Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Maksa on yleisin kohde-elin etäpesäke paksusuolen syöpä (CRC). Synkroninen maksametastaaseista voi antaa huonompi ennuste kuin metachronous etäpesäkkeitä, ja geneettiset muutokset ja tulehdusreaktio on myös liitetty huonoon ennusteeseen tapauksissa maksan etäpesäke johtuvia CRC. Kuitenkin vain harvat tutkimukset ovat tarkastelleet suhdetta

KRAS

mutaatioita ja tulehduksellinen tila CRC, etenkin kun kyse on maksametastaaseihin.

Methods

vaikutus aktivoitua mitogen- aktivoitu proteiinikinaasi reitti ja toinen proteiinia, joka liittyy tulehdukseen, C-reaktiivisen proteiinin, maksan etäpesäkkeitä tutkittiin. Meidän tavoitteena oli määrittää vaikutus

CRP

erityinen yhden emäksen monimuotoisuus (SNP) rs7553007 maksan etäpesäke CRC-erityinen eloonjäämisen (CSS) potilaista jälkeen Maksan kolorektaalisen metastasectomy.

Tulokset

ei havaittu huomattavia eroja genotyyppi jakaumat ja alleeli taajuuksia

CRP

SNP rs7553007 välillä CRC maksan etäpesäke ja kontrolliryhmään. CSS hinnat olivat alhaiset potilaiden alaryhmässä synkroniseen etäpesäkkeitä kanssa A-alleelin (A /A ja A /G) rs7553007 tai mutantit

KRAS Twitter /

BRAF

maksan metastaattisen yksilöitä. Lisäksi

CRP

SNP rs7553007 (riskisuhde [HR] = 1,101; 95%: n luottamusväli [CI] = 1,011-1,200;

P

= 0,027) ja

KRAS /BRAF

mutaatioita (HR = 2,377; 95% CI = 1,293-4,368;

P

= 0,005) pysyi ennustavan CSS CRC potilaalla on synkronoitu maksan etäpesäke monimuuttujamenetelmin.

Johtopäätökset

sekä

CRP

SNP rs7553007 ja

KRAS /BRAF

mutaatiot olivat riippumattomia ennustavat tekijät CRC potilaalla on synkronoitu maksan etäpesäke.

Citation: Huang CJ Teng HW, Chien CC, Lin JK, Yang SH (2013) Prognostic merkitys C-reaktiivinen proteiini polymorfismi ja

KRAS /BRAF

sisään Synkroninen maksametastaasin päässä peräsuolen syövän. PLoS ONE 8 (6): e65117. doi: 10,1371 /journal.pone.0065117

Editor: Kjetil Tasken, University of Oslo, Norja

vastaanotettu: 10 joulukuu 2012; Hyväksytty: 22 huhtikuu 2013; Julkaistu: 03 kesäkuu 2013

Copyright: © 2013 Huang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat avustusten (V98C1-152, V99C1-109 ja V100C-170) Taipei Veterans General Hospital. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

etäpesäke käsittää monimutkaisen sarjan vaiheita, joissa syöpäsolut jättää alkuperäisen kasvaimen päällä ja siirtyä kaukainen elin. Eri geeni, joissa on muuttunut ilmaisuja voi määrittää eri elin tavoitteita, yhdessä metastaattista microenvironment [1]. Peräsuolen syöpä (CRC), maksa on yleisin kohde-elin etäpesäkkeiden [2], [3]. Kliinisesti, noin 25% CRC potilaista esiintyy synkroninen maksametastaaseja aikaan diagnoosi, ja muut potilaat, joilla on edennyt sairaus kehittyy maksametastaaseista 3 vuoden kuluessa hoidon [3], [4]. Synkroninen etäpesäkkeitä voi kuitenkin antaa huonompi ennuste kuin metachronous etäpesäkkeitä [4]. Äskettäin geneettinen heterogeenisyys havaittiin liittyvän etenemisen maksan etäpesäkkeiden [1], [5], ja ennusteen maksan metastaattisen CRC havaittiin myös liittyvän näitä geneettisiä muutoksia [6], [7].

aktivointi mitogeeniaktivoidun proteiini (MAP) kinaasi signalointireitin, erityisesti kautta mutaatiot

v-Ki-ras2 Kirsten rotan sarkooma viruksen onkogeenin homologi

(

KRAS

) ja

v-Raf hiiren sarkooma viruksen onkogeeni homologin B1

(

BRAF

), on tärkeä askel kehitettäessä CRC [8].

BRAF

mutaatio on osoitettu olevan riippumaton ennustetekijöitä biomarkkeri Maksan kolorektaalisen metastasectomy [6], ja

KRAS

mutaatioita aikana hankitut etenemisen metastaattisen CRC vaikuttaa myös hoidon ja ennusteen [ ,,,0],9]. Tämä signalointireitti osallistuu myös tulehduksellisten prosessien [10]. C-reaktiivinen proteiini (CRP) on osa tulehduksellinen polku, joka on merkittävästi koholla tulehdusprosessien aikana ja on käyttökelpoinen biomarkkeri ennustetta CRC potilaista [11], [12]. Kliinistä merkitystä tämän proteiinin myös tutkittu suhteessa tiettyihin polymorfismia

CRP

geneettinen lokus [13] – [15]. Useat

CRP

yhden emäksen monimuotoisuus (SNP) havaittiin liittyvän riskiä sairastua CRC ja selviytymisen potilaiden tällä maligniteetin [16]. Kuitenkin onko CRP on vain merkkiaine taustalla tulehduksen tai on syy-yhteydessä maksan metastaattinen CRC edelleen epävarma. Niinpä tutkimukset rooli tulehduksen liittyvien modulaattorit CRC invaasiota ja etäpesäkkeiden tarvitaan edelleen.

Tässä olemme keskittyneet roolia aktivoitujen MAP kinaasireitin ja tulehdukseen liittyvä proteiini CRP maksassa etäpesäkkeitä CRC potilailla. Tavoite

CRP

SNP rs7553007 näillä metastaattisen potilailla analysoitiin, koska se liittyy läheisesti CRP tasoja, joka on aikaisemmin raportoitu sepelvaltimotaudin [15]. Olemme tutkineet merkityksen sekä erityinen SNP on

CRP

ja mutaatioita

KRAS Twitter /

BRAF

maksan etäpesäkkeiden suhteen CRC-erityinen eloonjäämisen (CSS) potilaiden jälkeen maksan kolorektaalisen metastasectomy.

Materiaalit ja menetelmät

Näytteet ja kliiniset tiedot

Tammikuusta 2000 ja tammikuun 2010 228 potilailla, joilla on peräsuolen maksametastaaseja (142 potilasta synkronimoottori tautia ja 86 potilasta, joilla metachronous tauti) koki parantava-aikomus maksan resektio Taipei Veterans General Hospital, Taiwan. Tauti vaiheessa arvioitiin mukaan American sekakomitean Cancer pysähdyspaikan järjestelmä, kuudes painos. Kliinis lavastus ja taudinkulku määritettiin tarkastelemalla tietokoneen tietokantaan, joka sisältää yksityiskohtaisia ​​tietoja. Non-CRC DNA ohjaa verinäytteistä (79 mies- ja 70 naispotilaita, ikäjakauma 50-80 vuotta) hankittiin Taiwan Han-kiinalaiset Cell ja Genome Bank. Tutkimuksen protokolla tarkasteli ja hyväksynyt Institutional Review Board of Taipei Veterans General Hospital. Kaikki osallistujat toimitti kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen osallistumaan tähän tutkimukseen. Kliiniset tiedot, kuten ikä, sukupuoli, koko metastaattisen maksan kasvain, kasvaimen etäpesäke (TNM) vaihe, ja kliinistä seurantaa data, kirjattiin prospektiivisesti (taulukko 1). Vatsan tietokonetomografia suoritettiin rutiininomaisesti seurata läsnäolo etäpesäkkeitä. Sen lisäksi, että säännöllisen seurantatutkimuksessa 6 kuukauden kuluessa, potilaita seurattiin 3 kuukauden välein jopa 2 vuotta, sitten 6 kuukauden välein 5 vuoden ajan, ja sen jälkeen vuosittain.

Tissue Perimän DNA Acquisition

määrittämiseksi

CRP

SNP rs7553007, arkistoidaan DNA näytteitä edellisessä tutkimuksessa 228 maksasta metastasoitunut yksilöt hankittiin [6]. Kaikki maksan metastaattinen näytteet leikeltiin kokenut ruoansulatuskanavan syöpä patologi, ja genominen DNA uutettiin, kuten aiemmin on kuvattu [6]. Pitoisuus ja puhtaus uutteet arvioitava uudelleen käyttämällä NanoDrop spektrofotometriä (NanoDrop Technologies, DE, USA).

arviointi

CRP

SNP rs7553007 ja

KRAS

ja

BRAF

Mutaatiot

CRP

SNP rs7553007 havaittiin käyttäen TaqMan SNP genotyypin määritys (määritys ID: C_26627342_10) on 7300 Real-Time PCR System (Applied Biosystems , USA), valmistajan mukaan ohjeiden [17]. Kuitenkin, tämä ei ollut mahdollista joillekin näytteitä, ja näissä tapauksissa SNP arvioitiin sekvensoimalla käyttäen alukkeita taulukossa S1 ja BigDye Terminator (versio 3.1) syklisekvensointireagenssipakkausta (Applied Biosystems) ABI 3100 kapillaarielektroforeesijärjestelmässä (Applied Biosystems).

KRAS Twitter /

BRAF

sarjoissa 217 maksan metastasoituneen näytteet saatiin edellisen raportin, mutta tiedot muista 11 yksilöt puuttui (taulukko 1) [6].

TILASTOANALYYSI

alleeli ja genotyyppi taajuudet 228 CRC potilaita ja 149 verrokkien verrattiin käyttäen chi-neliö testi. Kliiniset ja ennustetekijöitä data 228 potilasta, joilla peräsuolen maksametastaaseja analysoitiin. Analyysi CSS mitattuna alkaen leikkaus kuolinpäivä CRC suoritettiin käyttäen Kaplan-Meier selviytymisen testi, ja merkittävyys arvioitiin käyttäen log-rank-testi. Coxin käytettiin arvioimaan ennusteen arvioinnissa riskin luokan yhden ja usean analyysejä. Jälkimmäisessä taaksepäin vaiheittaista menettelyä käytetään valitsemaan muuttujia, jotka olivat riippumattomia ennustavat tekijät. Muuttujia vastaava

P

arvon 0,2 poistettiin mallista. Merkitys asetettiin

P

0,05 (SPSS for Windows-versio 13.0).

Tulokset

Suhde

CRP

SNP rs7553007 ja Survival Time CRC potilaat, joilla maksametastaaseihin

CSS korko jälkeen peräsuolen maksan metastasectomy oli huomattavasti lyhyempi, jos potilaalla on synkroninen etäpesäkkeitä (n = 142) kuin potilailla, joilla metachronous etäpesäkkeitä (n = 86) (

P

= 0,018, log-rank-testi) (kuvio 1). Alleeli ja genotyyppi taajuuksia rs7553007 eivät olleet merkittävästi erilaiset välillä verrokeilla ja maksan metastaattisen näytteitä potilaista, joilla on sekä synkronista metachronous etäpesäkkeiden (taulukko 2). Taajuudet A-alleelin olivat 57,0% ja 149 verrokeilla ja 55,5% varten 228 maksan metastaattinen potilasta (53,2% synkronista etäpesäke potilaille ja 59,3% for metachronous etäpesäkkeiden potilasta).

peräsuolen syöpää erityisiä eloonjääminen ennustettiin potilaalla on synkronoitu (n = 142) ja metachronous (n = 86) etäpesäke käyttäen Kaplan-Meierin selviytymistesti. Log-rank-testi osoitti tilastollisesti merkitsevää eroa eloonjäämisen hinnat.

Niistä 142 potilaalla on synkronoitu etäpesäkkeitä, potilaiden alaryhmässä kanssa A-alleelin (A /A ja A /G) rs7553007 maksassa metastaattisen yksilöiden (n = 111) oli pienempi CSS nopeudella kuin potilaiden alaryhmässä ilman A-alleelin (G /G) (n = 31) (kuvio 2A). Kiinnostavaa kyllä, tämä merkittävä ero CSS ei havaittu, että 86 potilaalla on metachronous etäpesäkkeitä (kuvio 2B).

peräsuolen syöpä (CRC) spesifisen eloonjäämistä ennustettiin potilaalla on synkroninen (A) ja metachronous (B) etäpesäkkeitä. Kaplan-Meier selviytymisen testiä käytettiin analysoimaan CRC-erityisiä eloonjäämisen potilailla, joilla on synkronoitu (n = 31 G /G; n = 111 A /A tai A /G) ja metachronous (n = 14 G /G; n = 72 A /A tai A /G) etäpesäkkeitä. Log-rank-testi osoitti tilastollisesti merkitsevää eroa selviytymisen hinnat synkroninen etäpesäkkeitä.

väliset

BRAF

ja

KRAS

mutaatiot ja Survival Aika CRC Potilaat, joilla maksametastaaseihin

Tutkimme geneettisten muutosten kerätystä maksassa metastaattisen yksilöitä. Tiedot mutatoitunut

BRAF

ja

KRAS

maksan metastasoituneen yksilöitä 217 potilaamme (136 synkronoitu ja 81 kanssa metachronous maksametastaaseihin) olivat saatavilla meidän edellisessä raportissa [6]. Tärkein havainto oli, että potilailla, joilla on synkronoitu maksan etäpesäke, joka oli

BRAF

tai

KRAS

mutaatio oli huomattavasti pienempi CSS kuin villin tyypin

BRAF

ja

KRAS

(kuvio 3A). Sitä vastoin mutaation tila

BRAF

ja

KRAS

ei ollut merkittävää yhteyttä ennusteeseen potilailla, joilla metachronous maksan etäpesäke (kuva 3B).

peräsuolen syöpä (CRC) – tautivapaalle ennustettiin potilaalla on synkroninen (A) ja metachronous (B) etäpesäkkeitä. Kaplan-Meier selviytymisen testiä käytettiin analysoimaan CRC-erityisiä eloonjäämisen potilailla, joilla on synkronoitu (n = 75 villityypin

KRAS Twitter /

BRAF

; n = 61 mutantit) ja metachronous (n = 50 villityypin

KRAS Twitter /

BRAF

; n = 31 mutanttien) etäpesäkkeitä. Log-rank-testi osoitti tilastollisesti merkitsevää eroa selviytymisen hinnat synkroninen etäpesäkkeitä.

Cox yhden ja usean analyysit CSS CRC Potilaat, joilla Synchronous maksametastaasin

Univariate Coxin regressio analyysi (taulukko 3) paljasti, että

CRP

SNP rs7553007 genotyyppi (riskisuhde [HR] = 1,092; 95%: n luottamusväli [CI] = 1,008-1,183;

P

= 0.030) ja

KRAS

tai

BRAF

mutaatioita (HR = 2.174; 95% CI = 1,199-3,942;

P

= 0,011) olivat merkitsevästi yhteydessä CSS CRC potilaalla on synkronoitu maksan etäpesäke. Kuitenkaan yksikään tekijöistä taulukossa 3 olivat ennustavia CSS potilailla, joilla metachronous etäpesäkkeitä. Muuttujat yhden muuttujan analyysiin, jotka sisältyivät monimuuttujamenetelmin (taulukko 4), ja taaksepäin vaiheittaista valintaa käytettiin merkittäviä ennustajia. Tulokset osoittivat, että läsnäolo A-alleelin

CRP

SNP rs7553007 (HR = 1.101; 95% CI = 1,011-1,200;

P

= 0,027) ja

KRAS /BRAF

mutaatioita (HR = 2,377; 95% CI = 1,293-4,368;

P

= 0,005) olivat riippumattomia ennustettaessa CRC potilaalla on synkronoitu maksan etäpesäke.

keskustelu

Kuten odotettua, ennuste CRC potilaalla on synkronoitu maksan etäpesäke oli yleensä huonompi kuin potilailla, joilla metachronous maksan etäpesäke. Synkroninen läsnäolo ensisijainen Kolorektaalituumorien ja maksan etäpesäke saattaisi merkitä enemmän levittää tautitilanne ja liittyi lyhyempi tautivapaan elinajan kuin metachronous etäpesäke [18]. Ishizuka et ai. lisäksi raportoitu, että systeeminen tulehdusreaktio heijastuu ennen leikkausta CRP korreloi taudin lopputulokseen näillä maksan metastaattisen potilaista [19]. Niinpä oletetaan, että synkroninen maksa etäpesäke korreloi Systeemistä tulehdus tila.

parantamiseksi terapeuttista tehoa, hallintaa CRC potilaalla on synkronoitu tai metachronous maksametastaaseista on yksilöllisesti tarpeisiin kunkin potilaan [20]. Siksi on tärkeää ymmärtää, mitkä tekijät vaikuttavat lopputulokseen jälkeen resektion maksametastaaseista [21].

Molemmat

CRP

SNP ja CRP on laajalti tutkittu sepelvaltimotaudin (CHD) [ ,,,0],22], [23]. Vastaavasti, CRP: n on osoitettu liittyvän riskin paksusuolen neoplasia [16], [24]. Kuitenkin toteamukset suhde

CRP

geneettisiä variantteja ja CRP Tautiriskiin ovat olleet ristiriitaisia ​​viime raporteissa [15], [23]. Elliott et ai. havainneet, että A-alleelin

CRP

SNP rs7553007 liittyi pieni CRP tasoja mutta ei sepelvaltimotaudin riskiä [15]. Tässä tutkimuksessa havaittiin, että CRC potilaalla on synkronoitu maksan etäpesäke kätkeminen A-alleeli oli merkitsevästi huonoon ennusteeseen. Tämä havainto on hieman erilainen kuin odotettu vaikutus A-alleelin, joka perustuu tutkimukseen Elliott et al. Nämä ristiriitaiset havainnot saattavat johtua eroista sekä etnisen potilaiden ja taudin tyyppi. Suurin osa osallistujista Elliott tutkimuksessa olivat Euroopan. Kuten taulukossa S2 (tietoja NCBI SNP tietokanta: www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/snp_ref.cgi?rs=7553007), A-alleeli on harvinaisempi Euroopan (33,6%) ja afrikkalainen väestö (19,9%) kuin aasialaisilla (yli 50%), ja osajoukkojen ovat jopa korkeampia taajuuksia, kuten Han Kiinan väestön Pekingissä (55,6%) ja japani väestön Tokiossa (73,3%). Erilaiset tulokset voidaan myös selittää monimutkainen tulehdusreaktioita. Onko CRP on vain merkkiaine taustalla tulehduksen tai on syy-yhteydessä maksan metastaattinen CRC edelleen epävarma. Tulehdusvaste liittyy

KRAS Twitter /

BRAF

mutaatioita on raportoitu monissa ihmisen syövissä, mukaan lukien CRC [25] – [28]. MAP kinaasireitin,

KRAS Twitter /

BRAF

mutaatioita tapahtuu toisensa poissulkevia tavalla [29] – [31]. Aiemmassa tutkimuksessa on osoitettu, että https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ijc.25042/full – bib4 # bib4

BRAF

mutaatiot liittyvät puuttuessa peritumoraalista lymfosyyttisen tulehduksen ja huono ennuste [ ,,,0],28].

suostumuksella päätelmien aiempien tutkimusten ehdotamme, että jotkut tulehdusreaktioita luoda ympäristö, joka edistää kasvainsolujen kasvua, invaasio, ja levittämiseen [32]. Siten tulehdusreaktio aiheuttama

KRAS

mutaation ja eräiden

CRP

genotyypit voivat pahentaa peräsuolen maksametastaaseja. Tässä tutkimuksessa osoitimme, että läsnäolo

CRP

SNP rs7553007 (A-alleeli) maksassa etäpesäkkeitä oli merkittävä riskitekijä huonon ennusteen CRC potilaalla on synkronoitu maksametastaaseja, mutta ei potilailla jossa metachronous maksametastaaseihin. Selviytymisen ero potilailla, joilla on synkroninen ja metachronous metastaaseja on myös raportoitu useissa muissa tutkimuksissa. [4], [33], [34].

Kuten keskustellaan Nördlinger et al., Leikkaussalin kemoterapiaa plus maksaresektio oli osoitettu olevan parempi kuin maksaresektio yksinään [35]. Tutkimuksessamme ei neoadjuvant eikä adjuvanttihoitoa ollut vaikutusta potilaiden selviytymiseen synkroniseen etäpesäkkeitä. Tämä saattaa johtua heterogeenisen hoito kemoterapian plus tavoite terapiassa antoi meidän potilaille. Vain potilaita, metachronous etäpesäkkeitä oli merkittävästi eloonjäämishyötyä vastaanottamisesta adjuvanttihoitoa. Siinä korostetaan paitsi näennäinen hyöty kemoterapiaa metachronous ryhmä, mutta myös erilaisen luonteen välillä näiden kahden ryhmän.

Tietääksemme tämä on ensimmäinen tutkimus osoittaa yhdistyksen välillä tietyn

CRP

SNP rs7553007 ja ennusteen CRC. CRP on osa tulehduksellinen polku, joka on dramaattisesti koholla tulehduksen aikana, ja korkea CRP taso on osoitettu olevan yhteydessä huonoon säilymiseen [11], [36]. Vaikka meillä ei ole tietoja CRP tasot potilaalla, jotka osallistuivat tähän tutkimukseen,

CRP

SNP rs7553007 oli kliinistä merkitystä. Mukaan -genotyypitystulosten osuudet A-alleelin

CRP

SNP rs7553007 ovat samanlaisia ​​verrokeilla ja CRC maksan etäpesäke, kuten tapahtuu muissa Aasian sarjassa [15].

Yhteenvetona tulokset viittaavat siihen, että sekä läsnäolo A-alleelin

CRP

SNP rs7553007 ja

KRAS Twitter /

BRAF

mutaatiot ovat merkittäviä ennustavat tekijät CRC potilaalla on synkronoitu maksan etäpesäke. Luonne tulehdusvasteiden vaikuttaa

CRP

SNP ja erityisiä

KRAS Twitter /

BRAF

mutaatioiden tulisi tutkia tarkemmin.

tukeminen tiedot

Taulukko S1.

Alukesekvensseillä määrittää CRP SNP rs7553007.

doi: 10,1371 /journal.pone.0065117.s001

(DOC) B Taulukko S2.

alleelifrekvenssien CRP SNP rs7553007 eri väestöstä.

doi: 10,1371 /journal.pone.0065117.s002

(DOC) B

Kiitokset

Tekijät haluavat kiittää tohtori Anna Fen-Yau Li hänen erinomaisesta tuesta patologian. Kirjoittajat myös kiittää Institute of Biomedical Sciences, National kliininen Core, ja National genotyypin Center, Academia Sinica tarjota ei-CRC ohjaus DNA Taiwan Han-kiinalaiset Cell ja Genome Bank.