiä muutoksia, jotka niiden tuloksia ei-tappavia, mutta yhdessä johtaa tappava fenotyyppi – johtanut kiinnostusta estäjiä BER polkuja. Yksi tällainen BER estäjä on poly-ADP-riboosi-polymeraasi (PARP) estäjä, joka tekee HR vajaiden solujen erityisen herkkä kemoterapia-indusoitua DNA vahinko [6] – [8]. Vaikka normaalit solut voivat korjata vahinkoja ja hengissä, BRCA-vajaiden solujen voi aktivoida HR-järjestelmän ja sen vuoksi he kuolevat (6). PARP-inhibiittorit ovat osoittaneet lupaavia tuloksia potilailla, joilla on BRCA1- tai BRCA2-positiivisia munasarjasyöpä [9] – [11].

Vaikka vain 10-15% naisista munasarjasyövän on ituradan BRCA1- tai BRCA2 mutaatiot, viimeaikainen tiedot viittaavat siihen, että satunnainen munasarjasyöpiä voi Harbor hankittu geneettisiä ja epigeneettiset puutteita BRCA ja muissa DNA: n korjaukseen geenejä ja proteiineja, kuten PTEN, RAD51, ja Fanconin anemia (FA) geenit [7], jotka voivat edistää ”BRCAness profiilin” . Koska yhteinen roolia että BRCA1 ja BRCA2 ovat muiden DNA korjaavien geenien, viat näissä muissa DNA: n korjaukseen proteiineja yksin voi vaikuttaa hoitovaste, uusiutuminen, ja yleistä eloonjäämistä ja lisätä herkkyyttä PARP-inhibiittorit. Haasteena on määritellä BRCAness profiileja satunnaista munasarjasyövän ja korreloivan tämän kliinisten tutkimusten tulosten kanssa.

Niinpä Tämän tutkimuksen tavoitteena on määritellä BRCAness profiilia satunnaista munasarjasyöpä. Erityisesti pyrittiin onko DNA: n ekspression korjaus proteiineja, kuten PARP, FANCD2, BRCA1, PTEN, H2AX, ATM, sekä p53, korreloi hoitovasteen toistumisen määrä, ja selviytymistä munasarjasyöpä.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

Kaikki potilaat saivat munasarjasyövän lavastus tai rajaamisvai- kirurgian Roswell Park Cancer Institute Buffalo, New York. Kaikki patologia näytteet kerättiin ja tarkistetaan meidän laitos, ja kasvaimet luokiteltiin WHO: n kriteerien [12]. Potilaskertomus potilaat olivat takautuvasti tarkistettava osana hyväksyttyä Roswell Park Cancer Institute Institutional Review Board protokolla vaatii kirjallisen potilaan suostumusta. Tarkastelu sisältyi ulko- ja sairaalahoidon, kuten leikkauksen ja kemoterapian. Kokonaiselinaika ja aika taudin etenemiseen määritettiin, kukin mitattuna diagnoosia tehtäessä (alkuperäisen leikkauksen). Progression määriteltiin objektiivista näyttöä toistumisen. Kesto kokonaiseloonjäämisessä oli väli diagnoosin ja kuolema. Havainnointi aika oli väli diagnoosin ja viimeinen kosketus (kuolema tai Viimeisimmässä seurannassa). Tiedot sensuroitiin viimeisessä seurannassa potilailla, joilla ei ole näyttöä toistuminen, etenemisen tai kuoleman.

Vasta

kuutta kaupallista ensisijainen monoklonaalisia vasta-aineita käytettiin, spesifinen ATM (Abcam, Boston, MA), BRCA1 (Biocare lab, Concord, CA), FANCD2 (Epitomics, San Francisco, CA), PARP (Abcam), p53 (Novacastra, Lica Microsystems, Buffalo Grove, IL), PTEN (Millipore, Billerica, MA ), ja polyklonaalinen vasta-aine H2AX (Bethyl Laboratories, Montgomery, TX) (taulukko 1). Detektio suoritettiin käyttäen avidiini-biotiini-peroksidaasi-kompleksin menetelmä (LASB-kit, DakoCytomation, Glostrup, Tanska).

Tissue Microarray valmistus

Parafiini upotetut kudokset 202 potilailla, joilla on munasarjasyöpä oli käytetty kudossiruina kuvatulla aiemmin Kononen et al. [13]. Lyhyesti, sen jälkeen valitsemalla huolellisesti morfologisesti edustaja alueen päässä hematoksyliini-eosiinilla (HE) jakso, 0,6 mm: n ytimet lävistettiin yksittäisten parafinoidut lohkot (luovuttaja lohkot), ja siirretään vastaanottimeen parafinoidut lohko (vastaanottimen lohko). Voittamiseksi kasvain heterogeenisyys, ydin koepalat tehtiin kolmesta eri alueilla kunkin kasvaimen. Yksi jakso värjättiin H SAS Institute Inc., Cary, NC). Seitsemän DNA korjaus proteiineja (BRCAness profiilin) ​​mitattiin lähtötilanteessa ja ryhmiteltiin negatiivinen (ei tai kevyt värjäys) ja positiivisia (kohtalainen tai voimakas värjäytyminen), joka perustuu värjäys voimakkuus. Liitot välinen perustason syövän tila (luokka, vaihe, histologian tyyppi, ja läsnäolo jäljellä kasvain) ja BRCAness profiilin ja yhdistysten kesken p53, PARP, FANCD2 ja BRCA1 tutkittiin käyttämällä Chi square ja Cochran Armitage trendi testejä.

Jos mahdollista, diagnoosista etenemisen /uusiutumisen ensimmäisten 3 vuotta tutkittiin. Potilaat, jotka kuolivat 3 vuoden kuluessa sensuroitiin aikaan kuoleman, ja potilaat, joilla oli uusiutumisen 3 vuoden jälkeen tai joilla ei ollut toistumisen myös sensuroitiin 3 vuotta. Korrelaatio Kunkin proteiinivärjäys intensiteetti ja suostumuksella useita korkeita proteiinien 3-vuoden uusiutumista elinaika arvioitiin käyttämällä Kaplan-Meier (KM) menetelmällä. Tulokset KM menetelmä sitten varmistettiin kumulatiivinen ilmaantuvuus tapahtumaan määritelty toistuminen ja kilpailevien riski määritellään ei-toistuminen kuolema käyttäen kumulatiivinen ilmaantuvuus toiminto [14]. Ikä ja syöpä tila säätää riskisuhde 3 vuoden toistumisen arvioitiin käyttämällä Coxin suhteellista riskin malliin. Association välillä yhteisymmärrys useiden korkea proteiinien ja toistuminen asema 6 kuukauden ja 1 vuosi tutki myös. Kaikki raportoidut p-arvot ovat kaksipuolisia ja arvo p 0,05 pidettiin tilastollisesti merkittävänä.

Tulokset

Patient ominaisuudet lähtötilanteessa on esitetty taulukossa 2. yhteensä 186 202 potilasta tutkittiin. Keski-ikä Tutkimuksen väestöstä oli 62 vuotta (vaihteluväli 33-89) ja keston mediaani seuranta-ajan uusiutumisen oli 22 kuukautta (vaihteluväli 20 päivää aikaa 3 vuotta). Kuten odotettua, suurin osa potilaista oli huonosti eriytetty, 3. asteen syöpiä (161/186, 86,6%), vaihe III tai IV sairaus (174/186, 93,5%), ja vakavien histologia (164/186, 88,2%). Leikkauksen 59 potilaalla ei ollut jäljellä tautia taas 125 potilasta oli vähintään minimaalinen jäljellä tauti. Kaikki potilaat saivat platinapohjaiseen ensimmäinen rivi kemoterapiaa. Mediaani arvioitu eloonjäämisaste kaikille potilaille oli 40,7 kuukautta (95% CI, +36,8-45,0kuukautta). Edunjättäminen sairastavien potilaiden välillä ilman jäljellä kasvain (58,1%) ja läsnäolo jäljellä kasvain (59,7%) olivat samanlaiset.

ilmentäminen DNA korjaukseen proteiinien epiteelin munasarjasyövän

proteiinin ilmentymistä ATM, FANCD2, PARP, PTEN, H2AX, BRCA1 ja p53 munasarjan epiteelin kasvain näytteet tutkittiin immunosolukemiallisella ja niiden yhteenliittymien kanssa munasarjasyövän uusiutuminen 3-vuotiaat lapset yhteenvetona taulukossa 3. PARP oli positiivinen 111 (60%) tapauksista, FANCD2 oli positiivinen 68 tapauksessa (39%), H2AX oli positiivinen 59% ja p53 55%: ssa tapauksista. Sitä vastoin useimmat kasvaimet olivat negatiivisia BRCA1 (87%), PTEN (89%) ja ATM (92%). Vaikka ei ole tilastollisesti merkitsevä, KM arviolta 3 vuoden uusiutumista vapaa eloonjääneiden potilaiden, joilla on korkea PARP (56,5% vs. 67,5%) ja korkea FANCD2 (55,5% vs. 66,9%) oli yli 10% pienempi kuin niiden alhainen värjäystä kollegansa. Potilaat, joilla on korkea PARP ja /tai FANCD2 olivat todennäköisesti myös ovat korkeita p53, 66% sekä positiivisia, 53% joko positiivisia, ja 43% sekä negatiiviset havaittiin positiivisia p53 (p joissa muutossuunnat = 0,01, kuva 1). Kaiken ilmaus joko FANCD2 tai PARP havaittiin 35% näytteistä. Co-ilmentymä PARP ja FANCD2 osoitettiin 56 173 (32%) näytteistä. Korkea ekspressio PARP, FANCD2 ja BRCA1 liittyivät merkittävästi toisiinsa, kun taas mitään yhdistyksen välillä BRCA1 ja p53 havaittiin (tuloksia ei ole esitetty).

välinen assosiaatio PARP, FANCD2, ja P53. Potilaat, joilla on positiivinen PARP tai positiivinen FANCD2 olivat todennäköisemmin myönteisiä P53. Potilaita, joilla on sekä PARP ja FANCD2 olivat tilastollisesti todennäköisemmin tahra positiivinen P53.

Korrelaatio FANCD2 ja PARP Expression kliinisten tutkimusten tulosten kanssa

Potilaat jaettiin viiteen toisensa yksinomainen ryhmään niiden ilmentymistä PARP, FANCD2, ja p53 (kuva 2). Näytteet värjättiin negatiivinen kaikkien kolmen proteiinin 31 potilaalla (18%), positiivinen p53 yksin 51 potilasta (30%), ja positiivinen FANCD2 ja PARP vain 19 potilasta (11%). Yli 40%: lla potilaista, joilla on positiivinen PARP ja /tai FANCD2 oli p53-proteiinin yli-ilmentyminen, mukaan lukien 37 (22%), jossa yliekspressio kaikkien 3 proteiineja, ja 32 (19%), p53: n kanssa ja PARP tai FANCD2 yliekspressio. KM arviolta 3 vuoden uusiutumista elinaika käyrät näille toisensa poissulkevia ryhmien p53, PARP ja FANCD2 näkyvät kuvassa 3, ja vaikutus BRCAness profiilin uusiutumista vapaa edunjättäminen on esitetty taulukossa 4. Erot eloonjäämisen enemmän yli 10% 12 kuukauden ja lähes 20% 24 kuukauden välillä havaittiin ryhmä positiivista värjäytymistä kaikkien kolmen proteiinin (p53, PARP ja FANCD2) ja ryhmän kaikkien kolmen negatiivisesti värjätty. Selviytymisen tiettyjä kehityssuuntia kohti lyhyempiä kaikissa kolmessa positiivisen ryhmään verrattuna muihin ryhmiin, vaikka tämä ei ollut tilastollisesti merkitsevä tässä pieneen otokseen (kuvio 3A). Olemme edelleen arvioitu 3 vuotta uusiutumista elinaika käyrät välillä potilailla, joilla on korkea kaikkien kolmen proteiinin (p53, PARP, FANCD2) ja ”muiden” potilaat kuten kuvassa 3B. Potilaat, joilla on kaikilla korkea olivat todennäköisemmin aiemmin toistumisen 3 vuoden kuluessa verrattuna kaikkiin muihin potilaisiin (p = 0,03). 12 kuukauden kuluttua diagnoosista, toistumisen elinaika oli 81% potilailla, joilla kaikilla positiivinen tasoilla PARP, FANCD2 ja p53 loput potilaista oli uusiutumista-vapaa eloonjäämisaste 92%. 18 kuukauden uusiutumisen elinaika oli 64% ryhmän kaikki kolme positiivista proteiineja ja 81% kaikille muille, ja kumulatiivinen uusiutumisen esiintyvyys oli 16,5% potilailla, joilla kaikilla korkea PARP, FANCD2 ja p53 verrattuna 31,8% muiden potilaiden. Potilaat, joilla on samanaikaisesti korkea PARP, FANCD2 ja p53 olivat kaksi kertaa todennäköisemmin olla toistumisen 3 vuoden kuluessa, on tarkistettu iän ja syövän tilan aikaan diagnoosi (taulukko 4). Mahdollisia vaikutuksia jäljellä kasvain ja muita lähtötilanteessa kliiniset tekijät varhaiseen toistumisen johtui monimuuttujamenetelmin. Erityisesti läsnäolo jäljellä kasvainta ei liittynyt tauti uusiutuu. Kuitenkin potilaat, joilla on jäljellä kasvain jälkeen alkuperäisen leikkauksen yleensä positiivisia PARP, FANCD2, ja P53 ilmentyminen verrattuna ryhmään, joilla ei ole jäljellä kasvain (26% vs. 14%, P = 0,07).

Jakelu viisi toisensa poissulkevia ryhmiä p53, PARP, ja FANCD2. 37 potilasta (22%) olivat positiivisia kaikissa kolmessa proteiinien.

Kaplan-Meier arviolta 3 vuoden uusiutumista elinaikaa käyriä. V: Ei eroa uusiutumista elinaika kun kukin 5 toisiaan poissulkevia ryhmien ilmaisua PARP, FANCD2, ja P53 tutkittiin itsenäisesti. B: Potilaita, joilla on kaikki kolme PARP, FANCD2, ja P53 oli pienempi uusiutumista elinaika verrattuna potilaisiin, jotka eivät positiivisia kaikissa kolmessa.

Tässä tutkimuksessa, määrittelimme platina kestävät taudin tauti toistuva 12 kuukauden kuluessa mekaanisesti loppuun, mutta myöntää, että enemmän standard definition merkitsisi platinaa vastarintaa toistumisen 6 kuukauden kuluttua. Siksi kuva 4 tutkii samanaikaista ilmentymistä PARP, FANCD2 ja P53 potilailla ja ilman 6 kuukauden ja 12 kuukauden uusiutumisen. Niistä 4 potilasta, joilla oli toistumisen 6 kuukauden kuluessa, 2 (50%) oli kaikki 3 positiivinen, kun taas 34 162 (21%) ilman toistuminen oli kaikki 3 positiivinen tasoilla. Niistä 17 potilaalla uusiutui ensimmäisen vuoden diagnoosin, noin 41% (7/17) oli kasvaimia, joilla on korkea kaikkien 3 proteiineja, verrattuna 19% (29/149), jossa kaikki 3 positiivista toistuminen ryhmässä (P = 0,04). Siksi varhainen uusiutuminen, joka edustaa platinaa resistenttejä, näyttää leimaa samanaikaisesti korkea PARP, FANCD2 ja p53.

Association positiivisten P53, PARP, ja FANCD2 potilailla ja ilman varhain toistumista . Potilaat, joilla varhainen uusiutuminen sekä 6 ja 12 kuukauden kuluttua diagnoosista olivat paljon todennäköisemmin on korkea kaikkien 3 proteiineista (50% 6 kuukauden ja 41,2% 12 kuukautta).

Keskustelu

Äskettäin rooli DNA korjaavien geenien ja proteiinien munasarjasyövän, käsite BRCAness munasarjojen syöpiä, sekä mekanismi synteettisten kuolleisuutta on tullut olennainen ymmärtämiseksi munasarjasyöpä synnyssä ja polkuja uusien hoitojen [7], [8]. Koska 20% korkealuokkaisesta vakavien satunnaista munasarjakarsinoomat on BRCA1- ja BRCA2 mutaatiot, rooli HR munasarjasyövän on vakiintunut [15], [16]. Kuitenkin monet perinnölliset ja satunnaista munasarjojen syöpiä ei ole omaa BRCA mutaatioita tai muutettu BRCA ilmaisun ja näin me perusteltu, että menetys muiden HR proteiinit voivat edistää munasarjasyöpä. Itse asiassa, epigeneettiset vaimentaminen FANCF kautta promoottorin metylaation [17] ja kevyemmästä FANCD2 [18] on aikaisemmin havaittu munasarjasyöpä. Olemme edelleen perusteltu, että yli-ilmentyminen eri HR proteiinien osuus voi hankitun platina-kestävyys ja sen vuoksi voidaan käyttää mahdollisena näytön (i) tunnistaa potilaat suurempi riski toistumisen ja (ii) tunnistaa uusia terapeuttisia kohteita. Mitata BRCAness (eli HR) profiilia satunnaista munasarjojen syöpien, käytimme immunosytokemiassa (ICH) tutkia proteiinin ilmentymistä DNA-vaurioita vastaus proteiineja FANCD2, BRCA1, PARP, H2AX, ja ATM sekä PTEN ja p53, kasvain vaimennin geenit, jotka on myös funktio ylläpitämisessä genomista vakauden harjoittamalla DNA korjaukseen [19] – [25] paneelissa satunnaista munasarjakarsinoomat.

Tietääksemme ei ole edellinen systemaattista analyysiä ATM ja H2AX ilmaisun munasarjasyöpiä. Täällä olemme huomanneet, että proteiinit ekspressoitiin 46% ja 59% meidän näytteistä vastaavasti, mikä saattaa viitata niiden mahdollisesti korvaavia ilmaisun HR vajavaisten solujen.

tukeminen rooli p53 ja PTEN kuin tuumorisuppressoreilla, enemmistö munasarjan karsinoomien testattu oli positiivinen p53 (55%), kuten vasta-aine tunnistaa sekä villityypin ja mutatoituja muotoja p53, ja negatiivinen PTEN lauseke (89%). Nämä tulokset ovat samankaltaisia ​​kuin muissa tutkimuksissa pitkälle edenneitä syöpiä [21] – [22].

Mielenkiintoista, huomasimme, että 86,7%: ssa tapauksista oli negatiivinen BRCA1 ICH. Suurin osa ennen tutkimuksia BRCA1 puute satunnaista munasarjasyöpä ovat keskittyneet mutaatioanalyysiin, metylaatio tutkimukset ja geenin ilmentymisen, vain muutaman immunosytokemiallisia tutkimuksia. Tuoreessa raportissa Skytte et al. paljastui negatiivinen BRCA ICH vain 20% munasarjan syövistä [26]. Nämä erot voidaan selittää käyttämällä erilaisia ​​vasta-aineiden havaitsemiseksi BRCA-proteiinia [27]. Itse vertailevassa tutkimuksessa 84 tapauksia satunnaisia ​​rintasyöpä neljä erilaista anti-BRCA vasta, Al-Mulla et al. havaittu BRCA1-proteiinin ilmentymisen menetyksen 83%: ssa tapauksista käyttäen samaa BRCA-vasta-ainetta AB-1, vastaan, N-pään epitoopin [28]. Vuonna NCIC tutkimuksessa, joka korreloi BRCA1-proteiinin ilmentymisen ICH vastaavien kliinisiä tietoja, 251 munasarjasyöpä analysoitiin käyttämällä hiiren monoklonaalista BRCA1-vasta-ainetta (MS110, Calbiochem, Saksa) ja 65%: n kasvaimia ei havaittu värjäytymistä tai hyvin lievää värjäytymistä [29 ]. Vasta-aine, joita käytetään myös tutkimuksessa oli eri vasta-aineet, joita käytetään ennen tutkimuksia. Lisäksi koska pieni otoskoko tutkimuksessamme ja samalla siinä NCIC tutkimuksessa, meidän pisteytys ryhmitelty värjäytymistä tulokset neljään luokkaan negatiiviseksi (ei lainkaan tai heikko) ja positiivisia (kohtalainen tai voimakas), joka perustuu värjäys voimakkuus. Näin ollen on välttämätöntä tuleville tutkimuksia selvästi hahmotella suuntaviivoja BRCA1 värjäystä ja pisteytys tutkimuksissa tämä merkki. Kuitenkin menetys BRCA1 useimmissa kasvainten tutkimuksessamme yhdessä lisääntyneen ilmentymisen PARP useimmissa syövät (käsitellään jäljempänä) viittaa siihen, että PARP: n ilmentymisen lisääntyminen voi olla korvaava mekanismi syöpäsoluissa kestämään platina-hoidon aiheuttama kuolema .

Tuloksemme kanssa PARP ovat myös yhdenmukaisia ​​aiempien tutkimusten. Löysimme korkea ilmentyminen PARP 60% näytteistä, samanlainen ennen raporttien mukaan positiivinen PARP proteiinivärjäys 76% munasarjan karsinoomien [26]. Kohtalainen FANCD2 värjäytyminen havaittiin useimmissa (85%) vaiheen I vakavasta karsinoomat munasarja [Pejovic, julkaisematon], kun taas tässä sarjassa huomaamme, että 40% kehittyneiden vakavien karsinoomien yli-ilmennä FANCD2. Näin ollen, yliekspressio FANCD2 lisäksi PARP voi kapasiteetin lisäämiseksi soluja korjaamaan DNA double ja yksittäisen juosteen katkoksia edistää platinaa vastarintaa.

Synergy joukossa PARP, FANCD2 ja p53-proteiinin ilmentyminen on yksi silmiinpistävä tulokset tutkimuksessamme. Kasvaimet, joilla on korkea ilmentymisen PARP ja /tai FANCD2 olivat todennäköisesti osoittaa yliekspressio p53. Proteiiniprofiilia määritelty korkea ilmentyminen kaikissa kolmessa proteiinien PARP, FANCD2, ja p53 liittyy suuri riski toistumisen. Ei vain oli uusiutumisriski kolme vuotta kaksinkertainen tässä ryhmässä, mutta se on erityisen huomionarvoista, että yli puolet potilaista toistuvia ensimmäisten 12 kuukauden mekaaninen käsittely (platina resistenttejä) oli merkittävästi kohonnut ilmentyminen näiden kolmen proteiinin. Tässä potilasryhmässä erityisen vaikea hoitaa munasarjasyöpä ei ole aiemmin tunnistettu proteiini tai muu molekyyli profilointia. Niinpä nämä tulokset mahdollistavat toteamisesta sekä naisilla on suurempi riski uusiutumisen ja ehdottaa mahdollisia terapeuttisia kohteita. Äskettäin lupaavia tuloksia ilmoitetaan faasi II kliinisessä tutkimuksessa PARP estäjän BSI-201 (iniparib) yhdessä gemsitabiinin ja karboplatiinin 19 potilaalla, joilla platina kestävät munasarjasyöpä [30].

Tutkimuksemme on useita rajoituksia . Ensinnäkin, vaikka me tutkittiin 186 potilasta, tämä on vielä rajallinen otos kaikkien kliinisten korrelaatioita tutkittiin. Toiseksi, potilailla, jotka ovat BRCA1 ja BRCA2-mutaation kantajia ei ole tunnistettu tässä tutkimuksessa. Tiukka ohjeet ennustetekijöiden -tutkimukset immunosytokemialla käyttäen standardoituja kriteerejä ovat vielä kehitteillä. Lisäksi tutkimme vain osa DNA korjaus proteiineja, kun taas sisällyttäminen muiden proteiinien mukana HR kuten ATR, Chk2 tai RAD51, ja toiminnalliset tutkimukset RAD51 pesäkkeitä muodostumisen arvioimaan herkkyys näiden solujen PARP (ja FANCD2) esto ovat meneillään.

Lopuksi, vaikka uskomme, että tärkein tämän tutkimuksen tulokset ovat (i) tunnistaminen BRCAness profiilin, joka ei liity BRCA1 ja (ii) yhdistys tämän triple-positiivisten munasarjasyöpä ( FANCD2 + /PARP + /P53 +) kanssa hyvin varhaisessa toistuminen munasarjasyövän ja siksi platinaa vastarintaa. Nämä potilaat voivat hyötyä dual esto FANCD2 ja PARP ja /tai pienten molekyylien kohdistaminen p53. Itse asiassa, estämällä FA /BRCA väylän satunnaista syöpien eri yhdisteitä, mukaan lukien circumin, on osoitettu herkistää syövät platinaa aineet [31]. Siten yhdistetty hoito FA /BRCA reitin inhibiittorit ja PARP-inhibiittorit jo kliinisissä tutkimuksissa, saattaa olla tehokas hoito uusiutuneen potilaille, jotka on tunnistettu yliekspressoimaan FANCD2 ja PARP.