Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

hepatooma säädelty proteiini (hURP) on osa chromatin- riippuvainen reitti kehräkokoonpanon. Tutkimme ennustetekijöiden ennustearvo hURP ihmisen maksasolusyövän (HCC).

Methods

hURP ilmentyminen arvioitiin immunosolukemiallisella hienoa neulalla hengittävillä hepatoomasolujen 97 HCC potilailla, joilla Barcelona Clinic Maksasyöpä (BCLC) vaihe A. Tämän jälkeen nämä potilaalle tehtiin osittainen hepatektomiaa (n = 18) tai radiotaajuisen ablaatio (n = 79) ja seurattiin 2-35 kuukautta. Kliinis parametrit toimitettiin hengissä analyysiä.

Tulokset

hURP ilmentymistä hengittävillä HCC-soluissa havaittiin 19,6%: lla potilaista. Kaplan-Meier selviytymisen analyysi osoitti, että positiivinen hURP lauseke (

P

= 0,023), Sytologisten luokittelu ≥3 (

P

= 0,008), AFP ≥35 ng /ml (

P

= 0,039), bilirubiini ≥1.3 mg /dl (

P

= 0.010), AST ≥50 U /L (

P

= 0,003) ja ALT ≥35 U /L (

P

= 0,005) olivat kaikki liittyy lyhyempi tautivapaan elinajan. Vaiheittainen monimuuttuja Coxin suhteellisen riskin malliin paljasti, että positiivinen hURP lauseke (HR, 2,334; 95% CI, 1,165-4,679,

P

= 0,017), AST ≥50 U /L (HR, 3,697; 95% CI , 1,868-7,319,

p

0,001), sytologisten asteen ≥3 (HR, 4,249; 95% CI, 2,061-8,759,

P

0,001) ja kasvaimen numero 1 (HR, 2,633; 95% CI, 1,212-5,722,

P

= 0,014) olivat riippumattomia ennustavat tautivapaan elinajan. Yhdistämällä 4 riippumaton ennustajia, potilailla, joilla on erilainen riski tulokset (RS) osoitti erotettavissa tautivapaan elinajan (RS≤1 vs. RS = 2,

P

= 0,001; RS = 2 vs. RS = 3, P 0,001). Sen sijaan potilaille ei voida erottaa ennusteen erotettavissa alaryhmiin käyttämällä AJCC /UICC TNM lavastus järjestelmä.

Johtopäätös

HCC potilaalla on BCLC vaihe A voidaan jakaa kolmeen prognoosi-erotettavissa ryhmien käyttö riskiluvun joka perustuu hURP ilmentymistä hengittävillä HCC-soluissa, ALT, sytologisten laatu ja kasvainten lukumäärä.

Citation: Chang ML, Lin SM, Yeh CT (2011) hURP Expression-avusteinen Risk Tulospalvelu Tunnista Ennuste Erottuva alakonsernit alkuvaiheen Maksasyöpä. PLoS ONE 6 (10): e26323. doi: 10,1371 /journal.pone.0026323

Editor: Bernard W. Futscher, University of Arizona, Yhdysvallat

vastaanotettu: 22 heinäkuu 2011; Hyväksytty 23. syyskuuta 2011; Julkaistu 17. lokakuuta 2011

Copyright: © 2011 Chang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Hanke tukivat avustusta Chang Gung Medical Research Program (CMRP-370693). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Käyttämällä integroiva bioinformatiikan lähestymistapaa, jossa analysoidaan sekvenssimerkkejä ilmaistuna ihmisen maksassa, uusi solukiertosäädeltyjä geeni nimeltä hepatooma säädelty proteiini (hURP) tunnistettiin 10 vuotta sitten [1]. HURP ilmaistuna runsaasti ihmisen maksasolusyövän (HCC eli. Hepatooma), on mitoosi fosfoproteiini substraatti Aurora-A [2]. Aurora-A on solusyklin-seriini /treoniini-kinaasi, joka näyttää huippu ekspressiotasoja aikana G2 /M vaiheessa [3], [4]. Se, että tasot hURP vaihtelee solusyklin aikana ja saavuttaa huippunsa G2 /M viittaa siihen, että se on rooli solukierron säätelyssä [5]. Lisätutkimukset ovat osoittaneet, että hURP on osa kromatiinin riippuvaisen koulutusjakson kehräkokoonpanon. Sillä on keskeinen rooli chromatin aiheuttama mikrotubulusten kokoonpanoa, stabiloi ja niput K-kuituja, ja on välttämätöntä de novo mikrotubulusten tuotantoa kromosomeista [6]. Lisäksi sen aktiivisuutta tarvitaan asianmukaista Kinetokori kaapata, tehokas kromosomi congression, ja ajoissa mitoottisten etenemistä. Viat näissä prosesseissa voi laukaista sopimatonta Anaphase aloittamista ja perimän epävakaisuuden [7], [8]. Sen lisäksi transkription säätelyyn, solunsisäinen runsaasti hURP säädellään myös cdk1 /sykliini B translaation jälkeisestä tasolla [9], [10]. Kuitenkin, voi olla joitakin ylimääräiset polut korvata toiminnan hURP solusyklissä, kuten hURP (- /-) hiiret kehittävät normaalisti ja ovat erotettavissa villityypin poikueesta. Ainoa dokumentoitu fenotyyppi hURP (- /-) hiirillä, on se, että naarashiirillä eivät pysty muodostamaan implantaatio johtuu kyvyttömyydestä suoritettava decidual reaktio [11].

Vaikka kokeelliset tiedot osoittavat välisen yhteyden solun sykli säätelyhäiriötä ja hURP aberrance mitään vakuuttavaa näyttöä on perustettu tähän mennessä viittaa suoraan kasvaimia synnyttävän roolia hURP HCC. Kuitenkin kappaletta todisteita siitä onkogeenisessä potentiaalia hURP olivat satunnaisia ​​ilmoituksia. Positiivinen hURP ilmentyminen liittyi syntymistä ja toistumisen siirtymäkauden cell carcinoma [12], [13]; geenien ilmentymisen analyysi paljasti, että hURP edusti prognoosimarkkerina pystyy erottamaan hyvän- ja pahanlaatuisten lisämunuaiskuoren kasvaimet [14], [15]; ja 293T solulinjoissa (American Type Culture Collection (ATCC) Manassas, VA, USA), yliekspressio hURP vuonna erilaistuneita soluja lisääntynyt solujen kasvuun ja estetty apoptoosin että normaalisti indusoi seerumistarvaatio [16]. Sitä vastoin hURP geeni kykenee parantamaan kemo- ja deoxycytosine analogien NIH3T3-soluissa [17], ja virusproteiini HBx aktivoi ekspressiota hURP apoptoosin ehkäisemiseksi aikana syövän eteneminen ja perustamalla chemoresistance in Hep3B-soluissa [18] .

HCC osuus 90% ensisijainen maksan kasvainten, edustaa viidenneksi yleisin syöpä maailmassa, ja se on kolmanneksi suurin syy syöpään liittyvät kuolemat maailmanlaajuisesti [19], [20]. Tarkka lavastus tauti voi auttaa lääkärit ymmärtämään ennustetta ja tekemään oikean valinnan hoitomuodot hyötyä potilaille. Tällä hetkellä on olemassa useita ennustetekijöiden pisteytysjärjestelmät jotka on luotu käyttämällä erilaisia ​​kliinis muuttujien [21]. Vaikka potilaiden välillä samassa vaiheessa HCC ja luokiteltuna sama pisteytysjärjestelmä, post-terapeuttinen ennuste on vielä monipuolinen. Tämä johtuu todennäköisesti siitä, että HCC on monen etiologinen tauti monimutkaisia ​​taustalla patogeeniset mekanismit, jonka on aiheuttanut erilaisia ​​riskitekijöitä. Oletettavasti sisällyttäminen hyvä molekyylitason markkereita ennustetyövälineenä ennustuksen järjestelmä voi korjata näitä puutteita ja parantaa nykyistä lavastus menetelmiä [22]. Koska saatavuus ultraäänitutkimus sekä muita kehittyneitä kuvantamisen menetelmiin, yhä useammat HCCs havaitaan aikaisessa vaiheessa. Lisäksi minimoida invasiivisuudesta menettelyjen, patologinen diagnoosi on vähitellen korvattu sytologia kautta hieno neula pyrkimys. Lisäksi kirurginen resektio on korvattu pitkälti radiotaajuisen ablaatio (RFA), koska vastaavia terapeuttisen tehon välillä hoitoja. Sytologinen ominaisuudet HCC-solujen, mukaan lukien erilaistuminen luokittelu ja immunovärjäyksen spesifisiä antigeenejä, saadaan helposti hieno neula pyrkimys. Nämä parametrit eivät tällä hetkellä kuulu mihinkään pisteytysjärjestelmät, mutta ne voivat antaa tärkeää tietoa tehokkaan ennustetta ennustamiseen. Vaikka hURP ensin louhittu tietokannasta ihmisen HCC up-geenien, sen merkitys ihmisen HCC

in vivo

on pysynyt vaikeasti. Käsitellä tätä, olemme laatineet immunohistokemiallista värjäystä menetelmä havaita hURP ilmentymisen hengittävillä HCC-soluissa potilailta. Viittaavia tekijöitä, Sytologisten luokittelua ja hURP ilmaisun HCC solut kaikki otettu huomioon laskettaessa ennustetekijöiden ennustajia näillä HCC potilailla.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaat

Tämä oli yksi keskus, mahdollisille ennustetekijöitä tutkimus, joka tehtiin, kun hyväksynnän Institutional Review Board Chang Gung Medical center. Kirjallinen suostumus saatiin kaikki osallistujat ennen tutkimukseen ottamista. Marraskuusta 2007 alkaen ja joulukuun 2009 97 peräkkäistä potilasta (62 miestä ja 35 naista), joilla oli diagnosoitu olevan HCC imulla sytologian ja vähintään kaksi dynaamista kuvantamistutkimukset (dynaaminen tietokonetomografia ja angiografia), otettiin mukaan tutkimukseen. Näitä potilaita joko täytti RFA hoitoon [23] tai oli lokalisoitu HCCs ja soveltuivat kirurginen poisto kasvaimet. Veri biochemistries Seuraavien parametrien testattiin: aspartaatti aminotransaminase (ASAT, 34 U /L), alaniini aminotransaminase (ALT, 36 U /L), kokonaisbilirubiini (Bil, 1,3 mg /dl), alfa- fetoproteiinin (AFP, 15 ng /ml), albumiini (3,5-5,5 g /dl), protrombiiniaika (10-13 sekuntia), kreatiniini (F: 0,44-1,03 M: 0,64-1,27 mg /dl). Hepatiitti B -viruksen pinta-antigeenejä (HBsAg) määritettiin kaupallisesti saatavilla olevalla radioimmuno- (Ausria-II, HBsAg-RIA; Abbott Laboratories, North Chicago, IL). Vasta-aineet Hepatiitti C-viruksen (HCV Ab) analysoitiin käyttämällä kolmannen sukupolven entsyymi-immunomääritys (Ax SYM HCV III, Abbott Laboratories, North Chicago, IL).

Lisäksi seuraava kliinis tiedot tallennettiin myös: sukupuoli , ikä, esiintyminen maksakirroosi, alkoholin käyttö, Edmondson n sytologisten laatu, määrä kasvaimia, suurin kasvaimen koko, läsnäolo askites heti hoidon, päiväys terapian (RFA tai leikkaus), päivämäärä kasvaimen uusiutumisen, ja viimeisimmän seurannan tai HCC liittyvä kuolema. Meidän lääkäriasema, potilaalla on pääportaalin laskimotukos jätettiin kirurgiseen tai Ablaatiohoitoa.

Maksa pyrkimys diagnosoida HCC

Under ultraäänitutkimuksessa ohjausta, 21- tai 22-mittari perkutaaninen transhepatic Kolangiogrammi neulaa käytettiin toive sytologia. Ilmakuivattua tahroja otettiin heti värjättiin Riu menetelmällä [24]. Arvostelu HCC tehtiin Edmondson ja Steinerin luokittelu [25]. Jos yksilö oli riittämätön tai vaikeaa Sytologisten diagnoosi, välitön maksabiopsia patologista tutkimusta tehtiin [26].

hURP immunosolukemialliset

Hiiren anti-hURP vasta-aineet ystävällisesti professori Chou CK (Yang-Ming University, Taiwan). Spesifisyys ja herkkyys Näiden vasta-aineiden on tunnettu aikaisemmin julkaistu [1], [11], [16], [27]. HURP-positiiviset ja negatiiviset HCC kudokset (mukaan Western blot-analyysi) käytettiin verrokkeina jokaiselle erän värjäystä. Normaali makrofagit, lymfosyytit ja granulosyytit solussa leviää käytettiin sisäisinä negatiivisina kontrolleina. Aspiroitu HCC solut kiinnitettiin puhdasta metanolia. Maksasolujen ilmentyminen hURP arvioitiin avidiini-biotiini immunoperoksidaasimenetelmällä. Levyjä inkuboitiin fosfaatilla puskuroidulla suolaliuoksella (PBS), joka sisälsi 3% vetyperoksidia 20 minuutin ajan ja pestiin sen jälkeen kahdesti (5 min) PBS: ssä, joka sisälsi 0,025% Triton X-100 (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) . Levyjä inkuboitiin sitten 10% normaalia hevosen seerumia 30 minuuttia, jonka jälkeen inkubaatio 1:500 laimennus hiiren anti-hURP-vasta-ainetta 37 ° C: ssa 1 tunnin ajan. Sen jälkeen, kun on pesty fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS, 0,1 M, pH 7,4), leikkeet jälkeen sitä inkuboitiin biotiini-konjugoidun hevosen anti-hiiri-immunoglobuliineja (Jackson Immunoresearch Lab., West Grove, PA, USA) 1:400 laimennus 40 minuuttia. Sen jälkeen, kun huuhdeltiin PBS: llä, leikkeet käsiteltiin avidiini-biotiini-kompleksin (Vectastain Elite ABC Kit, Vector Labs, CA) 30 minuutin ajan ja sitten inkuboitiin diaminobentsidiiniä liuokseen (DAB, Vector Labs, CA) 1 minuutin ajan. Nuclear counterstaining suoritettiin hematoksyliinillä.

kasvain ablaatio

Potilaita hoidettiin sisäisesti jäähtynyt radiotaajuusablaation järjestelmä (Valleylab ™, Boulder, Colorado, USA). Kaikki RF ablaatioita suoritettiin kolme Gastroenterologit runsaasti kokemusta Ablatiivi tekniikoita. Yksityiskohdista kasvain ablaatio kuvattiin aiemmin [28].

Kirurginen poisto kasvaimen

Kasvaimet täysin resektoitiin, joiden turvallisuus-marginaali yli 1 cm.

Seuraa up tutkimukset

saaneilla potilailla RFA, tietokonetomografian tai magneettikuvauksen tehtiin kolme viikkoa myöhemmin arvioida, onko ablaation oli täydellinen [28], [29]. Sen jälkeen täydellinen ablaatio tai kirurginen resektio, seuranta tehtiin ultraäänitutkimus, rintakehän röntgen-, AFP, ja veri biokemia välein 1-3 kuukautta ensimmäisenä vuonna ja joka 3. 6 kuukauteen sen jälkeen. Poikkeavat havainnot varmistettiin tietokonetomografian tai magneettikuvauksen. Intrahepaattinen toistumisen perustettiin käyttämällä kriteerien kuvataan muualla [30]. Sijainnista riippuen vaurioiden sekä potilaan tilan, ekstrahepaattiset toistumisen vahvistettiin koepala, toive sytologia, tietokonetomografian tai magneettikuvauksen [30].

Tilastot

Tauti vapaa eloonjääminen mitattiin alkaen diagnoosi päivämäärä toistumisen, etäpesäke, kuolema tai Viimeisimmässä seurannassa. Kaplan-Meier-menetelmää käytettiin arvioitaessa eloonjäämistä, ja log-rank-testiä käytettiin vertaamaan eloonjäämiskäyrien ryhmien välillä. Voit selvittää cutoffs tekijän kanssa parametritietoja, kokeellinen yhden muuttujan analyysi suoritettiin arvioimaan assosiaatio tekijä ja taudista vapaan eloonjäämisen käyttämällä sarjaa kasvaa arvoista kuin cutoffs. Tätä menetelmää käytettiin menestyksekkäästi tunnistamaan kliiniset ja virologiset ennustettaessa HCC potilailla [30]. Kokeelliset cutoffs laskettiin seuraavalla kaavalla: pienin arvo + n /15 × (suurin arvo – pienin arvo) (n = 1-14). Sellaisenaan, järjestysnumero ja raja-arvot generoidaan kullekin muuttujien tekijä. Kokeelliset Dikotominen ryhmiä siten erotettu sulku vähintään 1/15 tai korkeintaan 14/15 tekijän välillä. Näin Ryhmittelymahdollisuudella oli helpommin käytettäväksi tehdä hoitosuositusten tulevaisuudessa. Cutoff johtaa pienimmän P-arvo valittiin sitten myöhemmin Coxin suhteellista vaara-analyysi. Perustelut sekä rajoittamisesta tämän vähintään P-arvo lähestymistapa kliinisissä tutkimuksissa oli käsitelty myös arviossa [31]. Vaiheittainen Coxin suhteellisen vaaran malleja käytettiin ennustamaan riippumattomia ennustajia liittyy tautivapaan elinajan. Tulokset ilmaistaan ​​hazard rate suhteet (t) 95%: n luottamusväli (CI). Tässä tutkimuksessa Bonferronin korjaus usean vertailua ei sovellettu vuoksi kahdesta syystä. Ensinnäkin monet niistä tekijöistä mukana tiedettiin ennustetekijöiden mutta ei satunnaisesti valittua tuntemattomia tekijöitä. Tarkoituksenamme oli ymmärtää, kuinka merkittävä HUPR ilmaus oli verrattuna näihin tiedossa oleviin seikkoihin. Toiseksi, meidän lopullinen tavoite oli luoda yhdistelmä pisteytysjärjestelmä. Siksi ehdokas tekijöitä, jotka olivat mahdollisesti merkittäviä tarpeen sisällyttää.

Tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS (versio 18.0).

Tulokset

Kliininen parametrit

perustason ominaisuudet 97 potilasta on lueteltu taulukossa 1. Kaikki ne kuuluivat Barcelona Clinic Maksasyöpä (BCLC) vaihe A. HBV ja HCV-infektion osuus suurin osa tapauksista. Lähes 90% potilaista oli kirroottinen. Suurin osa potilaista oli epänormaali maksan toiminta, jossa keskimääräinen ASAT ja ALAT-arvot korkeammat kuin normaalin rajoissa. Kuitenkin vain pieni osa potilaista oli vakavia komplikaatioita (esim askites: 11,3%), kun taas keskimääräinen taso albumiini, bilirubiini ja protrombiiniaika olivat normaalin rajoissa. 75,3%: lla potilaista oli yksinäinen HCC ja vain 5,2%: lla potilaista kärsi pienten suonten hyökkäystä. Kasvaimen koko vaihteli 1,3-5,0 cm halkaisijaltaan. 81,4% potilaista sai RFA, kun taas muut potilaat olivat kasvaimet poistettiin kirurgisesti. Mukaan 6

th painos AJCC /UICC TNM-luokitus oli 69 ja 28 potilasta kuuluvat vaiheeseen I ja vaihe II vastaavasti.

ilmentäminen hURP vuonna HCCs

Niistä 97 potilaista, positiivinen ilmaus hURP havaittiin imetty HCC solut 19 potilasta (19,6%). Kahdeksan edustaja joissa imetty solut värjäytyivät positiivisesti anti-hURP on esitetty kuviossa 1. hURP ekspressiota havaittiin yli 80%: n imettiin pois soluista 15 potilaalla ja ilmaisun sijaitsi sytoplasmassa HCC-solut (kuvio 1, alempi paneeli). Kuitenkin jäljellä 4 potilasta, 50% HCC solut värjäytyivät positiivisesti (kuvio 1, yläpaneeli). 2 näistä 4 potilasta, vain harvoilla hURP positiiviset HCC solujen havaittiin.

hURP värjättiin ruskea väri.

Kun haluat selvittää hURP ilmentyminen liittyi johonkin kliinis parametrit, regressioanalyysimme suoritettiin. Todettiin, että hURP ilmaisua ei merkittävästi liittynyt mitään kliinis parametri (P 0,05 kaikille kliinis tekijät).

Association välillä kliinisten parametrien ja taudista vapaan eloonjäämisen

yhdistyksen välillä kliinisten parametrien ja tautivapaan elinajan on esitetty taulukossa 2. Niistä parametrit, positiivinen hURP ilme, sytologisten luokittelua ≥3, AFP ≥35 ng /ml, bilirubiini ≥1.3 mg /dl, AST ≥50 U /L, ja ALT ≥35 U /l havaittiin liittyvän lyhyempi tautivapaan elinajan (kuva 2).

n, määrä HCC riskipotilaiden.

Independent ennustavat taudin vapaa selviytyminen vaiheittain Coxin monimuuttuja verrannollinen riskin malliin

Käyttämällä vaiheittaista monimuuttuja Coxin suhteellisen riskin malliin, 4 tekijät pysyivät itsenäisinä ennustavat tautivapaan elinajan: positiivinen hURP ilmentyminen HCC-soluissa, ASAT ≥50 U /L, sytologisten asteen ≥3, ja kasvaimen määrä 1. Heidän riippumattomuus varmistettiin myös kahden muuttujan korrelaatio testeissä. On syytä huomata, että oikaisun jälkeen muiden häiritsevien tekijöiden kasvain numero (joka ei ole merkittävä parametri taudista vapaan eloonjäämisen yhden muuttujan analyysi) tuli merkittävä tekijä Coxin suhteellista riskin malliin. Riskisuhde (HR), 95%: n luottamusväli (CI), ja P-arvot 4 itsenäistä ennustajia on lueteltu taulukossa 3. Lopuksi riskipainoa pisteet kullekin potilaiden laskemalla määrä riippumattomia ennustajia kuljettaa kunkin potilaan. Riski tulokset vaihtelivat 0-3, ilman potilaan kuljettaa kaikki 4 tekijät (kuva 3). Koska mitään merkittävää eroa havaittiin taudista vapaan eloonjääneiden potilaiden välillä, joilla riski pisteet = 0 ja ne, joilla riskiluku = 1 (kuvio 3A,

p

= 0,421), nämä kaksi ryhmää yhdistettiin (kuvio 3B) . Tautivapaan eloon jäämisestä oli merkitsevästi erilainen eri potilailla, joilla on riski tulokset ≤1, potilaat, joilla on riski pisteet = 2, ja potilaat, joilla on riski pisteet = 3 (kuvio 3B). Sitä vastoin mitään eroa (

p

= 0,91) välillä todettiin toistumisen vapaa jäänteitä 69 TNM vaihe I ja 28 vaiheessa II potilaille.

(A) vertailu sairaus- vapaa eloonjääneiden potilailla, joilla on eri riski tulokset vaihtelivat 0 3 (B) potilaat, joilla riski pisteet = 0 ja ne, joilla riski pisteet = 1 yhdistettiin.

keskustelu

yleensä maksan resektio oli ylivoimainen RFA vuonna HCCs oikeutettuja kirurginen poisto, erityisesti kasvaimia 3 cm [32]. Hoidettaessa potilaita, joilla yksinäinen HCC ≤3 cm, RFA on verrattavissa toistuminen elinaika on poistettu kirurgisella samalla vähemmän invasiivisia [33]. Kuitenkin, maksan resektio edelleen hoidossa valinta HCC in noncirrhotic potilaiden hoitoon, koska hyvin säilynyt maksan toiminta on jäljellä maksassa. Toisaalta, RFA on turvallinen ja tehokas hallinnassa HCC Maksakirroosipotilailla, ja sen korkea toistettavuus tekee siitä erityisen arvokkaan kontrolloinnissa intrahepaattinen uusiutumista [34]. Kahdessa prospektiivisessa satunnaistetussa kontrolloidussa tutkimuksissa verrattiin RFA kirurginen resektio, ei havaittu merkittävää eroa kokonaiseloonjäämisessä tai toistumiseen elinaika. Edelleen alempi komplikaatio hinnat olivat odotetusti hoidetuilla potilailla RFA [35], [36]. Siksi valinta hoidon hyvin varhaisessa vaiheessa HCC tulisi riippua potilaan soveltuvuus leikkauksen, suorituskyky tila, vakavuus maksakirroosi, ja toteutettavuus RFA koska sijainti kasvain [37]. Meidän sarja, potilaat sopimattomia hepatektomiaa alistettiin RFA. Yhdenmukaisia ​​aiempien raporttien tautivapaan elinajan näiden kahden menetelmän ei ollut merkitsevästi erilainen (taulukko 2). Siten bias eri hoitomenetelmiä tulisi olla vähäinen.

heterogeenisyys HCC on suuresti haitannut etsimistä tehokkaiden molekyylitason ennustetekijöiden ennustajia. Eräässä tapauskontrollitutkimuksessa 39 hepatiitti C liittyvät HCC tapauksissa (24 varhaisessa vaiheessa) ja 77 verrokkia, ei des-gamma-karboksi protrombiini eikä AFP pystyi ennustamaan optimaalisesti syntymistä HCC [38]. Siten jopa HCC joka on homogeeninen taustalla oleva sairaus, luotettava biomerkkiaine ole vielä löydetty. Mukaan 6

th painos AJCC /UICC TNM luokittelu, 69 ja 28 BCLC vaihe A -potilaille nykyisen tutkimuksen luokiteltiin vaiheen I ja II, vastaavasti. Näitä potilaita ei voida erottaa ennusteen erotettavissa alaryhmiin käyttämällä AJCC /UICC TNM lavastus järjestelmä. Esillä olevassa tutkimuksessa osoitimme riippumaton ennustamisessa taudista vapaan eloonjäämisen HCC mukaan hURP ilmentyminen ilmanotto HCC-soluissa. HURP pidetään kantasolujen merkki ja on huomaamaton täysin erilaistuneita soluja [39]. Samanlaisia ​​tähän havaintoon, toinen kantasolujen markkeri, epiteelin soluadheesiomolekyyli (EpCAM), todettiin ekspressoituvan dominantly konfluenteissa monikyhmyinen tyyppi HCC ja EpCAM ekspressiotasot ennusti toistumisen HCC [40]. Lisäksi yliekspressio Aurora B, kromosomaalinen matkustajaproteiiniin mukana kromosomi eriytymistä, kara-tarkastuspiste, ja sytokineesiin [41], ennustivat kasvaimen invaasion ja huonon ennusteen HCC [42]. Toiminnallinen samankaltaisuus hURP ja Aurora B edelleen tukee ennakoivaa roolia hURP tautivapaan eloonjäämisen HCC.

Viime vuosina tuumorisolun kylvö pitkin neulaa suolikanavan on todettu olevan riskejä maksan biopsia [43]. Hieno neula pyrkimys sytologia on osoittautunut turvallinen ja tarkka vaihtoehto maksabiopsian tunnistaa valtaosa HCC [44]. Siksi hURP värjäytyminen hengittävillä HCC solut voidaan mahdollisesti kehittyä kätevä tapa ennustamiseksi taudista vapaan eloonjäämisen HCC. On kuitenkin joitakin rajoituksia, jotka liittyvät tähän tekniikkaan. Vaikka hURP on nimetty sen geeni on säädelty ihmisen HCC, vain 19,5% (19/97) meidän HCC hengittävillä näytteet osoittivat positiivista hURP ilme. On mahdollista, että jäljellä näytteissä ekspressiotasot hURP olivat liian alhaiset immunohistokemiaa havaitsemiseen. Luultavasti näissä näytteissä, valtaosa HCC solut olivat nonproliferating ”out-of-cycle” todetaan. Tämä aiheutti kasvaimia kasvaa hitaasti, mikä johti pidemmän tautivapaan elinajan. Vaihtoehtoisesti kun otetaan huomioon oletus, että hURP voisi olla kantasolujen merkki, alhainen esiintyvyys hURP-positiivisten solujen tässä tutkimuksessa saattaa heijastaa sitä, että suurin osa HCCs syntyi tulehdukseen liittyviä mutaation aiheuttama virus loukkauksia maksasoluihin (HBV tai HCV-infektiota meidän sarjassa oli yli 90%), kun taas HCCs että kehittyä

de novo

mutaatio naiivin maksan kantasoluja vain osuus murto-osassa tapauksista. Tässä tutkimuksessa osoitimme, että korkea ASAT, ALAT, ja bilirubiinipitoisuudet korreloivat lyhyempi tautivapaan elinajan. Tämä viittaa siihen, että virus liittyvät maksan necroinflammation on tärkeä rooli HCC toistumisen. Tällä hetkellä ei ole selvää, onko koulutusjakson HCC soluja, jotka kehittyvät virus liittyvät maksasolujen vaurio kehittyä HCCs allekirjoitus syövän kantasoluja. Lopuksi, kuten johdannossa on mainittu, tarpeeton polkuja, jotka voivat kompensoida hURP toiminta on ehdotettu. Sinänsä HCCs, että ei ole hURP ilmaisu, vaihtoehtoisia onkogeeninen väyliä liity hURP yli-ilmentyminen ovat erittäin uskottava.

Toinen erikoista esillä olevan data on, että lähes kaikki hURP ilmentymisen sijaitsi sytoplasmassa HCC-solujen . Importiini-α1 osoitettiin olevan itsenäinen ennustaja varhaisen uusiutumisen jälkeen HCC resektio [45]. HURP on yksi kehräkokoonpanon tekijöitä, joiden toiminta säätelee importins, ja vakaan tilan jakelu hURP määritetään jatkuvan sukkuloinnin hURP välillä sytoplasmassa ja tumassa kautta Importiini [46]. Useimmat hURP tutkimukset ovat keskittyneet sen kehräkokoonpanon rooli tumassa mitoosin aikana, kun taas hyvin vähän tiedetään sen toiminta solulimassa aikana interphase. Sekä hURP ja importiinissa-α1 on yli-ilmentynyt HCCs huonon ennusteen, joka viittaa siihen, tärkeitä rooleja näiden molekyylien kasvaimen synnyssä. Poikkeava sytoplasminen yli-ilmentyminen hURP HCC voisi sotkea tutkimaton toiminnon solukierron säätelyssä, joka vaatii lisäselvityksiä.

lisäksi hURP positiivisuus, ASAT ≥50 U /L, Sytologisten asteen ≥3, ja kasvaimen numero 1 todettiin myös olevan riippumaton ennustajia varten tautivapaan elinajan meidän HCC potilailla. Sytologinen luokittelu edustaa erilaistumista HCC solujen ja kasvaimen määrä voi olla merkki yksi- tai multifokaalinen kasvain alkuperää tai vaihtoehtoisesti lavastus HCC. Nämä tekijät ovat kaikki viittaavia huonoon ennusteeseen ja on dokumentoitu useissa tutkimuksissa [47], [48]. ASAT, ALAT, bilirubiini ja AFP tasot, jotka havaittiin olevan merkittäviä ennusteen ennustajia vuonna univariate analyysi, vastataan joko aste tulehdus (ASAT, ALAT ja bilirubiini) tai tuumorikuormitus (AFP). AFP heijastui myös aste maksatulehduksen joissakin tapauksissa [49]. Kirjallisuudessa useita rivejä tulokset viittaavat maksan tulehdus on ennustetyövälineenä ennustaja HCC. Ennen leikkausta CRP taso osoitettiin liittyvän aggressiivisuus alussa toistuvia HCC tutkimuksessa 124 potilasta, joille tehtiin hepatektomiaa [50]. Lisäksi tutkimukset koskevat HCV-liittyvän HCC ovat osoittaneet, että HCC lähes aina kehittyy histologisesti maksan ja että pelkkä krooninen maksasairaus on potentiaalinen riski kehittämiseen HCC [51]. Todellakin, krooninen maksan necroinflammation sen myöhemmän sukupolven reaktiivisten hapen lajien voi aiheuttaa kromosomaalisten mutaatioiden ja lopulta pahanlaatuisiin proliferoivien hepatosyyttien. Samoin huono maksan toiminta varaukseen ehdottamat hyperbilirubinemiaan, todettiin olevan merkitsevästi yhteydessä HCC esiintyminen muissa tutkimuksissa [52]. Tutkimus ilmoittautumalla 150 potilasta yhdellä HCC pienempi kuin 5 cm halkaisijaltaan käsitellä partikkelin sädehoidon havaittu, että Child-Pugh luokitus oli itsenäinen riskitekijä paikallisen uusiutumisen [53]. Lopuksi retrospektiivinen tutkimus koostuu 413 kirroosipotilaiden HCC saavilla potilailla RFA ja 648 kirroottiset HCC saavien potilaiden kirurginen resektio, seerumin AFP todettiin olevan ainoa merkittävä ennakoivan tekijä kaikille selviytymisen analyysit [54]. Yhdistelemällä 4 riippumaton ennustajia, jotka oli suoraan tai epäsuorasti liittyvät ennustetta HCC kirjallisuudessa, riski tulokset potilaista, joilla HCC erottaa potilaiden kolmeen erilliseen merkittävästi erilainen hoidon jälkeen ennusteet. Siksi potilaille, joilla BLCL vaiheessa A, riski tulokset, jotka sisältävät hURP värjäys pystyvät tarjoamaan edelleen eroa eri jälkeisen terapeuttinen ennusteen ryhmät. Pieni otoskoko Tämän tutkimuksen on kuitenkin rajoittanut kliinistä arvoa. Validoida ennustetekijöiden merkitystä hURP ilmaisun suuremmassa HCC kohortti, joka on monikeskustutkimuksessa olisi erittäin informatiivinen ja olisi toteutettava tulevaisuudessa.

Tietääksemme tämä on ensimmäinen tutkimus, jossa arvioitiin kliinisissä sovelluksissa of hURP ilmaisun ennustamisessa tautivapaan elinajan HCC potilaista. Uusi riski pisteet, joka koostuu 4 itsenäistä ennustavat myös hURP positiivisuuden HCC-soluissa, ASAT ≥50 U /L, Sytologisten asteen ≥3, ja kasvaimen määrä 1, erotetaan HCC potilaalla on BCLC luokka A kolmeen prognoosi-erotettavissa ryhmiä. Nämä havainnot voivat olla arvokkaita arvioitaessa vaikutuksia hoitointerventioiden HCC potilaalla on BCLC vaiheessa A, joka on yleisin vaiheessa löysi vuoksi varhainen havaitseminen HCC kautta hallitusti kasvain tutkimus. Lopuksi, henkilökohtainen hoito ja seuranta potilailla, joilla on varhaisessa vaiheessa HCC voidaan toteuttaa lähitulevaisuudessa.