Krooninen sairaus

tiivistelmä

tavoite

biomarkkerit pystyy erottelee potilaille, joille voi vastata tiettyihin kemoterapeuttiset aineet voivat parantaa kliinistä tehokkuutta. Sulfataaseja (SULFs) on keskeinen rooli patogeneesissä ihmisen erilaisten syöpien. Täällä fokusoimme tutkimuksen ennustetekijöiden ja ennustava vaikutus

SULF2

metylaatio mahasyövässä.

Methods

Promoottori CpG-saarekkeen metylaation

SULF2

analysoitiin 100 mahasyövän näytteitä.

in vitro

herkkyys sisplatiinin, doketakselin, gemsitabiini, irinotekaani ja pemetreksediliuos määritettiin histoculture huumeiden vastemääritystä (HDRA). Lisäksi 56 mahasyövän saaneista potilaista modifioidun FOLFOX hoito (joka toinen viikko oksaliplatiinin ja 5-FU: n ja foliinihapon) on takautuvasti analysoitiin arvioitava edelleen ennustetekijöiden ja ennakoiva vaikutus

SULF2

metylaatio mahasyövässä.

tulokset

Metyloidut

SULF2

(

SULF2M

) havaittiin 28 potilaalla, kun taas loput 72 potilaista havaittiin metyloimaton

SULF2

(

SULF2U

, metylointi korko: 28%). Näytteet, joissa

SULF2U

olivat herkempiä sisplatiinia kuin ne, joilla on

SULF2M

(esto: 48.80% vs. 38,15%,

P

= 0,02), kun taas näytteiden

SULF2M

olivat herkempiä irinotekaania kuin

SULF2U

(esto: 53.61% vs. 40.92%,

P

= 0,01). Ei ollut yhdistyksen välillä

SULF2

metylaatio ja

in vitro

herkkyys doketakselille, gemsitabiinia ja pemetreksedi.

SULF2

metylaatio havaittiin olevan merkittävää yhteyttä sisplatiinin teho (

SULF2M

: 57.14%,

SULF2U

: 80,56%,

P

= 0.02 ) ja irinotekaanin tehokkuus (

SULF2M

: 89,29%,

SULF2U

: 62.50%,

P

= 0,01). Niistä 56 potilailla, jotka saivat muutettu FOLFOX hoito, merkittävä assosiaatio havaittiin välillä selviytymisen ja

SULF2

metylaatiostatuksen (

SULF2M:

309 päivää, 95%: n luottamusväli = 236-382 päivää;

SULF2U:

481 päivää, 95%: n luottamusväli = 418-490 päivää;

P

= 0,02). Monimuuttuja-analyysi paljasti, että

SULF2

metylaatio oli itsenäinen ennustetekijä kokonaiselinaika mahasyövän hoidetuilla potilailla platinapohjaiseen kemoterapiaan.

Johtopäätös

SULF2

metylaatio on negatiivisesti liittyy sisplatiinin herkkyys

in vitro

.

SULF2

metylaatio saattaa olla uusi ennustetekijöitä biomarkkeri mahasyövän hoidetuilla potilailla platinapohjaiseen kemoterapiaan.

Citation: Shen J, Wei J, Wang H, Yang Y, Yue G, Wang L , et ai. (2013)

SULF2

Metylointi liittyy

In vitro

Sisplatiini Herkkyys ja kliinisestä tehosta mahasyövän saaneilla potilailla Modified FOLFOX hoito. PLoS ONE 8 (10): e75564. doi: 10,1371 /journal.pone.0075564

Editor: Zhengdong Zhang, Nanjing Medical University, Kiina

vastaanotettu: 12 kesäkuu 2013; Hyväksytty: 14 elokuu 2013; Julkaistu: 04 lokakuu 2013

Copyright: © 2013 Shen et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ rahoittivat avustusta National Natural Science Foundation of China (Grant No. 81220108023 ja 81172094) ja Top Six Talents Project Jiangsun maakunnassa (Grant nro 2011ws005). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Mahalaukun syöpä on yksi yleisimmistä syistä syöpään liittyvän kuoleman maailmanlaajuisesti [1], [2]. Multimodal hoitosuositukset, perustuu pääasiassa platinaa ja 5-fluorourasiilin (5-FU), on osoitettu pidentävän potilaan selviytymisen; Kuitenkin minkä tahansa yhdistelmän kemoterapia-aineiden, vastausprosentti on vain noin 30% -50% [3], [4]. Yrittäessään parantaa kliinistä tehokkuutta, on tärkeää ja tarpeen tunnistaa biomarkkerit pystyy erottelee potilaille, joille voi vastata tiettyihin kemoterapia-aineiden [4] – [9].

heparaanisulfaattiproteoglykaanit (HSPGs ) ovat koreseptoreita hepariinia sitovat kasvutekijät ja sytokiinit jaetaan solun pinnalla ja soluväliaineen. Kaksi isoformia solunulkoisen heparaanisulfaatin 6-O-endosulfatases (SULFs), SULF1 ja SULF2, on havaittu nisäkkäillä. Molemmat proteiinit eritetään solun pinnan moduloida sulfatoimiseksi HSPGs [10]. Vaikka edellinen raportit ovat yksiselitteisesti korostaneet kriittisen roolin, joka SULFs olla patogeneesissä ihmisen erilaisten syöpien, lausunnot roolista SULFs syövän kehittymisessä ollut hieman polarisoitunut. Useat todisteet osoittavat, että SULFs ovat negatiivisia säätelijöitä kasvainsolujen kasvua, ja että yliekspressio SULFs kasvainsoluissa estää solujen kasvua vapauttamalla useat tekijät, kuten FGF-2, HB-EGF ja HGF [11] – [13]. Muut tutkimukset sitä mieltä, että SULFs ovat positiivisia säätelijöitä oncogenetic signalointireittien, kuten Wnt, BMP, Hedgehog ja GDNF [14] – [16], ja lisääntynyt ilmentyminen SULFs on vallalla erilaisia ​​syöpiä, kuten mahalaukun, hepatosellulaarinen, haima- ja rinta- syöpiä, ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) sekä pään ja kaulan kasvaimet [10], [13], [17] – [20]. Korkea ilmaus SULF2 on yhteydessä heikkoon säilymiseen potilaiden kanssa maksasyövän ja NSCLC [18], [20]. Saatavilla olevat todisteet metylaatiostatuksen ja ekspressiotasot

SULFs

mahasyövän ovat kuitenkin ei-ratkaisevia, ja ennustetyöväline tai ennustearvo

SULFs

varten kemosensitiivisyys ennuste on edelleen tuntematon.

tässä tutkimuksessa olemme analysoineet promoottori CpG-saarekkeen metylaation

SULF2

, koodaava geeni SULF2 endosulfatase, ja sen yhteys

in vitro

herkkyys sisplatiinin, doketakselin , gemsitabiini, irinotekaani, ja pemetreksedi 100 ihmisen mahasyövän näytteitä. Tätä varten suoritimme joukon

in vitro

herkkyystesteissä tuoreeltaan poistettuihin mahakasvaimen kudoksiin ja arvioidaan mahdollinen käyttö

SULF2

metylaatiostatuksen ennustamiseksi kemoterapeuttisen tehoa siellä aineita. Sitten me takautuvasti analysoineet

SULF2

metylaation kohortin 56 mahasyövän potilailla, joita hoidettiin modifioidun FOLFOX hoito ja päätteli, että

SULF2U

toimii itsenäisenä ennustetekijöiden biomarkkereiden mahasyövän hoidetuilla potilailla muunneltua FOLFOX hoito.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

Kaikki tutkimukseen liittyy ihmisen osallistujat ovat hyväksyneet Tutkijavoimavarojen Suojaava komitean Rumputorni sairaalan Affiliated Medical School Nanjingin yliopiston ja kirjallinen suostumus saatiin kaikilta potilailta.

potilaille ja Kudosnäytteiden

otetut potilaat olivat käymässä läpi gastrektomia laitoksella General Surgery of Tornissa sairaala, Nanjing, Kiina aikana elokuu 2010 lokakuuhun 2011. kelpoisuusvaatimusten tutkimukseen osallistumiseen mukana seuraavat parametrit: (1) ikä 18 vuotta; (2) histologisesti varmennettu mahalaukun adenokarsinooman, mucinous tai sinettisormus adenokarsinooman; (3) ei ole aikaisempaa tai samanaikaista pahanlaatuisia kasvaimia muu kuin mahasyöpä; (4) ei aiempaa kemoterapiaa tai sädehoitoa, joko adjuvanttia tai palliatiivinen; ja (5) riittävä tehtävä kaikkien tärkeimpien elinten. Kudosnäytteet uutetaan 100 tuoreeltaan-poistetun mahalaukun kasvaimet. Jokainen kasvain kudos jaettiin kahteen osaan: (1) yksi osa pidettiin 4 ° C Hanksin tasapainotettu suolaliuos 1% penisilliini /streptomysiiniä keräämisen jälkeen, ja sitten lähetetään laboratorioon 15 min 4 ° C: ssa

in vitro

arvioinnissa kemosensitiivisyys mukaan histoculture huumeiden vastemääritystä (HDRA) [21], [22]; (2) jäljellä oleva osa tehtiin formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut (FFPE) kasvain lohkoissa patologinen havainto ja metylaation havaitsemiseen. Me jälkikäteen tarkistetaan potilaan potilastiedot ja kirurgian raportit tunnistaa kliinisten ja histopatologisten tiedot, kuten sukupuoli, histologia, kasvainpaikkaa, vaihe, histologisia laatu ja imusolmuke etäpesäke. Kasvaimet luokitellaan International Union Against Cancer (UICC) TNM-luokitus. Kirjallinen suostumus saatiin kaikilta potilailta ja protokollat ​​tätä tutkimusta hyväksyttiin Tutkijavoimavarojen Suojaava komitea Tornissa sairaalassa.

HDRA

HDRA suoritettiin, kuten aikaisemmin raportoinut Furukawa ja työtovereiden [21], [22]. Lyhyesti, tuore kasvaimen kudokset pestiin kahdesti Hanksin tasapainotetulla suolaliuoksella, ja jauhettiin pieniksi palasiksi, noin 10 mg painoltaan ja halkaisija 0,5 mm, joka laitettiin sitten valmis kollageenia (Health Design, Rochester, NY) pinnat 24 -No mikrotiitterilevyillä. Optimaalinen pitoisuudet huumeita käytetään erottamaan

in vitro

herkkyys ja kestävyys olivat 20 ug /ml sisplatiinia [23], 100 ug /ml dosetakselia [22], 50 ug /ml gemsitabiinia [23], 20 ug /ml irinotekaanin [23], ja 400 ug /ml pemetreksediä [5], mukaan huippunsa plasmassa potilailla. Sisplatiini, dosetakseli, ja irinotekaani saatiin Jiangsu Hengrui Medicine Company (Jiangsu, Kiina), kun taas pemetreksedi ja gemsitabiinin saatiin Eli Lilly and Company (Shanghai, Kiina). 8 rinnakkaista viljelykuoppiin käytettiin kunkin lääkeaineen pitoisuus, samoin kuin kontrolli. Levyjä inkuboitiin 7 päivää 37 ° C: n läsnä ollessa lääkkeet liuotetaan RPMI 1640 väliaineessa, joka sisälsi 20% vasikan sikiön seerumia ja vasemmalle: ssa kostutetussa ilmakehässä, joka sisälsi 95% ilmaa-5% CO

2. Jälkeen histoculture, 100 ui tyypin I kollagenaasilla (0,1 mg /ml, Sigma, Shanghai, Kiina) ja 100 ui 3- (4,5-dimetyyli-2-thiazotyl) -2,5-difenyyli-2H-tetratsoliumbromidi ( MTT) liuosta (5 mg /ml, Sigma, Shanghai, Kiina) lisättiin kuhunkin viljelmään ja inkuboitiin vielä 16 tunnin ajan. Uuttamisen jälkeen dimetyylisulfoksidi, absorbanssi liuosta kuhunkin kuoppaan luettiin 540 nm: ssä.

arviointi Herkkyys Anti-cancer Agents HDRA

absorbanssi per gramma viljellään kasvainkudoksen laskettiin keskiarvo absorbanssi kudosta 8 rinnakkaista viljelykuoppiin, ja kasvainkudoksen paino määritettiin ennen kulttuuriin. Eston määrä kunkin syöpälääkkeen laskettiin käyttämällä seuraavaa kaavaa: Estoaste (%) = (1-T /C) x 100, jossa T on keskimääräinen absorbanssi kasvaimen /paino, ja C on absorbanssien keskiarvo ohjaus kasvain /paino. Cut-off inhibiitionopeudet käytetään erottamaan herkkiä ja resistenttejä tapauksissa hyväksyttiin 30%, 40%, 50% ja 60% jokaista lääkettä testattiin.

in vitro

teho oli myös arvioitu perustuen cut-off esto seuraavasti: tehokkuus rate (%) = useita arkaluontoisia tapauksia /tapausten kokonaismäärä.

Potilaiden Kemoterapia

kaikista potilaista, 56 kanssa Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) suorituskyky (PS) ≤2 sai modifioitu FOLFOX (yhdistelmä 5-FU ja platina) kemoterapian jälkeen resektio primaarikasvainten seuraavasti: oksaliplatiini 85 mgm

-2 plus foliinihappoa 200 mgm

-2 kuin 2 h infuusiona päivänä 1, jonka jälkeen 22 h infuusiona 5-FU 2000 MGM

-2 päivinä 1 ja 2, kahden viikon välein. Nämä 56 potilasta edelleen seurattu ja niiden elinaika laskettiin alkaen diagnoosi päivämäärä viimeinen seurannan tai kuolema mistä tahansa syystä.

DNA Extraction ja muuttaminen

Three 7 um leikkeet valmistettiin primaarikasvaimen lohkoja, jotka sisälsivät ainakin 80% kasvainsoluja. Sen jälkeen kun värjäys hematoksyliini-eosiinilla, syöpä osat olivat microdissected ja siirrettiin mikrosentrifugiputkeen. DNA eristettiin rutiininomaisesti ja sitten modifioida kemiallisesti natriumbisulfiittia muuntaa kaikki metyloitumattomat sytosiinit urasiilit jättäen methylcytosines muuttumattomana [18]. Sitten ne varastoitiin -20 ° C: ssa lisäanalyysiä varten.

metylaatiospesifinen polymeraasiketjureaktio (MSP) B

MSP suoritettiin määrittämään metylaatiostatuksen

SULF2

käyttäen ABI Prism 7300HT Sequence Detection System (Applied Biosystems). Kukin PCR-reaktio sisälsi genomisen DNA: 2 ui SYBR Green PCR Mix (TaKaRa, Japani) 10 ul: ssa, vettä 7,7 ui, ja alukkeita 0,15 ui (10 umol /l). PCR-olosuhteet olivat 95 ° C: ssa 10 min, mitä seurasi 45 sykliä 59 ° C: ssa 30 s, 72 ° C 30 s ja 95 ° C: ssa 30 s. Alukkeet

SULF2

metyloitu PCR (TaKaRa, Japani) olivat seuraavat: eteenpäin 5 ’TAAGTGTTTTTTTTATAGCGGC 3’, kääntää 5’TACCGTAATTTCCGCTATC 3 ’. Alukkeet

SULF2

metyloitumattomia PCR (TaKaRa, Japani) olivat seuraavat: eteenpäin 5 ’GTTTATAAGTGTTTTTTTATAGTGGT3’, käänteinen 5’TACCATAATTTCCACTATCCCT 3 ’. Jokainen lähetys reaktio sisälsi positiivisen ohjauksen metyylitransferaasi (M.SssI) hoidetun ihmisen genomista DNA: ta (täysin metyloitu), negatiivinen kontrolli DNA-näytteistä, jotka oli vahvistettu metyloimattomia ja toinen negatiivinen kontrolli ilman DNA: ta. Kaikki kokeet suoritettiin kahtena kappaleena. Tulokset validoitu valitut näytteet yhdistetyn bisulfiittimodifikaatio ja bisulfiitti sekvensointi.

Tilastollinen analyysi

Arvot ilmaistiin keskiarvoina ± keskihajonta. Erot inhibiitionopeudet ryhmien välillä arvioitiin käyttäen t-testiä. Mahdollisia yhdistykset SULF2 metylaatio kliinisiä piirteitä ja

in vitro

kemosensitiivisyys tehoa analysoitiin käyttämällä Fisherin todennäköisyyden testiä. Kaikki tilastolliset testit olivat kaksipuolisia, ja P-arvo on alle 0,05 pidettiin tilastollista merkittävyyttä. Tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS, versio 16.0.

Tulokset

Potilaiden ominaisuudet

ominaisuudet kaikista potilaista on esitetty taulukossa 1. Suurin osa potilaista oli miehiä (73%), ja vallitseva histologia oli adenokarsinooma (79%). 35 (35%) potilaista, kasvain sijaitsee distaalinen vatsa, 38 (38%) proksimaalisessa mahassa, ja 27 (27%) koko vatsassa. Kuusikymmentä-kolme (63%) potilaista oli vaiheen III tai IV sairaus. Imusolmukemetastaaseja oli läsnä 75 (75%) potilaalla. Metyloidut

SULF2

(

SULF2M

) havaittiin 28 potilaalla, kun taas loput 72 potilaista havaittiin metyloimaton

SULF2

(

SULF2U

, metylointi rate: 28 %). RT-PCR-monistus käyrät

SULF2M

ja

SULF2U

oli kuviossa S1. Ei ollut yhdistyksen välillä

SULF2

metylaatio ja jokin potilaiden ominaisuudet, kuten sukupuoli, histologia, kasvainpaikkaa, vaihe, histologisia laatu ja imusolmuke etäpesäke.

in vitro

tehoa Valuuttakurssi testattu Drugs

in vitro

herkkyys sisplatiinin, doketakselin, gemsitabiini, irinotekaani ja pemetreksedi onnistuneesti testattu kaikissa näytteissä. Keskimääräinen inhibitio hinnat Kunkin testatun lääkeaineen on lueteltu taulukossa 2. Näytteitä, joissa

SULF2U

olivat herkempiä sisplatiinia kuin ne, joilla on

SULF2M

(48,80% vs. 38,15%,

P

= 0,02), kun taas näytteiden

SULF2M

olivat herkempiä irinotekaania kuin

SULF2U

(53.61% vs. 40.92%,

P

= 0,01, taulukko 2 ja kuvio 1). Ei ollut yhdistyksen välillä

SULF2

metylaatio ja

in vitro

herkkyys doketakselille, gemsitabiinia tai pemetreksedi- (taulukko 2). Kuten taulukossa 3 on esitetty, ei ole assosiaatiota inhibiitionopeudet havaittiin syöpälääkkeiden ja minkä tahansa kliinisiä tekijöitä.

Mediaani on keskilinjan jokaiseen laatikkoon.

tutkimiseksi edelleen mahdollinen suhde

SULF2

metylaatio ja sisplatiini tai irinotekaanin herkkyys,

in vitro

teho nopeudella kunkin lääkkeen pitoisuus tutkittiin perustamalla eri cut-off inhibiitionopeudet (taulukko 4). Neljä eri raja-arvot hyväksyttiin: 30%, 40%, 50% ja 60%. Tällä cut-off 30% esto,

SULF2

metylaatio havaittiin olevan merkittävää yhteyttä sisplatiinin teho (

SULF2M

: 57.14%,

SULF2U

: 80.56 %,

P

= 0,02) ja irinotekaanin tehokkuus (

SULF2M

: 89,29%,

SULF2U

: 62.50%,

P

= 0,01, kuva 2 ja Taulukko 4). Tällä cut-off 40%, 50% ja 60% esto, oli suuntaus, että

SULF2M

näytteet osoittivat korkeampia irinotekaanin tehoa, mutta pienempi sisplatiinia teho kuin

SULF2U

näytteitä (taulukko 4).

Association of

SULF2

metylointi hoitovastetta Kemoterapia

Niistä 56 potilailla, jotka saivat muutettu FOLFOX hoito, mediaani elinaika oli 434 päivää (vaihteluväli 111-641 päivää). Merkittävä yhdistys ei havaittu selviytymisen ja kasvainpaikkaa (

P

= 0,01). Mikään muu assosiaatio kliinisiä piirteitä ja eloonjäämistä havaittiin (taulukko 5 ja kuvio 3).

SULF2M

havaittiin 19 potilaalla, kun taas

SULF2U

todettiin 37 potilaalla (

SULF2

metylaation määrä: 34%). Merkittävä yhdistys ei havaittu selviytymisen ja

SULF2

metylaatiostatuksen. Kokonaiselinajan mediaani oli 309 päivää (95% CI = 236-382 päivää) potilailla, joilla

SULF2M

, ja 481 päivää (95% CI = 418-490 päivää) niille, joilla

SULF2U

(

P =

0,02, kuva 3). Käyttäen sekä yhden ja usean Coxin suhteellinen vaara-analyysi, jossa otettiin huomioon ikä, sukupuoli, kasvaimen sivuston vaiheessa histologinen luokka, imusolmuke etäpesäke ja

SULF2

Metylointia covariates, kasvain sivusto ja

SULF2

metylaatio säilyi merkitsevänä merkkiaineiden kokonaiselinaika mahasyövän hoidetuilla potilailla platinapohjaisen kemoterapian (taulukko 6).

keskustelu

Vaikka aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet osallistuminen SULF2 syövän synnyssä, sen arvoa kemosensitiivisyys ennuste jää epäselväksi. Tämä tutkimus keskittyy promoottori CpG-saarekkeen metylaation

SULF2

mahdollisena biomarkkereiden mahasyövän. Tärkeimmät havainnot Tässä tutkimuksessa osoitetaan, että: (i) määrä

SULF2M

ihmisen mahasyövän on noin 30%; (Ii) ensimmäinen todiste

SULF2U

liittyy sisplatiinin herkkyys syöpään; (Iii) todisteet

SULF2M

liittyy irinotekaanin herkkyys mahasyövän; (Iv) retrospektiivinen tutkimus ja validointi

SULF2

metylaation kohortin 56 potilasta, joilla mahalaukun syövän, joka antoi meille mahdollisuuden löytää että

SULF2U

on itsenäinen ennustetekijöiden biomarkkereiden mahasyövän hoidetuilla potilailla modifioidun FOLFOX hoito.

Aiemmissa tutkimuksissa mahalaukun syövän, koskevat päätelmät metylaatiostatus ja ekspressiotasot

SULFs

olivat tuloksettomia. Yhdessä tutkimuksessa vain 13 aikaisen vaiheen rintasyövän ja syöpien, joista suurin osa oli vaiheen I analysoitiin semikvantitatiivinen RT-PCR

SULF1

ilmaisun [24]. On osoitettu, että alhaisen ilmentymisen

SULF1

oli yleistä näiden kahden syöpää. Toisessa tutkimuksessa, ilmaus molempien

SULF1

ja

SULF2

mRNA määritettiin reaaliaikaisella RT-PCR suuri kohortti mahasyövän kudosten, havainto, että

SULFs

ilmaistiin korkeammalla tasolla mahasyövän verrattuna normaaleihin kudoksiin. Nykyisessä tutkimuksessa löydettiin tutkimalla

SULF2

metylaation 100 mahasyövän näytettä, että määrä

SULF2M

oli noin 30%, mikä osoitti, että enemmistönä mahasyövän olivat

SULF2U

. Viimeaikaiset tutkimukset integroidun genomista analyysit paljastivat, että

SULF2

toimii alavirtavaikuttajainhibiittorit p53, ja että aktivointi p53 voisi johtaa

SULF2U

ja säätely ylöspäin

SULF2

. Mahdollinen yhteys p53 ja SULF2 kasvutekijäindusoituneessa signalointireitin ehdotti mahdollista roolia SULF2 syövän kehittymisessä ja syöpäpotilaiden tulos [25]. Suhde

SULF2

unmethylation ja

SULF2

ylössäätöä on edelleen testata näistä näytteistä. Eri ekspressiotasot ja metylaatiostatuksen

SULF2

välillä kasvain ja normaali kudos on myös edelleen todentaa.

Tutkimukset

SULF2

Metylointia kemosensitiivisyys ennustaja ovat niukkoja. Metylointi

SULF2

promoottori on liittynyt parempi eloonjäämisen resektoitiin keuhkoadenokarsinooma potilasta, ja myös marginaalinen parannus eloonjäämisen kehittyneiden NSCLC saavilla potilailla tavanomaisen kemoterapian (riskisuhde = 0,63,

P

= 0,07) [18]. Myöhemmät tutkimukset osoittivat, että NSCLC solulinjoissa

SULF2M

olivat 134 kertaa herkempi topoisomeraasi I: n estäjä kuin ne, joilla on

SULF2U

. Nykyisessä tutkimuksessa olemme osoittaneet, että mahalaukun kasvaimista

SULF2M

ovat herkempiä irinotekaanin kuin ne, joilla on

SULF2U

. Lisäksi olemme osoittaneet ensimmäistä kertaa, että

SULF2

metylaatio on myös mahdollinen ennustavan biomarkkeri sisplatiinin tehokkuuden. Mahalaukun kasvaimista

SULF2U

olivat herkempiä sisplatiinia kuin ne, joilla on

SULF2M

, ja mahasyövän potilaalla on

SULF2U

osoitti pienempi kuolleisuus vastaanotettaessa platinapohjaisen kemoterapian. Vaikka useat ennustava biomarkkerit on tunnistettu sisplatiinin, kuten ERCC1 [7], BRCA1 [4], [26], [27] ja XRCC1 [28] – [30], kun otetaan huomioon suhteellisen alhainen vaste oli yleisesti käytetty platina /5FU-pohjainen neoadjuvant hoitosuunnitelmaa kehittynyt mahasyöpä potilaita, tunnistaminen biomarkkerit ennustaa vastausta tarvitaan kiireellisesti. Löytö uutta ennakoivaa biomarkkereiden jotka voivat tutkia metylointianalyysi on kiehtova ja täydentävää. Syy miksi

SULF2

unmethylation kasvattaa kasvain herkkyyttä sisplatiinin voi valehdella ubikitiinipromoottori entsyymien konjugoimiseksi (UBE). On raportoitu, että

SULF2

metylaatio johtaa lisääntyneeseen ekspressioon UBE [18]. UBE lisätty ubikitiinipromoottori tiettyihin lysiinitähteet ja oli mukana DNA: n korjaukseen, mutageneesi ja solujen lisääntymistä. Yliekspressio tietyissä UBEs, kuten RAD6B, aiheuttaa merkittävän resistenssin sisplatiinia [31]. Lisätutkimuksia olisi toteutettava tutkimiseksi molekyylitason mekanismi

SULF2M

aiheuttama sisplatiinin vastus.

Huomattava synergistinen vaikutus sisplatiinin ja DNA metyylitransferaasi (DNMT) estäjät 5-atsa-dC (DAC) solun elinkelpoisuuden havaittiin sisplatiinin kestävä AGS solulinja mutta ei sisplatiinin herkkien MKN28 solulinjassa [32]. Tiedot analysoidaan pesäkkeiden muodostumisen ominaisuus osoitti knockdovvn DNMT1 aiheutti kasvu sisplatiinin herkkyyttä [32]. Molekyylimekanismin jää epäselväksi. Kuitenkin suhde

SULF2

metylaation ja sisplatiinin herkkyys voi osittain selittää tätä ilmiötä. Hoito mahasyövän kanssa DNMT estäjät voivat aiheuttaa demetylaation

SULF2

ja siten lisätä herkkyyttä sisplatiinia. Niinpä sen lisäksi, että ennustava vaikutus, meidän data tukee myös sisällyttämistä DNMT estäjän nykyisissä hoitomenetelmistä vähintään osajoukko mahasyöpäpotilaista.

Yhteenvetona meidän tutkimus tarjoaa uusia todisteita siitä, että

SULF2

metylaatio on negatiivisesti liittyy sisplatiinin herkkyys

in vitro

.

SULF2

metylaatio on potentiaalinen ennustetekijöitä biomarkkeri mahasyövän hoidetuilla potilailla platinapohjaiseen kemoterapiaan.

tukeminen Information

Kuva S1.

RT-PCR-monistus käyrät SULF2M ja SULF2U. Punainen käyrä tarkoittaa monistamiseen SULF2M, ja sininen käyrä tarkoittaa monistamiseen SULF2U. Kuvassa S1a esittää monistuskäyriä näytteen kanssa SULF2M; Kuvassa S1B esittää monistuskäyriä näytteen kanssa SULF2U.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0075564.s001

(TIF) B