Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Claudins tunnetaan tiiviin liitoksen proteiineja, ja niiden ilmentämiskuviota mahasyövässä on yhä kiistanalainen. Suhde ekspressiokuvioita tiiviin liitoksen proteiinien ja kasvaimen leviämisen alussa mahasyöpä vielä lainkaan selvää.

Tavoitteet

ilmentymisen tutkimiseksi malleja klaudiini-18 ja Ki-67 aikaisin mahalaukun syöpä leviämisrintamassa ja ympäröivä normaali mahalaukun limakalvon ja tutkia biologisen toiminnan klaudiini-18 leviämisen ja invaasion syöpäsoluja.

Methods

Seitsemänkymmentäviisi aikaisin mahalaukun syöpä vauriot poistettiin endoskooppinen limakalvon resektio tai endoskooppinen limakalvon alaista resektio arvioitiin. Kaikki mahasyövän vaurioita diagnosoitiin eriytetty adenokarsinooma käyttäen Japani luokittelu mahakarsinooman. Arvioida epiteeliproliferaation immunovärjäyty- Ki-67 tehtiin, ja merkintöjä indeksi laskettiin. Arvioida ilmaus epiteelin tiiviin liitoksen proteiineja, immunofluoresenssivärjäyksellä of klaudiini-18 suoritettiin. Immunoreaktiivisuus klaudiini-18 luokiteltiin sen mukaan, montako värjäytyneiden solujen. Korrelaatio Analyysin suoritti spearmanin järjestyskorrelaatiokerroin. Transfektio klaudiini-18 Sirna (siRNA) toteutettiin vuonna MKN74, joka on klaudiini-18-positiivisia mahasyövässä solulinjan, tutkimaan vaikutusta klaudiini-18 leviämisen ja invaasion syöpäsoluja.

Tulokset

Claudin-18 oli merkitsevästi alassäädetty mahasyövän verrattuna ympäröivään mahalaukun normaali limakalvo tai suoliston metaplasiaa. Ki-67 merkintöjä indeksi mahasyövän leviämisrintamassa oli käänteisesti korreloi klaudiini-18 tason, mutta että limakalvon vaurio ei korreloi. Claudin-18 Knockdown merkittävästi edistänyt leviämisen MKN74 verrattuna ohjaus siRNA-transfektoiduissa soluissa. MKN74 invaasio lisääntyi merkitsevästi klaudiini-18 siRNA transfektio verrattuna ohjaus siRNA transfektion.

Johtopäätökset

Down-regulation of klaudiini-18 liittyy proliferaatiopotentiaali leviämisrintamassa mahalaukun syövän, viittaa siihen, että sillä on keskeinen rooli mahalaukun syövän etenemisessä.

Citation: Oshima T, Shan J, Okugawa T, Chen X, Hori K, Tomita T, et al. (2013) Down-asetus Claudin-18 liittyy Proliferative ja Invasive Mahdolliset mahasyövän leviämisrintamassa. PLoS ONE 8 (9): e74757. doi: 10,1371 /journal.pone.0074757

Editor: DunFa Peng, Vanderbilt University Medical Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: toukokuu 28, 2013; Hyväksytty: 06 elokuu 2013; Julkaistu: 20 syyskuu 2013

Copyright: © 2013 Oshima et ai. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat opetus-, kulttuuri-, urheilu-, Science and Technology of Japan kautta Grant-in-Aid tieteellisen tutkimuksen (C) 2010-2012 (nro 22590691). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Mahasyöpää (GC) on neljänneksi yleisin diagnosoitu maligniteetti ja toiseksi yleisin syy syöpään liittyvää kuolleisuutta maailmanlaajuisesti [1], [2]. Intramucosal GC voidaan curatively hoitaa endoskooppinen hoito. Lisäksi endoskooppinen submukoosinen leikkely (ESD) tekniikka on laajentanut merkintöjen endoskooppiset hoitoon ja käyttöön yhtenä ryhmänä resektio intramucosal suuri ja hieman limakalvon alaista invasiivisia aikaisin GC [3]. Yhtenä ryhmänä resektio ESD mahdollistaa tarkan diagnoosin syövän syvyys [4].

Tight liittymissä (TJS) ovat erikoistuneet membraanidomeeneja apikaalisimmasta alue polarisoitunut epiteelisolujen ja endoteelisolujen [5]. Claudins ovat suuret TJ proteiinit; ne koostuvat vähintään 27 jäsenen proteiineja ja ilmaistaan ​​kudosspesifisellä tavalla [6], [7]. Ne säätelevät parasellulaarista läpäisevyyttä ja vahvistaa epiteelisolujen polariteetin niiden aidan toiminto [6], [8]. Kasvava määrä tuoretta näyttöä siitä, että claudins ovat keskeisiä rakenteellisia ja toiminnallisia komponentteja TJ säikeiden [6], [9], ja ne voivat olla ratkaiseva rooli kasvainten synnyssä ja tulehduksen [10], [11].

mahalaukun epiteelin esittelee joukon muutoksia klaudiini ilmentyminen normaalista limakalvosta suoliston metaplasiaa ja adenokarsinooma. Vaikka GC äskettäin luokiteltu musiini-pohjainen ekspressio [12], [13], joka on klaudiini perustuva GC luokitus on myös ehdotettu [14]. Olemme myös raportoitu, että alas-säätely klaudiini-3 liittyi leviämisen intramucosal GC [15]. Äskettäin klaudiini-18 knock-out-hiiret osoitettu olevan mahalaukun limakalvon surkastumista ja parasellulaarista H

+ ioni vuoto [16]. Claudin-18a2 osoitettiin olevan usein säädellä vähentävästi GC suoliston fenotyypin, mikä viittaa siihen, että klaudiini-18a2 olisi hyvä merkkiaine GC [17]. Kuitenkin biologisen toiminnan klaudiini-18, joka saattaa olla osallisena syöpäsolujen käyttäytymistä, ei ole koskaan tutkittu. Lisäksi on epäselvää, mikä ominaisuus GC solujen leviämisrintamassa liittyy nopeaan kasvuun tai aggressiivisuus hyökkäystä.

Tässä tutkimuksessa, ilmentymistason klaudiini-18 GC leviämisrintamassa ja ympäröivä mahan limakalvoa tutkittiin ensimmäistä kertaa, ja korrelaatio klaudiini-18 tason ja Ki-67 merkintöjä indeksi (LI) in GC arvioitiin. Vaikutus klaudiini-18 leviämisen ja invasiivisuus

in vitro

tarkasteltiin.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaat

peräkkäinen 74 potilasta aikaisin GC tutkittiin (taulukko 1). GC vauriot (n = 75), jotka oli tehty parantavaan EMR tai ESD arvioitiin. GC kanssa limakalvon alaista invaasiota (n = 31) olivat mukana tässä tutkimuksessa. Double syöpiä havaittiin vain yhdessä miespotilas. Kaikki GC luokiteltiin eriytetty adenokarsinooma käyttäen Japanin luokitusta mahakarsinooman [18]. Potilas nimettömänä oli säilynyt. Tämä tutkimus suoritettiin ilmoituksen mukaisesti Helsingin ja hyväksyi eettinen komitea /Institutional Review Board of Hyogo College of Medicine. Kohteena antoi kirjallinen lupa.

immunohistokemia

Näytteet kiinnitettiin 10% formaliinilla ratkaisu ja upotettiin parafiiniin. Leikkeet leikattiin 3 um paksuuteen ja värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla (HE). Arvioida epiteeliproliferaation, näytteitä inkuboitiin Ki-67 monoklonaalista vasta-ainetta (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), jonka jälkeen inkuboitiin hevosen biotinyloidun anti-hiiri-vasta-ainetta (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Streptavidiini-biotiini-kompleksin menetelmä (Vector Laboratories) käytettiin visualisoimaan immunoreaktiivisuus. Tumat vastavärjättiin hematoksyliinillä.

immunofluoresenssivärjäyksellä ja liitoskohtien Proteins

Kanin anti-klaudiini-18 polyklonaalista vasta-ainetta (Invitrogen) ja Cy3-konjugoitu vuohen anti-kani-lgG: tä (Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove , PA, USA) sekundaarinen vasta-aine käytettiin visualisoida immunoreaktiivisuus. Spesifisyyden reaktio testattiin inkuboimalla ei-immuuni kanin seerumia (Dako, Glostrup, Tanska).

pisteytys immunovärjäys Claudin-18 ja Ki-67

Immunoreaktiivisuus arvioitiin kaksi riippumatonta tarkkailijaa (T.Ok., XC), ja molemmat olivat sokeita kliinis-ja kliinisiin tuloksiin liittyvät kunkin näytteen. Non neoplastisia mahalaukun limakalvo ilman suolen metaplasiaa (ei-IM) ja suoliston metaplasiaa (IM) ja syöpä alueilla arvioitiin. Immunoreaktiivisuus klaudiini-18 luokiteltiin seuraavien kriteerien mukaisesti: 0, ettei kalvo värjäys; 1+, alle 10% syöpäsolujen täydellisen membraaniväriaine; 2+, 10%: sta 50% tuumorisolujen täydellisen kalvon värjäys; 3+, yli 50%: sta 75% kasvainsolujen täydellinen, vahva kalvo värjäys; ja 4+, yli 75% solujen täydellinen, erittäin vahva solukalvojen värjäytymistä. Viisi suuritehoiset kenttiä analysoitiin kullakin alueella tapauksista ja keskimääräinen arvo laskettiin. Kaikki leikkeet sijoitettiin kahdesti vahvistaa tulosten toistamisen. Ki-67 LI laskettiin jälkeen laskemalla 1000 syöpäsoluja.

Sirna (siRNA) Knockdown Kokeet

siRNA vaiennettu ihmisen klaudiini-18, ON-TARGET plus SMARTpool ja ei erityinen ohjaus siRNA ostettiin Dharmacon, Inc. (Lafayette, CO, USA). MKN74 solulinja (japanilainen Collection of Research Bioresources Cell Bank, Osaka, Japani), joka on

CLDN18

-positiivinen, valittiin vaikutusten tutkimiseen klaudiini-18 Knockdown proliferaatioon ja hyökkäys ominaisuuksia GC solujen . Solut transfektoitiin 25 nM siRNA käyttäen DharmaFECTTM3 (Dharmacon, Inc.). Ohjaus ja valvonta siRNA ryhmiä hoidettiin transfektioreagensseilla ilman siRNA ja transfektioreagensseilla epäspesifistä ohjaus siRNA, vastaavasti. Määritykset suoritettiin 3 päivää sen jälkeen, kun MKN74 solut transfektoitiin.

proliferaatiomääritystä

Solujen proliferaatio määritettiin kolorimetrisellä määrityksellä solun elinkykyisyyden perusteella lohkaisu tetratsoliumsuolan WST-1 mitokondrion dehydrogenaasit (Takara Bio Inc., Otsu, Japani). Absorbanssi formatsaanipitoisuus väriaine muodostuu, mikä korreloi määrän metabolisesti aktiivisen viljelmän soluista, mitattiin 450 nm: ssä 1 h sekoituksesta reagenssi.

invaasiomääritys

MKN74 soluinvaasiota määritettiin 24-kuoppaisilla BioCoat matrigeeliin invaasiota kammiot (8 m; Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA) valmistajan protokollan. Alakammioissa olivat täynnä RPMI1640 10% FBS, ja soluja (2 x 10

5) asetettiin insertin kammioissa, joka sisälsi RPMI1640 ilman FBS. Sen jälkeen kun 24-tunnin inkubaation noninvasive solut poistettiin pumpulipuikolla. Solut, jotka ovat siirtyneet kalvon läpi ja kiinni alapinnan kalvon kiinnitettiin 10% formaliinilla ja värjättiin hematoksyliinillä. Kvantifioinnin solut laskettiin mikroskoopilla viidessä random suuritehoisia kenttiä. Määritykset suoritettiin kolmena rinnakkaisena. Invaasio suhde ohjata väliaine laskettiin.

Tilastollinen analyysi

Tilastollinen arviointi suoritettiin käyttäen SPSS13.0 (SPSS, Chicago, IL, USA). Korrelaatio Analyysin suoritti spearmanin järjestyskorrelaatiokerroin (rs). Useat vertailut suoritettiin käyttäen Kruskal-Wallisin testiä ja sen jälkeen Scheffen testi. Yhden vertailut suoritettiin Mann-Whitney testi.

P

0,05 pidettiin merkittävänä.

Tulokset

Expression of Claudin-18 mahan limakalvoa ja karsinooma

yhteensä 75 eriytetyn GC tapauksissa analysoitiin tässä tutkimuksessa. Leikkeet värjättiin klaudiini-18, ja taso värjäys luokiteltiin. Claudin-18 havaittiin korkeita mahalaukun epiteelisolujen klo apikaalisella ja lateraalinen puoli rajojen kuin IM mutta ei IM tai eriytetty adenokarsinoomasolua (Fig. 1A). Tasot klaudiini-18 olivat merkittävästi alhaisemmat syöpäsoluissa kuin ei-IM ja IM, sekä merkittävästi pienempi IM verrattuna ei-IM (Fig. 1 B).

(A) HE värjäys mahan limakalvon ei-suolikanavan metaplasiaa (non-IM), suoliston metaplasiaa (IM), ja syöpä. Klaudiini-18 havaitaan mahan limakalvon ei-IM pinnalla rajalla ja sivusuunnassa kalvon epiteelisolut, mutta ei IM tai syöpä. Valkoinen bar = 100 pm, keltainen bar = 50 pm. (B) Claudin-18 taso on huomattavasti alhaisempi GC kuin ei-IM tai IM. Taso on myös huomattavasti alhaisempi IM kuin ei-IM.

#

P

0,05 vs. IM. **

P

0,01 vs. ei-IM.

Detection of Claudin-18 GC kanssa Submukosaalinen Invasion

edustaja GC tapauksissa limakalvon alaista invaasio osoittivat että tiheä klaudiini-18 värjäys oli ilmeistä leviämisrintamassa submukoosisen tunkeutuneet-syöpäsoluja, ja Ki-67 LI oli matala vaurio (Fig. 2A). Tapauksessa, jossa alhaisen klaudiini-18 värjäys leviämisrintamassa submukoosisen tunkeutuneet-syöpäsoluja, Ki-67 LI oli korkea vaurio (Fig. 2A).

HE värjäystä osoittaa tapauksia submukoosisen invasiivisia GC. Ki-67 positiivista ytimet havaitaan syöpäsoluja. Ki-67 LI on pieni tapauksessa submukoosisen-positiivisten klaudiini-18 värjäys (3+) (vasemmalla) ja korkea tapauksessa submukoosisen-negatiivisten klaudiini-18 värjäys (0) (oikealla). Bar = 100 pm. (B) Ki-67 LI korreloi käänteisesti kanssa klaudiini-18 tason (rs = -0,550,

P

= 0,0010).

korrelaatio Claudin-18 Level ja Ki-67 LI

Ki-67 LI GC limakalvon ja submucosa määritettiin prosenttiosuus Ki-67-positiivisia ytimiä. Voit selvittää korrelaatio Ki-67 LI ja klaudiini-18 tason, korrelaatio analyysi. Limakalvon ekspressiotaso klaudiini-18 ei korreloi merkitsevästi Ki-67 LI (rs = 0,07,

P =

0,60). Sitä vastoin submukoosinen klaudiini-18-ilmentymisen taso oli merkittävästi kääntäen korreloi submukosaalisen Ki-67 LI (rs = -0,550,

P

= 0,0010) (Fig. 2B).

Vaikutus Claudin-18 siRNA on leviämisen ja invaasion GC Cells

GC solulinja, MKN74, perusentsyymit klaudiini-18, ja mRNA taso klaudiini-18 väheni merkittävästi siRNA vastaan ​​claudin- 18 (Fig. 3A). Immunofluoresenssivärjäyksen kanssa klaudiini-18 väheni myös transfektion jälkeen (kuvio. 3B). In klaudiini-18 alassäädetty MKN74, solujen kasvu lisääntyi merkittävästi (Fig. 4A), ja hyökkäyksen soluista lisääntyi merkittävästi (Fig. 4B).

(B) n värjäys klaudiini-18 on vähennetään klaudiini-18 siRNA hoitoa. Bar = 50 pm. Kukin arvo on keskiarvo ± SD 3 riippumattoman kokeen. **

P

0,01 vs. kontrolli tai ohjata siRNA.

(A) Claudin-18 siRNA hoito merkitsevästi indusoi solujen lisääntymisen. (B) Claudin-18 siRNA-transfektoiduissa MKN74 solut osoittavat merkittävästi suurempi hyökkäys suhde verrattuna valvoa tai ohjata siRNA-transfektoiduissa soluissa. Tyypillisiä kuvia esitellään yläreunassa. Bar = 500 pm. Kukin arvo on keskiarvo ± SD 3 riippumattoman kokeen. **

P

0,01 vs. kontrolli tai ohjata siRNA.

Keskustelu

Altered ilmaus claudins klo submukosaalisen leviämisrintamassa saattavat liittyä etenemiseen GC. Viimeaikaiset tutkimukset osoittavat, että jopa hieman Submukosaalinen invasiivisia GC ilman imusuonten ja verisuonten invaasio, ESD voisi olla toteutettavissa parantava toimenpide [19]. On kuitenkin vielä epäselvää, mitkä tapaukset hieman submukosaalisen invasiivisen GC voi seurata ilman leikkausta jälkeen ESD. Esillä olevassa tutkimuksessa todettiin, että oli olemassa käänteinen korrelaatio klaudiini-18 tason ja Ki-67-positiivisuus leviämisrintamassa submukoosisen invasiivisia GC, ja että klaudiini-18 säänneltyä GC soluinvaasiota ja lisääntymistä. Ki-67 immunohistokemia on korvattu mitoosi laskennan arvioitaessa kasvainsoluproliferaation. Tutkimukset ovat osoittaneet, että Ki-67 korreloi erilaistumattomilla ja metastaattisen solujen pahanlaatuisia kasvaimia [20]. Tässä tutkimuksessa vain EMR /ESD-resektoitiin GC jossa osoitus rajoittuu eriytetty tyyppi GC tutkittiin. Siksi nämä tulokset osoittivat, että Ki-67 tasolla leviämisrintamassa liittyi metastaattisen solujen maligniteetteja, ja että menetys klaudiini-18 oli yksi merkkiaineiden GC aggressiivisuutta ja saattaa kehittämiseen liittyvät etäpesäkkeiden, joka edellyttää ylimääräisiä kirurgian jälkeen ESD hoidon.

Claudins ovat poikkeuksellisen säännelty eri syöpäsairauksista, kuten GC, maksasyövän, sappiteiden syöpä, rintasyöpä, munuaissolukarsinooma, ja mesoteliooma [15], [21] – [ ,,,0],25]. Muutos claudins risteyksissä liittyy menetys tarttuu tiukasti ja napaisuus epiteeleissä. Menetys napaisuuden liittyy lisääntynyt solujen lisääntymistä ja epiteelin-to mesenkymaalitransitioon, kun häiriöt tiiviin liitoksen komplekseja muuttaa solu-vuorovaikutuksiin, jotka liittyvät ja metastaasit [23], [26], [27]. Vuonna havainnointitutkimukset vähenemistä klaudiini-3 ja -4 on raportoitu GC solujen leviämisrintamassa ja havaittiin korreloivan syövän etenemisen ja etäpesäkkeiden [14]. Down-regulation claudins on raportoitu myös joissakin muissa epiteelikasvaimissa, kuten menetys klaudiini-1 rintasyövässä [28] ja paksusuolen syöpä [29], samoin kuin menetys klaudiini-7 rintasyövässä [30] ja pään ja kaulan alueen syöpä [31]. Mitä hyökkäyksen kasvainsoluja, vähentää ilmentymistä klaudiini-7 leviämisrintamassa havaittiin korreloivan syvyys hyökkäyksen ja imusuonten osallistuminen levyepiteelisyövän ruokatorven [32]. Vaikka klaudiini-3 ja klaudiini-7 ilmaisut olivat alhaisemmat submukosaalisen leviämisrintamassa kuin limakalvomuutoksia edellisessä tutkimuksessa klaudiini-3 ja klaudiini-7 tasoa leviämisrintamassa eivät korreloi Ki-67 LI [15]. Toisaalta, klaudiini-18 leviämisrintamassa oli korreloi käänteisesti Ki-67 LI esillä olevassa tutkimuksessa. Nämä tiedot voivat liittyä havainnot että klaudiini-3 ja klaudiini-4 eivät liittyneet imusolmuke etäpesäke [33]. Lisäksi nämä havainnointitutkimukset voi selittää, ovatko nämä muutokset vaikuttavat suoraan kasvaimen invaasio ja etäpesäkkeiden.

Claudin-18 ilmentyy pääasiassa mahassa ja keuhkoissa epiteelisolujen. Claudin-18a2 on lomake, vatsa, ja isoformit ovat hieman erilaisia. Aiemmassa raportissa, mahalaukun tyyppi klaudiini-18 hävisi GC [17]. Kuitenkin aikana suoliston metaplasia, ekspressiokuviota claudins jo poikkeaa normaalista mahalaukun epiteelin. Katoaminen klaudiini-18 havaittiin liittyvän suolen metaplasia mahassa [17]. Siksi menetys klaudiini-18 ilmentyminen kehittynyt GC [17] ei ehkä yksinkertaisesti osoittaa luonnetta syöpä. Jopa prosessi GC etenemisen, ilmentymisen taso saattaa muuttua. Tutkia toiminnon näiden kohde- molekyylien, mielestämme oli tärkeää tutkia kasvaimia samassa vaiheessa, ja arvioimme taso klaudiini-18, jotka voivat vaikuttaa hyökkäyksen ja etäpesäkkeiden, hieman submukoosinen invasiivisia GC vaurioita. Lisäksi mahalaukun limakalvon klaudiini-18 ei välttämättä toimi juuri TJs, koska ilmaisi lokalisointi solun pinnalla ei ollut juuri TJs. Lisätutkimukset ovat tarpeen tutkia fysiologisia ja patofysiologisia TJ proteiinia ilmaisuja sivusuunnassa kalvon.

tutkia muutoksia klaudiini-18 tasoilta submukosaalisen leviämisrintamassa osaltaan leviämisen ja invaasion syöpäsolujen, siRNA tutkimusmenetelmiä käytettiin pudotus proteiinin MKN74 GC cell linja, mikä on positiivinen claudin-18. Siten esillä tutkimus osoitti ensimmäistä kertaa toiminnan klaudiini-18 GC käyttäen geneettistä lähestymistapaa, ja että menetys klaudiini-18 oli mukana sekä leviämisen ja invaasion GC soluja. Yhdessä nämä tiedot, menetys klaudiini-18-submukosaalisen leviämisrintamassa osoitti hankintaan aggressiivisempi ominaisuuksia ja saattaa mahdollistaa solu-solu dissosiaatiota aikana hyökkäystä. Kuitenkin rajoitus Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli, että vain MKN74 voitaisiin tarkastella, koska se oli ainoa eriytetty mahasyövän solulinjasta, jotka ilmensivät klaudiini-18 niin pitkälle kuin tutkitaan. Siksi samanlainen ilmiöitä ei voi jäljentää muiden mahasyövässä solulinjoissa.

Sekä ylössäätöä ja alas-säätely claudins on raportoitu olevan osallisena syövän prosessi [34], [35]. Analysointiin toiminta claudins syöpäsoluissa, geneettisiä lähestymistapoja claudins on myös raportoitu eri syöpäsoluissa. Knockdovvn klaudiini-1 siRNA aiheutti eston muuttoliikkeen paksusuolen syöpäsoluissa [36]. Yli-ilmentyminen klaudiini-6, klaudiini-7, tai klaudiini-9 tehosti invasiivisen potentiaalia mahalaukun adenokarsinooman solulinjan [37]. Tällaiset klaudiini aiheuttama leviämisen ja invaasion Saattaa vaikuttaa ristiriitaiselta, koska claudins tiedetään olevan osallisena tiivistys epiteelin risteyksissä. Nämä kiistanalainen tiedot viittaavat siihen, että toiminnot claudins ovat subtype- ja solutyyppispesifiseen.

Koska rajoitus Tämän tutkimuksen, se ei ole vielä selvää, että tämä laski klaudiini-18 tasolla submukosaalisen invasiivisia edessä on itse osallisina syövän etäpesäkkeiden, koska se on vaikea seurata luonnon historian varhaisen GC. Kuitenkin tiedot tässä tutkimuksessa osoitti, että alempi klaudiini-18 tasolla leviämisrintamassa liittyi suurempi proliferatiivinen taipumusta. On syytä takautuvasti tutkimaan, onko tämä lasku klaudiini-18 taso voidaan käyttää metastasoitunut sekä varoituksia biologisten merkkiaineiden jälkeen endoskooppinen resektio tulevassa tutkimuksessa.

Yhteenvetona on osoitettu ensimmäistä kertaa, että klaudiini-18 on heterogeenisesti ilmaistiin submukosaalisen invasiivisia edessä varhain GC, ja alas-säätely klaudiini-18 liittyy proliferatiivinen ja invasiivisia potentiaalia GC. Nämä havainnot osoittavat, että klaudiini-18 on keskeinen rooli etenemistä GC ja voi olla ehdokkaana biomarkkereiden taudin etenemisen. Klaudiini-18 Knockdown koe vahvisti, että tukahduttaminen junktionaalinen klaudiini-18 edistänyt leviämisen ja invaasion GC soluja.

Kiitokset

Kiitos Ms. Noriko Kamiya tekniseen tukeen.